Повышение термостабильности бактериальной формиатдегидрогеназы методом направленного мутагенеза Федорчук, Владимир Витальевич

brief description

Федорчук, Владимир Витальевич.
Повышение термостабильности бактериальной формиатдегидрогеназы методом направленного мутагенеза : диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.15. - Москва, 2000. - 122 с. : ил.
Оглавление диссертациикандидат химических наук Федорчук, Владимир Витальевич
I. Введение.
II. Обзор литературы.
Глава 1. Стабилизация белков.
1.1 Общие положения.
1.2 Физико-химические методы.
1.3 Методы белковой инженерии.
1.3.1 Создание дополнительных 8-8 связей.
1.3.2 Повышение жесткости полипептидной цепи.
1.3.3 Оптимизация электростатических взаимодействий.
1.3.4 Гидрофобизация белковой глобулы.
1.3.5 Основы пространственного строения полипептидной цепи.
1.3.6 Снятие конформационных напряжений.
1.3.7 Другие методы.
1.4 Стабилизация МАБ+-зависимых формиатдегидрогеназ.
1.4.1 Сравнение аминокислотных последовательностей.
1.4.2 Механизмы инактивации ФДГ.
Глава 2. Очистка белков в двухфазных системах.
III. Экспериментальная часть.
Глава 3. Материалы и методы исследования.
3.1 Материалы.
3.2 Методы исследования.
IV. Результаты и их обсуждение.
4.1. Влияние ионной силы на термостабильность ФДГ.
4.2 Роль аминокислотного остатка в положении 61 в стабильности бактериальных ФДГ.
4.3 Мутагенез остатков Азр13, 01иЮ6, 01и170 и С1и391.
4.3.1 Мутагенез остатка Азр13.
4.3.2 Мутагенез остатка С1и170.
4.3.3 Мутагенез остатков 01и106 и 01и391.
4.3.4 Температурные зависимости термоинактивации.
4.4 Мутагенез остатка А1а198 и мутант Т7.
4.5 Разработка метода крупномасштабной очистки формиатдегидрогеназы с помощью двухфазных систем.
4.5.1. Оптимизация состава двухфазных систем.
4.5.2. Оптимизация очистки формиатдегидрогеназы термообработкой биомассы.
V. Выводы.
VI. Литература.