Улько Лариса Григорівна. Бактеріальні асоціації за некробактеріозу у корів (поширення, етіопатогенез, профілактика та засоби лікування) : Улько Лариса Григорьевна. Бактериальные ассоциации по некробактериоза у коров (распространение, этиопатогенез, профилактика и средства лечения)

Краткое описание

СУМСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ АГРАРНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

На правах рукопису

УЛЬКО ЛАРИСА ГРИГОРІВНА

УДК 619:616.98:578.27:636.2

БАКТЕРІАЛЬНІ АСОЦІАЦІЇ ЗА НЕКРОБАКТЕРІОЗУ У КОРІВ (ПОШИРЕННЯ, ЕТІОПАТОГЕНЕЗ, ПРОФІЛАКТИКА ТА ЗАСОБИ ЛІКУВАННЯ)

Спеціальність 16.00.03 − ветеринарна мікробіологія, епізоотологія, інфекційні хвороби та імунологія

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук

Науковий консультант:
доктор ветеринарних наук, професор
Фотіна Тетяна Іванівна

Суми - 2013
ЗМІСТ

ПЕРЕЛІК УМОВНИХ ПОЗНАЧЕНЬ..

7

ВСТУП

8

РОЗДІЛ 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ.

18

1.1. Значення асоціацій мікроорганізмів у патології тварин та людини

18

1.2. Поширення захворювань кінцівок у великої рогатої худоби та економічні збитки .

27

1.3. Етіологія та фактори, що сприяють виникненню інфекційних захворювань з ураженням кінцівок

35

1.4. Лікувально-профілактичні заходи за захворювань кінцівок у великої рогатої худоби...............................................

48

Висновки до розділу 1..

57

РОЗДІЛ 2 ВИБІР НАПРЯМІВ ДОСЛІДЖЕНЬ, МАТЕРІАЛИ ТА
МЕТОДИ ВИКОНАННЯ РОБОТИ..

60

2.1. Матеріали досліджень

60

2.2. Методи досліджень.

63

Висновки до розділу 2..

87

РОЗДІЛ 3. РЕЗУЛЬТАТИ ВЛАСНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ..

88

3.1. Поширення некробактеріозу великої рогатої худоби, ускладненого різними бактеріальними асоціаціями в господарствах Північно-Східного регіону України та зв'язок захворювання з іншими патологіями..

88

3.2. Видовий спектр мікроорганізмів за ускладненого перебігу некробактеріозу у великої рогатої худоби

98

3.3. Вивчення культуральних, морфологічних та біохімічних властивостей культур мікроорганізмів виділених від тварин заускладненого перебігу

107

3.3.1. Виділення та ідентифікація S. aureus за культуральними,
морфологічними і біохімічними властивостями...

107

3.3.2. Виділення та ідентифікація S. epidermidis та S. saprophiticus за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями..

114

3.3.3. Виділення та ідентифікація S. agalactiae, S. pyogenes, E. faecalis за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями.

116

3.3.4. Виділення та ідентифікація E. coli за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями ..

117

3.3.5. Виділення та ідентифікація P. vulgaris та P. mirabilis за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями

118

3.3.6. Виділення та ідентифікація P. aeruginosa за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями.........................................................................

120

3.3.7. Виділення та ідентифікація K. pneumoniae за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями

124

3.3.8. Виділення та ідентифікація C. oedematiens, C. septicum та C. perfringens за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями

126

3.3.9. Виділення та ідентифікація F. necrophorum за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями

130

3.3.10. Виділення та ідентифікація D. nodosus за культуральними, морфологічними і біохімічними властивостями .

132

3.4. Визначення патогенних властивостей ізолятів на лабораторних тваринах, вивчення патолого-анатомічних та гістологічних змін за їх зараження дослідними культурами збудників

135

3.5. Дослідження антибіотикочутливості ізолятів, виділених від тварин за асоційованих бактеріозів кінцівок..

148

3.6. Вивчення впливу асоційованих бактеріозів кінцівок на якість продуктів тваринництва ...

155

3.6.1.Мікробне обсімені.ння продуктів забою великої рогатої худоби за асоційованих бактеріозів кінцівок

155

3.6.2. Якість молока, отриманого від корів за асоційованих бактеріозів кінцівок.

158

3.7. Вивчення стану показників неспецифічної резистентності та антиоксидантного захисту організму великої рогатої худоби за асоційованих бактеріозів кінцівок...

160

3.8. Розробка лікувально-профілактичних заходів за асоційованих
бактеріозах кінцівок у великої рогатої худоби...

167

3.8.1. Випробування препарату «ВетОкс-1000» за асоційованих
бактеріозів кінцівок великої рогатої худоби..

167

Список литературы

ВИСНОВКИ

У дисертаційній роботі на основі епізоотологічних та бактеріологічних досліджень теоретично та експериментально обґрунтовано етіологічну роль S..aureus, S. epidermidis, S. saprophiticus, S. agalactiae, S. pyogenes, Е. faecalis, E. coli, P. vulgaris, P. mirabilis, P. aeruginosa, K. pneumoniae, C. perfringens, C. septicum, C..oedematiens, F. necrophorum, D. nodosus при хворобах кінцівок у великої рогатої худоби та аргументовано зв'язок асоційованих бактеріозів кінцівок з виникненням маститів і метритів. Для профілактики та лікування патології кінцівок, в тому числі за ускладненого перебігу некробактеріозу, розроблено високоефективні препарати «ТімТіл», «Ранойод» та «Оксипрол», доведена їх фармакологічна та терапевтична ефективність у господарствах з різною технологією утримання. Встановлена доцільність застосування аутовакцин в комплексі лікувально-профілактичних заходів за асоційованих бактеріозів кінцівок.
1. Встановлено широке розповсюдження (11,11-12,19 %) асоційованих бактеріозів кінцівок, зокрема ускладненого перебігу некробактеріозу серед поголів’я великої рогатої худоби в господарствах Північного регіону України Найвищий відсоток захворюваності великої рогатої худоби на асоційовані бактеріози виявлено серед корів 13,86-15,01 %. Захворюваність серед телиць і нетелів варіює в межах 6,54-7,9 % та 4,43-6,2 % відповідно. Захворювання частіше реєструють у корів 5-6-ти річного віку (15,91 %), у квітні місяці (35,14 %).
2. Із біоматеріалу від тварин з ураженнями кінцівок ізольовано наступні мікроорганізми: S..aureus, S. epidermidis, S. saprophiticus, S. agalactiae, S. pyogenes, Е. faecalis, E. coli, P. vulgaris, P. mirabilis, P. aeruginosa, K. pneumoniae, C. perfringens, C. septicum, C..oedematiens, F. necrophorum, D. nodosus. Найбільша питома вага в загальній кількості ізольованої мікрофлори припадає на бактерії родів Staphylococcus spp. 27,09 %, Streptococcus spp. 23,15 % та Proteus spp. 14,62 %. В 45,83 % випадків асоціація була представлена 5 збудниками, із 22,71 % проб в асоціації виділяли 6 збудників, із 17,42 % і 10,24 % − 7 і 4 збудники відповідно. Найменша кількість проб 2,15 % та 1,65 % була представлена 3 та 8 збудниками.
3. За показниками біологічних властивостей ізольованих мікроорганізмів від корів з ураженнями кінцівок виявлено, що більшість з них і спричиняють загибель 55-95 % дослідних білих мишей. За рівнем патогенності ізоляти мають таку послідовність: S. aureus, P. aeruginosa, P. vulgaris, E. coli, C. septicum, C. oedematiens, S. agalactiae, K. pneumoniae, S. pyogenes, Е. faecalis, P. mirabilis, C. perfringens, F. necrophorum, S. saprophiticus, S. epidermidis, D. nodosus.
4. Встановлено наявність вираженої резистентності виділених мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів, а саме S. aureus, S. epidermidis, S. saprophiticus, S. agalactiae, S. pyogenes, Е. faecalis, E. coli, P. vulgaris, P. mirabilis, P. aeruginosa, K. pneumoniae до пеніциліну, стрептоміцину, енрофлоксацину та гентаміцину, що вказує на необхідність розробки нових комбінованих препаратів з урахуванням антибіотикочутливості стосовно більшості асоціантів, зокрема до тіамуліну, тілозину та тетрацикліну.
5. Виявлено підвищений рівень бактеріального обсіменіння продуктів забою та молока, одержаних від тварин, з ознаками асоційованих бактеріозів кінцівок. Із проб м’язової тканини та печінки, відібраних від туш великої рогатої худоби за асоційованих бактеріозів кінцівок легкого ступеню виділяються E. coli, S. aureus та P. vulgaris, які є джерелом виникнення харчових захворювань (токсикоінфекції та токсикози) у людей. Бактеріальна забрудненість молока тварин з асоційованими бактеріозами кінцівок була вірогідно вищою (р<0,001) порівняно із здоровими тваринами і становила 8674,4±566,71 тис / см 3.
6. Встановлена тенденція зростання захворюваності тварин на асоційовані бактеріози кінцівок, в тому числі і ускладненого перебігу некробактеріозу за умов зниження резистентності організму. Збільшення випадків асоційованих бактеріозів кінцівок відбувається при зниженні резистентності тварин в залежності від сезону року. В серпні захворюваність тварин була найнижчою (1,7 %), а показники природної опірності відносно високими: ЛАСК 14,23±0,64 %, БАСК 56,83±1,45 %, ФА 62,34±1,21.%. В лютому показники резистентності знижувалися ЛАСК до 8,34±0,72%, БАСК до 51,64±0,98 %, ФА нейтрофілів до 50,42±1,23 %, захворюваність зростала в 2,5 рази і становила 4,2 %. У сироватці крові корів з ураженнями кінцівок, викликаних асоціацією умовно-патогенних мікроорганізмів, виявлено достовірно менший вміст загального білка 59,5±0,40 г/л, альбумінів та альфа-глобулінів 37,52±0,28 % та 16,81±0,05 % відповідно, збільшення гамма-глобулінів до 31,0±0,29 % та підвищення активності АсАТ і АлАТ у сироватці крові до 28,1±0,39 Од/л і 53,5±0,40 Од/л відповідно, що вказує на розвиток ендогенної інтоксикації та порушення функції печінки.
7. Показано, що комплексне застосування ВетОксу-1000 (місцево та внутрішньовенно) дозволяє отримати високий терапевтичний ефект (87,5-100 %) при бактеріальних захворюваннях кінцівок у корів. Внутрішньовенне введення ВетОксу-1000 сприяє нормалізації імунного статусу за рахунок зростання лізоцимної і бактерицидної активності сироватки крові, фагоцитарної активності нейтрофілів та достовірного зменшення рівня малонового діальдегіду на 55,5 % з одночасною стимуляцією активності системи антиоксидантного захисту: активність глутатіонпероксидази підвищилася на 29,2 %, глутатіонредуктази на 20,4 %.
8. Експериментально обґрунтовано та розроблено комплексний хіміотерапевтичний препарат «ТімТіл» загальної дії для терапії великої рогатої худоби за асоційованих бактеріозів кінцівок, етіологічно зумовлених умовно-патогенною мікрофлорою S. aureus, S. epidermidis, S. saprophiticus, S. agalactiae, S. pyogenes, Е. faecalis, E. coli, P. vulgaris, P. mirabilis, P. aeruginosa, K. pneumoniae, C. perfringens, C. septicum, C. oedematiens, F. necrophorum, D. nodosus. Терапевтична ефективність препарату «ТімТіл» при лікуванні корів з асоційованими бактеріозами кінцівок за внутрішньом’язового уведення у дозі 1,0 см3 на 10 кг маси тварини становить 90 %. Застосування препарату сприяє зменшенню термінів одужання на 4,8 доби.
9. Доведено ефективність місцевого застосування препарату «Ранойод», який забезпечує широкий спектр антимікробної дії, при лікуванні тварин з асоційованими бактеріозами кінцівок великої рогатої худоби. Застосування Ранойоду забезпечує одужання 90 % хворих тварин, скорочення терміну одужання до 19,8±0,64 діб при зменшенні кількості обробок до чотирьох.
10. Обґрунтовано пролонговану дію антибактеріального препарату «Оксипрол». Його лікувальний ефект при застосуванні тваринам з асоційованими бактеріозами кінцівок в дозі 1,0 см3 на 10 кг маси тварини двічі з інтервалом 72 год. забезпечує одужання 86,7 % тварин.
11. Застосування 1 % розчину Бровадезу-плюс для лікування великої рогатої худоби з асоційованими бактеріозами кінцівок методом ножних ванн протягом трьох днів на тиждень три місяці поспіль сприяє зниженню захворюваності з 18,3 % до 4,3 %.
12. Показано, що щеплення корів інактивованою асоційованою вакциною із місцевих штамів F. necrophorum, S. aureus, S. pyogenes, P. aeruginosa та P. vulgaris в дозі 5,0 см3 у комплексі з неспецифічними засобами є ефективним способом у боротьбі з асоційованими бактеріозами кінцівок у великої рогатої худоби, в тому числі ускладненого перебігу некробактеріозу. Застосування вакцини забезпечувало повний захист тварин впродовж трьох місяців після щеплення.
13. Використання комплексних схем лікування великої рогатої худоби з асоційованими бактеріозами кінцівок із застосуванням препаратів «Ранойод», «ТімТіл», «Оксіпрол» та «ВетОкс-1000» залежно від ступеня ураження копитець дозволяє отримати високий терапевтичний ефект (90 %) і скоротити терміни одужання хворих тварин на 33,11 %. Економічна ефективність на 1 грн. затрат при лікуванні корів з легким ступенем ураження копитець становить 47,69 грн., з середнім 44,00 грн., з тяжким 4,62 грн.

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ

1. Комплексна система лікувально-профілактичних заходів за асоційованих бактеріозів кінцівок, що включає: комплексний антибактеріальний препарат загальної етіотропної дії «ТімТіл», комплексний препарат етіопатогенетичної дії для місцевого застосування «Ранойод», етіотропний препарат пролонгованої дії «Оксипрол», препарат етіопатогенетичної дії для місцевого і загального застосування «ВетОкс-1000» та препарат «Бровадез плюс» для місцевого застосування та дезінфекції (затверджена Науково-методичною радою Державного комітету ветеринарної медицини України, протокол № 4 від 25 грудня 2011 р.)
2. У випадках високого рівня захворюваності тварин на асоційовані бактеріози кінцівок в господарстві поряд з засобами неспецифічної терапії пропонуємо застосовувати асоційовану вакцину, виготовлену на основі місцевих штамів мікроорганізмів.
3. Технічні умови України на: ТімТіл ТУ У 24.4-14332579-058:2010, затв. Держав. департам. ветер. мед. Мін. агрополітики України 30.09.2010; Оксіпрол ТУ У 24.4-14332579-045:2010, затв. Держав. Департам. ветер. мед. Мін. агрополітики України 02.04.2010; реєстраційні посвідчення на: ТімТіл № АВ-01904-01-10 від 22.12.10; Оксипрол № АВ-02526-01-11 від 01.07.2011; Ранойод» № АВ-02924-01-11 від 30.12.11. та налагоджено їх серійне виробництво і реалізація ТзОВ НУНВФ «Бровафарма», м.Бровари.
4. Методичні рекомендації «Етіологія, терапія та особливості профілактики бактеріальних хвороб копитець у корів» (затверджені Науково-методичною радою Державного комітету ветеринарної медицини України, протокол № 1 від 23 грудня 2010 р).
5. Методичні рекомендації «Поширення та етіопатогенетичні передумови асоціативних бактеріозів кінцівок у корів», затверджені Науково-методичною радою Державного комітету ветеринарної медицини України (протокол № 4 від 25 грудня 2011 р).

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ЛІТЕРАТУРНИХ ДЖЕРЕЛ

1. Валеев Н. О. Лечебно-профилактические мероприятия при гнойно-некротических заболеваниях пальцев у коров (с учетом их иммунного статуса) : автореф. дис. канд. вет. наук : 16.00.05 / Н. О. Валев. − Санкт-Петербург, 1998. − 21с.
2. Безин А. Н. Клинико-иммунологический статус и иммунокорекция при травмах у животных : автореф. дис. д-ра. вет. наук : 16.00.03 / А. Н. Безин. Троицк, 2000. − 42с.
3. Сидорчук А. Некробактериоз КРС: Боятся или бороться? / А. Сидорчук, А. Воронец // Животноводство России. 2001. № 12. С. 32−34.
4. Островский М. В. Новый подход к лечению некробактериоза КРС / М. В. Островский // Рынок АПК. − 2005. − №12 (26) С. 26−27.
5. Clark В. L. The role of Fusobacterium necrophorum and Bacteroides melaninogenicus in the aetiology of interdigital necrobacillosis in cattle / B. L. Clark, D. J. Stewart, D. L. Emery //Austral. Veter. Jour. − 1985. − Vol 62, № 2. − P. 47−49.
6. Варданян А. В. Профилактика и лечение заболеваний копытец у коров : автореф. дис. д-ра вет наук : 16.00.05 / А. В. Варданян. Ереван, 1998. 36 с.
7. Кутлукаев И. И. Лечение гнойно-некротических заболеваний пальцев крупного рогатого скота / И. И. Кутлукаев, М. Ш. Шакуров, И. Г. Галимзянов // Ветеринарный врач. 2003. − № 3. − С. 35−38.
8. Молоканов В. А. Болезни копытец сельскохозяйственных животных / В. А. Молоканов, Б. С. Семенов, К. М. Камсаев. Челябинск : ЗАО «Конус», 2003. 170 с.
9. Борисевич В. Б. Ветеринарна ортопедія: хвороби копит і копитець / В. Б. Борисевич, Б В. Борисевич, О. Ф. Петренко, Н. М. Хомін − К. : ДІА, 2007. 136 с.
10. Панько І. С. Гнійно-некротичні хвороби пальців у високопродуктивних корів / І. С. Панько, М. В. Петрик. К. : Бібліотека ветеринарної медицини. 2007. 64 с.