Должикова Инна Вадимовна Разработка лиофилизированного препарата на основе рекомбинантных вирусных векторов для профилактики лихорадки Эбола и исследование его иммуногенных и протективных свойств

Краткое описание

Должикова Инна Вадимовна Разработка лиофилизированного препарата на основе рекомбинантных вирусных векторов для профилактики лихорадки Эбола и исследование его иммуногенных и протективных свойств
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИ
кандидат наук Должикова Инна Вадимовна
ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Болезнь, вызванная вирусом Эбола

1.2. Структура вируса Эбола

1.3. Жизненный цикл вируса Эбола

1.4. Функции белков вируса Эбола и механизмы ухода от иммунного ответа хозяина

1.4.1. Нуклеопротеин (№)

1.4.2. УР35

1.4.3. УР40

1.4.4. Белки GP

1.4.5. УР30

1.4.6. УР24

1.4.7. Белок L

1.5. Разработка вакцин против БВВЭ

1.5.1. История разработки вакцин против БВВЭ

1.5.2. Векторные вакцины против БВВЭ, вышедшие в клинические исследования

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. МАТЕРИАЛЫ, использованные в диссертационной работе

2.1.1. Оборудование

2.1.2. Микроорганизмы и рекомбинантные вирусные векторы

2.1.3. Линии клеток млекопитающих

2.1.4. Животные

2.1.5. Плазмидные векторы

2

2.1.6. Антитела

2.1.7. Рекомбинантные белки

2.1.8. Различные реактивы для молекулярно-биологических процедур

2.1.9. Среды для культивирования бактерий

2.1.10. Среды для культивирования эукариотических клеток и реактивы для трансфекции

2.1.11. Наборы

2.1.12. Синтез нуклеотидных последовательностей, секвенирование

2.1.13. Реактивы, используемые в иммунобиологических методах

2.1.14. Реактивы и наборы, используемые при исследовании иммуногенности

2.2. МЕТОДЫ

2.2.1. Получение и анализ рекомбинантных вирусных векторов

2.2.2. Получение лиофилизированных препаратов рекомбинантных вирусных векторов

2.2.3. Исследования иммуногенности

2.2.4. Исследования протективной активности

2.2.5. Статистические и биоинформатические методы

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Выбор антигена и вектора для доставки антигена

3.2. Оптимизация нуклеотидной последовательности для экспрессии полноразмерного гликопротеина GP вируса Эбола

3.3. Получение рекомбинантных векторов на основе аденовируса человека 5 серотипа и вируса везикулярного стоматита, несущих антиген GP вируса Эбола

3.4. Получение лиофильно-высушенных rVSV-GP и rAd5-GP

3.5. Исследование экспрессии гена гликопротеина вируса Эбола в составе полученных рекомбинантных вирусов rAd5-GP и rVSV-GP

3.5.1. Исследование экспрессии гена гликопротеина в составе полученных рекомбинантных вирусов rAd5-GP и rVSV-GP методом иммуноблотинга

3.5.2. Исследование экспрессии гена гликопротеина в составе полученных рекомбинантных вирусов rAd5-GP и гУБУ-ОР методом иммуноцитохимии

3.6. Исследование иммуногенности гУБУ-ОР и rAd5-GP у грызунов и приматов

3.6.1. Исследование напряженности гуморального иммунного ответа

3.6.1.1. Исследование напряженности гуморального иммунного ответа у мышей при иммунизации гУБУ-ОР и rAd5-GP

3.6.1.2. Исследование напряженности гуморального иммунного ответа у макак резус при иммунизации гУБУ-ОР и rAd5-GP

3.6.2. Исследование напряженности клеточного иммунного ответа

3.6.2.1. Исследование напряженности клеточного иммунного ответа у мышей при иммунизации гУБУ-ОР и rAd5-GP

3.6.2.2. Исследование напряженности клеточного иммунного ответа у макак резус при иммунизации гУБУ-ОР и rAd5-GP

3.7. Исследование протективности гУБУ-ОР и rAd5-GP у приматов

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

БЛАГОДАРНОСТИ