Влияние in vitro пептидогликанов и липополисахаридов на секреторную, метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и моноцитов периферической крови : Вплив in vitro пептидогліканів та ліпополісахаридів на секреторну, метаболічну активність та апоптоз нейтрофілів і моноцитів периферійної крові

Краткое описание

Министерство здравоохранения Украины
Луганский государственный медицинский университет

На правах рукописи

Стериони Игорь Валерьевич

УДК 577:612.112.91/.95:576.367

Влияние in vitro пептидогликанов и липополисахаридов на секреторную, метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и моноцитов периферической крови

14.03.04 патологическая физиология

Диссертация на соискание учёной степени кандидата
медицинских наук

Научный руководитель:

Гайдаш Игорь Славович, доктор медицинских наук,
профессор, заслуженный деятель науки и техники Украины

Примірник ідентичний всім існуючим.
Вчений секретар
спеціалізованої вченої ради Д 29.600.02 доц. В.М. Шанько

Луганск-2009

СОДЕРЖАНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ, СОКРАЩЕНИЙ И ТЕРМИНОВ.........3
ВВЕДЕНИЕ......................4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.....9

1.1.

Влияние микроорганизмов на секреторную активность и метаболизм нейтрофилов и моноцитов in vitro...

9

1.2.

Влияние микроорганизмов на апоптоз нейтрофилов и моноцитов in vitro..

24

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ....35

2.1.

Материалы исследования..

35

2.2.

Методы исследования

36

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ И ПЕПТИДОГЛИКАНОВ НА АПОПТОЗ НЕЙТРОФИЛОВ И МОНОЦИТОВ IN VITRO ..41
ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ И ПЕПТИДОГЛИКАНОВ НА СЕКРЕТОРНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ И МОНОЦИТОВ IN VITRO 56
ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ И ПЕПТИДОГЛИКАНОВ НА СИСТЕМУ ЦИКЛИЧЕСКИХ НУКЛЕОТИДОВ НЕЙТРОФИЛОВ И МОНОЦИТОВ IN VITRO 74

5.1.

Влияние на содержание циклических нуклеотидов в общих популяциях нейтрофилов и моноцитов

74

5.2.

Влияние на содержание циклических нуклеотидов в CD95-положительных и CD95-отрицательных нейтрофилах и моноцитах

83

АНАЛИЗ И ОБОБЩЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ..100
ВЫВОДЫ.............107
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ПЕРВОИСТОЧНИКОВ.........109

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Известно, что одним из ключевых механизмов, обеспечивающих поддержание структурно-функционального постоянства как отдельных органов и тканей, так и всего организма в целом, является апоптоз. Значительный интерес представляет исследование механизмов апоптоза нейтрофилов и моноцитов, играющих важную роль в норме и при различных патологических состояниях организма человека [1, 4, 80, 85, 94].
Известно, что некоторые цитокины способствуют задержке апоптоза, увеличивая выживаемость нейтрофилов и моноцитов in vivo [18, 21, 65, 71, 95]. Поскольку зрелые нейтрофилы и моноциты являются короткоживущими, неспособными к пролиферации и самообновлению, увеличение продолжительности их жизни можно рассматривать как важный механизм, позволяющий клеткам накапливаться в очагах инфекции и воспаления, сохраняя полноценный арсенал своих функций.
В настоящее время известно, что компоненты клеточной стенки бактерий липополисахариды (ЛПС) и пептидогликаны (ПГН), освобождающиеся из погибших бактерий, угнетают апоптоз нейтрофилов и моноцитов, а также модулируют секрецию ними ряда цитокинов (интерлейкинов ИЛ, фактора некроза опухоли ФНО). С этим, вероятно, связан ряд осложнений в патогенезе многих заболеваний: активированные клетки довольно долго циркулируют в кровяном русле и атакуют собственные клетки и ткани организма, осложняя течение ряда заболеваний. Известны только отдельные детали механизма регуляции апоптоза и секреторной активности нейтрофилов и моноцитов при действии ЛПС и ПГН, в том числе практически не изучена динамика изменений содержания циклического аденозина монофосфата (цАМФ) и циклического гуанозина монофосфата (цГМФ) в данных клетках [12, 67, 68, 77].
Связь работы с научными программами, темами. Диссертация является фрагментом плановой научной работы кафедры патологической физиологии Луганского государственного медицинского университета «Воспаление как результат действия бактерий» (номер государственной регистрации 0198U005713). Автор является исполнителем комплексной темы.
Цель исследования: Определить in vitro влияние ПГН и ЛПС на секреторную, метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и моноцитов периферической крови.
Для достижения цели поставлены следующие задачи:
В зависимости от дозы и времени взаимодействия ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius с нейтрофилами и моноцитами периферической крови человека, изучить in vitro:
1. Влияние ЛПС и ПГН на апоптоз нейтрофилов и моноцитов.
2. Влияние ЛПС и ПГН на секрецию нейтрофилами и моноцитами ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8 и ФНО-α.
3. Влияние ЛПС и ПГН на систему циклических нуклеотидов (цАМФ и цГМФ) в нейтрофилах и моноцитах.
4. Влияние ЛПС и ПГН на внутриклеточное содержание цАМФ и цГМФ в СD95-положительных и СD95-отрицательных нейтрофилах и моноцитах.
Объект исследования: секреторная и метаболическая активность и апоптоз нейтрофилов и моноцитов периферической крови in vitro.
Предмет исследования: влияние ПГН и ЛПС in vitro на апоптоз, секреторную активность и систему циклических науклеотидов нейтрофилов и моноцитов периферической крови.
Методы исследования: микробиологические (выделение ЛПС и ПГН из клеточных стенок бактерий); иммунологические (выделение нейтрофилов и моноцитов из периферической крови; определение содержания ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ФНО-a, цАМФ и цГМФ в супернатантах клеток; определение потенциальной апоптогенной активности ЛПС и ПГН методами проточной цитометрии; определение экспонирования рецепторов к моноклональным антителам CD38 и СD95 на цитоплазматических мембранах моноцитов и нейтрофилов методом непрямой иммунной флюоресценции), морфологические (окрашивание взвеси клеток акридин-оранжевым и исследование с помощью флуоресцентного микроскопа) и статистические (метод вариационной статистики).
Научная новизна полученных результатов. Впервые изучено влияние ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius на секреторную активность и апоптоз нейтрофилов и моноцитов периферической крови in vitro. Показано, что с увеличением концентрации и времени контакта ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius с нейтрофилами и моноцитами происходит увеличение количества апоптирующих клеток, усиление секреции цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8 и ФНО-α) и изменение внутриклеточного содержания цАМФ и цГМФ. Установлено, что моноциты проявляют наибольшую секреторную активность, стабильность внутриклеточного содержания цАМФ и цГМФ и устойчивость к апоптогенному влиянию ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius, чем нейтрофилы. Стимулирующий секрецию потенциал ЛПС H. influenzae существенно превышал таковой для ПГН S. intermedius независимо от дозы и времени действия на моноциты и нейтрофилы. Нейтрофилы проявляют одинаковую чувствительность к апоптогенному действию ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius независимо от концентрации последних и времени контакта с ними, тогда как моноциты наиболее чувствительны к апоптогенному влиянию ЛПС H. influenzae.
Впервые определено внутриклеточное содержание цАМФ и цГМФ в нейтрофилах и моноцитах с CD95-положительным и CD95-отрицательным фенотипами, подвергнутых дозозависимому и временному действию ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius. Установлено, что в CD95-положительных клетках имеет место количественное преобладание цАМФ над цГМФ, тогда как в CD95-отрицательных клетках преобладание цГМФ над цАМФ. Дисбаланс в системе цАМФ/цГМФ CD95-положительных и CD95-отрицательных клеток усиливается по мере увеличения действующих доз ЛПС и ПГН и длительности их контакта с нейтрофилами и моноцитами.
Практическая значимость. Результаты работы могут использоваться при трактовке патогенеза типических патологических процессов (воспаления и лихорадки) и механизмов апоптоза, при изучении действия биологических флогогенных факторов на макроорганизм; а также при разработке методов патогенетического лечения воспалительных заболеваний бактериальной этиологии. Полученные данные используются в лекционном курсе и при проведении практических занятий на кафедрах патофизиологии и микробиологии Луганского государственного медицинского университета, на кафедре патофизиологии Харьковского национального медицинского университета Министерства здравоохранения Украины, что подтверждено соответствующими актами внедрения.
Личный вклад соискателя. Диссертация является самостоятельной научно-исследовательской работой, в которой автором самостоятельно проведен патентный и литературный поиск, выполнена экспериментальная часть работы, написаны все главы диссертации и автореферат. Выбор темы научного исследования, формулировка цели и задач исследования, планирование работы были осуществлены совместно с научным руководителем работы профессором И.С. Гайдашем.
Апробация работы. Основные положения диссертации были изложены и обсуждены на заседаниях: научной конференции «Четвёртые чтения имени В.В. Подвысоцкого» (Одесса, 2005); международной научно-практической конференции преподавателей, врачей, молодых учёных и студентов Медицинского института Сумского государственного университета «Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины» (Сумы, 2007); Межгородской конференции молодых учёных «Актуальные проблемы патофизиологии» (С.-Петербург, 2007); научно-практической конференции с международным участием «Диагностические центры: медико-биологические аспекты диагностического процесса» (Ровно, 2007); Всеукраинской научно-практической конференции студентов, молодых учёных и интернов «Актуальные проблемы фундаментальной медицины (на английском языке)» (Луганск, 2007); XI и XII международных медицинских конгрессов студентов и молодых учёных (Тернополь, 2007-2008); Всеукраинской научно-практической конференции «Вестник учёного-2009» (Николаев, 2009); а также на заседаниях Луганских областных обществ микробиологов и патофизиологов в 2002-2008 гг.
Публикации. По результатам и материалам диссертации опубликованы 13 научных работ, из них 6 статей в журналах, отвечающих требованиям Высшей аттестационной комиссии Украины и опубликованных согласно требованиям, изложенным в пункте 3 Постановления Высшей аттестационной комиссии Украины от 15 января 2003 г. за № 7-05/1, и 7 тезисов докладов на конференциях и конгрессах.

Список литературы

ВЫВОДЫ

В диссертации изложено теоретическое обоснование роли структурных компонентов бактерий (ЛПС и ПГН) в стимуляции секреторной и метаболической активности и апоптоза нейтрофилов и моноцитов периферической крови здоровых людей in vitro, и доказана зависимость этой роли от концентрации ЛПС и ПГН, а также от времени экспонирования клеток со структурными компонентами бактерий.
1. ЛПС H. influenzae и ПГН S. intermedius стимулируют in vitro апоптоз нейтрофилов и моноцитов периферической крови человека, что выражается в увеличении как количества клеток, вступивших на путь апоптоза, так и клеток, имеющих в своём фенотипе неспецифические и специфические маркеры апоптоза CD38 и CD95. Апоптогенное влияние на моноциты и нейтрофилы ЛПС и ПГН является зависимым от дозы и времени взаимодействия: количество апоптировавших клеток возрастает по мере увеличения действующих концентраций ЛПС и ПГН, а также времени контакта с ними моноцитов и нейтрофилов. Наибольший уровень апоптирующих клеток имеет место при контакте моноцитов и нейтрофилов с ЛПС и ПГН в дозе 100 мкг/мл в течение 24 ч, наименьший уровень при дозе ЛПС и ПГН 10 мкг/мл и времени контакта 6 ч. Большую устойчивость к апоптогенному воздействию ЛПС и ПГН проявляют моноциты. Нейтрофилы проявляют одинаковую чувствительность к апоптогенному действию ЛПС и ПГН независимо от концентрации последних и времени контакта с ними, тогда как моноциты наиболее чувствительны к апоптогенному влиянию ЛПС.
2. ЛПС и ПГН in vitro усиливают секрецию моноцитами и нейтрофилами ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8 и ФНО-α. Влияние ЛПС и ПГН на секреторную активность моноцитов и нейтрофилов является дозо- и времязависимым: наибольший уровень секреции интерлейкинов и ФНО-α наблюдается через 24 ч контакта клеток с ЛПС и ПГН в действующей концентрации 100 мкг/мл, наименьший через 6 ч контакта с ЛПС и ПГН в концентрации 10 мкг/мл. Стимулирующий секрецию потенциал ЛПС существенно превышает таковой для ПГН независимо от дозы и времени воздействия на моноциты и нейтрофилы. Под влиянием ПГН и ЛПС наиболее интенсивно секретируются ИЛ-1β и ФНО-α, наименее интенсивно ИЛ-8. Секреторная активность моноцитов при стимуляции их ПГН и ЛПС была существенно выше таковой нейтрофилов.
3. ЛПС и ПГН дозо- и времязависимо влияют на внутриклеточное содержание цАМФ и цГМФ в общих популяциях нейтрофилов и моноцитов, что проявляется количественным преобладанием цАМФ над цГМФ. Наибольший дисбаланс в системе цАМФ/цГМФ в общих популяциях нейтрофилов и моноцитов развивается при действии на данные клетки ЛПС и ПГН в концентрации 100 мкг/мл и времени контакта 24 ч, наименьший при действующей концентрации ЛПС и ПГН 10 мкг/мл и длительности контакта 6 ч. Моноциты проявляют большую стабильность внутриклеточного содержания цАМФ и цГМФ, чем нейтрофилы.
4. В CD95-положительных нейтрофилах и моноцитах, подвергшихся влиянию ЛПС и ПГН, имеет место количественное преобладание цАМФ над цГМФ, тогда как в CD95-отрицательных клетках наблюдают преобладание цГМФ над цАМФ. Дисбаланс в системе цАМФ/цГМФ CD95-положительных клеток усиливается по мере увеличения действующих доз ЛПС и ПГН и длительности их контакта с данными клетками, тогда как дисбаланс в системе цАМФ/цГМФ CD95-отрицательных клеток с увеличением действующих доз ЛПС и ПГН и длительности их контакта с данными клетками уменьшается.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ПЕРВОИСТОЧНИКОВ

1. Апоптоз нейтрофилов как параметр воспалительной реакции при патологии различного генеза / А.В. Пасечник, В.А. Фролов, Н.Г. Гвоздь [и др.] // Вестник РУДН. 2004. № 1. С. 103-105.
2. Апоптозіндукуюча активність пептидогліканів облігатно анаеробних грампозитивних збудників гнійно-запальних захворювань гінекологічного профілю / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, С.В. Бірюкова [та ін.] // Галицький лікарський вісник. 2001. № 3. С. 29-31.
3. Апоптозіндукуюча активність тейхоєвих кислот збудників гнійно-запальних захворювань у гінекологічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Н.К. Казимірко [та ін.] // Український медичний альманах. 2000. № 5. С. 174-176.
4. Белушкина Н.Н. Молекулярные основы апоптоза / Н.Н. Белушкина, Алм Хасан Хамад, С.Е. Северин // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1998. № 4. С. 15-23.
5. Биохимия и иммунология микробных полисахаридов / Н.В. Васильев, Н.Б. Луцюк, Г.К. Палий, О.В. Смирнова. Томск: Издательство Томского университета, 1984. 304 с.
6. Бондаренко В.М. Определение эндотоксина грамотрицательных бактерий в крови человека / В.М. Бондаренко, В.Г. Лиходед, М.Ю. Яковлев // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2002. № 2. С. 83-89.
7. Васильева Г.И. Кооперативное взаимодействие моно- и полинуклеарных фагоцитов, опосредованное моно- и нейтрофилокинами / Г.И. Васильева, И.А. Иванова, С.Ю. Тюкавкина // Иммунология. 2000. № 5. С. 11-17.
8. Винокуров М.Г. Действие липополисахаридов и УФ-облучения диапазона С на регуляцию апоптоза нейтрофилов человека / М.Г. Винокуров, И.Р. Прохоренко, М.М. Юринская // Иммунология. 2001. № 2. С. 25-27.
9. Вітріщак С.В. Вплив пептидогліканів на функціональну активність моноцитів в експерименті: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец. 14.03.04 «Патологічна фізіологія» / С.В. Вітріщак. Одеса, 2002. 16 с.
10. Владимирская Е.Б. Механизмы апоптотической смерти клеток / Е.Б. Владимирская // Гематология и трансфузиология. 2002. № 2. С. 35-40.
11. Воробьёв А.А. Липополисахариды грамотрицательных вирулентных бактерий и их роль в инфекции и иммунитете / А.А. Воробьёв, Е.В. Борисова, В.А. Борисов // Вестник Российской академии медицинских наук. 1997. № 3. С. 10-13.
12. Вплив збудників гнійно-запальних захворювань хірургічного профілю на систему циклічних нуклеотидів в імуноцитах / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов [та ін.] // Буковинський медичний вісник. 2001. № 2. С. 59-61.
13. Вплив ліпополісахаридів етіологічних агентів неонатального сепсису на фагоцитарну активність моноцитів in vitro / Н.Б. Пількевич, В.В. Флегонтова, І.С. Гайдаш [та ін.] // Здобутки клінічної та експериментальної медицини. 2006. № 1. С. 116-118.
14. Гайдаш И.С. Влияние пептидогликанов и липополисахаридов условно-патогенных бактерий на апоптоз нейтрофилов in vitro / И.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, И.В. Стериони // Український медичний альманах. 2004. № 6. С. 195-197.
15. Гайдаш І.С. Апоптозіндукуюча активність ліпополісахаридів збудників гнійно-запальних захворювань у хірургічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов // Вісник морської медицини. 2000. № 3. С. 24-28.
16. Гайдаш І.С. Апоптозіндукуюча активність пептидогліканів та тейхоєвих кислот грампозитивних збудників гнійно-запальних захворювань у хірургічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов, О.М. Салманова // Вестник гигиены и эпидемиологии. 2001. № 1. - С. 70-73.
17. Гайдаш І.С. Склад умовно-патогенних бактерій збудників гнійно-запальних захворювань жіночих статевих органів та їхній вплив на апоптоз моноцитів та нейтрофілів / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, С.В. Вітріщак, А.В. Флегонтова // Вісник асоціації акушерів-гінекологів України. 2000. № 4. С. 33-37.
18. Гебеш В.В. Цитокінова теорія патогенезу інфекцій і принципи лікування хворих / В.В. Гебеш // Інфекційні хвороби. 1998. № 1. С. 29-32.
19. Гюлазян Н.М. Влияние клинического течения сальмонеллёзной инфекции в периоде ранней реконвалесценции на эндотоксининдуцированный апоптоз клеток периферической крови / Н.М. Гюлазян // Клиническая лабораторная диагностика. 2007. № 4. С. 22-24.
20. Експресія молекул CD95 на поверхні моноцитів і лімфоцитів іn vitro під впливом ліпополісахаридів збудників хронічних синуситів, отитів і тонзилітів / Н. Казімірко, І. Шумова, Н. Петруня [та ін.] // Вісник Львівського університету. Серія біологічна. 2008. Випуск 46. С. 54-58.
21. Ершов Ф.И. Эра цитокинов или язык клеток / Ф.И. Ершов // Вестник Российской академии естественных наук. 2002. № 3. С. 24-26.
22. Зак К.П. Большие гранулосодержащие лимфоциты в патологии / К.П. Зак, Л.П. Киндзельский, А.К. Бутенко. К.: Наукова думка, 1992. 164 с.
23. Злакоманова О.Н. Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня доктора мед. наук: спец. 14.00.36 «Алергологія та імунологія» та 14.00.35 «Дитяча хірургія» / О.Н. Злакоманова. Челябінськ, 2008. 32 с.
24. Иванов Ю.И. Статистическая обработка результатов медико-биологических исследований на микрокалькуляторах по программам / Ю.И. Иванов, О.Н. Погорелюк. М.: Медицина, 1990. 220 с.
25. Иммунология апоптоза и некроза / С.Я. Проскуряков, В.Л. Габай, А.Г. Коноплянников [и др.] // Биохимия. 2005. Выпуск 12. С. 1593-1605.
26. Исаченко Е.Г. Спонтанный и липополисахаридиндуцированный синтез цитокинов клетками крови человека в норме и при аллергопатиях / Е.Г. Исаченко, Т.И. Виткина, С.А. Геронина // Иммунология. 1999. № 5. С. 37-39.
27. Казимирко Н.К. Влияние пептидогликанов бактерий на продукцию медиаторов эпителиоцитами влагалища и опухолевыми клетками HeLa / Н.К. Казимирко, Т.В. Левченко // Український медичний альманах. 2005. № 4. С. 116-119.
28. Казімірко Н.К. Апоптозіндукуюча активність ліпополісахариду Neisseria meningitidis / Н.К. Казімірко, О.В. Рубан, С.В. Вітріщак // Український медичний альманах. 2000. № 5. С. 82-83.
29. Карсонова М.И. Изучение способности моноцитов периферической крови человека расщеплять пептидогликаны клеточной стенки бактерий с образованием глюкозаминилмурамилолигопептидных фрагментов / М.И. Карсонова, В.Л. Львов, Д.В. Мазуров, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2001. № 3. С. 21-23.
30. Кетлинский С.А. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина // Иммунология. 1995. № 3. С. 30-43.
31. Клеточные механизмы иммуномодулирующего действия препарата Иммуномакса / Р.И. Атауллаханов, А.В. Пичугин, Н.М. Шишкова [и др.] // Иммунология. 2005. № 2. С. 111-120.
32. Ковальчук Л.В. Новые иммунопатогенетические взгляды: апоптотические иммунодефициты / Л.В. Ковальчук, А.Н. Чередеев // Иммунология. 1999. № 6. С. 17-18.
33. Ковальчук Л.В. Хемокины новое семейство цитокинов, регулирующих миграцию лейкоцитов / Л.В. Ковальчук, Р.Т. Сайгитов //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2000. № 1. С. 90-94.
34. Козлов В.К. Дисфункция иммунной системы в патогенезе травматической болезни / В.К. Козлов // Український журнал екстремальної медицини імені Г.О. Можаєва. 2005. № 3. С. 5-16.
35. Колесникова Н.В. Влияние миелопептида-3 на экспрессию молекул СD11B, CD16 и CD95 нейтрофильными гранулоцитами у детей, больных гнойно-септическими заболеваниями / Н.В. Колесникова, И.В. Нестерова, Г.А. Чудилова, В.А. Тараканов // Иммунология. 1999. № 3. С. 41-43.
36. Кондракова О.А. Инвазивная стрептококковая инфекция: факты и гипотезы / О.А. Кондракова, В.Н. Бабин, Н.Ф. Дмитриева, Н.И. Брико // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1999. № 5. С. 4-7.
37. Коннова Ю.А. Патогенетические механизмы интоксикационного синдрома при острых кишечных инфекциях и методы его коррекции: автореф. дис. на соискание учёной степени канд. мед. наук: спец: 14.00.10 «Инфекционные болезни» / Ю.А. Коннова. М., 2007. 23 с.
38. Коновалов А.Ю. Влияние липополисахаридов на экспрессию молекул CD95 на поверхности моноцитов in vitro / А.Ю. Коновалов, И.В. Стериони // Материалы Межгородской конференции молодых учёных «Актуальные проблемы патофизиологии». С.-Петербург, 2007. С. 11.
39. Коновалов А.Ю. Влияние тейхоевых кислот возбудителей хронических тонзиллитов и синуситов на секреторную активность моноцитов in vitro / А.Ю. Коновалов, Н.К. Казимирко // Світ медицини та біології. 2007. № 1. С. 9-11.
40. Косенко Ю.В. Влияние липополисахаридов бактерий этиологических агентов хронического пародонтита у беременных на секреторную активность моноцитов и лимфоцитов in vitro / Ю.В. Косенко // Український медичний альманах. 2005. № 6. С. 199-202.
41. Косенко Ю.В. Влияние липополисахаридов бактерий на апоптоз моноцитов / Ю.В. Косенко // Український медичний альманах. 2004. № 6. С. 66-68.
42. Косенко Ю.В. Влияние липополисахаридов этиологических агентов хронического пародонтита на фагоцитарную активность моноцитов / Ю.В. Косенко // Український медичний альманах. 2005. № 5. С. 66-68.
43. Косенко Ю.В. Вплив ліпополісахаридів етіологічних агентів хронічного пародонтиту на фагоцитарну активність моноцитів in vitro / Ю.В. Косенко, Перфільєва М.Ю. // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2006. № 1. С. 16-19.
44. Кудин А.П. Содержание некоторых цитокинов в крови и ликворе детей с генерализованными формами менингококковой инфекции / А.П. Кудин, Н.Н. Нашкевич, С.Т. Коледа, А.А. Астапов // Медицинские новости. 2001. № 10. С. 66-68.
45. Кульшин В.А. Улучшенный метод выделения липополисахаридов из грамотрицательных бактерий / В.А. Кульшин, А.А. Яковлев, С.Н. Авиева // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1987. № 5. С. 44-46.
46. Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / С.Н. Лапач, А.В. Чубанко, П.Н. Бабич. К.: Морион, 2000. 320 с.
47. Левченко Т.В. Роль структурных компонентов бактерий в нарушении продукции медиаторов опухолевыми клетками HeLa, эпителиоцитами влагалища, моноцитами и лимфоцитами периферической крови in vitro: дис. кандидата мед. наук: 14.03.04 / Левченко Тетяна Володимирівна. Луганськ, 2008. 163 с.
48. Левченко Т.В. Секреторная активность интактных эпителиоцитов влагалища, опухолевых клеток НeLa, моноцитов и Т-лимфоцитов / Т.В. Левченко // Український медичний альманах. 2007. № 6. С. 61-64.
49. Лушников Е.Ф. Гибель клетки (апоптоз) / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов. М.: Медицина, 2001. С. 189-191.
50. Мазуров Д.В. Изучение способности моноцитов периферической крови человека расщеплять пептидогликаны клеточной стенки бактерий с образованием глюкозаминилмурамилолигопептидных фрагментов / Д.В. Мазуров, В.Л. Львов, М.И. Карсонова // Иммунология. 2001. № 3. С. 21-23.
51. Малов В.А. Эволюция взгляда на роль бактериальных липополисахаридов в патологии человека / В.А. Малов, С.Г. Пак // Вестник Российской академии медицинских наук. 1997. № 8. С. 33-38.
52. Мащенко И.С. Цитокиновый статус больных генерализованным пародонтитом и его связь с состоянием процессов метаболизма костной ткани / А.А. Гударян, И.С. Мащенко // Український стоматологічний альманах. 2005. № 2. С. 5-8.
53. Маянский А.Н. Апоптоз нейтрофилов / А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.И. Заславская // Иммунология. 1999. № 6. С. 11-20.
54. Маянский Н.А. Каспазонезависимый механизм апоптоза нейтрофилов: апоптогенный эффект туморнекротического фактора / Н.А. Маянский // Иммунология. 2002. № 1. С. 15-17.
55. Маянский Н.А. Состояние каспазы-3 при подавлении апоптоза нейтрофилов гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором / Н.А. Маянский // Иммунология. 2001. № 2. С. 22-25.
56. Минцер О.П. Методы обработки медицинской информации / Минцер О.П., Угаров Б.Н., Власов В.В.. К.: Вища школа, 1991. 271 с.
57. Миргородская А.В. Влияние пептидогликанов и липополисахаридов бактерий на апоптоз нейтрофилов in vitro / А.В. Миргородская // Український журнал екстремальної медицини ім. Г.О. Можаєва. 2008. № 2. С. 86-89.
58. Миргородська Г.В. Вплив пептидогліканів та ліпополісахаридів на функціональну активність та метаболічний статус моноцитів крові людини / Г.В. Миргородська // Український журнал клінічної та лабораторної медицини. 2008. № 2. С. 61-65.
59. Моисеева Е.Г. Метаболический гомеостаз и иммунная реактивность организма в динамике воспаления в тканях пародонта (экспериментальное исследование): автореф. дис. на соискание учёной степени доктора мед. наук: спец: 14.00.16 «Патологическая физиология» / Е.Г. Моисеева. М., 2008. 32 с.
60. Мурашко Н.К. Апоптоз нейтрофілів у хворих з гіпертензивною енцефалопатією / Н.К. Мурашко // Український медичний часопис. 2008. № 5. С. 132-134.
61. Николаев А.Ю. Лечение почечной недостаточности / А.Ю. Николаев, Ю.С. Милованов. М: ООО «Медицинское информационное агентство», 1999. 223 с.
62. Новожилова А.П. Программированная клеточная гибель / А.П. Новожилова, Н.Н. Плужников, В.С. Новиков. СПб.: Наука, 1996. 276 с.
63. Орлова Е.Г. Модуляция лептином функциональной активности нейтрофилов и моноцитов периферической крови женщин / Е.Г. Орлова, С.В. Ширшев // Цитокины и воспаление. 2007. № 3. С. 44-48.
64. Особенности цитокинового статуса при клещевых нейроинфекциях у детей // Т.Ю. Бедарева, Т.В. Попонникова, Г. Доблер [и др.] // Медицина в Кузбассе (рецензируемый научно-практический журнал). 2008. - № 5 (специальный выпуск). С. 13-18.
65. Потапнев М.П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами / М.П. Потапнев // Иммунология. 2002. № 4. С. 237-243.
66. Регуляция апоптоза нейтрофилов как параметра патологии различного генеза / Е.Г. Моисеева, А.В. Пасечник, В.А. Фролов [и др.] // Вестник Российского университета дружбы народов. 2006. № 3. С. 111-113.
67. Роль системы циклических нуклеотидов в иммунорегуляторных процессах и методические подходы к её изучению при оценке иммунного статуса человека / А.В. Бирюков, М.А. Стенина, А.Ю. Скрипник [и др.] // Лабораторное дело. 1985. № 1. С. 29-35.
68. Рубан Т.В. Вплив бактеріальних продуктів на синтез цитокінів моноцитами (огляд літератури) / Т.В. Рубан, Д.Ю. Наталуха, А.В. Москвін // Український журнал екстремальної медицини ім. Г.О. Можаєва. 2001. № 2. С. 83-88.
69. Самохин А.В. Иммунология, апоптоз и гомеопатия / А.В. Самохин, М.С. Томкевич, Ю.В. Готовский. М.: Имедис, 1998. 224 с.
70. Секреція інтерлейкінів-1β та -6 моноцитами in vitro при експериментальному сепсисі / М.Ф. Даценко, Є.В. Суглобов, О.М. Салманова [та ін.] // Український журнал екстремальної медицини ім. Г.О. Можаєва. 2001. № 3. С. 71-73.
71. Серебренникова С.Н. Роль цитокинов в воспалительном процессе (сообщение 1) / С.Н. Серебренникова, И.Ж. Семинский // Сибирский медицинский журнал. 2008. № 6. С. 5-8.
72. Сидоренко С.В. Бактериемия и сепсис: возбудители и антибиотики / С.В. Сидоренко // Клиническая антибиотикотерапия. 1999. № 2. С. 4-9.
73. Сидякова Е.В. Содержание провоспалительных цитокинов и экспрессия тканевого фактора моноцитами периферической крови у больных костным панарицием и остеомиелитом длинных трубчатых костей / Е.В. Сидякова, А.М. Мироманов, Ю.А. Витковский // Сибирский медицинский журнал. 2008. № 6. С. 52-55.
74. Синопальников И.А. Новые горизонты применения макролидов при инфекциях дыхательных путей / А.И. Синопальников // Российские медицинские вести. 2004. № 2. С. 20-24.
75. Спивак Н.Я. Сепсис: иммунология и иммунокоррекция / Н.Я. Спивак, С.М. Белоцкий, В.А. Карлов. К.: Фитосоциоцентр, 2007. 304 с.
76. Стериони И.В. Экспрессия молекул CD95 на поверхности нейтрофилов под влиянием структурных компонентов и токсинов условно-патогенных бактерий in vitro / И.В. Стериони // Український медичний альманах. 2005. № 2. С. 141-143.
77. Татаров С.В. Влияние пептидогликанов и тейхоевых кислот этиологических агентов хронического остеомиелита на систему циклических нуклеотидов и фагоцитарную активность моноцитов in vitro / С.В. Татаров // Український медичний альманах. 2003. № 6. С. 215-218.
78. Татаров С.В. Влияние пептидогликанов стрептококков на продукцию моноцитами фактора некроза опухоли-α / С.В. Татаров // Український медичний альманах. 2002. № 5. С. 143-145.
79. Татаров С.В. Механизмы влияния компонентов этиологических агентов хронического остеомиелита на функциональную активность моноцитов in vitro: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец. 14.00.16 «Патологічна фізіологія» / С.В. Татаров. Ростов-на-Дону, 2004. 16 с.
80. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы / С.Р. Уманский // Молекулярная биология. 1996. Выпуск 3. С. 487-502.
81. Урбах В.Ю. Математическая статистика для биологов и медиков / В.Ю. Урбах. М.: АН СССР, 1975. 232 с.
82. Флегонтова В.В. Механизмы реализации иммуносупрессивных свойств условно-патогенных бактерий этиологических агентов гнойно-воспалительных заболеваний: дис. доктора мед. наук: 03.00.07 / Флегонтова Вероніка Валентинівна. Луганськ, 2004. 335 с.
83. Фомин В.В. Функциональное состояние фагоцитарного, гуморального, клеточного звеньев иммунитета при стрептококковой инфекции / В.В. Фомин, С. В. Пустынникова // Уральский медицинский журнал. − 2007. − № 3. − С. 532-533.
84. Фрейдлин И.С. Иммунная система и ее дефекты [руководство для врачей] / И.С Фрейдлин. СПб.: НТФФ «Полисан», 1998. 113 с.
85. Хейфлик Л. Смертность и бессмертие на клеточном уровне / Л. Хейфлик // Биохимия. 1997. Выпуск 11. С. 1380-1393.
86. Хома С.М. Вплив пептидоглікану золотавого стафілококу та ліпополісахариду палички синього гною на функціональну активність та метаболічний статус моноцитів і Т-лімфоцитів крові людини / С.М. Хома // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2007. № 1. С. 78-91.
87. Цитокин-опосредованные механизмы развития системной иммуносупрессии у больных с гнойно-хирургической патологией / А.А. Останин, О.Ю. Леплина, М.А. Тихонова [и др.] // Цитокины и воспаление. 2002. № 1. С. 38-45.
88. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Иммунология. 1996. № 6. С. 10-23.
89. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме / А.А. Ярилин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1998. № 2. С. 38-48.
90. Alexander C. Bacterial lipopolysaccharide and innate immunity / С. Alexander, Е.Т. Rietschel // Journal of Endotoxin Research. 2001. № 7. P. 167-202.
91. Antibodies to streptococcal cell wall in psoriatic arthritis and cutaneous psoriasis / K. Rantakokko, M. Rimpilainen, J. Uksila [et al.] // Clinical and Experimental Rheumatology. 1997. № 4. P. 399-404.
92. Bailly S. Differential regulation of IL-6, IL-1α, IL-1β and TNF-α production in LPS-stimulated human monocytes: role of cyclic AMP / S. Bailly, B. Ferrua, M. Fay, M.A. Gougerot-Pocidalo // Cytokine. 2000. № 3. P. 205-210.
93. Boudaly S. Activation of dendritic cells by polymorphonuclear neutrophils / S. Boudaly // Frontiers in Bioscience. 2009. № 14. P. 1589-1595.
94. Cahit A. Molecular control of neutrophil apoptosis / А. Cahit, D.A. Moulding, S.W. Edwards // FEBS Letters. 2001. № 3. P. 318-322.
95. Cassatella M.A. The production of cytokines by polymorphonuclear neutrophils / M.A. Cassatella // Immunology Today. 1995. № 16. P. 21-26.
96. Clinical and biological relevance of hepatocyte apoptosis in alcoholic hepatitis / M. Ziol, M. Tepper, M. Loher [et al.] // Journal of Hepatology. 2001. Volume 34. P. 254-260.
97. Comparative evaluation of apoptosis induced by Shiga toxin 1 and/or lipopolysaccharides in human monocytic and macrophage-like cells / L.M. Harrison, R.P. Cherla, C. van den Hoogen [et al.] // Microbial Pathogens. 2005. № 2-3. P. 63-76.
98. Cytokine induction in fetal rat brains and brain injury in neonatal rats after maternal lipopolysaccharide administration / Z. Cai, Z.-L. Pan, Y. Pang [et al.] // Pediatric Research. 2000. № 1. Р. 20-35.
99. Dialyzable leukocyte extract differentially regulates the production of TNFalpha, IL-6, and IL-8 in bacterial component-activated leukocytes and endothelial cells / M.O. Ojeda, C. van't Veer, C.B. Fernandez Ortega [et al.] // Inflammation Research. 2005. № 2. P. 74-81.
100. Different sequence strains of Streptococcus agalactiae elicit various levels of cytokine production // M.A. De Francesco, F. Gargiulo, R. Negrini [et al.] // Immunological Investigations. 2008. № 8. P. 741-751.
101. Dynamic correlation of neutrophil apoptosis and immune activation during treatment of HIV infection / M. Boirivant, P. Lefterova, B. Micka [et al.] // Cell Death Differentiation. 1999. № 5. P. 420-432.
102. Differential regulation of cytokine and chemokine production in lipopolysaccharide-induced tolerance and priming / O.M. Peck, D.L. Williams, K.F. Breuel [et al.] // Cytokine. 2004. № 5. P. 202-208.
103. Distribution of granulocyte colony-stimulating factor and G-CSF-receptor mRNA and protein in the human fetus / D.A. Calhoun, W.H. Donnelly, Y. Du [et al.] // Pediatric Research. 1999. - № 3. P. 19-22.
104. Dosch S.F. SARS coronavirus spike protein-induced innate immune response occurs via activation of the NF-kappaB pathway in human monocyte macrophages in vitro / S.F. Dosch, S.D. Mahajan, A.R. Collins // Virus Research. -2009. № 1. P. 29-36.
105. Effect of vitamin C administration on neutrophil apoptosis in septic patients after abdominal surgery / I. Ferrón-Celma, A. Mansilla, L. Hassan [et al.] // Journal of Surgical Research. 2008. № 21. P. 23-29.
106. Eun B.-L. Pentoxifylline attenuates hypoxic-ischemic brain injury in immature rats / B.-L. Eun, X.-H. Liu, J.D.E. Barks // Pediatric Research. 2000. № 1. P. 40-50.
107. Foster T.J. Immune evasion by staphylococci / T.J. Foster // Natural Reviews in Microbiology. 2005. № 3. P. 948-958.
108. Francisella tularensis genes required for inhibition of the neutrophil respiratory burst and intramacrophage growth identified by random transposon mutagenesis of LVS // G.S. Schulert, R.L. McCaffrey, B.W. Buchan [et al.] // Infection and Immunity. 2009. № 2. P. 9-18.
109. Galanos C. A new method for the extraction of R-lipopolysaccharides / C. Galanos, O. Luderitz, O. Westphal // European Journal of Biochemistry. 1969. № 2. P.245-249.
110. Ginsburg I. Role of lipoteichoic acid in infection and inflammation / I. Ginsburg // Lancet Infectious Diseases. 2002. № 2. P. 171-179.
111. Guidet B. Interleukins and TNF in septic shock / B. Guidet, F. Staikowsky, G. Offenstadt // Reviews in Practice. 2003. № 1. P. 13-17.
112. Haller D. Cytokine secretion by stimulated monocytes depends on the growth phase and heat treatment of bacteria: a comparative study between lactic acid bacteria and invasive pathogens / D. Haller, C. Bode, W.P. Hammes // Microbiology and Immunology. 2008. № 43. P. 925-935.
113. Highly purified lipoteichoic acid activates neutrophil granulocytes and delays their spontaneous apoptosis via CD14 and TLR2 / S. Lotz, I. Wilde, G. van Zandbergen [et al.] // Journal of Leukocyte Biology. 2004. № 75. P. 467-477.
114. Human cytomegalovirus paralyzes macrophage motility through down-regulation of chemokine receptors, reorganization of the cytoskeleton, and release of macrophage migration inhibitory factor / G. Frascaroli, S. Varani, N. Blankenhorn [et al.] // Journal of Immunology. 2009. № 1. P. 477-488.
115. IL-1β secretion induced by Aggregatibacter (Actinobacillus) actinomycetemcomitans is mainly caused by the leukotoxin / P. Kelk, R. Claesson, C. Chen [et al.] // International Journal of Medical Microbiology. 2008. № 5-6. P. 529-541.
116. Induction of cytokine production in human T cells and monocytes by highly purified lipoteichoic acid: involvement of Toll-like receptors and CD14 / E. Ellingsen, S. Morath, T. Flo [et al.] // Medical Science Monitoring. 2002. № 5. P. 149-156.
117. Induction of release of tumor necrosis factor from human monocytes by staphylococci and staphylococcal peptidoglycans / C.P. Timmerman, E. Mattsson