Влияние пептидогликанов, тейхоевых кислот и липополисахаридов бактерий на метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и субпопуляций Т-лимфоцитов in vitro

Краткое описание

Министерство здравоохранения Украины
Луганский государственный медицинский университет

На правах рукописи

Русалов Виталий Леонидович

УДК 579:612.112.91/.94:576.367

Влияние пептидогликанов, тейхоевых кислот и липополисахаридов бактерий на метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и субпопуляций Т-лимфоцитов in vitro

14.03.04 патологическая физиология

Диссертация на соискание учёной степени кандидата
медицинских наук

Научный руководитель:

Гайдаш Игорь Славович, доктор медицинских наук, профессор

Примірник ідентичний всім існуючим.

Вчений секретар

спеціалізованої вченої ради Д 29.600.02 доц. В.М. Шаньк

Луганск-2009

СОДЕРЖАНИЕ

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ, СОКРАЩЕНИЙ И ТЕРМИНОВ.........4
ВВЕДЕНИЕ......................6

ГЛАВА 1.

ВЛИЯНИЕ СТРУКТУРНЫХ КОМПОНЕНТОВ БАКТЕРИЙ НА АПОПТОЗ И МЕТАБОЛИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫХ КЛЕТОК

11

1.1.

Влияние структурных компонентов бактерий на апоптоз иммуноцитов.

11

1.2.

Влияние структурных компонентов бактерий на метаболизм иммуноцитов..

21

ГЛАВА 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

30

2.1.

Материалы исследования..

30

2.2.

Методы исследования.

31

ГЛАВА 3.

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОГЛИКАНОВ, ТЕЙХОЕВЫХ КИСЛОТ И ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ БАКТЕРИЙ НА АПОПТОЗ НЕЙТРОФИЛОВ И Т-ЛИМФОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO

38

ГЛАВА 4.

ВЛИЯНИЕ ПЕПТИДОГЛИКАНОВ, ТЕЙХОЕВЫХ КИСЛОТ И ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ БАКТЕРИЙ НА МЕТАБОЛИЗМ НЕЙТРОФИЛОВ И Т-ЛИМФОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА IN VITRO.

67

4.1.

Влияние пептидогликанов, тейхоевых кислот и липополисахаридов бактерий на систему циклических нуклеотидов нейтрофилов и Т-лимфоцитов.

67

4.2.

Влияние пептидогликанов, тейхоевых кислот и липополисахаридов бактерий на систему адениловых нуклеотидов нейтрофилов и Т-лимфоцитов.

85

4.3.

Влияние пептидогликанов, тейхоевых кислот и липополисахаридов бактерий на перекисное окисление липидов и ферментативную систему антиоксидантной защиты нейтрофилов и Т-лимфоцитов.

97

АНАЛИЗ И ОБОБЩЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ..114
ВЫВОДЫ.........121
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.....123
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ПЕРВОИСТОЧНИКОВ.124

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ, СОКРАЩЕНИЙ И ТЕРМИНОВ

АДФ

-

аденозиндифосфат

АМК

-

активные молекулы кислорода

АМФ

-

аденозинмонофосфат

АОЗ

-

антиокислительная защита

АТФ

-

аденозинтрифосфат

ДК

-

диеновые конъюгаты

ИА

-

индекс апоптоза

ИЛ

-

интерлейкин

К

-

интегральный коэффициент

ЛПС

-

липополисахарид

л

-

литр

мг

-

миллиграмм

МДА

-

малоновый диальдегид

МЕ

-

международная единица

мкг

-

микрограмм

мкмоль

-

микромоль

мл

-

миллилитр

нг

-

нанограмм

ПГН

-

пептидогликан

пкмоль

-

пикомоль

ПОЛ

-

перекисное окисление липидов

СОД

-

супероксиддисмутаза

ТК

-

тейхоевые кислоты

у.е.

-

условная единица

ФНО-α

-

фактор некроза опухоли-α

цАМФ

-

циклический аденозин монофосфат

цГМФ

-

циклический гуанозин монофосфат

ч

-

час

ЭЗ

-

энергетический заряд

CD4

-

Т-хелперы/индукторы

CD8

-

Т-супрессоры цитотоксические

CD38

-

неспецифический маркер апоптоза

CD95

-

специфический маркер апоптоза

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Подавляющее большинство инфекционных процессов бактериальной этиологии протекает на фоне функциональной недостаточности фагоцитарного звена иммунной системы и формирования супрессорного варианта иммунодефицита [58, 69, 83, 101]. Недостаточность фагоцитарной системы, дефицит Т-хелперов/индукторов и их функциональная неполноценность являются основными критериями степени тяжести иммунодефицитного состояния [19, 41, 42, 68].
Этиологическими факторами, обусловливающими развитие иммунодефицита при бактериальных инфекциях, являются структурные компоненты бактерий тейхоевые кислоты (ТК), пептидогликаны (ПГН) и липополисахариды (ЛПС), способные стимулировать в иммунокомпетентных клетках апоптоз, влиять на их секреторную, фагоцитарную и метаболическую активность [1, 2, 4, 7, 13, 17, 18, 102, 118, 123, 125, 126].
Известно, что разные виды иммунокомпетентных клеток различаются исходным уровнем своей метаболической активности, внутриклеточным содержанием циклических и адениловых нуклеотидов, спектром ферментов [124, 128]. Изменение метаболических констант в иммунокомпетентных клетках влечёт за собой изменение их функциональной активности [64].
Недостаточно изученными являются механизмы влияния структурных компонентов условно-патогенных бактерий на апоптоз и метаболический статус нейтрофилов и основных иммунорегуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов, обеспечивающих силу иммунного ответа при инфекционном процессе [11, 47, 62]. Невыясненными остаются особенности систем циклических и адениловых нуклеотидов, состояние процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и ферментативной системы антиокислительной защиты (АОЗ) в Т-хелперах/индукторах, цитотоксических Т-супрессорах и нейтрофилах. Выяснение этих особенностей создаст теоретическую базу для оптимизации фармакологической коррекции иммунодефицитных состояний при бактериальных инфекционных процессах.
Связь работы с научными программами, темами. Диссертация является фрагментом плановой научной работы кафедры патофизиологии Луганского государственного медицинского университета № 0198U005713 «Воспаление как результат действия бактерий». Автор является соисполнителем комплексной темы.
Цель исследования: Определить in vitro влияние ПГН, ТК и ЛПС бактерий на метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и субпопуляций Т-лимфоцитов.
Для достижения цели поставлены следующие задачи:
В зависимости от дозы и времени взаимодействия ПГН и ТК Staphylococcus aureus, и ЛПС Escherichia coli с нейтрофилами и субпопуляциями Т-лимфоцитов, изучить in vitro влияние ПГН, ТК и ЛПС на:
1. Апоптоз нейтрофилов, Т-хелперов/индукторов и цитотоксических Т-супрессоров.
2. Систему циклического аденозина (цАМФ) и гуанозина (цГМФ) монофосфатов в нейтрофилах и субпопуляциях Т-лимфоцитов.
3.Систему адениловых нуклеотидов в нейтрофилах и субпопуляциях Т-лимфоцитов.
4. Состояние ПОЛ и ферментативную систему АОЗ в нейтрофилах и субпопуляциях Т-лимфоцитов.
Объект исследования: апоптоз, системы циклических и адениловых нуклеотидов, ПОЛ и ферментативная система АОЗ нейтрофилов, Т-хелперов/индукторов и цитотоксических Т-супрессоров.
Предмет исследования: влияние ПГН, ТК и ЛПС in vitro на апоптоз, системы циклических и адениловых нуклеотидов, ПОЛ и ферментативную систему АОЗ нейтрофилов, Т-хелперов/индукторов и цитотоксических Т-супрессоров.
Методы исследования: микробиологические (выделение ПГН, ТК и ЛПС из клеточных стенок бактерий); иммунологические (выделение из периферической крови нейтрофилов, Т-хелперов/индукторов и цитотоксических Т-супрессоров, определение потенциальной апоптогенной активности ПГН, ТК и ЛПС, определение экспонирования рецепторов к моноклональным антителам CD38 и CD95 на цитоплазматических мембранах клеток); морфологические (окрашивание клеток акридином жёлтым и исследование с помощью флуоресцентного микроскопа); биохимические (определение внутриклеточного содержания циклических и адениловых нуклеотидов, ДК, МДА, активности каталазы и СОД); статистические (метод вариационной статистики).
Научная новизна полученных результатов. Впервые in vitro изучено влияние ПГН, ТК Staphylococcus aureus и ЛПС E.coli на апоптоз и метаболическую активность субпопуляций Т-лимфоцитов Т-хелперов/индукторов и Т-супрессоров/цитотоксиков крови человека. Показано, что с увеличением концентрации и времени взаимодействия ПГН, ТК и ЛПС с субпопуляциями Т-лимфоцитов происходит увеличение количества апоптирующих клеток, изменение внутриклеточного содержания циклических и адениловых нуклеотидов, усиливается ПОЛ и снижается активность ферментативной системы АОЗ. Установлено, что под воздействием ПГН, ТК и ЛПС наибольшие негативные метаболические изменения и наибольший апоптоз имеют место в субпопуляции Т-хелперов/индукторов.
Впервые in vitro изучено влияние ПГН, ТК Staphylococcus aureus и ЛПС Escherichia coli на систему адениловых нуклеотидов, ПОЛ и ферментативную систему АОЗ нейтрофилов крови человека. Показано, что с увеличением концентрации и времени взаимодействия ПГН, ТК, ЛПС в нейтрофилах происходит снижение внутриклеточного содержания АТФ и активности ферментов АОЗ, увеличение количества АДФ, АМФ и метаболитов ПОЛ.
Впервые проведен сравнительный анализ чувствительности нейтрофилов и субпопуляций Т-лимфоцитов к действию ПГН, ТК и ЛПС. Установлено, что наименее чувствительными к негативному влиянию ПГН, ТК и ЛПС являются цитотоксические Т-супрессоры и нейтрофилы крови человека, наиболее чувствительными Т-хелперы/индукторы.
Практическая значимость полученных результатов. Результаты работы могут использоваться при трактовке патогенеза типичных патологических процессов (иммунодефицита, воспаления, лихорадки) и механизмов апоптоза, при изучении действия биологических флогогенных факторов на макроорганизм, а также при разработке методов патогенетического обоснования лечения иммунодефицитных состояний, воспалительных заболеваний бактериальной этиологии. Полученные данные используются в лекционном курсе и при проведении практических занятий на кафедрах патофизиологии и микробиологии Луганского государственного медицинского университета, на кафедре патофизиологии Харьковского национального медицинского университета Министерства охраны здоровья Украины, что подтверждено соответствующими актами внедрения.
Личный вклад соискателя. Выбор темы научного исследования, формулирование цели и задач исследования, планирование работы были осуществлены научным руководителем работы профессором И.С. Гайдашем. Автором самостоятельно проведен: информационный поиск с помощью базы данных «Medline», анализ литературы, выполнены микробиологические, иммунологические, морфологические, биохимические и статистические исследования, написаны все главы диссертации и автореферат.
Апробация результатов диссертации. Основные научные положения, выводы диссертации были доложены и обсуждены на заседаниях: Всеукраинской научно-практической конференции «Окружающая среда и здоровье» (Тернополь, 2008); XIV Межгородской конференции молодых учёных «Актуальные проблемы патофизиологии» (С.-Петербург, 2008); ХІІІ Международного медицинского конгресса студентов и молодых учёных (Тернополь, 2009); Всеукраинской научно-практической конференции «Вестник учёного-2009» (Николаев, 2009), а также на заседаниях Луганских областных обществ микробиологов и патофизиологов в 2006-2009 гг.
Публикации. По материалам диссертации напечатаны: 4 научных статьи в журналах и сборниках, отвечающих требованиям Высшей аттестационной комиссии Украины и опубликованных согласно требованиям, изложенным в пункте 13 Постановления Высшей аттестационной комиссии Украины от 15 января 2003 г. За № 7-05/1, и 3 тезисов

Список литературы

ВЫВОДЫ

В диссертации представлено теоретическое обоснование роли структурных компонентов бактерий (ПГН, ТК Staphylococcus aureus и Escherichia coli) в стимуляции апоптоза и метаболических нарушений нейтрофилов, Т-хелперов/индукторов и цитотоксических Т-супрессоров периферической крови здоровых людей in vitro, и доказана зависимость этой роли от вида иммунокомпетентных клеток, а также от концентрации и времени контакта клеток со структурными компонентами бактерий.
1. Структурные компоненты бактерий ПГН, ТК Staphylococcus aureus и ЛПС Escherichia coli в действующих концентрациях 10 и 100 мкг/мл и при экспозиции до 24 ч in vitro стимулируют апоптоз нейтрофилов Т-хелперов/индукторов и цитотоксических Т-супрессоров, что проявляется увеличением количества клеток с морфологическими признаками апоптоза, а также количества клеток с маркерами апоптоза CD38 и CD95. Апоптозстимулирующее действие структурных компонентов бактерий является дозо-, время- и видозависимым. С увеличением действующей концентрации ПГН, ТК и ЛПС, а также продолжительности их контакта с клетками-мишенями количество апоптирующих клеток увеличивается. Наибольшим апоптогенным потенциалом обладают ПГН Staphylococcus aureus и ЛПС Escherichia coli, наименьшим ТК Staphylococcus aureus. Наиболее чувствительны к апоптогенному действию ПГН, ТК и ЛПС Т-хелперы/индукторы, умеренно чувствительны нейтрофилы, наименее чувствительны цитотоксические Т-супрессоры периферической крови человека.
2. ТК, ПГН и ЛПС бактерий при контакте с нейтрофилами, CD4+- и CD8+-лимфоцитами in vitro изменяют внутриклеточное содержание цАМФ, цГМФ и их баланс. Нейтрофилы и CD4+-лимфоциты при контакте с ТК, ПГН и ЛПС реагируют увеличением содержания цАМФ и снижением цГМФ, тогда как в CD8+-лимфоцитах увеличение цГМФ преобладает над увеличением цАМФ. Влияние ТК, ПГН и ЛПС на систему циклических нуклеотидов нейтрофилов, CD4+- и CD8+-лимфоцитов является видо-, дозо- и времязависимым.
3. ТК, ПГН и ЛПС при контакте с нейтрофилами, CD4+- и CD8+-лимфоцитами снижают ЭЗ этих клеток за счёт уменьшения внутриклеточного содержания АТФ и увеличения АДФ и АМФ. Влияние ТК, ПГН и ЛПС на систему адениловых нуклеотидов нейтрофилов, CD4+- и CD8+- лимфоцитов является видо-, дозо- и времязависимым: с увеличением концентрации и времени взаимодействия структурных компонентов бактерий с клетками-мишенями, в последних изменения в системе адениловых нуклеотидов усиливаются. Потенциал влияния на систему адениловых нуклеотидов у ПГН и ЛПС выше такового у ТК. Наибольшее снижение ЭЗ под влиянием ТК, ПГН и ЛПС развивается в CD4+-лимфоцитах, наименьшее в нейтрофилах.
4. ТК, ПГН и ЛПС при контакте с нейтрофилами, CD4+- и CD8+-лимфоцитами человека in vitro активируют в них ПОЛ и снижают активность каталазы и СОД. Прооксидантное действие структурных компонентов бактерий является видо-, дозо- и времязависимым. Прооксидантное действие наиболее выражено у ЛПС и ПГН, и наименее выражено у ТК. С увеличением действующей концентрации ТК, ПГН и ЛПС и времени их контакта с нейтрофилами, CD4+- и CD8+-лимфоцитами нарушения процессов ПОЛ и активности ферментов системы АОЗ в этих клетках усиливаются. Наибольшей чувствительностью к прооксидантному действию ТК, ПГН и ЛПС обладают CD4+-лимфоциты, наименьшей CD8+-лимфоциты.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. С целью уменьшения степени выраженности апоптоза и метаболических нарушений в нейтрофилах, Т-хелперах/индукторах и цитотоксических Т-супрессорах периферической крови человека при их непосредственном контакте с ПГН, ТК и ЛПС следует сокращать длительность контакта иммунокомпетентных клеток с указанными эндотоксинами, а также снижать действующую концентрацию последних.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ПЕРВОИСТОЧНИКОВ

1. Апоптоз нейтрофилов как параметр воспалительной реакции при патологии различного генеза / А.В. Пасечник, В.А. Фролов, Н.Г. Гвоздь [и др.] // Вестник Российского университета дружбы народов. 2004. № 1. С. 103-105.
2. Апоптозіндукуюча активність пептидогліканів облігатно анаеробних грампозитивних збудників гнійно-запальних захворювань гінекологічного профілю / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, С.В. Бірюкова [та ін.] // Галицькиактивність пептидогліканів та тейхоєвих кислот грампозитивних збудників гнійно-запальних захворювань у хірургічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов [та ін.] // Вестник гигиены и эпидемиологии. 2001. Т. 5, № 1. С. 70-73.
4. Апоптозіндукуюча активність тейхоєвих кислот збудників гнійно-запальних захворювань у гінекологічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Н.К. Казимірко [та ін.] // Український медичний альманах. 2000. № 5. С. 174-176.
5. Барышников А.Ю. Программированная клеточная смерть (апоптоз) / А.Ю. Барышников, Ю.В. Шишкин // Российский онкологический журнал. 1996. № 1. С. 58-60.
6. Белушкина Н.Н. Молекулярные основы апоптоза / Н.Н. Белушкина, Алм Хасан Хамад, С.Е. Северин // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 1998. № 4. С. 15-23.
7. Биохимия и иммунология микробных полисахаридов / Н.В. Васильев, Н.Б. Луцюк, Г.К. Палий, О.В. Смирнова. Томск: Издательство Томского университета, 1984. 304 с.
8. Бондаренко В.М. Определение эндотоксина грамотрицательных бактерий в крови человека / В.М. Бондаренко, В.Г. Лиходед, М.Ю. Яковлев // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2002. № 2. С. 83-89.
9. Винокуров М.Г. Действие липополисахаридов и УФ-облучения диапазона С на регуляцию апоптоза нейтрофилов человека / М.Г. Винокуров, И.Р. Прохоренко, М.М. Юринская // Иммунология. 2001. № 2. С. 25-27.
10. Вітріщак С.В. Вплив пептидогліканів на функціональну активність моноцитів в експерименті: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец. 14.03.04 «Патологічна фізіологія» / С.В. Вітріщак. Одеса, 2002. 16 с.
11. Владимирская Е.Б. Механизмы апоптотической смерти клеток / Е.Б. Владимирская // Гематология и трансфузиология. 2002. № 2. С. 35-40.
12. Воробьёв А.А. Липополисахариды грамотрицательных вирулентных бактерий и их роль в инфекции и иммунитете / А.А. Воробьёв, Е.В. Борисова, В.А. Борисов // Вестник Российской академии медицинских наук. 1997. № 3. С. 10-13.
13. Вплив збудників гнійно-запальних захворювань хірургічного профілю на систему циклічних нуклеотидів в імуноцитах / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов [та ін.] // Буковинський медичний вісник. 2001. № 2. С. 59-61.
14. Вплив ліпополісахаридів етіологічних агентів неонатального сепсису на фагоцитарну активність моноцитів in vitro / Н.Б. Пількевич, В.В. Флегонтова, І.С. Гайдаш [та ін.] // Здобутки клінічної та експериментальної медицини. 2006. № 1. С. 116-118.
15. Гайдаш И.С. Влияние пептидогликанов и липополисахаридов условно-патогенных бактерий на апоптоз нейтрофилов in vitro / И.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, И.В. Стериони // Український медичний альманах. 2004. № 6. С. 195-197.
16. Гайдаш І.С. Апоптозіндукуюча активність ліпополісахаридів збудників гнійно-запальних захворювань у хірургічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов // Вісник морської медицини. 2000. № 3. С. 24-28.
17. Гайдаш І.С. Апоптозіндукуюча активність пептидогліканів та тейхоєвих кислот грампозитивних збудників гнійно-запальних захворювань у хірургічних хворих / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, Є.В. Суглобов, О.М. Салманова // Вестник гигиены и эпидемиологии. 2001. № 1. - С. 70-73.
18. Гайдаш І.С. Склад умовно-патогенних бактерій збудників гнійно-запальних захворювань жіночих статевих органів та їхній вплив на апоптоз моноцитів та нейтрофілів / І.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова, С.В. Вітріщак, А.В. Флегонтова // Вісник асоціації акушерів-гінекологів України. 2000. № 4. С. 33-37.
19. Гебеш В.В. Цитокінова теорія патогенезу інфекцій і принципи лікування хворих / В.В. Гебеш // Інфекційні хвороби. 1998. № 1. С. 29-32.
20. Гюлазян Н.М. Влияние клинического течения сальмонеллёзной инфекции в периоде ранней реконвалесценции на эндотоксининдуцированный апоптоз клеток периферической крови / Н.М. Гюлазян // Клиническая лабораторная диагностика. 2007. № 4. С. 22-24.
21. Експресія молекул CD95 на поверхні моноцитів і лімфоцитів іn vitro під впливом ліпополісахаридів збудників хронічних синуситів, отитів і тонзилітів / Н. Казімірко, І. Шумова, Н. Петруня [та ін.] // Вісник Львівського університету. Серія біологічна. 2008. Випуск 46. С. 54-58.
22. Ершов Ф.И. Эра цитокинов или язык клеток / Ф.И. Ершов // Вестник Российской академии естественных наук. 2002. № 3. С. 24-26.
23. Зак К.П. Большие гранулосодержащие лимфоциты в патологии / К.П. Зак, Л.П. Киндзельский, А.К. Бутенко. К.: Наукова думка, 1992. 164 с.
24. Злакоманова О.Н. Цитокинопосредованная дисфункция локомоторной активности фагоцитов и ее коррекция у детей с травматической болезнью: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня доктора мед. наук: спец. 14.00.36 «Алергологія та імунологія» та 14.00.35 «Дитяча хірургія» / О.Н. Злакоманова. Челябінськ, 2008. 32 с.
25. Иванов Ю.И. Статистическая обработка результатов медико-биологических исследований на микрокалькуляторах по программам / Ю.И. Иванов, О.Н. Погорелюк. М.: Медицина, 1990. 220 с.
26. Иммунология апоптоза и некроза / С.Я. Проскуряков, В.Л. Габай, А.Г. Коноплянников [и др.] // Биохимия. 2005. Выпуск 12. С. 1593-1605.
27. Исаченко Е.Г. Спонтанный и липополисахаридиндуцированный синтез цитокинов клетками крови человека в норме и при аллергопатиях / Е.Г. Исаченко, Т.И. Виткина, С.А. Геронина // Иммунология. 1999. № 5. С. 37-39.
28. Казимирко Н.К. Влияние пептидогликанов бактерий на продукцию медиаторов эпителиоцитами влагалища и опухолевыми клетками HeLa / Н.К. Казимирко, Т.В. Левченко // Український медичний альманах. 2005. № 4. С. 116-119.
29. Казімірко Н.К. Апоптозіндукуюча активність ліпополісахариду Neisseria meningitidis / Н.К. Казімірко, О.В. Рубан, С.В. Вітріщак // Український медичний альманах. 2000. № 5. С. 82-83.
30. Карсонова М.И. Изучение способности моноцитов периферической крови человека расщеплять пептидогликаны клеточной стенки бактерий с образованием глюкозаминилмурамилолигопептидных фрагментов / М.И. Карсонова, В.Л. Львов, Д.В. Мазуров, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2001. № 3. С. 21-23.
31. Ковальчук Л.В. Новые иммунопатогенетические взгляды: апоптотические иммунодефициты / Л.В. Ковальчук, А.Н. Чередеев // Иммунология. 1999. № 6. С. 17-18.
32. Козлов В.К. Сепсис: иммунопатогенез тяжёлого сепсиса / В.К. Козлов // Клінічна імунологія, алергологія, інфектологія. 2009. № 1-2. С. 17-24.
33. Колесникова Н.В. Влияние миелопептида-3 на экспрессию молекул СD11B, CD16 и CD95 нейтрофильными гранулоцитами у детей, больных гнойно-септическими заболеваниями / Н.В. Колесникова, И.В. Нестерова, Г.А. Чудилова, В.А. Тараканов // Иммунология. 1999. № 3. С. 41-43.
34. Коновалов А. Экспрессия молекул CD95 на поверхности нейтрофилов под влиянием структурных компонентов и токсинов бактерий in vitro / А. Коновалов, И. Стериони, Е. Копельян // Матеріали XI Ювілейного міжнародного медичного конгресу студентів і молодих вчених, присвяченому 50-річчю заснування Тернопільського державного медичного університету імені І.Я. Горбачевського. Тернопіль. 2007. С. 214.
35. Коновалов А.Ю. Влияние липополисахаридов на экспрессию молекул CD95 на поверхности моноцитов in vitro / А.Ю. Коновалов, И.В. Стериони // Материалы Межгородской конференции молодых учёных «Актуальные проблемы патофизиологии». С.-Петербург, 2007. С. 68-70.
36. Коновалов А.Ю. Влияние тейхоевых кислот возбудителей хронических тонзиллитов и синуситов на секреторную активность моноцитов in vitro / А.Ю. Коновалов, Н.К. Казимирко // Світ медицини та біології. 2007. № 1. С. 9-11.
37. Коновалов А.Ю. Вплив препарату «Амізон» на фагоцитарну активність, процеси перекисного окиснення ліпідів, систему антиокислювального захисту нейтрофілів і моноцитів хворих на хронічні отити, тонзиліти та синусити / А.Ю. Коновалов // Український медичний альманах. 2007. № 2. С. 80-81.
38. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лабораторное дело. 1988. № 1. С. 16-19.
39. Косенко Ю.В. Влияние липополисахаридов бактерий этиологических агентов хронического пародонтита у беременных на секреторную активность моноцитов и лимфоцитов in vitro / Ю.В. Косенко // Український медичний альманах. 2005. № 6. С. 199-202.
40. Косенко Ю.В. Влияние липополисахаридов бактерий на апоптоз моноцитов / Ю.В. Косенко // Український медичний альманах. 2004. № 6. С. 66-68.
41. Косенко Ю.В. Влияние липополисахаридов этиологических агентов хронического пародонтита на фагоцитарную активность моноцитов / Ю.В. Косенко // Український медичний альманах. 2005. № 5. С. 66-68.
42. Косенко Ю.В. Вплив ліпополісахаридів етіологічних агентів хронічного пародонтиту на фагоцитарну активність моноцитів in vitro / Ю.В. Косенко, Перфільєва М.Ю. // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2006. № 1. С. 16-19.
43. Коэкспрессия антигена СD34 ранних гемопоэтических предшественников и антигена FAS/APO-1 (CD95), опосредующего апоптоз / А.Ю. Барышников, Т.Н. Заботина, Н.П. Седяхина [и др.] // Экспериментальная онкология. 1994. № 4-6. С. 343-345.
44. Кульшин В.А. Улучшенный метод выделения липополисахаридов из грамотрицательных бактерий / В.А. Кульшин, А.А. Яковлев, С.Н. Авиева // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1987. № 5. С. 44-46.
45. Лапач С.Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Excel / С.Н. Лапач, А.В. Чубанко, П.Н. Бабич. К.: Морион, 2000. 320 с.
46. Левченко Т.В. Роль структурных компонентов бактерий в нарушении продукции медиаторов опухолевыми клетками HeLa, эпителиоцитами влагалища, моноцитами и лимфоцитами периферической крови in vitro: дис. кандидата мед. наук: 14.03.04 / Левченко Тетяна Володимирівна. Луганськ, 2008. 163 с.
47. Лушников Е.Ф. Гибель клетки (апоптоз) / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов. М.: Медицина, 2001. С. 189-191.
48. Мазуров Д.В. Изучение способности моноцитов периферической крови человека расщеплять пептидогликаны клеточной стенки бактерий с образованием глюкозаминилмурамилолигопептидных фрагментов / Д.В. Мазуров, В.Л. Львов, М.И. Карсонова // Иммунология. 2001. № 3. С. 21-23.
49. Малов В.А. Эволюция взгляда на роль бактериальных липополисахаридов в патологии человека / В.А. Малов, С.Г. Пак // Вестник Российской академии медицинских наук. 1997. № 8. С. 33-38.
50. Маянский А.Н. Апоптоз нейтрофилов / А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.И. Заславская // Иммунология. 1999. № 6. С. 11-20.
51. Маянский А.Н. Апоптоз: начало будущего / А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.А. Абаджиди, М.И. Заславская // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1997. № 2. С. 88-94.
52. Маянский Н.А. Каспазонезависимый механизм апоптоза нейтрофилов: апоптогенный эффект туморнекротического фактора / Н.А. Маянский // Иммунология. 2002. № 1. С. 15-17.
53. Маянский Н.А. Состояние каспазы-3 при подавлении апоптоза нейтрофилов гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором / Н.А. Маянский // Иммунология. 2001. № 2. С. 22-25.
54. Минцер О.П. Методы обработки медицинской информации / Минцер О.П., Угаров Б.Н., Власов В.В.. К.: Вища школа, 1991. 271 с.
55. Миргородская А.В. Влияние in vitro тейхоевых кислот, пептидогликанов и липополисахаридов на метаболическую активность и апоптоз нейтрофилов и моноцитов // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2007. № 5. С. 30-36.
56. Миргородская А.В. Влияние пептидогликанов и липополисахаридов бактерий на апоптоз нейтрофилов in vitro / А.В. Миргородская // Український журнал екстремальної медицини ім. Г.О. Можаєва. 2008. № 2. С. 86-89.
57. Миргородська Г.В. Вплив пептидогліканів та ліпополісахаридів на функціональну активність та метаболічний статус моноцитів крові людини / Г.В. Миргородська // Український журнал клінічної та лабораторної медицини. 2008. № 2. С. 61-65.
58. Моисеева Е.Г. Метаболический гомеостаз и иммунная реактивность организма в динамике воспаления в тканях пародонта (экспериментальное исследование): автореф. дис. на соискание учёной степени доктора мед. наук: спец: 14.00.16 «Патологическая физиология» / Е.Г. Моисеева. М., 2008. 32 с.
59. Мурашко Н.К. Апоптоз нейтрофілів у хворих з гіпертензивною енцефалопатією / Н.К. Мурашко // Український медичний часопис. 2008. № 5. С. 132-134.
60. Новожилова А.П. Программированная клеточная гибель / А.П. Новожилова, Н.Н. Плужников, В.С. Новиков. СПб.: Наука, 1996. 276 с.
61. Погорелов В.М. Морфология апоптоза при нормальном и патологическом гемопоэзе / В.М. Погорелов, Г.И. Козинец // Гематология и трансфузиология. 1995. Т. 40, № 5. С. 21-25.
62. Потапнев М.П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами / М.П. Потапнев // Иммунология. 2002. № 4. С. 237-243.
63. Регуляция апоптоза нейтрофилов как параметра патологии различного генеза / Е.Г. Моисеева, А.В. Пасечник, В.А. Фролов [и др.] // Вестник Российского университета дружбы народов. 2006. № 3. С. 111-113.
64. Роль системы циклических нуклеотидов в иммунорегуляторных процессах и методические подходы к её изучению при оценке иммунного статуса человека / А.В. Бирюков, М.А. Стенина, А.Ю. Скрипник [и др.] // Лабораторное дело. 1985. № 1. С. 29-35.
65. Рубан Т.В. Апоптозіндукуюча активність ліпополісахаридів збудників гнійно-запальних захворювань у хірургічних хворих / Т.В. Рубан, О.М. Салманова, Є.І. Потьомкін // Збірник наукових праць Актуальні проблеми акушерства і гінекології, клінічної імунології та медичної генетики”. К.-Луганськ, 2001. С. 161-166.
66. Салманова О.Н. Влияние глутаргина на функциональную активность естественных киллеров, обработанных пептидогликанами, тейхоевыми кислотами и липополисахаридами / О.Н. Салманова // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2006. № 2. С. 53-63.
67. Салманова О.Н. Влияние пептидогликанов, тейхоевых кислот и липополисахаридов на функциональную активность естественных киллеров / О.Н. Салманова // Український медичний альманах. 2006. № 3. С. 123-125.
68. Секреція інтерлейкінів-1β та -6 моноцитами in vitro при експериментальному сепсисі / М.Ф. Даценко, Є.В. Суглобов, О.М. Салманова // Український журнал екстремальної медицини ім. Г.О. Можаєва. 2001. № 3. С. 71-73.
69. Спивак Н.Я. Сепсис: иммунология и иммунокоррекция / Н.Я. Спивак, С.М. Белоцкий, В.А. Карлов. К.: Фитосоциоцентр, 2007. 304 с.
70. Стальная И.Д. Метод определения диеновой конъюгации ненасыщенных высших жирных кислот / И.Д. Стальная // Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 63-64.
71. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная, Т.Г. Гаришвили // Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. С. 66-68.
72. Стериони И.В. Влияние in vitro пептидогликанов и липополисахаридов условно-патогенных бактерий на экспрессию молекул СD38 и CD95 на поверхности нейтрофилов / И.В. Стериони, А.Ю. Коновалов // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2006. № 2, додаток А. С. 50-52.
73. Стериони И.В. Влияние липополисахаридов и пептидогликанов бактерий на значение индекса апоптоза и экспонирование рецепторов CD95 и СD38 нейтрофилами и моноцитами in vitro / И.В. Стериони, В.Л. Русалов, С.А. Белокобыльский [и др.] // Материалы Всеукраинской научно-практической конференции «Вестник учёного-2009». Николаев. 2009. С. 25-26.
74. Стериони И.В. Влияние липополисахаридов и пептидогликанов на систему циклических нуклеотидов нейтрофилов и моноцитов in vitro / И.В. Стериони // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2008. № 1. С. 60-65.
75. Стериони И.В. Экспрессия молекул CD95 на поверхности нейтрофилов под влиянием структурных компонентов и токсинов условно-патогенных бактерий in vitro / И.В. Стериони // Український медичний альманах. 2005. № 2. С. 141-143.
76. Татаров С.В. Влияние пептидогликанов и тейхоевых кислот этиологических агентов хронического остеомиелита на систему циклических нуклеотидов и фагоцитарную активность моноцитов in vitro / С.В. Татаров // Український медичний альманах. 2003. № 6. С. 215-218.
77. Татаров С.В. Влияние пептидогликанов стрептококков на продукцию моноцитами фактора некроза опухоли-α / С.В. Татаров // Український медичний альманах. 2002. № 5. С. 143-145.
78. Татаров С.В. Механизмы влияния компонентов этиологических агентов хронического остеомиелита на функциональную активность моноцитов in vitro: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец. 14.00.16 «Патологічна фізіологія» / С.В. Татаров. Ростов-на-Дону, 2004. 16 с.
79. Уманский С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы / С.Р. Уманский // Молекулярная биология. 1996. Выпуск 3. С. 487-502.
80. Урбах В.Ю. Математическая статистика для биологов и медиков / В.Ю. Урбах. М.: АН СССР, 1975. 232 с.
81. Утешев Д.Б. Апоптоз: фармакологические аспекты / Д.Б. Утешев, А.В. Сергеев, Б.С. Утешев // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1998. Т. 61, № 4. С. 57-65.
82. Флегонтова В.В. Механизмы реализации иммуносупрессивных свойств условно-патогенных бактерий этиологических агентов гнойно-воспалительных заболеваний: дис. доктора мед. наук: 03.00.07 / Флегонтова Вероніка Валентинівна. Луганськ, 2004. 335 с.
83. Фомин В.В. Функциональное состояние фагоцитарного, гуморального, клеточного звеньев иммунитета при стрептококковой инфекции / В.В. Фомин, С. В. Пустынникова // Уральский медицинский журнал. − 2007. − № 3. − С. 532-533.
84. Хейфец Л.Б. Разделение форменных элементов крови человека в градиенте плотности верографин-фиколл / Л.Б. Хейфец, В.А. Абалакина // Лабораторное дело. 1973. № 10. С. 579-581.
85. Хома С.М. Вплив пептидоглікану золотавого стафілококу та ліпополісахариду палички синього гною на функціональну активність та метаболічний статус моноцитів і Т-лімфоцитів крові людини / С.М. Хома // Загальна патологія та патологічна фізіологія. 2007. № 1. С. 78-91.
86. Чивари С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения её в биологических материалах / С. Чивари, И. Чаба, И. Секей // Лабораторное дело. 1985. № 11. С. 16-18.
87. Шевченко М.Ю. Біологічна активність бактерійних ліпополісахаридів та роль цитокінів в розмноженні грамнегативних бактерій: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец. 03.00.07 «Мікробіологія» / М.Ю. Шевченко. Харків, 2003. 16 с.
88. Ярилин А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А.А. Ярилин // Иммунология. 1996. № 6. С. 10-21.
89. Ярилин А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме / А.А. Ярилин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1998. № 2. С. 38-48.
90. Alexander C. Bacterial lipopolysaccharide and innate immunity / С. Alexander, Е.Т. Rietschel // Journal of Endotoxin Research. 2001. № 7. P. 167-202.
91. Bailly S. Differential regulation of IL-6, IL-1α, IL-1β and TNF-α production in LPS-stimulated human monocytes: role of cyclic AMP / S. Bailly, B. Ferrua, M. Fay, M.A. Gougerot-Pocidalo // Cytokine. 2000. № 3. P. 205-210.
92. Boudaly S. Activation of dendritic cells by polymorphonuclear neutrophils / S. Boudaly // Frontiers in Bioscience. 2009. № 14. P. 1589-1595.
93. Cahit A. Molecular control of neutrophil apoptosis / А. Cahit, D.A. Moulding, S.W. Edwards // FEBS Letters. 2001. № 3. P. 318-322.
94. Cassatella M.A. The production of cytokines by polymorphonuclear neutrophils / M.A. Cassatella // Immunology Today. 1995. № 16. P. 21-26.
95. Cohn W.E. The separation of adenosine polyphosphates by ion exchange and paper chromatography / W.E. Cohn, C.E. Carter // Journal of American Chemical Society. 1950. - № 2 P. 4273-4275.
96. Comparative evaluation of apoptosis induced by Shiga toxin 1 and/or lipopolysaccharides in human monocytic and macrophage-like cells / L.M. Harrison, R.P. Cherla, C. van den Hoogen [et al.] // Microbial Pathogens. 2005. № 2-3. P. 63-76.
97. Dialyzable leukocyte extract differentially regulates the production of TNFalpha, IL-6, and IL-8 in bacterial component-activated leukocytes and endothelial cells / M.O. Ojeda, C. van't Veer, C.B. Fernandez Ortega [et al.] // Inflammation Research. 2005. № 2. P. 74-81.
98. Different sequence strains of Streptococcus agalactiae elicit various levels of cytokine production // M.A. De Francesco, F. Gargiulo, R. Negrini [et al.] // Immunological Investigations. 2008. № 8. P. 741-751.
99. Differential regulation of cytokine and chemokine production in lipopolysaccharide-induced tolerance and priming / O.M. Peck, D.L. Williams, K.F. Breuel [et al.] // Cytokine. 2004. № 5. P. 202-208.
100. Effect of vitamin C administration on neutrophil apoptosis in septic patients after abdominal surgery / I. Ferrón-Celma, A. Mansilla, L. Hassan [et al.] // Journal of Surgical Research. 2008. № 21. P. 23-29.
101. Foster T.J. Immune evasion by staphylococci / T.J. Foster // Natural Reviews in Microbiology. 2005. № 3. P. 948-958.
102. Francisella tularensis genes required for inhibition of the neutrophil respiratory burst and intramacrophage growth identified by random transposon mutagenesis of LVS // G.S. Schulert, R.L. McCaffrey, B.W. Buchan [et al.] // Infection and Immunity. 2009. № 2. P. 9-18.
103. Galanos C. A new method for the extraction of R-lipopolysaccharides / C. Galanos, O. Luderitz, O. Westphal // European Journal of Biochemistry. 1969. № 2. P.245-249.
104. Ginsburg I. Role of lipoteichoic acid in infection and inflammation / I. Ginsburg // Lancet Infectious Diseases. 2002. № 2. P. 171-179.
105. Haller D. Cytokine secretion by stimulated monocytes depends on the growth phase and heat treatment of bacteria: a comparative study between lactic acid bacteria and invasive pathogens / D. Haller, C. Bode, W.P. Hammes // Microbiology and Immunology. 2008. № 43. P. 925-935.
106. Highly purified lipoteichoic acid activates neutrophil granulocytes and delays their spontaneous apoptosis via CD14 and TLR2 / S. Lotz, I. Wilde, G. van Zandbergen [et al.] // Journal of Leukocyte Biology. 2004. № 75. P. 467-477.
107. IL-1β secretion induced by Aggregatibacter (Actinobacillus) actinomycetemcomitans is mainly caused by the leukotoxin / P. Kelk, R. Claesson, C. Chen [et al.] // International Journal of Medical Microbiology. 2008. № 5-6. P. 529-541.
108. Induction of cytokine production in human T cells and monocytes by highly purified lipoteichoic acid: involvement of Toll-like receptors and CD14 / E. Ellingsen, S. Morath, T. Flo [et al.] // Medical Science Monitoring. 2002. № 5. P. 149-156.
109. Inhibition of human neutrophil apoptosis by Paracoccidioides brasiliensis: role of interleukin-8 // M.J. Acorci, L.A. Dias-Melicio, M.A. Golim [et al.] // Scandina