рН-зависимость элементарных стадий катализа неорганической пирофосфатазой Фабричный, Игорь Павлович

brief description

Фабричный, Игорь Павлович.рН-зависимость элементарных стадий катализа неорганической пирофосфатазой : диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.10. - Москва, 2000. - 108 с. : ил.

Оглавление диссертациикандидат химических наук Фабричный, Игорь Павлович
Список сокращений Введение
Ферментативные механизмы гидролиза/синтеза фосфоангидридной связи (обзор литературы) Пирофосфатаза О-белки АТРазы Экспериментальная часть Материалы Ферменты
Определение активности пирофосфатазы
Расчет общих концентраций ионов Мд2+, пирофосфата и фосфата Математическая обработка результатов Результаты и их обсуждение
1. Кинетический механизм ингибирования пирофосфатазы дрожжей фторид-ионом
1.1. Влияние иона Б" на гидролиз/синтез РР
1.2. Инактивация У-РРазы в равновесии с фосфатом
1.3. Влияние фторид-иона на образование связанного с ферментом пирофосфата
1.4. Константы скорости элементарных стадий катализа
2. Влияние замен консервативных остатков активного центра на функциональные свойства пирофосфатазы дрожжей
2.1. Влияние мутаций на каталитические свойства РРазы
2.2. Взаимодействие мутантных У-РРаз с фторид-ионом
2.3. Ингибирование фторид-ионом синтеза РР1 Б117Е-РРазой
3. Влияние рН на константы скоростей элементарных стадий катализа У-РРазой
3.1. Кинетика гидролиза РР1 в стационарном состоянии
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Трис - трис(гидроксиметил)аминометан BSA - альбумин сыворотки быка DTT - дитиотреитол
EGTA - этиленгликоль-бисф-аминоэтиловый эфир) N,N,N',N' -тетр аацетат
Е-РРаза - РРаза из Escherichia coli
MES - 4-морфолиноэтансульфоновая кислота
PIPES 1,4-пиперазиндиэтансульфоновая кислота
Pi - фосфат
PPi - пирофосфат
РРаза - неорганическая пирофосфатаза
TAPS - 3-{[2-гидрокси-1,1 -бис(гидроксиметил)этил]амино}-1 -пропансульфоновая кислота
TES - 3-{[2-гидрокси-1,1-бис(гидроксиметил)этил]амино}-1-этансульфоновая кислота WT - природный штамм
Y-РРаза - РРаза из дрожжей Saccharomyces cerevisiae