Желтякова Ірина Олександрівна. Вивчення стійкості біологічних об'єктів різного рівня організації до дії фізико-хімічних факторів кріоконсервуцвання

brief description

Желтякова Ірина Олександрівна. Вивчення стійкості біологічних об'єктів різного рівня організації до дії фізико-хімічних факторів кріоконсервуцвання : Дис... канд. наук: 14.01.35 2006

Желтякова І.О. Вивчення стійкості біологічних об’єктів різного рівня організації до дії фізико-хімічних факторів кріоконсервування. Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.01.35 кріомедицина. Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, Харків, 2006.
Вивчено вплив кріоконсервування без використання традиційних кріопротекторів на морфофункціональний стан ядровміщуючих клітин кордової крові людини та вплив попереднього гіпотермічного зберігання на морфофунціональні властивості і кріостійкість ядровміщуючих клітин кордової крові людини. Визначені білкові фракції плазми, що мають вирусонейтралізуючу активність, молекулярна маса яких відповідає молекулярній масі пропердину, інтерферонів і -глобулінів.
Вивчено вплив тривалості зберігання в умовах гіпотермії і помірно-низьких температур на збереженість та кріостійкість вірусу грипу А/Вікторія в складі патологічного матеріалу і показана різна кріостійкість вірусу залежно від ступеня його зрілості.
Встановлено, що лейкоконцентрат кордової крові людини, попередньо інтраназально введений у носоглотку мишей, сприяє виробленню у них противірусного імунітету, досить напруженого, щоб забезпечити стійкість останніх до зараження вірусом грипу на протязі одного року і може бути розглянутий, як новий засіб профілактики грипу та інших гострих респіраторно вірусних захворювань.

У дисертаційній роботі теоретично узагальнені результати численних фундаментальних і прикладних досліджень в галузі кріобіології, що стосуються проблем кріоконсервування і кріостійкості кровотворних клітин кордової крові людини та вірусутримуючого матеріалу, що були використані при розробці ефективних технологій їх довгострокового зберігання. Обґрунтовані новий підхід і доцільність застосування кордової крові людини для визначення кількості і морфофункціональних властивостей кровотворних клітин; одержання лейкоконцентрату, його кріоконсервування і використання для профілактики респіраторних вірусних інфекцій.
Показано, що після 48 годин гіпотермічного зберігання кордової крові людини при температурі +4С знижується кріостійкість її ядровміщуючих компонентів без зміни їх морфофункціональних властивостей. У зв'язку з цим, максимально припустимим терміном гіпотермічного зберігання кордової крові людини перед її використанням для приготування лейкоконцентрату є 24 години збереження при температурі +4С.
Уперше встановлено, що в плазмі кордової крові людини визначаються фракції білків з молекулярними масами 180-230кД (пропердин), 160 кД (-глобуліни) і менш 100 кД (інтерферони), яким притаманна противірусна активність, титр яких вірогідно не змінюється після кріоконсервування.
Показано, що лейкоконцентрат кордової крові людини при однократному інтраназальному введенні може попереджати розвиток грипозної інфекції у мишей і сприяти виробленню напруженого противірусного імунітету, що забезпечує несприйнятливість тварин до даної інфекції на протязі одного року. Встановлено, що розвиток гемо- і імунодепресивних станів у експериментальних тварин при грипозній інфекції обумовлено безпосереднім впливом вірусу на органи гемо- і імунопоезу.
Визначені припустимі терміни збереження вірусу грипу А/Вікторія в складі патологічного матеріалу при температурі +4С, 0С и -20С. Максимально припустимим терміном збереження вірусу грипу А/Вікторія в змиві з носоглотки є 24 години при температурі +4С и 0С і не більш двох діб при температурі -20С; в слизовій носоглотці, тканинах трахеї і легень - вісім діб при +4С и 0С і п'ятнадцять діб при -20С.
Показано, що оптимальним методом кріоконсервування вірусу грипу А/Вікторія в складі патологічного матеріалу (змив із носоглотки, слизова носоглотки, тканина трахеї та легень) є швидке занурення у рідкий азот.