ЧУДИН Антон Вячеславович ГЕМОДИНАМИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ТКАНЯХ ГЛАЗА ПРИ РЕГИОНАРНОЙ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ И ВОЗМОЖНОСТИ ИХ КОРРЕКЦИИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ

Бесплатное скачивание авторефератов
СКИДКА НА ДОСТАВКУ РАБОТ!
ВНИМАНИЕ АКЦИЯ! ДОСТАВКА ОТДЕЛЬНЫХ РАЗДЕЛОВ ДИССЕРТАЦИЙ!
Авторские отчисления 70%
Снижение цен на доставку работ 2002-2008 годов

 

ПОСЛЕДНИЕ ОТЗЫВЫ

Порядочные люди. Приятно работать. Хороший сайт.
Спасибо Сергей! Файлы получил. Отличная работа!!! Все быстро как всегда. Мне нравиться с Вами работать!!! Скоро снова буду обращаться.
Отличный сервис mydisser.com. Тут работают честные люди, быстро отвечают, и в случае ошибки, как это случилось со мной, возвращают деньги. В общем все четко и предельно просто. Если еще буду заказывать работы, то только на mydisser.com.
Мне рекомендовали этот сайт, теперь я также советую этот ресурс! Заказывала работу из каталога сайта, доставка осуществилась действительно оперативно, кроме того, ночью, менее чем через час после оплаты! Благодарю за честный профессионализм!
Здравствуйте! Благодарю за качественную и оперативную работу! Особенно поразило, что доставка работ из каталога сайта осуществляется даже в выходные дни. Рекомендую этот ресурс!


Название:
ЧУДИН Антон Вячеславович ГЕМОДИНАМИЧЕСКИЕ И МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ТКАНЯХ ГЛАЗА ПРИ РЕГИОНАРНОЙ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ И ВОЗМОЖНОСТИ ИХ КОРРЕКЦИИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
Альтернативное Название: ЧУДІН Антон Вячеславович гемодинамічні та МОРФОЛОГІЧНІ ЗМІНИ В ТКАНИНАХ ОЧІ При регіонарній ІШЕМІЇ-реперфузії ТА МОЖЛИВОСТІ ЇХ КОРЕКЦІЇ (ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ) CHUDIN Anton Vyacheslavovich HEMODYNAMIC AND MORPHOLOGICAL CHANGES IN EYE TISSUES IN REG
Тип: Автореферат
Краткое содержание: Диссертация изложена на 152 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов
исследования, главы собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 205 источников (66 отечественных и 139 зарубежных). Диссертация иллюстрирована 13 таблицами и 24 рисунками. Работа выполнена в отделе ультразвуковых исследований (начальник д.м.н., профессор Киселёва Т. Н.), на базе научного экспериментального центра (заведующая к.б.н. Щипанова А. И.), отдела патологической анатомии и гистологии (начальник д.м.н., профессор Хорошилова-Маслова И. П.) и отдела иммунологии и вирусологии (начальник
д.м.н., профессор Слепова О. С., совместно с к.б.н. Балацкой Н. В.) ФГБУ «МНИИГБ им. Гельмгольца» Минздрава России.
Содержание работы Материал и методы исследования
Исследование проведено на 110 крысах породы Wistar со средней массой 200 - 250 гр. Возраст животных составлял от 3 до 5 месяцев.
Все инвазивные вмешательства проводились при сочетании общей анестезии по стандартной схеме из расчета дозы вещества на массу тела, принятой в лабораторной практике для работы с крысами и местной анестезии 0,4% раствором оксибупрокаина (инокаин). Эксперимент состоял из трех этапов. Первый этап включал оценку состояния кровотока в орбитальных сосудах до начала приема антиоксиданта ресвератрола и через 30 суток после начала его применения. На втором этапе проводилось моделирование ишемии-реперфузии путём повышения ВГД до 110 мм.рт.ст. на 30 минут (патент РФ на изобретение №2577449 от 15.02.2016) и субконъюнктивального введения раствора ЭТ-1 в дозе 0,2 мл 4*10-6 моль/л (М) (патент РФ на изобретение №2577242 от
11. 02.2016). Третий этап включал оценку состояния переднего отрезка глаза, ультразвуковое исследование глаза и орбиты в B-режиме, оценку глазного кровотока, лабораторные и морфологические исследования биоматериала после эвтаназии животных.
Согласно задачам исследования на первом этапе все животные были разделены на две группы: в 1 группу вошли 50 интактных крыс (50 глаз), во 2 группу - 60 крыс (60 глаз), которые получали ресвератрол перорально в дозе 20 мг/кг с питьевой водой в течение 30 суток.
На втором этапе исследования все животные 1 группы были разделены на три подгруппы: 20 животных (20 глаз), которым моделирование ишемии- реперфузии проводилось путём повышения ВГД на одном глазу (1А подгруппа), 20 животных (20 глаз), у которых моделировали ишемию-реперфузию с помощью одностороннего субконъюнктивального введения эндотелина-1 (ЭТ-1) (1Б подгруппа) и 10 интактных крыс (20 глаз) составили контрольную (1В) подгруппу.
Животные 2-й группы, получавшие ежедневно ресвератрол, были разделены на две подгруппы. 2А подгруппу составили 30 крыс (30 глаз), которым осуществляли моделирование односторонней ишемии-реперфузии путём повышения ВГД. В 2Б подгруппу вошли 30 крыс (30 глаз), у которых моделирование ишемии-реперфузии проводилось с помощью одностороннего субконъюнктивального введения ЭТ-1. После моделирования регионарной ишемии-реперфузии животные 2 группы продолжали получать антиоксидант до момента эвтаназии. Всем животным автор самостоятельно выполнял осмотр с помощью бинокулярной лупы для оценки состояния переднего отрезка глаза и прямую офтальмоскопию для подтверждения появления ишемии сетчатки. Выраженность кератопатии и реакция переднего отрезка глаза оценивалась по шкале в условных баллах по 5 критериям (светобоязнь и блефароспазм, отёк роговицы, отёк радужки, кровь в передней камере, неоваскуляризация роговицы).
Критериями исключения из эксперимента явились: отслойка сетчатки, эндофтальмит, гипопион и цилиохориоидальная отслойка, возникшие в постишемическом периоде.
Ультразвуковые методы исследования проводились на многофункциональной ультразвуковой диагностической системе Voluson E8 Expert (GE Healthcare) до начала приема ресвератрола, через 30 суток после начала перорального применения антиоксиданта, в первые минуты после моделирования ишемии-реперфузии и через 3, 7 и 30 суток.
Применение мультичастотного объемного линейного датчика RSP 6-16-D позволило определить основные орбитальные сосуды в режиме энергетического картирования (ЭК) с трехмерной реконструкцией изображения. Определение показателей гемодинамики осуществлялось с помощью ЭК и импульсной допплерографии. Регистрировали спектр допплеровского сдвига частот (СДСЧ) и основные количественные показатели кровотока: максимальную систолическую скорость (Vsyst), конечную диастолическую скорость (Vdiast) и индекс резистентности или периферического сопротивления (RI).
Перед оценкой гемодинамических параметров автором самостоятельно проводилось измерение системного артериального давления (АД) под общим наркозом с помощью системы неинвазивного измерения АД c хвостовой манжетой IITC (США) (Mouse Rat Blood Pressure System IITC Life Science Inc., USA).
Животных выводили из эксперимента под наркозом путём декапитации через 3, 7 и 30 суток после моделирования ишемии-реперфузии.
Лабораторные методы исследования. Данный раздел работы выполнен на базе отдела иммунологии и вирусологии Института (руководитель - д.б.н.,
профессор Слепова О. С.) совместно с к.б.н. Балацкой Н. В. Материалом для исследований послужили сыворотка крови (СК) и гомогенаты тканей комплекса сетчатка-хориоидея крыс. Определяли следующие показатели: факторы
митохондриального (BAX/BCL-2) и внешнего пути апоптоза (sFas/FasL),
показатель повреждения нервной ткани - глиофибриллярный кислый протеин (GFAP), маркёр воспаления (МСР-1), нейротрофический фактор мозга (BDNF) и фактор роста нервов (NGF).
Методы гистологического исследования. Патогистологическое исследование проводилось на базе отдела патологической гистологии и анатомии ФГБУ «МНИИ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава России (руководитель отдела д.м.н., профессор Хорошилова-Маслова И. П.). Энуклеацию глазного яблока у крыс производили через 3, 7 и 30 суток после ишемии-реперфузии.
Энуклеированные глаза фиксировали в растворе Боуэна. После
макроскопического исследования вырезали колодку глазного яблока, которую обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в парафин. Парафиновые срезы толщиной 0,5-1,5 мкм готовили на микротоме Le^ RM2235 (Германия) и окрашивали гематоксилин-эозином. Препараты исследовали и фотографировали с помощью светового микроскопа на микросистеме Le^ (Германия) при увеличении *40, х100, *200, х400.
Статистический анализ выполнен автором самостоятельно с помощью компьютерных программ Microsoft Excel и “Statistica 6.0” (Stat. Soft. Inc, США). Для оценки статистической значимости применяли t-критерий Стьюдента и тест Манна-Уитни. Разница считалась достоверной при p<0,05.
Результаты собственных исследований
Оценка состояния переднего отрезка глаза после моделирования ишемии-реперфузии. Результаты обследования переднего отрезка глаза по бальной шкале показали травматичность метода моделирования ишемии- реперфузии путём повышения ВГД. Отмечались симптомы повреждения переднего отрезка глаза: светобоязнь, блефароспазм, отёк роговицы, радужки и гифема через 3 суток и появление неоваскуляризации роговицы у всех животных к концу периода наблюдения (через 30 суток) (Табл. 1). При моделировании ишемии-реперфузии путём субконъюнктивального введения ЭТ-1 наблюдали меньшую степень повреждения переднего отрезка глаза в раннем и позднем постишемическом периоде. Применение ресвератрола в течение длительного времени (от 1 до 2 месяцев) способствовало снижению выраженности и исчезновению ряда симптомов повреждения переднего отрезка глаза, наблюдалось уменьшение степени отёка, быстрое рассасывание гифемы и снижение неоваскуляризации роговицы (Табл. 1).
Оценка гемодинамики в орбитальных сосудах у крыс до моделирования ишемии-реперфузии. Соотношение результатов исследования в серой шкале с объемной цветовой картой потоков крови в режиме ЭК с трехмерной реконструкцией изображения позволило правильно оценить прижизненную пространственную топографию хода сосудов в орбите. Для точного определения глазных артерий сравнивали место визуализации потока крови с проекцией зрительного нерва. Если поток крови располагался кнутри от зрительного нерва, то его определяли как верхнюю глазную артерию (ВГ А), если кнаружи - как нижнюю глазную артерию (НГА). В аксиальной плоскости сканирования идентифицировали задние длинные цилиарные артерии (ЗКЦА), если сосудистая структура визуализировалась вблизи заднего полюса глаза и параллельно ему, при этом поток крови был направлен в сторону глаза. При проведении аксиальной плоскости сканирования через задний полюс глаза в проекции зрительного нерва определяли центральную артерию сетчатки (ЦАС).
В результате выполненного анализа трехмерной реконструкции сосудистой системы глаза и орбиты крысы с учетом литературных данных разработана 3D схема кровоснабжения глаза крысы. В отличие от представленной ранее схемы 2D показано, что задняя цилиарная артерия (ветвь нижней глазной артерии) первоначально в орбите отдает ЦАС, затем у заднего полюса глаза - две ЗДЦА. Предложенная схема имеет существенное значение для точной регистрации показателей гемодинамики в сосудах глаза.
Средний уровень нормального артериального давления (АД) в хвостовой артерии установлен на основании анализа данных 1-й контрольной группы и составлял для систолического АД в среднем 121,1±9,5 мм. рт.ст. (M+o), для диастолического - 80±14,3 мм.рт.ст (M+o). После статистической обработки полученных данных у здоровых интактных крыс были определены параметры средних показателей кровотока в сосудах орбиты в норме. Анализ показателей кровотока в ЦАС у здоровых крыс через 30 дней после приёма ресвератрола показал достоверное увеличение максимальной систолической скорости кровотока (Vsyst) на 35,6% (p<0,05), конечной диастолической (Vdiast) на 25,4% (p<0,001) и снижение RI на 13,5% (p<0,05) по сравнению с показателями в группе контроля. Аналогичные изменения гемодинамики отмечали в ЗДЦА, НГА и ВГА, в которых регистрировали увеличение Vsyst в среднем на 30,6%, 26,8% и 32% соответственно (p<0,05); увеличение Vdiast на 25,4% в ЗДЦА, 22,5% в НГА (p<0,001); на 19% в ВГА (p<0,05) и достоверное снижение индекса периферического сопротивления во всех артериях (p<0,05) по сравнению с контролем
 


Обновить код

Заказать выполнение авторской работы:

Поля, отмеченные * обязательны для заполнения:


Заказчик:


ПОИСК ДИССЕРТАЦИИ, АВТОРЕФЕРАТА ИЛИ СТАТЬИ


Доставка любой диссертации из России и Украины