Выявление маркеров цитомегаловируса у новорожденных и детей раннего возраста. Развитие апоптоза при цитомегаловирусной инфекции in vitro Меджидова, Марина Гудовна

brief description

Меджидова,МаринаГудовна.Выявлениемаркеровцитомегаловирусауноворожденныхидетейраннеговозраста.Развитиеапоптозаприцитомегаловируснойинфекцииinvitro: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 2005. - 159 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
ГУ НИИ ВИРУСОЛОГИИ им. д. и. ИВАНОВСКОГО РАМН На правах рукописиМЕДЖИДОВАМАРИНАГУДОВНАВыявлениемаркеровцитомегаловирусауноворожденныхидетейраннеговозраста.Развитиеапоптозаприцитомегаловируснойинфекцииinvitro. 03.00.03. - Молекулярная биология ДИССЕРТАЦИЯ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ

стр. 5
моноклональные антитела ПЦР - полимеразная цепная реакция ФЛЭЧ - фибробласты легкого эмбриона человека ЦМВ -цитомегаловирусчеловека ЦМВИ -цитомегаловируснаяинфекцияЦПД - цитопатическое действие ВВЕДЕНИЕ. Актуальность проблемы.Цитомегаловируснаяинфекция(ЦМВИ) является одной из наиболее часто встречающихинфекцийуноворожденныхидетейраннеговозраста, вызывающих тяжелые патологии, вплоть до гибелиребенка(15;...

стр. 117
диагностика ЦМВИноворожденныхидетейраннеговозрастаявляется сложной задачей. ЧастотавыявлениямаркеровЦМВ уноворожденныхидетейраннеговозрастас подозрением на ЦМВИ зависит отвозрастаребенка, инфицированности матери, времени заражения в процессеразвития, компетентности иммунной системы. Выбор

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Меджидова, Марина Гудовна
ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1. Цитомегаловирус человека: структура и репликация.
1.1. Структура и организация генома
1.2. Репликация цитомегаловируса
Глава 2. Методы лабораторной диагностики цитомегаловирусной инфекции.
2.1. Культуральные методы
2.2. Непосредственное определение вирусных антигенов в клинических образцах
2.3. Определение нуклеиновых кислот вируса
2.4. Серологические методы
Глава 3. Действие цитомегаловируса на программированную клеточную гибель.
3.1. Ингибирование апоптоза в ЦМВ инфицированных клетках.
3.2. Влияние вирусных белков на программированную клеточную гибель.
3.3. Анализ клеточных факторов, участвующих в апоптозе.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Основные реактивы и препараты, используемые в работе
Культура клеток и вирус
Определение инфекционной активности вируса
Синхронизация ФЛЭЧ
Иммуноцитохимический метод
Определение целостности цитоплазматической мембраны фибробластов 51 Выявление активированной каспазы-3 и фрагментированной ДНК
Пациенты
Исследуемый материал
Быстрый культуральный метод (БКМ)
Твердофазный иммуноферментный анализ (тИФА)
Иммуноблот
Авидность антител
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава 5. Выявление маркеров ЦМВ у новорожденных и детей раннего возраста.
5.1.Повышение чувствительности выявления инфеционно активного вируса с помощью БКМ.
5.2.Частота обнаружения маркеров ЦМВ у недоношенных и маловесных новорожденных детей с использование количественных вариантов БКМ, ПЦР и методов серодиагностики. JT^
5.3. Выявление маркеров ЦМВ у детей раннего возраста.
5.4. Сравнение эффективности выявления ЦМВ в клинических образцах методом ПЦР и БКМ.
5.5. Сравнительный анализ коммерческих тест-систем, выявляющих анти-ЦМВ антитела IgG и IgM.
Глава 6. Влияние ЦМВИ на гибель диплоидных фибробластов человека.
6.1. Динамика гибели фибробластов человека, инфицированных в различных фазах клеточного цикла.
6.2. Экспрессия мРНК генов Bcl-2, Fas и белка Вс1-2 в клетках, инфицированных ЦМВ в различных пролиферативных состояниях.
6.3. Активация каспазы-3 и транслокация цитохрома С в цитоплазму зараженных клеток.
6.4. Влияние ЦМВ на целостность цитоскелета клетки. 100 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 103 ВЫВОДЫ 136 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список использованных сокращений.
АГ- антиген AT - антитела
БКМ - быстрый культуральный метод
ИА - индекс авидности
ИБ - иммуноблот
ИФА - иммуноферментный анализ
МИ -множественность инфицирования
МКА - моноклональные антитела
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ФЛЭЧ - фибробласты легкого эмбриона человека
ЦМВ - цитомегаловирус человека
ЦМВИ - цитомегаловирусная инфекция
ЦПД - цитопатическое действие