Биогенез и локализация теломерных нуклеопротеиновых комплексов в процессе оогенеза и раннего развития Drosophila melanogaster Кордюкова Мария Юрьевна

brief description

Кордюкова,МарияЮрьевна.БиогенезилокализациятеломерныхнуклеопротеиновыхкомплексоввпроцессеоогенезаираннегоразвитияDrosophilamelanogaster: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.01.03 /КордюковаМарияЮрьевна; [Место защиты: Институт биологии гена Российской академии наук]. - Москва, 2019. - 134 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт молекулярной генетики Российской академии наук На правах рукописиКОРДЮКОВАМарияЮрьевнаБиогенезилокализациятеломерныхнуклеопротеиновыхкомплексоввпроцессеоогенезаираннегоразвитияDrosophilamelanogaster03.01.03 молекулярная

стр. 4
является гетерогенной и включает также РНКтеломерногоретроэлемента TART.................................................................... 72 3.3 Структура илокализациятеломерныхРНП в различных тканяхDrosophila............................................................................................................... 75 3.3.1ЛокализацияHeT-A РНП в яичникахDrosophilaнараннихэтапахоогенеза...

стр. 11
теломерныхРНП 2). Исследовать принципы формированиятеломерныхРНП впроцессеоогенезаираннегоразвитияDrosophila3) Исследовать особенности структуры илокализациителомерныхРНП в яичниках ираннихэмбрионахDrosophila4) Изучить механизмы транспортателомерныхРНП в яичниках и эмбрионахDrosophila5)

Оглавление диссертациикандидат наук Кордюкова Мария Юрьевна
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования и степень ее разработанности
Цели и задачи исследования
Научная новизна и практическая значимость исследования
Методология и методы исследования
Положения, выносимые на защиту
Степень достоверности и апробация результатов
Личное участие автора в проведении исследований
Структура и объем работы
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Теломеры
1.1.1 Строение теломер млекопитающих
1.1.2 Теломерная РНК млекопитающих
1.1.3 Теломерные ретротранспозоны у разных видов
1.1.4 Теломеры дрозофилы
1.1.5 Контроль экспрессии теломерных повторов и длины теломер у О. melanogaster
1.1.6 Теломерные ретротранспозиции у дрозофилы
1.1.7 Структура Оа§-белков, кодируемых теломерными повторами дрозофилы
1.2 Теломерная дисфункция и клеточный ответ на повреждение теломер
1.2.1 Дисфункция теломер у млекопитающих
1.2.2 Поддержание теломер и теломерная дисфункция в терминальных клетках млекопитающих
1.2.3 Теломерная дисфункция у дрозофилы
1.3 Молекулярные механизмы контроля оогенеза и раннего развития дрозофилы
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Линии D. melanogaster, использованные в работе
2.2 РНК-иммунопреципитация
2.3 Выделение РНК
2.4 Реакция обратной транскрипции
2.5 Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени
2.6 Ко-иммунопреципитация
2.7 Вестерн-блоттинг
2.8 Флуоресцентная гибридизация in situ с РНК-зондом
2.9 Иммуноокрашивание яичников Drosophila
2.10 Получение зонда для РНК FISH
2.11 Сбор эмбрионов дрозофилы и подготовка для экспериментов
2.12 Культивирование и иммуноокрашивание клеток S2
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
_3.1 Проверка трансгенной системы для экспрессии маркированного белка HeT-A Gag
_3.2 HeT-A РНК и HeT-A Gag формируют РНП в процессе оогенеза и раннего развития Drosophila
3.2.1 Белок HeT-A Gag и HeT-A РНК взаимодействуют с образованием РНП в клетках Drosophila линии S2, в яичниках и ранних эмбрионах
3.2.2 HeT-A РНП является гетерогенной и включает также РНК теломерного ретроэлемента TART
_3.3 Структура и локализация теломерных РНП в различных тканях Drosophila
3.3.1 Локализация HeT-A РНП в яичниках Drosophila на ранних этапах оогенеза
3.3.2 Локализация HeT-A РНП в яичниках Drosophila на средних и поздних этапах развития яйцевых камер
3.3.3 Локализация HeT-A РНП в эмбрионах Drosophila
3.3.4 TART РНК колокализуется с HeT-A РНП в яичниках и эмбрионах Drosophila
_3.4 Транспорт HeT-A РНП, направленный к минус концам микротрубочек, осуществляется транспортным белком Egl
3.4.1 Нокдаун egl приводит к нарушению локализации HeT-A РНК в яичниках Drosophila
3.4.2 HeT-A РНП взаимодействуют с белком-транспортером Egl в яичниках и эмбрионах Drosophila
3.4.3 Egl колокализуется с HeT-A РНП в яичниках Drosophila
3.4.4 В яичниках дикого типа HeT-A Gag также колокализуется с Egl
3.4.5 Взаимодействие HeT-A РНП c Egl приводит к эктопическому накоплению Egl возле центросом в ранних эмбрионах при нарушении р1РНК сайленсинга и гиперэкспрессии НеТ-А
3.5 Гиперэкспрессия теломерных РНП приводит к гибели клеток в различных типах тканей, при этом HeT-A Gag локализуется вблизи центросом митотических клеток
4. ОБСУЖДЕНИЕ
_4.1 HeT-A Gag и HeT-A РНК образуют РНП в яичниках и эмбрионах дрозофилы
_4.2 Биогенез HeT-A РНП в процессе оогенеза дрозофилы
_4.3 РНК теломерного ретроэлемента TART ассоциирована с HeT-A РНП
_4.4 Транспорт теломерных HeT-A РНП, направленный к минус-концам микротрубочек, осуществляется белком Egalitarian в яичниках и эмбрионах дрозофилы
4.5 HeT-A РНП накапливаются вокруг центросом в эмбрионах с нарушением piРНК пути и нарушают локализацию Egl
4.6 HeT-A Gag скапливается у центросом при гиперэкспрессии в клетках и эмбрионах Drosophila
ЗАКЛЮЧЕНИЕ