Репликативное старение мезенхимальных стромальных клеток человека в условиях с различным содержанием кислорода Ратушный Андрей Юрьевич

brief description

Ратушный,АндрейЮрьевич.Репликативноестарениемезенхимальныхстромальныхклетокчеловекавусловияхсразличнымсодержаниемкислорода: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.03.01; 03.03.04 /РатушныйАндрейЮрьевич; [Место защиты: Ин-т мед.-биол. проблем]. - Москва, 2019. - 140 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Российской академии наук» ____________________________ На правах рукописиРАТУШНЫЙАндрейЮрьевичРЕПЛИКАТИВНОЕСТАРЕНИЕМЕЗЕНХИМАЛЬНЫХСТРОМАЛЬНЫХКЛЕТОКЧЕЛОВЕКАВУСЛОВИЯХСРАЗЛИЧНЫМСОДЕРЖАНИЕМКИСЛОРОДА03.03.01 - физиология 03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание

стр. 44
полной среды, бережно ресуспендировали, подсчитывали в гемоцитометре количествоклетоки высевали на культуральную посуду с плотностью 3*103клеток/см2. Длительное культивирование МСК приразличномсодержаниикислородаПосле разморозки культивированиеклетокосуществляли в инкубаторе (Sanyo, Япония) в стандартныхусловияхпри атмосферном уровнекислорода(5% СО2, 95% воздуха (≈20% О2), 37°С, 100% влажность) и при пониженном...

стр. 61
2016). Рисунок 15. Распределение МСК по фазам клеточного цикла при длительном культивировнии вусловияхразличногосодержаниякислорода. Оценку проводили на стадии 40-60% конфлюентности монослоя. Репрезентативные диаграммы. Оценка влияния гипоксическихусловийвыявила, что культивирование жтМСК при физиологическомсодержаниикислорода(5% О2) приводит к достоверному (p≤0,05) увеличению доли делящихсяклетокна ранних пассажах (рис. 14)....

Оглавление диссертациикандидат наук Ратушный Андрей Юрьевич
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Научная новизна
Теоретическая и практическая значимость
Основные положения, выносимые на защиту
Степень достоверности результатов проведённых исследований
Апробация работы
Связь работы с научными программами
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Мезенхимальные стромальные/стволовые клетки. Общие положения
Тканевые источники и гетерогенность МСК
Тканевая ниша МСК. Уровень кислорода
Старение организма и старение клетки
Инициаторы клеточного старения
Механистические теории старения
Теломерная теория
Свободно-радикальная теория
Митохондриальная теория старения
Свободно-радикальная митохондриальная теория
Положительные эффекты клеточного старения
Старение МСК
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Химические реагенты
Материалы
Оборудование
Выделение МСК
Криоконсервация МСК
Длительное культивирование МСК при различном содержании кислорода
Иммунофенотипирование МСК
Число удвоений популяции
Распределение популяций МСК по фазам клеточного цикла
Колониеобразующие единицы
Экспрессия Р-галактозидазы, ассоциированной со старением
Распределение популяций МСК по размеру и гранулярности
Жизнеспособность
Дифференцировка в остеогенном и адипогенном направлениях
Состояние внутриклеточных органелл
Конфокальная микроскопия
Окислительный стресс в клетке
Иммуноферментный анализ
Количественный ПЦР анализ
Статистическая обработка
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Феноменологические признаки сенесцентного состояния
Количество удвоений клеточной популяции
Жизнеспособность
Пролиферативная активность
Активность ассоциированной со старением Р-галактозидазы
Морфология
Характеристика МСК при длительном культивировании
Иммунофенотип
Потенциал к дифференцировке
Характеристика состояния клеточных органелл и уровня окислительных процессов
Митохондрии
АФК
Лизосомы
Паракринные медиаторы
Транскрипционная активность генов, ассоциированных со старением и реакцией на гипоксию
Экспрессия генов, ассоциированных со старением
Экспрессия генов, ассоциированных с реакцией на гипоксию
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ