Демиелинизация в условиях ишемии головного мозга у крыс Кисель Алена Андреевна

brief description

Кисель,АленаАндреевна.Демиелинизациявусловияхишемииголовногомозгаукрыс: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.03.01 /КисельАленаАндреевна; [Место защиты: Национальный исследовательский Томский государственный университет]. - Томск, 2019. - 153 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
университет» На правах рукописиКисельАленаАндреевнаДЕМИЕЛИНИЗАЦИЯВУСЛОВИЯХИШЕМИИГОЛОВНОГОМОЗГАУКРЫС03.03.01 Физиология Диссертация на соискание учёной

стр. 2
вазогенный................................................... 21 1.1.3 Особенности основных типовишемииголовногомозга........................... 23 1.1.3.1 Локальнаяишемия.................................................................................. 23 1.1.3.2 Тотальнаяишемияголовногомозга..................................................... 25 1.2 Томографические методы диагностикиишемиимозга...

стр. 10
генетики СО РАН и Томского государственного университета. Исследование включало в себя две экспериментальные серии, посвящённые изучению процессовдемиелинизациивусловияхдвух различных типовишемииголовногомозга. В первой серии изучаласьдемиелинизациявусловияхтотальной 11ишемииголовногомозга,

Оглавление диссертациикандидат наук Кисель Алена Андреевна
ВВЕДЕНИЕ......................................................................................................................6
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..............................................................................................14
1.1 Ишемия головного мозга.....................................................................................14
1.1.1 Типы ишемии головного мозга....................................................................14
1.1.2 Механизмы ишемического повреждения головного мозга.......................16
1.1.2.1 Глутаматная эксайтотоксичность и апоптоз........................................16
1.1.2.2 Воспаление и нарушение проницаемости гематоэнцефалического барьера..................................................................................................................19
1.1.2.3 Отёк: цитотоксический и вазогенный...................................................21
1.1.3 Особенности основных типов ишемии головного мозга...........................23
1.1.3.1 Локальная ишемия..................................................................................23
1.1.3.2 Тотальная ишемия головного мозга.....................................................25
1.2 Томографические методы диагностики ишемии мозга...................................27
1.2.1 Диффузионная МРТ.......................................................................................28
1.2.2 Изображения магнитной восприимчивости................................................30
1.2.3 ЕЬА1К/Т2- и ^-взвешенные изображения...................................................30
1.2.4 Перфузионная МРТ.......................................................................................32
1.3. Повреждение олигодендроцитов и миелина при ишемии головного мозга . 33
1.3.1 Механизмы чувствительности олигодендроцитов и миелина
к повреждающим факторам...................................................................................33
1.3.2 Повреждение олигодендроцитов и миелина при ишемии.........................40
1.4 Картирование миелина с помощью МРТ..........................................................43
1.4.1 Картирование ^.............................................................................................43
1.4.2 Картирование миелиновой водной фракции MWF....................................46
1.4.3 Диффузионно-тензорные изображения DTI...............................................48
1.4.4 Картирование макромолекулярной протонной фракции MPF.................49
2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ......................................................................................52
2.1 Объект исследования...........................................................................................52
2.2 Моделирование ишемии головного мозга.........................................................53
2.2.1 Моделирование тотальной ишемии.............................................................53
2.2.2 Моделирование локальной ишемии.............................................................53
2.3 Методы прижизненной оценки состояния животных......................................55
2.3.1 Оценка выживаемости...................................................................................55
2.3.2 Оценка неврологического дефицита............................................................55
2.3.3 Магнитно-резонансная томография.............................................................55
2.4 Выведение из эксперимента, фиксация тканей, пробоподготовка.................58
2.5 Окрашивание срезов мозга..................................................................................59
2.5.1 Окрашивание срезов мозга для детекции миелина....................................59
2.5.1.1 Окрашивание на липиды миелина люксолевым быстрым
синим LFB............................................................................................................59
2.5.1.2 Окрашивание к основному белку миелина MBP.................................60
2.5.2 Окрашивание срезов мозга для детекции зрелых нейронов.....................61
2.5.3 Окрашивание срезов мозга для детекции воспаления...............................62
2.6 Обработка изображений......................................................................................63
2.6.1 Оценка содержания миелина в срезах мозга...............................................63
2.6.1.1 Оценка содержания миелина по оптической плотности LFB............63
2.6.1.2 Оценка содержания миелина по проценту MBP-позитивной площади................................................................................................................65
2.6.2 Оценка степени гибели нейронов и воспаления в срезах мозга...............65
2.6.3 Обработка карт магнитно-резонансных параметров..................................66
2.7 Статистическая обработка данных.....................................................................66
3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ..........................................................................68
3.1 Выживаемость и неврологический дефицит.....................................................68
3.1.1 Выживаемость и неврологический дефицит при тотальной ишемии головного мозга ....................................................................................................... 68
3.1.2 Выживаемость и неврологический дефицит при моделировании локальной ишемии .................................................................................................. 69
3.2 Гибель нейронов и активация микроглии при моделировании ишемии.......70
3.2.1 Гибель нейронов и активация микроглии в гиппокампе при тотальной ишемии головного мозга ........................................................................................ 70
3.2.2 Гибель нейронов и активация микроглии в очаге локальной ишемии головного мозга ....................................................................................................... 72
3.3 Демиелинизация в условиях ишемии головного мозга...................................75
3.3.1 Изменения миелина, детектируемые по MBP............................................75
3.3.1.1 Изменения миелина, детектируемые по MBP при моделировании тотальной ишемии..............................................................................................75
3.3.1.2 Изменения миелина, детектируемые по MBP при моделировании локальной ишемии .............................................................................................. 77
3.3.2 Изменения миелина, детектируемые по LFB при моделировании локальной ишемии .................................................................................................. 80
3.4 Апробация и гистологическая валидация метода картирования MPF...........82
3.4.1 Анализ динамики значений MPF при моделировании локальной ишемии ..................................................................................................................... 82
3.4.2 Гистологическая валидация MPF картирования на модели локальной ишемии ..................................................................................................................... 84
3.4.3 Исследование специфичности метода картирования MPF
для количественной оценки содержания миелина по сравнению с другими методами МРТ.........................................................................................................86
3.4.4 Линейная регрессионная модель количественной оценки миелина после ишемии с MPF в качестве независимого параметра и коррекцией
на отёк......................................................................................................................89
3.5 Исследование специфичности MPF для количественной оценки миелина по сравнению с другими гистологическими показателями...................................91
4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.............................................................................93
4.1 Сравнение экспериментальных моделей тотальной и локальной ишемии мозга по параметрам нейрональной гибели, воспаления и демиелинизации......93
4.2 Обсуждение результатов гистологической валидации и оценки специфичности MPF картирования в качестве маркера неинвазивной оценки содержания миелина................................................................................................102
ЗАКЛЮЧЕНИЕ...........................................................................................................109
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.........................................................................................113
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...........................................................................................116