СТАН МІКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА ПУХЛИН ПІД ВПЛИВОМ ФІТОПРЕПАРАТУ ГА-40 (експериментальне дослідження) : СОСТОЯНИЕ микроциркуляторного русла ОПУХОЛЕЙ ПОД ВЛИЯНИЕМ фитопрепараты ГА-40 (экспериментальное исследование)

Краткое описание

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ
ВІННИЦЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ
УНІВЕРСИТЕТ ім. М.І. ПИРОГОВА

На правах рукопису

ЛИСЕНКО СЕРГІЙ АНДРІЙОВИЧ

УДК: 616.13:616-006:615.015.001.5

СТАН МІКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА ПУХЛИН ПІД ВПЛИВОМ ФІТОПРЕПАРАТУ ГА-40 (експериментальне дослідження)

14.01.07 онкологія

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата
медичних наук

Наукові керівники: - доктор медичних наук, професор Болюх
Борис Афанасійович;
- доктор медичних наук, професор Галахін
Костянтин Олександрович

Вінниця - 2009

ЗМІСТ

Вступ . 4
Розділ 1. Мікроциркуляторне русло в пухлинах (огляд літератури) 9
1.1. Особливості мікроциркуляції та ангіогенезу в злоякісних пухлинах .... 9
1.2. Значення впливу на мікроциркуляторне русло та ангіогенез в прогнозі і лікуванні злоякісних новоутворень .......... 25
1.3. Відомості про застосування фітопрепарату ГА-40 . 35
Розділ 2. Матеріал та методи дослідження .......... 39
2.1. Дослідження мікроциркуляторного русла на моделі карциноми Герена .. 39
2.2. Дослідження мікроциркуляторного русла на моделях карциноми легені Л’юїс та меланоми B-16..... 43
2.3. Статистична обробка отриманих результатів ............. 46
Розділ 3. Результати власних досліджень ........ 53
3.1. Стан мікроциркуляторного русла карциноми Герена без будь-якого впливу ...... 53
3.2. Стан мікроциркуляторного русла карциноми Герена під впливом фітопрепарату ГА-40.. 69
3.3. Стан інтратуморальної мікроциркуляції в карциномі Герена при застосуванні циклофосфаміду .. 82
3.4. Стан мікроциркуляції карциноми Герена під впливом опромінення ... 97
3.5. Стан мікроциркуляторного русла карциноми легені Л’юїс та особливості її метастазування під впливом фітопрепарату ГА-40 . 110
3.6. Стан мікроциркуляторного русла меланоми В16 та особливості її метастазування при застосуванні фітопрепарату ГА-40 ...... 116
Розділ 4. Аналіз та обговорення результатів дослідження .. 123
Висновки ... 129
Список використаних джерел ..... 131
Додатки ..... 150

ПЕРЕЛІК УМОВНИХ ПОЗНАЧЕНЬ, СИМВОЛІВ, СКОРОЧЕНЬ І ТЕРМІНІВ

ЕК ендотеліальні клітини
МКАТ моноклональне антитіло
ПАТ протипухлинна антиангіогенна терапія
EGF - епідермальний фактор росту
FGF - фактор росту фібробластів
IL-1 інтерлейкін 1
KDR (або Flk-1) рецептор VEGF типу 2
ММP матриксна металопротеїназа
NF-kB транскрипційний нуклеарний фактор
TNF-α фактор некрозу пухлини α
VEGF фактор росту судинного ендотелію

ВСТУП

Актуальність теми. В останнє десятиріччя проблема мікроциркуляції пухлини набула особливої актуальності. Відомо, що зміни ступеня васкуляризації органа або тканини є передумовою у виникненні різноманітних захворювань: недостатня васкуляризація сприяє розвитку серцево-судинної патології, безпліддя, виразок, ішемії головного мозку, а надмірна щільність мікросудин - ревматоїдного артриту, сліпоти, псоріазу та злоякісних новоутворень [1].
Особлива увага в онкології приділяється проблемі пухлинного ангіогенезу, обов’язкової ланки патогенезу злоякісних пухлин [2, 3, 4]. Вивчення ангіогенезу не тільки дає додаткову інформацію для з’ясування механізмів пухлинного росту і метастазування, але і відкриває перспективи в прогнозі та лікуванні хворих на злоякісні новоутворення [5, 6, 7, 8]. До новітніх напрямків у лікуванні цих хворих відноситься, зокрема, протипухлинна антиангіогенна терапія, а спрямованість такого лікування на пригнічення ангіогенезу в пухлині - це нова стратегія в терапії хворих на рак [9, 10, 11].
В сучасній онкології особливо актуальним є пошук та дослідження впливу нових лікарських засобів як на пухлинний ангіогенез та його основні показники, так і на стан мікроциркуляторного русла злоякісних новоутворень та метастазів. Одним із таких препаратів є фітопрепарат ГА-40, який відноситься до антинеопластичних та імуномодулюючих засобів. В його склад входить комплекс поліпептидів рослинного походження, виділених із екстракту Купени кільчастої (Polgonatum varticillatum). Доведено, що лікарський засіб ГА-40 по відношенню до злоякісних клітин проявляє цитостатичну активність. Так, поліпептиди фітопрепарату ГА-40 взаємодіють з поверхневими рецепторами пухлинних клітин, зокрема лектиновими рецепторами, Т-клітинним рецептором, та ініціюють апоптоз. На відміну від хіміопрепаратів, ГА-40 не ушкоджує нормальні клітини організму і не має шкідливої дії на органи і тканини, що підтверджено експериментальними дослідженнями [12, 13].
З 2007 р. фітопрепарат ГА-40 дозволений для медичного застосування в нашій країні наказом МОЗ України №263 і Державним фармакологічним центром МОЗ України. Він використовується в складі комплексної терапії хворих на злоякісні новоутворення, а саме різних видів карцином, гострого мієлобластного і мегакаріобластного лейкозів, меланоми шкіри [14].
Незважаючи на велику кількість робіт, присв’ячених ангіогенезу, існують протилежні думки про його роль в клінічному перебігу, метастазуванні і прогнозі пухлинного процесу, хоча більшість авторів стверджують, що критеріями агресивності злоякісного росту і несприятливого прогнозу захворювання є саме ангіогенез та його показники (висока щільність судин у пухлинах, підвищення у сироватці крові рівня фактора росту судинного ендотелію (VEGF)) [2, 10, 15]. Наявність таких оцінок щодо ролі ангіогенезу у процесі пухлинного росту свідчить про необхідність подальшого вивчення механізмів неоваскуляризації та особливостей мікроциркуляторного русла пухлин, особливо під впливом нових лікарських засобів, зокрема фітопрепарату ГА-40.
Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дослідження за темою дисертації проведено в рамках планової науково-дослідної роботи кафедри променевої діагностики, променевої терапії та онкології Вінницького національного медичного університету ім. М.І. Пирогова на тему «Клініко-морфологічні аспекти діагностики, лікування та реабілітації хворих на злоякісні новоутворення» (№ держреєстрації 0104U002842, 2004-2010 рр).
Мета дослідження - визначити особливості мікроциркуляторного русла злоякісних новоутворень та їх метастазів при застосуванні фітопрепарату ГА-40 на моделях експериментальних пухлин.

Завдання дослідження:
1. Вивчити структурні зміни мікроциркуляторного русла карциноми Герена при застосуванні фітопрепарату ГА-40.
2. Провести порівняльний аналіз впливу фітопрепарату ГА-40 та циклофосфаміду і опромінення на мікроциркуляторне русло карциноми Герена.
3. Визначити особливості мікроциркуляторного русла карциноми легені Л’юїс при застосуванні фітопрепарату ГА-40 та його вплив на ріст пухлини і метастазування.
4. Визначити стан мікроциркуляторного русла меланоми В16 та особливості її метастазування під впливом фітопрепарату ГА-40.
5. Встановити зміни рівня VEGF в сироватці крові експериментальних тварин з пухлинами при застосуванні фітопрепарату ГА-40.
Об’єкт дослідження: експериментальні моделі пухлин (карцинома Герена, карцинома легені Л’юїс, меланома В16).
Предмет дослідження: інтратуморальне мікроциркуляторне русло первинних пухлин та їх метастазів.
Методи дослідження: методи експериментальної онкології для оцінки росту злоякісних пухлин та їх метастазів; імуноферментний для визначення рівня VEGF в сироватці крові експериментальних тварин з пухлинами; морфологічні - з використанням світлової та електронної мікроскопії для вивчення структурних особливостей мікроциркуляторного русла пухлин та їх метастазів; морфометричні - для визначення кількісних показників пухлинного ангіогенезу; статистичні із застосуванням математичних моделей багатомірного аналізу для обробки та аналізу отриманих даних.
Наукова новизна одержаних результатів. Встановлені антиваскулярні та антиангіогенні властивості фітопрепарату ГА-40 на основі вивчення стану мікроциркуляторного русла в експериментальних дослідженнях на трьох моделях пухлинного росту: карциномі Герена, карциномі легені Л’юїс та меланомі В16.
Виявлено гістологічні та ультраструктурні зміни судин карциноми Герена, які свідчать про гальмуючий вплив фітопрепарату ГА-40 на її мікроциркуляторне русло, що підтверджується зменшенням на 28 добу експерименту дольового вмісту в пухлині мікросудин та середньої площі судин у порівнянні з контрольною групою.
З’ясовано, що фітопрепарат ГА-40 проявляє інгібуючий вплив на неоваскуляризацію та метастазування у тварин з карциномою легені Л’юїс та меланомою В16. При цьому зменшується і об’єм первинної пухлини, і загальна кількість метастазів, і об’єм метастатичного ураження легень у порівнянні з контрольною групою тварин. Доведено, що застосування ГА-40 у тварин з карциномою легені Л’юїс та меланомою В16 призводить до одночасного зниження рівня VEGF в сироватці крові та збільшення кількості аваскулярних метастазів.
Практичне значення одержаних результатів. Застосування фітопрепарату ГА-40 на моделях експериментальних пухлин (карцинома Герена, карцинома легені Л’юїс, меланома В16) супроводжується як розвитком альтеративних змін в судинах мікроциркуляторного русла, так і гальмуванням процесів ангіогенезу в первинних пухлинах і їх метастазах. Виявлені властивості дозволяють рекомендувати застосування фітопрепарату ГА-40 в комплексному лікуванні хворих на злоякісні пухлини. На підставі результатів власних експериментальних досліджень визначено новий вектор фармакологічної дії цього препарату пригнічення неоангіогенезу з гальмуванням пухлинного росту. Розпочата клінічна апробація ГА-40 у хворих з первинною меланомою шкіри в Національному інституті раку (м. Київ).
Отримані дані використовуються в навчальних програмах з онкології, гістології, нормальної та патологічної анатомії для студентів та лікарів-інтернів Вінницького національного медичного університету ім. М.І. Пирогова.
Особистий внесок здобувача. Дисертантом визначена мета та завдання даного дослідження, проаналізована наукова література з обраної теми. Здобувачем здійснено планування та виконання експериментів на щурах з пухлиною Герена, мишах з карциномою легені Л’юїс та меланомою В16. Також автором самостійно проведено аналіз первинної документації експериментів, статистична обробка результатів та їх інтерпретація. Дисертантом особисто сформульовані висновки та положення, підготовлений ілюстративний матеріал. У наукових розробках, що висвітлені в статтях, опублікованих сумісно з співавторами, участь здобувача полягала в проведенні експериментальних досліджень, статистичній обробці отриманих даних, формулюванні висновків та підготовці публікацій до друку.
Апробація результатів дисертації. Основні положення дисертації доповідались та обговорювались на: конференції молодих вчених та фахівців ВНМУ ім. М.І. Пирогова (Вінниця, 2002 р.); VI Міжнародному медичному конгресі студентів та молодих учених (Тернопіль, 2002 р.); III зїзді онкологів СНГ (Мінськ, 2004 р.); засіданні Вінницького обласного наукового товариства онкологів (Вінниця, 2005 р.); VII та IX Міжнародних конференціях молодих онкологів Сучасні проблеми експериментальної і клінічної онкології” (Київ, 2006 р., 2008 р.); XI з’їзді онкологів України (Судак, АР Крим, 2006 р.); науково-практичній конференції молодих вчених Медична наука: сучасні досягнення та інновації” (Харків, 2007 р.), VIII Міжнародному конгресі патологів України Сучасні проблеми патологічної анатомії” (Полтава, 2008 р.).
Публікації. Основний зміст дисертаційної роботи викладений у 10 публікаціях, в тому числі у 5 статтях у фахових журналах, рекомендованих ВАК України, а також 5 тезах вітчизняних та міжнародних конференцій, конгресів та з’їздів.

Список литературы

ВИСНОВКИ

В дисертаційному дослідженні на експериментальних пухлинах (карцинома Герена, карцинома легені Л’юїс, меланома В16) встановлені антиваскулярні та антиангіогенні властивості фітопрепарату ГА-40, який виявляє протипухлинну дію.
1. Застосування фітопрепарату ГА-40 гальмує розвиток в карциномі Герена мікроциркуляторного русла, про що свідчить зменшення на 28 добу експерименту питомої ваги судинного русла у порівнянні з контрольною групою з 0,142 до 0,105 (р<0,001), тобто на 26%, та середньої площі судин з 3151,86 мкм² до 2485,9 мкм² (р<0,001), тобто на 21%. Ступінь інтратуморальної щільності судин з 12 по 28 добу експерименту під впливом фітопрепарату ГА-40 у порівнянні з аналогічними термінами в групі контролю зменшується у 2,73 рази.
2. Структурні зміни судин мікроциркуляторного русла карциноми Герена у тварин при застосуванні фітопрепарату ГА-40 у порівнянні з контрольною групою характеризуються суттєвими морфологічними змінами ендотеліоцитів судин, розвитком в них виражених альтеративних змін, які супроводжуються некрозами паренхіми пухлини та склерозом як в стінках судин, так і в самій пухлині.
3. Порівняльний аналіз впливу фітопрепарату ГА-40 та циклофосфаміду і опромінення на мікроциркуляторне русло карциноми Герена виявив тотальне домінування склеротичних явищ і колагенізацію стінок судин при застосуванні цитостатика та дегенеративні зміни судинного русла під впливом опромінення.
4. Застосування фітопрепарату ГА-40 призводить до розвитку деструктивних змін в судинах мікроциркуляторного русла карциноми легені Л’юїс, пригнічення пухлинного росту та метастазування. При цьому об’єм первинної пухлини зменшується з 1818,1±65,4 мм³ у контрольній групі до 1104,0±94,4 мм³ (р<0,01), тобто на 39%, а загальна кількість метастазів аналогічно з 32,2±4,3 до 21,2±2,9 (р<0,05), тобто на 34%. Об’єм метастатичного ураження легень під впливом ГА-40 на відміну від тварин контрольної групи зменшується у 2,37 рази.
5. При застосуванні фітопрепарату ГА-40 у тварин з меланомою В16 відбувається редукція мікроциркуляторного русла внаслідок розвитку індукованого тромбозу, що призводить до достовірного зменшення об’єму пухлини з 1671,9±141,8 мм³ у контрольній групі до 1043,4±150,3 мм³ (р<0,01), тобто на 38%, об’єму метастатичного ураження легень з 9,21±1,61 мм³ до 5,27±0,92 мм³ (р<0,05), тобто на 43% та загальної кількості метастазів з 31,4±3,3 у контрольній групі до 23,4±2,3 (р<0,05), тобто на 25%.
6. Кількість аваскулярних метастазів в легенях під впливом препарату ГА-40 при карциномі легені Л’юїс в експериментальній групі тварин збільшується у порівнянні з контрольною з 67,7±4,3% до 84,3±6,8% (р<0,05), тобто на 25%, аналогічно при меланомі В16 - з 60,66±7,84% до 89,32±9,45% (р<0,05), тобто на 47%.
7. Рівень VEGF в сироватці крові тварин з карциномою легені Л’юїс при застосуванні фітопрепарату ГА-40 достовірно знижується з 152,9±10,1 пг/мл у контрольній групі до 123,2±8,8 пг/мл (р<0,05), тобто на 19,4%, а при меланомі В16 аналогічно з 132,1±8,7 пг/мл до 103,2±10,6 пг/мл, тобто на 21,9%.

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ

1. Фільченков О. О. Апоптоз і рак: від теорії до практики / О. О. Фільченков, Р. С. Стойка. - Тернопіль: ТДМУ, 2006. - 524 с.
2. Молекулярная диагностика опухолей: фундаментальные основы и практическое применение / [С. П. Осинский, Д. Ф. Глузман, Й. Клифф и др.]. К.: ДІА”, 2007. 248 с.
3. Ангіогенез вирішальний фактор оцінки перебігу злоякісного пухлинного процесу : матеріали ХI з’їзду онкологів України, 29 трав. - 2 черв. 2006 р., АР Крим. К. : АМН України, Ін-т онкології, 2006. С. 251.
4. Folkman J. The vasculorization of tumors / J. Folkman // Sci. Am. - 1976. - V. 234. - P. 58-73.
5. Weidner N. Tumor angiogenesis correlates with metastasis in invasive prostate carcinoma / N.Weidner, P. R. Carrol // Am. J. Pathol. - 1993. - V. 143. - P. 401-409.
6. Weidner N. Intratumor microvessels density as a prognostic factor in cancer / N. Weidner // Am. J. Pathol. - 1995. - V. 147. - P. 9-19.
7. Лісняк І. О. Неоваскуляризація і пухлинний ріст : автореф. дис. на здобуття наук. ступеня доктора біол. наук : спец. 14.01.07 Онкологія” / І. О. Лісняк. - К., 2004. 38 с.
8. Initial stage of tumor induced angiogenesis: evaluation via skin window chambers in rodent models / C. Y. Li, S. Shan, Q. Huang [et al.] // J. Nat. Cancer Inst. - 2000. V. 92. P. 143-147.
9. Jones A. New development in angiogenesis: a major mechanism for tumor growth and target for therapy / A. Jones, A. L. Harris // Cancer J. Sci. Am. 1998. - V. 4, №4. - P. 209-229.
10. Новак О. Є. Ангіогенез у розвитку злоякісних пухлин: теоретичні і практичні аспекти / О. Є. Новак, І. О. Лісняк, В. Ф. Чехун // Онкологія. 2002. Т. 4. С. 244-251.
11. Соляник Г. И. Противоопухолевая антиангиогенная терапия: принципы, проблемы, перспективы / Г. И. Соляник // Онкология. - 2006. - Т. 8, №2. - С. 206-208.
12. Дікал М. В. Роль препарату GA-40 в корекції тубуло-інтерстиційного синдрому при хронічному нефриті Мазугі / М. В. Дікал, Ю. Є. Роговий // Клінічна анатомія та оперативна хірургія. 2006. Т. 5, № 3. С. 14-16.
13. Дікал М. В. Механізми розвитку тубуло-інтерстиційного синдрому при хронічному нефриті Мазугі (експериментальне дослідження): автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук : спец. 14.03.04 Патологічна фізіологія” / М. В. Дікал. - К., 2008. 19 с.
14. Галахін К. О. Новий неоад’ювант (ГА-40) в комплексном лечении больных меланомой кожи / К. О. Галахін, В. Ф. Коноваленко, Т. В. Гордієнко // Патологія. 2008. Т.5, №1. С. 28-33.
15. Folkman J. Role of angiogenesis in tumor growth and metastasis / J. Folkman // Semin. Oncol. 2002. V. 29 (6 Suppl. 16). P. 15-18.
16. Оцінка патоморфологічних змін та неоваскуляризації в рецидивних карциномах прямої кишки / С. О. Шалімов, Б. В. Сорокін, К. О. Галахін [та ін.] // Доп. НАН України. 2005. - № 9. С. 196-202.
17. Петрищев Н. Н. Дисфункция эндотелия микрососудов как фактор метастазирования / Н. Н. Петрищев, Н. В. Дубина // Вопр. Онкологии. 1999. T. 45. C. 484-492.
18. Фильченков А. А. Апоптоз и рак / А. А. Фильченков, Р. С. Стойка. - К.: Морион, 1999. 189 с.
19. Prolongal tumor dormancy by prevention of neovascularization in the vitrous / S. Brem, H. Brem, J. Folkman [et al.] // Cancer Res. - 1976. - V. 36. - P. 2907-2912.
20. Механизм неоваскулогенеза и его регуляции во взрослом организме / О. Ю. Гурина, В. В. Куприянов, А. А. Миронов [та ін.] // Арх. анат. - 1985. - Т. 88, №1. - С. 9-21.
21. Rofstad E. K. Growth and vascular structure of human melanoma xenograttis / E. K. Rofstad // Cell Tissue Kine. - 1984. - V. 17. - P. 91-101.
22. Genistein reduced tumor necrosis factor alpha-induced plasminogen activator inhibitor-1 transcription but not urokinase expression in human endothelial cells / V. W. Van-Hinsbergh, M. Vermeer, P. Koolwijk [et al.] // Blood. - 1994. - V. 84, №.9. - P. 2984-2991.
23. Denecamp J. Angiogenesis / J. Denecamp // Progr. appl. Microcirc. - 1984. - V. 18. - P. 28-38.
24. Ангиогенез / [Куприянов В. В., Миронов А. А., Миронов В. А., Гурина О. Ю.]. - М.: НИО ”Квартет”, 1993. - 170 с.
25. Growth inhibition of human endot helial cells by human recombinant tumor necrosis factor alpha and interferon-gamma / T. Mauerhoff, A. Belfiore, R. Pujol-Borrell [et al.] // Tumori. - 1994. - V. 80, №.4. - P. 301-305.
26. FGF 1 affixation stimulates ePTFE endothelization without intimal hyperplasia / J. L. Gray, S. S. Kang, G. C. Zenni [et al.] // J. Surg. Res. - 1994. - V. 57, № 5. - P. 596-612.
27. Thompson W. D. Tumors acquire their vascilature by vessel incorporation, not vessel in growth / W. D. Thompson, K. J. Shiach, R. A. Fraser // J. Pathol. - 1987. - V. 151. - P. 323.
28. Paku S. First steps of tumor-related angiogenesis / S. Paku, N. Paweletz // Lab. Invest. - 1991. - V. 65. - P. 334-346.
29. Yamagami I. Electron microscopic study on the cornea / I. Yamagami // Jpn. J. Ophthalmol. 1970. - V. 14. - P. 41.
30. Fibrin contaning gels induce angiogenesis. Implications for tumor stroma generation and woud healing / H. F. Dvorak, V. S. Harvey, L. F. Broun [et al.] // Lab. Invest. - 1987. - V. 57. - P. 673.
31. Wakui S. Two and three dimensional ultrastructural observation of two cell type angiogenesis in human granulation tissue / S. Wakui // Virchov Arch. B. Cell Pathol. - 1988. - V. 56. - P. 127.
32. Involvement of platelets in tumor angiogenesis? / H. M. Pinedo, H. M. V. Verheul, R. J. D Amato [et al.] // Lancet. 1998. V. 352. P. 1775-1777.
33. Stehelin D. Similitudes entre les mechanisms de neoangiogenese et de invasion tumorales / D. Stehelin // C. R. Stances Soc. Biol. 1998. V. 192. P. 217-222.
34. Влияние эпиталона на кинетику роста и функциональную морфологию саркомы М-1 / В. Х. Хавинсон, В. В. Южаков, И. М. Кветной [та ін.] // Вопр. онкологии. 2001. Т. 47. С. 461-466.
35. Neovascularization in clinical stage A testicular germ cell tumor: prediction of metastatic disease / D. Olivares, T. Ulbright, W. DeRiese [et al.] // Cancer Res. - 1994. V. 54. P. 2800-2802.
36. Induction of chemotactic cytokines by minimally oxidized LDL / J. A. Berliner, D. S. Schwartz, M. C. Territo [et al.] // Adv. Exp. Med. Biol. - 1993. - V. 351. - P. 13-18.
37. Фомина Л. В. Клеточные взаимодействия в ангиогенезе человека: автореф. дисс. на соискание учен. степени доктора мед. наук : спец. 14.00.02 Анатомия человека”, 14.00.23 Гистология, цитология, эмбриология”/ Л. В. Фомина. - М., 2000. 40 с.
38. Migration and proliferation of endothelial cells in preformed and newly formed blood vessels during tumor angiogenesis / D. H. Ausprunk, J. Folkman // Microvasc. Res. - 1977. - V. 14. - P. 53-65.
39. Cliff W. Observations on healing tissue: combined light and electron-microscopic investigation / W. Cliff // Phil. Trans. Soc. - 1963. - V. 246. - P. 305-325.
40. Schoels G. Studies of inflammation. III. Growing capillaries: their structure and permeability / G. Schoels // Virch. Arch. Path. Anat. - 1963. - V. 337. - P. 97-141.
41. Kuzuya M. Reorganization of endothelial cord-like structures on basement membrane complex (Matrgel): involvement of transforming growth factor beta 1 / M. Kuzuya, J. L. Kinsella // J. Cell Physiol. - 1994. - V. 161, №2. - P. 267-76.
42. Smith C.W. Transendothelial migration / C. W. Smith // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 1993. - V. 184. - P. 201-212.
43. Cytocine activation of human macro- and microvessel-derived endothelial cells / M. E. Gerritsen, M. J. Niedbala, A. Szczepanski [et al.] // Blood Cells. - 1993. - V. 19, №2. - P. 325-339.
44. Сосудистый эндотелий / [Алимов Г. А., Банин В. В., Бобрик И. И. и др.]. К.: Здоров’я, 1986. - 244 с.
45. Platelet adhesion to fibronectin in flow: dependence on surface concentration and shear rate, role of platelet membrane glycoproteins GP IIb/IIIa and VLA-5, and inhibition by heparin / S. Beumer, M. J. Isseldijk, P. G. de-Groot [et al.] // Blood. - 1994. - V. 84, №11. - P. 3724-3733.
46. Electron microscopic observation of pseudopodia from choriocapillary endothelium / T. Yamamoto, S. Fukuda, H. Obata [et al.] // Jpn. J. Ophthalmol. - 1994. - V. 38, №2. - P. 129-138.
47. Zywietz F. Ultrastructural studies on tumour capillaries of a rat rhabdomyosarcoma during fractionated radiotherapy / F. Zywietz, L. S. Hahn, W. Lierse // Acta Anat.-Basel. - 1994. - V. 150, №1. - P. 80-85.
48. Paweletz N. Tumor-related angiogenesis / N. Paweletz, M. Knierim // Crit. Rew. Oncol. Hematol. - 1989. - V. 9. - P. 197.
49. Leek R. D. Association of macrophage infiltration with angiogenesis and prognosis in invasive breast carcinoma / R. D. Leek, C. E. Lewis, R. Wtitehouse // Cancer Res. - 1996. - V. 56. - P. 4625-4629.
50. Serum vascular endothelial growth factor is a predictor of invasion and metastasis in hepatocellular carcinoma / X-M. Li, Z-Y. Tang, L-Z. Qin [et al.] // J. Exp. Cancer Res. - 1999. V. 18. - P. 511-517.
51. Carmeliet P. Angiogenesis in cancer and other diseases / P. Carmeliet, R. K. Jain // Nature. 2000. V. 407. P/ 249-257.
52. Imojama S. Deposition of basic fibroblast growth factor on surface of epidermal melanocytes suggesting the stromal control of epidermal pigmentation / S. Imojama, M. Furumura, Y. Hori // Pigment. Cell. Res. - 1994. - V. 7, №3. - P. 170-174.
53. Effect of tumor angiogenesis on proliferation of endothelial cell and tube formation / I. Ishiwata, C. Ishiwata, M. Soma [et al.] // Virh. Arch. Pathol. Anat. - 1990. - V. 417. - P. 473-476.
54. Vascular permeability factor (VPF, VEGF) in tumor biology / D. R. Senger, S. Van-de-Water, L. B. Brown [et al.] // Cancer. Metastasis. Rev. - 1993. - V. 12, №3-4. - P. 303-324.
55. Vascular permeability factor/ vascular endothelial cell growth factor-mediated permeability occurs through disorganization of endothelial junction proteins / C. G. Kevil, D. K. Payne, E. Mire [et al.] // J. Biol. Chem. 1998. V. 273. P. 15099-15103.
56. Angiogenesis in breast cancer. Regulation, prognostic aspects and implications for novel treatment strategies / E. R. Horak, A. L. Harris, N. Stuart [et al.] // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1993. - V. 30. - P. 71-84.
57. Vascular endothelial growth factor increases urokinase receptor expression in vascular endothelial cells / S. J. Mandriota, G. Seghezzi, J. D. Vassalli [et al.] // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 9709-9716.
58. Vascular endothelial growth factor inhibits endothelial cell apoptosis induced by tumor necrosis factor-alpha: balance between growth and death signals / I. Spyridopoulos, E. Brogi, M. Kearney [et al.] // J. Mol. Cell. Cardiol. 1997. V. 29. P. 1321-1330.
59. Distinct roles of the receptor tyrosine kinases Tie-1 and Tie-2 in blood vessel formation / T. N. Sato, Y. Tozawa, U. Deutsch [et al.] // Nature. 1995. V. 376. P. 70-74.
60. Risau W. Vasculogenesis, angiogenesis and endothelial cell differentiation during embryonic development / W. Risau // Issues Biomed. Basel. - 1991. - V. 14. - P. 58-68.
61. Liotta L. A. Cancer metastasis and angigenesis: an imbalance of positive and negative regulation / L. A. Liotta, P. S. Steeg, W. G. Stetler-Stevenson // Cell. - 1991. - V. 64. - P. 327-336.
62. Tumor angiogenic activity of gynecologic tumor cells lines on the chorioallantoic membrane / I. Ishiwata, S. Ishiwata, M. Soma [et al.] // Gynecol. Oncol. - 1988. - V. 29. - P. 87-93.
63. Серов В. В. Соединительная ткань / В. В. Серов, А. Б. Шехтер. - М.: Медицина, 1981. 312 с.
64. Васильев Ю. М. Соединительная ткань и опухолевый рост в эксперименте / Ю. М. Васильев. - М.: Медгиз, 1961. - 139 с.
65. Lo S. K. E-selectin ligands mediate tumor necrosis factor-induced neutrophil seque stration and pulmonary edema in guinea pig lungs / S. K. Lo, B. Bevilacqua, A. B . Malik // Circ. Res. - 1994. - V. 75, №6. - P. 330-338
66. Fontana A. Interleikin 1 / A. Fontana, S. Bodmer, H. Frei // Schweiz. Med. Wohenschr. - 1985. - V.87. - P. 1424-1428.
67. Plate K. H. Molecular mechanisms of developmental and tumor angiogenesis / K. H. Plate, G. Breier, W. Risau // Brain. Pathol. - 1994. - V. 4, №3. - P. 207-218.
68. Interaction of interleukin-1 and interferon-gamma on fibroblast growth factor-induced angiogenesis / K. Norioka, T. Mitaka, Y. Mochizuki [et al.] // Jpn. J. Cancer Res. - 1994. - V. 85, №5. - P. 522-529.
69. McLennan I. S. Localisation of transforming growth factor beta 1 in developing muscles: implications for connective tissue and fiber type pattern formation / I. S. McLennan // Dev. Dyn. - 1993. - V. 197, №4. - P. 281-290.
70. Grau G. TNF in vascular pathology: the importance of platelet-endothelium interactions / G. Grau, J. Lou // Res. Immunol. - 1993. - V. 203, №5. - P. 355-363.
71. Characterization of tumor necrosis factor alpha-induced alteration of glycosaminoglycans in cultured cells: comparison among vascular smooth-muscle cells, vascular endothelial cells, Chang liver cells and LLC-PK1 cells / T. Kaji, S. Hiraga, C. Yamamoto [еt al.] // Biol. Pharm. Bull. - 1993. - V. 16. - P. 834-839.
72. Bussolino F. Murine endothelioma celllinestransformed by polyoma middle T oncogene as target for and produced of cytokines / F. Bussolino, M. De Rossi, A. Sica // J. Immunol. - 1991. - V.147. - P. 2122-2129.
73. Interleukin 1 promotes tumor cell adhesion to cultured human endothelial cells / E. F. Dejana, M. C. Bertochi, A. Bortolami [еt al.] // Science. - 1988. - V. 246. - P. 1303.
74. Tissue factor controls the balance of angiogenic and antiangiogenic properties of tumour cells in mice / Y. Zhang, Y. Deng, T. Luther [et al.] // J. Clin. Invest. - 1994. V. 92. - P.1320-1327.
75. Tissue factor expression during human and mouse development / T. Luther, C. Flossel, N. Mackman [et al.] // Am. J. Pathol. - 1996. - V. 149. - P. 101-113.
76. Auerbach R. Angiogenesis-induction by tumors embryonic tissue and lymphocytes / R. Auerbach, L. Kibai, Y. Sidky // Cancer Res. - 1976. - V. 36. - P. 3435.
77. Sidky Y. A. Lymphocyte-induces angiogenesis. A quatitative and sensitive assay of the graft host reaction / Y. A. Sidky, R. Auerbach // J. Exp. med. - 1975. - V. 141. - P. 1084-1100.
78. Ribatti D. Lymphocyte-induced angiogenesis: a morphometric study in the chock embryo chorioallantoic membrane / D. Ribatti, M. P. Loria, A. Tursi // Acta Anat. - 1991. - V. 142. - P. 334-338.
79. Carlos Th. M. Leucocyte-endothelial adhesion molecules / Th. M. Carlos, I. M. Harlan // Blood. - 1994. - V. 84. - P. 2068-2101.
80. Springer T. A. Traffic signals on endothelium for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration / T. A. Springer // Ann. Rev. Physiol. 1995. V. 57. P. 827-872.
81. Stewart M. Leucocyte integrins / M. Stewart, M. Thiel, N. Hogg // Curr. Opin. Cell Biol. 1995. - V. 7. - P. 690-696.
82. Endostatin: an endogenous inhibitor of angiogenesis and tumor growth / M. S. O`Reilly, T. Boehm, Y. Shing [et al.] // Cell. 1997. V. 88. P. 277-285.
83. Calreticulin and calreticulin fragments are endothelial cell inhibitors that suppress tumor growth / S. E. Pike, L. Yao, J. Setsuda [et al.] // Blood. 1999. V. 94. P. 2461-2468.
84. Angiostatin: a novel angiogenesis inhibitor that mediates the suppression of metastases by a Lewis lung carcinoma / M. S. O`Reilly, L. Holmgren, Y. Shing [et al.] // Cell. 1994. V. 79. P. 315-328.
85. Multiple forms of angiostatin induce apoptosis in endothelial cells / R. Lucas, L. Holmgren, I. Garcia [et al.] // Blood. 1998. V. 92. P. 4730-4741.
86. Crystal structure of the angiogenesis inhibitor endostatin at 1.5 A resolution / E. Hohenester, T. Sasaki, B. R. Olsen [et al.] // EMBO J. 1998. V. 17. P. 1656-1664.
87. Vasostatin, a calreticulin fragment, inhibits angiogenesis and suppresses tumor growth / S. E. Pike, L. Yao, K. D. Jones [et al.] // J. Exp. Med. 1998. V. 188. P. 2349-2356.
88. Canstatin, a novel matrix-derived inhibitor of angiogenesis and tumor growth / G. D. Kamphaus, P. C. Colorado, D. J. Panka [et al.] // J. Biol. Chem. 2000. V. 275. P. 1209-1215.
89. Interleukin-12 and interleukin-18 synergistically induce murine tumor regression which involves inhibition of angiogenesis / C. M. Coughlin, K. E. Salhany, M. Wysocka [et al.] // J. Clin. Invest. 1998. V. 101. P. 1441-1452.
90. Thrombospondin 1 and type I repeat peptides of thrombospondin 1 specifically induce apoptosis of endothelial cells / N. Guo, H. C. Krutzsch, J. K. Inman [et al.] // Cancer Res. 1997. V. 57. P. 1735-1742.
91. Thrombospondin 1 expression in bladder cancer: association with p53 alterations, tumor angiogenesis and tumor progression / G. D. Grossfeld, D. A. Ginsberg, J. P. Stein [et al.] // J. Natl. Cancer Inst. 1997. V. 89. - P. 219-227.
92. Vascular endothelial growth factor, wild-type p53, and angiogenesis in early operable non-small cell lung cancer / A. Giatromanolaki, M. I. Koukourakis, S. Kakolyris [et al.] // Clin. Cancer Res. 1998. V. 4. - P. 3017-3024.
93. Mechanisms underlying PTEN regulation of vascular endothelial growth factor and angiogenesis / C. Gomez-Manzano, J. Fueyo, H. Jiang [et al.] // Ann. Neurol. 2003. V. 53. P. 109-117.
94. Ras modulates Myc activity to repress thrombospondin 1 expression and increase tumor angiogenesis / R. S.Watnick, Y. N. Cheng, A. Rangarajan [et al.] // Cancer Cell. 2003. V. 3. P. 219-231.
95. Coexpression of hypoxia-inducible factors 1alpha and 2alpha, carbonic anhydrase IX, and vascular endothelial growth factor in nasopharyngeal carcinoma and relationship to survival / E. P. Hui, A. T. Chan, F. Pezzella [et al.] // Clin. Cancer Res. 2002. V. 8. - P. 2595-2604.
96. Clark E.A. Integrins and signal transduction pathways: the road taken / E. A. Clark, J. S. Brugge // Science. 1995. V. 268. P. 233-239.
97. Regulation of the extracellular ligand binding activity of integrins / C. Fernandez, K. Clark, L. Burrows [et al.] // Front. Biosci. 1998. V. 3. P. D684-D700.
98. Vascular endothelial growth factor increases of gelatinase A and decreases release of tissue inhibitor of metalloproteinase’s by microvascular endothelial cells in vitro / W. J. Lamoreaux, M. E. Fitzgerald, A. Reiner [et al.] // Microvasc. Res. 1998. V. 55. P. 29-42.
99. Localization of matrix metalloproteinase MMP-2 to the surface of invasive cells by interaction with integrin alpha v beta 3 / P. S. Brooks, S. Stromblad, L. C. Sanders et al. // Cell. 1996. V. 85. P. 683-693.
100. Overexpression of the focal adhesion kinase (p125FAK) in invasive human tumors / L. V. Owens, L. Xu, R. J. Craven [et al.] // Cancer Res. 1995. V. 55. P. 2752-2755.
101. Сенатова И. Д. Изменения ультраструктуры эндотелия венул под влиянием гистамина / И. Д. Сенатова // Архив патологии. - 1974. - Т. 34, №7. - С. 60-64.
102. Angiogenesis inhibitin and tumor regression caused by heparin or heparin fragment in the presence of cortisone / J. Folkman, R. Langer, R. G. Linhard [et al.] // Science. - 1983. - V. 221. - P. 719-725.
103. Diminished heparin binding of a basic fibroblast growth factor mutant is associated with reduced receptor binding, mitogenesis, plasminogen activator induction and in vitro angiogenesis / L.Y. Li, M. Safran, D. Aviezer [et al.] // Biochemistry. - 1994. - V. 33. - P. 10999-11007.
104. Gulino P.M. Consideration on the mechanisms of the angiogenic reponse / P. M. Gulino // Ant. Cancer Res. - 1986. - V. 6. - P. 153-158.
105. Folkman J. Angiogenic factors / J. Folkman, M. Klagsbrun // Science. - 1987. - V. 235. - P. 442-447.
106. Characterisation and quantification of cooper sulfate-induced vascularisation of the rebbit cornea / J. S. Park, P. Bhattacherjee, R. M. J. Palmer [et al.] // Am. J. Pathol. - 1988. - V. 230. - P. 173-178.
107. Folkman J. Tumor angiogenesis: therapeutic implication / J. Folkman // New Engl. J. Med. - 1971. - V. 285. - P. 1182-1186.
108. Induction of angiogenesis during the transition from hyperplasia to neoplasma / J. Folkman, K. Watson, D. Ingber [et al.] // Nature. - 1989. - V. 339. - P. 58-61.
109. Дрижак В. І. Метастазування злоякісних пухлин та його регуляція / В. І. Дрижак // Вісник наукових досліджень. 2007. Т. 46, №1 - С. 98-100.
110. Liotta L. A. Quantitative relationship of intravascilar tumor cell, tumor vessels and pulmonary metastases following tumor implantation / L. A. Liotta, J. Kleqnerman, G. Saidel // Cancer Res. - 1974. - V. 34. - P. 997-1007.
111. Abnormalities in pericytes on blood vessels and endothelial sprouts in tumors / S. Morikawa, P. Baluk, T. Kaidoh [et al.] // Am. J. Pathol. - 2002. - V. 160. - P. 985-1000.
112. Hynes R. O. Integrins: a family of cells surface receptors / R. O. Hynes // Cell. - 1987. - V.48. - P. 549-554.
113. Kerbel R. S. Growth dominence of the metastatic cancer cell: cellular and molecular aspect / R. S. Kerbel // Adv. Cancer Res. - 1990. V. 55. - P. 87-131.
114. Tumor angiogenesis as a prognostic factor in ovarian carcinoma: quantification of endothelial immunoreactivity by image analysis / W. M. Schoell, D. Fieber, O. Reich [et al.] // Cancer. 1997. V. 80. P. 2257-2262.
115. Salvesen H. B. Prognostic significance of angiogenesis and Ki-67, p53 and p21 expression: a population based endometrial carcinoma study / H. B. Salvesen, O. E. Iversen, L. A. Akslen // J. Clin. Oncol. 1999. V. 17. P. 1382-1390.
116. Сосуды стромы инвазивного протокового рака молочной железы / Н. Н. Волченко, Л. Э. Завалишина, А. Н. Петров [та ін.] // Арх. Патологии. 1999. T. 61. C. 35-38.
117. Vermeulen P. B. Quantification of angiogenesis in solid human tumors: an international consensus on the methodology and criteria evaluation / P. B.Vermeulen, G. Gasparini, S. B. Fox // Eur. J. Cancer. 1996. V. 32A. P. 2472-2484.
118. An immunohistochimical study of the vascularization of well differentiated thyroid tumours / N. A. Wong, J. Willoats, M. J. Kendall [et al.] // J. Pathol. 1997. V. 182. P. 43.
119. Angiogenesis as a prognostic indicator in cervical intraepithelial neoplasia / S. P. Dobbs, I. R. Johnson, P. Hewett [et al.] // Eur. J. Gynecol. Oncol. 1997. - V. 18. P. 220.
120. Angiogenesis in vulvar intraepithelial neoplasia (VIN) and in vulvar cancer / D. Bancher-Todesca, A. Obermair, S. Bilgi [et al.] // Eur. J. Gynecol. Oncol. - 1997. V. 18. P. 224.
121. Angiogenesis: prognostic significance in laryngeal cancer / F. Beatrice, R. Cammarota, C. Giordano [et al.] // Anticancer Res. - 1998. V. 18. - P. 4737-4740.
122. Preoperative serum E-cadherin assay in patients with ovarian carcinoma / A. Gadducci, M. Ferdeghini, S. Cosio [et al.] // Anticancer Res. - 1999. V. 19. - P. 769-772.
123. Evaluation of tumour angiogenesis as a prognostic marker in malignant mesothelioma / K. Kumar-Singh, P. B. Vermeulen, J. Weyler [et al.] // J. Pathol. 1997. V. 182. P. 211-216.
124. Proliferation index and vascular density of giant cell tumours of bone: are the prognostic markers? / M. A. Sulh, V. F. Greco, T. Jiang [et al.] // Cancer. - 1996. V. 77. P. 2044-2051.
125. Bloemendal H. J. New strategies in antivascular cancer therapy / H. J. Bloemendal, T. Logtenberg, E. E. Voest // Eur. J. Clin. Invest. 1999. V. 29. P. 802-809.
126. Scappaticci F. Mechanisms and future directions for angiogenesis-based cancer therapies / F. Scappaticci // J. Clin. Oncol. - 2002. V. 20. - P. 3906-3927.
127. Кушлинский Н. Е. Роль фактора роста эндотелия сосудов при раке молочной железы / Н. Е. Кушлинский, Е. С. Герштейн // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2002. - Т. 133. - С. 604-612.
128. Dutour A. Tumor endothelial cells are targets for selective therapies: in vitro and in vivo models to evaluate