Промышленная технология производства биологических препаратов для диагностики туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота Безгин, Вячеслав Михайлович

brief description

Безгин,ВячеславМихайлович.Промышленнаятехнологияпроизводствабиологическихпрепаратовдлядиагностикитуберкулезаилейкозакрупногорогатогоскота: диссертация ... докторабиологическихнаук в форме науч. докл. : 03.00.04. - Москва, 1999. - 51 с.; 20х15 см.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
рукописи / ^ ^ ' - ' ^ з г и нВячеславМихайловичПромышленнаятехнологияпроизводствабиологическихпрепаратовдлядиагностикитуберкулезаилейкозакрупногорогатогоскота03.00.04-биохимия 03.00.23 - биотехнология ^Диссертация., в виде научного доклада на соискание ученой степени докторабиологическихнаук. Москва -1999 Работа выполнена на Государственной Курской биофабрике, во...

стр. 4
1997). Сложностьбиологическихсистем, применяемых в биотехнологическихпроизводствах, заключается, в многостадийноститехнологий, а также н е о б х о ­ димости оптимизации и строгой организации производственных процессов:: Поэтому совершенствованиепромышленнойтехнологииизготовленияпрепаратовдлядиагностикитуберкулезаилейкозакрупногорогатогоскота, а также решение проблемы охраны окружающей среды...

стр. 4
разработать научные и практические основыпромышленногопроизводствановых и усовершенствова­ ния существующихтехнологийполученияпрепаратовдлядиагностикитубер­ кулезаилейкозакрупногорогатогоскота. Основные задачи исследований. 1. Разработать типовуюпромышленнуютехнологиюизготовления тубер­ кулина П П Д (protein purified derivative)длямлекопитающих в стандартном раз­ ведении. 2....

Оглавление диссертациидоктор биологических наук в форме науч. докл. Безгин, Вячеслав Михайлович
Актуальность проблемы. В структуре инфекционных болезней животных туберкулез и лейкоз крупного рогатого скота по своему социальному и экономическому значению занимают особое место. Значительный ущерб эти заболевания наносят скотоводству в связи с большой чувствительностью животных к этим болезням и длительностью эксплуатации.
Эффективность противоэпизоотических и профилактических мероприятий при туберкулезе и лейкозе крупного рогатого скота в значительной степени зависит от своевременной постановки диагноза и удаления больных животных из оздоравливаемых стад, так как они являются основным источником возбудителей болезней (В.Е. Щуревский, 1980; Н.П. Овдиенко, В.А. Шаров« Э.С. Плотников, 1982; В.А. Бусол, М.И. Гулюкин, 1988; П.Н. Смирнов и др., 1998).
Во всех странах, где регистрируют туберкулез, эффективность диагностики обеспечивается применением аллергического метода с использованием специфического биопрепарата - туберкулина. В диагностике лейкоза крупного рогатого скота широко применяют реакцию иммунодиффузии в агаровом геле (РИД), которая принята в качестве основного диагностического теста, регламентирующего международную и внутреннюю торговлю племенными животными, спермой, эмбрионами, а также при проведении оздоровительных мероприятий (М. Шваних, 1996; А.Н. Шаров, B.C. Тырина, JI.A. Ерощенко, Й.С. Шевырев и др., 1996; В.П. Шишков, Л.Г. Бурба, А.Ф. Валихов, 1988,1996).
Одним из ведущих биопредприятий, производящих препараты диагно--—-"кого профиля, является Государственная Курская биофабрика, производ-ч мощности которой позволяют ежегодно выпускать около 400 млн. доз 'атов для диагностики лейкоза и туберкулеза крупного рогатого скота. , ,ует отметить, что на изготовителе диагностикумов туберкулеза и лейкоза -их огромная ответственность за их качество, так как по данным Департа-:;та ветеринарии Минсельхозпрода РФ туберкулез и лейкоз крупного рогато-~ ешта последние годы занимают ведущее место в структуре инфекционной патологии животных (В.М. Авилов, В.М. Нахмансон, 1995; В.М. Авилов, В.Ф. Пылинин, Н.П. Овдиенко, В.А. Ведерников, 1997).
Сложность биологическйх систем, применяемых в биотехнологических производствах, заключается в многостадийности технологий, а также необходимости оптимизации и строгой организации производственных процессов.
Поэтому совершенствование промышленной технологии изготовления препаратов для диагностики туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота, а также решение проблемы охраны окружающей среды при их производстве остаются актуальными (В.П. Шишков, Г.Ф. Коромыслов, Л.Г. Бурба, 1991; В.И. Литвинов, A.M. Моррз, В.Я. Гергерт, 1996).
Цель работы.- Целью наших исследований было разработать научные и практические основы промышленного производства новых и усовершенствования существующих технологий получения препаратов для диагностики туберкулеза и лейкоза крупного рогатого скота*
Основные задачи исследований.
1. Разработать типовую промышленную технологию изготовления туберкулина ППД (protein purified derivative) для млекопитающих в стандартном разведении.
2. Разработать научно обоснованный способ производства качественно нового,, стандартизированного ло молекулярной.массе, туберкулиНас использованием ультрафильтрации.
3. Изучить зависимость качества туберкулина ПГ1Д для млекопитающих от производственных штаммов, используемых в его получении.
4. Оптимизировать условия культивирования микобактерий туберкулеза бычьего вида при промышленном производстве туберкулинов.
5. Изучить процесс электродиализного обессоливания растворов туберкулина и внедрить в производство промышленную технологию.
6. Разработать промышленную технологию приготовления сублимированной питательной среды для ускоренного выделения микобактерий туберку^ леза из биоматериала животных.
7. Разработать технологию промышленного изготовления сублимированного антигена вируса лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС) для РИД.
8. Разработать промышленную технологию культивирования клеток почки эмбриона овцы (ПЭО), хронически инфицированных вирусом лейкоза, в промышленных ферментерах и выделения антигена вируса лейкоза с использованием процессов ультрафильтрации.
9. Разработать нормативную документацию на изготовление туберкули-нов ППД для млекопитающих и наборов для диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
10. Представить экологическую характеристику разработанных технологий производства диагностикумов.
Научная новизна. Впервые разработана промышленная технология производства:
- туберкулина ППД в стандартном разведении (патент № 2031656 «Способ получения туберкулина», 1992 г.);
- туберкулина ППД для млекопитающих с использованием методов ультрафильтрации (патент № 2045959 «Аллерген для диагностики туберкулеза и способ его получения», 1992 г. и патент № 2035914 «Способ получения туберкулина», 1993 г.);
- наборов для диагностики лейкоза крупного рогатого скота в реакции иммунодиффузии (патент № 2020960 « Способ получения антигена вируса лейкоза крупного рогатого скота», 1992 г.);
- питательной среды для ускоренного выделения микобактерий туберкулеза из биоматериала животных (ФАСТ-ЗЛ).
Впервые изучен процесс электродиализного обессоливания растворов туберкулина и разработана его промышленная технология (патент №2031656 «Способ получения туберкулина», 1992 г.), позволяющая существенно интенсифицировать процесс изготовления диагностикума.
Изучены иммунобиологические свойства ППД туберкулинов для млекопитающих в едином разведении и разработана технология стабилизации растворов туберкулина.
Разработана методика концентрирования и стандартизации туберкуло-протеина по молекулярной массе и дана иммунобиологическая характеристика препарата.
Изучено влияние производственных штаммов М. bovis и М. tubereulosis на качественные характеристики туберкулина ППД для млекопитающих. Показана высокая специфичность и активность моноштаммного препарата. и гг Ангмтыл I „
Разработана технология выделения и концентрирования вируса лейкоза крупного рогатого скота.
Практическая значимость работы определена действующими Нормативно-техническими документами (НТД) на технологию изготовления (технологические инструкции) и контроль (технические условия, государственный стандарт), рассмотренными и утвержденными в установленном порядке.
Результаты исследований включены в:
Инструкцию по изготовлению и контролю туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих», утвержденную Главным управлением ветеринарии МСХ СССР 30.12.85 г;
- «Временную инструкцию по изготовлению и контролю набора для серологической диагностики лейкоза КРС в РИД», утвержденную Главным управлением ветеринарии МСХ СССР 25.05.87 г;
- ГОСТ 16739-88 «Туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих»;
- Технические условия 10-19-442-87 «Набор для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота»;
- Технические условия 46-21-902-85 «Туберкулин очищенный (ППД) для млекопитающих»;
- «Инструкцию по изготовлению аллергена сухого очищенного комплексного из атипичных микобактерий (KAM)», утвержденную директором ВГНКИ ветпрепаратов 02.10.93 г.;
- Дополнения и изменения к «Инструкции по изготовлению и контролю туберкулина очищенного (ППД) для млекопитающих», утвержденные ГУВ Госагропрома СССР 02.10.87 г.;
- Изменения и дополнения к «Инструкции по изготовлению и контролю туберкулина очищенного ППД для млекопитающих», утвержденные ГУВ при Госкомиссии Совмина СССР по продовольствию 04.04.90 г. и 10.12.90 г.;
- «Инструкцию по изготовлению среды питательной ФАСТ-ЗЛ», утвержденную директором Государственной Курской биофабрики и директором ВНИИ бруцеллеза и туберкулеза животных 12.04.96 г. и 16.04.96.;
- Технические условия 9385-106-00494185-96 «Среда питательная ФАСТ-ЗЛ».
Освоено серийное промышленное производство диагностикумов и питательной среды на Государственной Курской биофабрике. По разработанным технологиям произведено 3591 млн. доз туберкулина, 223,3 млн. доз наборов для диагностики лейкоза крупного рогатого скота, 70,8 тыс. доз питательной среды ФАСТ-ЗЛ для ускоренного выделения микобактерий туберкулеза из биоматериала от животных.