АНАЛИЗ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ СРЕДСТВ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ОПТИМИЗАЦИИ БОЛЕУТОЛЯЮЩЕЙ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ТЕРАПИИ : АНАЛІЗ ФАРМАКОЛОГІЧНОЇ АКТИВНОСТІ ТА БЕЗПЕКИ НЕСТЕРОЇДНИХ ПРОТИЗАПАЛЬНИХ ЗАСОБІВ І ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ОБГРУНТУВАННЯ ОПТИМІЗАЦІЇ ЗНЕБОЛЮЮЧОЇ ТА ПРОТИЗАПАЛЬНОЇ ТЕРАПІЇ

Краткое описание

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ
ДНЕПРОПЕТРОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

На правах рукописи

ПОДПЛЕТНЯЯ Елена Анатольевна

УДК 615.212.3.035.1:616-009.7]092.9

АНАЛИЗ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И БЕЗОПАСНОСТИ НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ СРЕДСТВ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ОПТИМИЗАЦИИ БОЛЕУТОЛЯЮЩЕЙ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ТЕРАПИИ

14.03.05. фармакология (фарм. науки)
Диссертация на соискание ученой степени
доктора фармацевтических наук

Научный консультант:
доктор медицинских наук,
профессор В.И. МАМЧУР

Харьков 2008

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.7
ВВЕДЕНИЕ. ....8
ГЛАВА 1. Современные представления о фармакологической коррекции воспаления и боли (обзор литературы)...15
1.1. Фармакологический анализ НПВС, применяющихся при ревматоидных заболеваниях: терапевтические и побочные эффекты..15
1.2. Роль «непростагландиновых» механизмов, в том числе процессов перекисного окисления липидов, в реализации аналгетического и противовоспалительного эффектов НПВС.....29
1.3. Современные представления о механизме наиболее опасного эффекта НПВС гастродуденотоксичости....41
1.4. Хондротоксичные свойства НПВС и возможные пути их коррекции..58
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования..67
2.1. Объекты исследования...67
2.1.1. Характеристика животных, использованных в экспериментах..67
2.1.2. Препараты67
2.2. Токсикологические методы исследования...68
2.3. Метод исследования двигательно-исследовательской реакции, эмоциональной активности у крыс в тесте «открытое поле» и блиц-тестах...69
2.4. Биохимические методы анализа71
2.5. Гематологический анализ крови.......76
2.6. Способ моделирования адъювантного артрита.......77
2.7. Способ моделирования остеоартроза.......78
2.8. Методы макроскопического анализа строения суставов...78
2.9. Методика изучения противовоспалительной активности препаратов..78
2.10. Методика исследования анальгетических свойств препаратов...79
2.10.1. Методика изучения анальгетической активности препаратов
на модели электроболевого раздражения...79
2.10.2. Моделирование состояния острой боли..80
2.10.3. Методика исследования анальгетических свойств препаратов на
модели отдергивания хвоста (тепловая иммерсия)....80
2.10.4. Моделирование висцеральной боли (уксуснокислые корчи)..80
2.11. Исследование ульцерогенных свойств препаратов...81
2.12. Морфологические методы исследования...82
2.13. Методы изучения эмбриотоксичности и тератогенности препарата..83
2.14. Методы исследования иммуннотоксичности препаратов86
2.15. Методы проведения теоретических квантово-химических расчетов..88
2.16. Методы статистической обработки результатов......89
ГЛАВА 3. Влияние НПВС представителей разных групп, а также их комбинаций с антиоксидантами и хондропротекторами на болевую чувствительность животных и воспаление.....90
3.1. Аналгетическая активность НПВС и их рациональных комбинаций на модели электроболевого раздражения корня хвоста крыс.90
3.1.1. Центральный компонент аналгетического действия НПВС...90
3.1.2. Дозозависимая антиноцицептивная активность антиоксидантов.97
3.1.3. Рациональность одновременного применения НПВС с антиоксидантами, а также с хондропротекторами, в уменьшении болевой чувствительности у животных...101
3.2. Эффективность НПВС и их рациональных комбинаций, как болеутоляющих средств на модели уксуснокислых корчей у мышей...107
3.3. Противовоспалительная активность НПВС и исследуемых комбинаций на экспериментальных моделях с использованием разных флогогенов...109
ГЛАВА 4. Токсикологическая характеристика (острая и хроническая токсичность) комбинированного лекарственного средства, содержащего индометацин и тиотриазолин.118
4.1. Определение острой токсичности при внутрижелудочном введении препаратов мышам..118
4.2. Хроническая токсичность комбинированного лекарственного средства и препарата сравнения диклофенака натрия ....120
4.2.1. Общее наблюдение за животными..120
4.2.2. Влияние препаратов на эмоционально-поведенческую активность животных..122
4.2.2.1 Поведение животных в условиях «открытого поля»...122
4.2.2.2. Влияние индометацина, диклофенака, таблеток индометацина с тиотриазолином на продолжительность блиц-теста белых крыс...124
4.2.2.3 Исследование миорелаксантных свойств индометацина, диклофенака, таблеток индометацина с тиотриазолином. .125
4.2.3. Гематологический анализ крови..126
4.2.4. Влияние препарата на плод (эмбритоксичность) и развитие в постнатальном периоде (тератогенность).127
4.2.5. Иммунологические свойства препарата..132
4.2.6. Биохимический анализ крови и мочи при хроническом применении препарата..134
4.2.6.1. Биохимические показатели крови и мочи, свидетельствующие о влиянии препаратов на работу почек....134
4.2.6.2. Биохимические показатели крови и мочи, cвидетельствующие о влиянии препаратов на функционирование печени....137
4.2.6.3. Содержание в крови лактатдегидрогеназы (ЛДГ) при хроническом введении исследуемых препаратов141
4.2.6.4. Содержание в крови креатинкиназы (КК) при хроническом введении исследуемых препаратов142
4.2.6.5. Содержание в крови общего белка при хроническом введении исследуемых препаратов143
4.2.7. Влияние индометацина и его комбинации с тиотриазолином на состояние желудка...144
4.2.8. Влияние препарата на биоэлектрическую активность сердца..145
4.2.9. Анализ влияния препаратов на состояние тканей по результатам патоморфологического исследования...147
4.2.10. Оценка безопасности комбинации индометацина и тиотриазолина по влиянию на слизистую желудка в условиях голодания...162
ГЛАВА 5. Эффективность и безопасность НПВС и их комбинаций с антиоксидантами и хондропротекторами при лечении адъювантного артрита у крыс182
5.1. Влияние исследуемых препаратов на размеры суставов..183
5.2. Локомоторная и эмоциональная активность животных в ходе развития ревматоидного артрита и его лечения...185
5.3. Изменение болевого порога в ходе формирования артрита и его лечения.193
5.4. Гематологический анализ крови крыс, леченных исследуемым препаратом и препаратами сравнения...195
5.5. Биохимический анализ сыворотки крови и мочи (определение глюкозаминогликанов, серомукоида, сиаловых кислот, оксипролина).200
5.6. Морфологический анализ суставов при адъювантном артрите и его лечении.206
5.7. Состояние слизистой оболочки желудка при лечении артрита НПВС и комбинированными таблетками....234
5.8. Антиоксидантный статус и активность процессов перекисного окисления липидов в тканях животных с моделируемым адъювантным артритом249
ГЛАВА 6. Эффективность и безопасность НПВС и их комбинаций с антиоксидантами и хондропротекторами при лечении артроза у крыс.257
6.1. Влияние исследуемых препаратов на размеры суставов257
6.2. Локомоторная и эмоциональная активность животных в ходе развития артроза и его лечения..259
6.3. Изменение болевого порога в ходе формирования артроза и его лечения.262
6.4. Гематологический анализ крови крыс, леченных исследуемыми препаратоми 264
6.5. Биохимический анализ сыворотки крови и мочи (определение глюкозаминогликанов, серомукоида, сиаловых кислот, оксипролина и кальция)267
6.6. Морфологический анализ суставов при артрозе и его лечении.270
ГЛАВА 7. Теоретическое и экспериментальное обоснование рациональности сочетания индометацина и тиотриазолина в одной лекарственной форме...280
7.1. Исследование механизма синергичного действия НПВС и антиоксиданта при острой боли у крыс...280
7.2. Теоретическое исследование строения комплексов тиотриазолина с индометацином285
ГЛАВА 8. Анализ и обобщение результатов исследований...296

ВЫВОДЫ.347

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...350

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

цАМФ циклический аденозинмонофосфат
АсАТ, АлАТ аспартаттрансаминаза, аланинтрансаминаза
АФК активные формы кислорода
АПФ ангиотензин превращающий фермент
БА базисные препараты
γ-ГТ γ-глутамилтранспептидаза
ГАГ - глюкозаминогликаны
ГПО - глутатионпероксидаза
ЖКТ желудочно-кишечный тракт
ИЛ интерлейкины
КК креатинкиназа
ЛДГ лактатдегидрогеназа
ЛТ - лейкотриены
МУК монойодуксусная кислота
iNOS индуцибельная NO-синтаза
НПВС нестероидные противовоспалительные средства
ОА остеоартроз (остеоартрит)
ПОЛ перекисное окисление липидов
СРО свободнорадикальное окисление
МПО - миелопероксидаза
ПГ, ПГЕ1, ПГЕ2 простагландины
РА ревматоидный артрит
СОД супероксиддисмутаза
СОЭ скорость оседания эритроцитов
ФНО-α фактор некроза опухоли-α
ЦОГ циклооксигеназа
ЩФ щелочная фосфатаза
ЭБР электроболевое раздражение
ЯИ язвенный индекс

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Воспаление и боль являются наиболее частыми симптомами разнообразных заболеваний и представляют важную клиническую проблему. В связи с полиэтиологичностью и механизмами развития воспалительного процесса и болевого синдрома для лечения таких заболеваний и прежде всего ревматических применяются препараты разных фармакологических групп, среди которых особое место занимают средства симптоматической терапии нестероидные противовоспалительные средства (НПВС). Ревматоидный артрит (РА) является наиболее распространенной формой воспалительного заболевания суставов и поражает около 1% населения (в Украине 0,4%, в Европе и Северной Америке 12%). Ежегодная заболеваемость составляет около 0,02%, почти 90% пациентов с агрессивной формой болезни становятся нетрудоспособными и составляют 1520% от общего числа инвалидов (Коваленко В.М., 2007; Насонов Е.Л., 2008).
Актуальность проблемы обусловлена не только распространенностью заболеваний, которые сопровождаются этими синдромами, но и частотой побочных реакций, возникающих при применении противовоспалительных и анальгетических средств. Так, в нашей стране, по данным Государственного фармакологического центра МЗ Украины, в 2005 г. НПВС занимали пятое место в рейтинге фармакологических групп лекарственных средств (АТС-группа) по частоте зарегистрированных побочных реакций, а заболевания, которые служили основными показаниями для фармакотерапии (остеоартрит и ревматоидний артрит), которая и вызывала эти побочные реакции, соответственно шестую и восьмую позиции (Викторов А.П., 2006).Однако, несмотря на высокую частоту и тяжесть осложнений (Викторов А.П., 2008; Wallace J.L., 2008; Lanas A., 2008), НПВС продолжают оставаться распространенными лекарственными средствами, а индометацин один из самых мощных его представителей. Язвенные поражения желудочно-кишечного тракта (Свинцицкий А.С., Пузанова О.Г., 2004; Brune K., 2004), нефро- и гепатотоксичность (Пентюк А.А. и соавт., 2007; Mingatto F.E. et al., 2006) являются наиболее опасными осложнениями в терапии индометацином, кроме того применение препарата при ревматоидном артрите и остеоартрите ограничено его хондротоксичностью (Зупанец И.А. и соавт., 2008; Викторов А.П., 2008; Mastbergen S.C. et al., 2006).
Несмотря на многолетнюю историю применения в клинике, механизмы, определяющие терапевтическую эффективность и токсические реакции индометацина, до сих пор остаются не до конца раскрытыми. Ведущий механизм, определяющий как эффективность, так и токсичность НПВС, связан с подавлением активности циклооксигеназы (ЦОГ). Однако в противовоспалительном и анальгетическом действии препаратов этой группы немаловажную роль играет их способность нарушать синтез лейкотриенов, образование свободных радикалов, высвобождение лизосомальных ферментов, повышать стабильность клеточных мембран, то есть проявлять антиоксидантные свойства (Costa D., 2006, 2008; Santos F., 2008). Известно, что в патогенезе воспаления и боли процессы свободнорадикального окисления выполняют роль универсального механизма (Сутковой Д.А., 2000; Guedes R.P., 2008, Ibi M., 2008).
В связи с этим представляется возможным повысить качество противовоспалительной и анальгетической терапии индометацином с помощью перспективного отечественного антиоксиданта тиотриазолина, который обладает противовоспалительной и иммуномодулирующей активностью, улучшает микроциркуляцию, является сильным ингибитором перекисного окисления в тканях (Мазур И.А., 2007), усиливает процессы репаративной регенерации в костной ткани, позволяет снизить дозу НПВС на 50 % и добиться длительной ремиссии при ревматоидном артрите и остеоартрите (Глушак Ю.Н., 2003). Кроме того, известно, что интенсивность образования простагландинов, о чем свидетельствуют многочисленные данные литературы, меняется в зависимости от присутствия прооксидантов и антиоксидантов (Egger T., 2003; Sanchez-Moreno C., 2003; Wang T., 2004).
Связь работи з научными программами, планами, темами. Работа виповнялась согласно плану научно-исследовательских работ кафедры фармакологии и технологии лекарственных средств Днепропетровской государственной медицинской академии и является фрагментом НИР кафедры «Фармакологический анализ адаптивных функций мозга и его структурно-функциональной организации в условиях экспериментальной патологии ЦНС» (№ госрегистрации 0104U005740), «Экспертная оценка соотношения антициклооксигеназных и антиоксидантных свойств отечественных анальгетических средств (амизон, анальбен, пирадозол, бензофурокаин, винборон)» (№ госрегистрации 0103U004100), «Разработка системы методических подходов изучения в эксперименте селективности антициклооксигеназной активности отечественных и новых нестероидных противовоспалительных средств (НПВС)» (№ госрегистрации 0104U006269), хозрасчетная тема «Фармакологическая экспертиза (безопасность и специфическая фармакологическая активность) таблеток тиотриазолина с индометацином» (№ договора 5.12. 030/2005). Автор является соавтором этих тем.
Целью исследований было создание эффективного и безопасного противовоспалительного и анальгетического средства путем снижения дозы индометацина и сочетания с антиоксидантом тиотриазолином и установление его лечебных свойств при патологических состояниях, сопровождающихся воспалением и болевым синдромом.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задания исследования:
1. С помощью скрининговых методов провести анализ противовоспалительной и антиноцицептивной активности разных комбинаций индометацина и диклофенака натрия с антиоксидантами и хондропротектором, а также параллельно исследовать современные представители группы НПВС.
2. Исследовать острую токсичность комбинации индометацина и тиотриазолина
3. Изучить хроническую токсичность таблеток «Индотрил» в сравнении с «золотым стандартом» противовоспалительной терапии диклофенаком натрием.
4. Определить влияние комбинированного препарата на состояние слизистой оболочки желудка крыс.
5. Установить фармакологическую активность и безопасность таблеток «Индотрил» и провести сравнительный анализ с другими противовоспалительными и анальгетическими средствами в условиях адъювантного артрита.
6. Выяснить влияние таблеток «Индотрил», как средства для симптоматического и патогенетического лечения, на развитие артроза у животных.
7. Обосновать целесообразность создания фиксированного комбинированного препарата индометацина с тиотриазолином.
Объект исследования: фармакологическая эффективность и безопасность препарата «Индотрил» и классических и новых представителей группы НПВС в адекватных модельных системах..
Предмет исследования. 1. Нестероидные противовоспалительные средства индометацин, диклофенак натрий, нимесулид, целекоксиб, лорноксикам; антиоксиданты тиотриазолин, кверцетин; хондропротектор хондроитин сульфат с глюкозамина гидрохлоридом.
2. Комбинированный препарат таблетки «Индотрил».
Научная новизна полученных результатов заключается в том, что впервые в экспериментальных условиях исследован спектр фармакодинамики и безопасности комбинированного средства «Индотрил»
На основе скрининговых исследований установлено, что комбинация индометацина в дозе, равной ½ от оптимальной терапевтической, и отечественного антиоксиданта тиотриазолина в соотношении 1:3 обладает значительным противовоспалитеьным и антиноцицептивным действием, что было подтверждено на разных моделях асептического воспаления, висцеральной и соматической боли. Проведен сравнительный анализ специфической активности с другими препаратами - НПВС разных химических групп (нимесулид, лорноксикам, целекоксиб, диклофенак натрий), а также новыми комбинированными средствами, включающими в себя НПВС, антиоксиданты (тиотриазолин, кверцетин) и хондропротекторы (глюкозамина гидрохлорид, хондроитин сульфат).
Установлено, что гастро-, гепато-, нефро-, хондротоксичность у препарата «Индотрил» значительно ниже, чем у индометацина и диклофенака натрия.
Впервые установлены высокая эффективность и низкий уровень опасности комбинации индометацина и тиотриазолина при лечении адъювантного артрита и артроза у крыс. Исследовано влияние препарата «Индотрил», нимесулида, лорноксикама, целекоксиба, диклофенака натрия и комбинаций НПВС с антиоксидантами и хондропротекторами на состояние тканей сустава. В отличие от индометацина, обладающего хондротоксичным действием, исследуемый комбинированный препарат способстует сохранению глюкозаминогликанов и коллагена в хрящевой ткани, целостности суставной поверхности.
Научная новизна подтверждена патентами на изобретение: "Нестероїдний протизапальний анальгетичний засіб" (Патент Украины № 76677) и Нестероидное противовоспалительное анальгетическое средство ” (Патент России № 2303450).
Практическое значение полученных результатов. На основе фармакологических и токсикологических исследований препарата «Индотрил» доказана его низкая токсичность и эффективность при лечении воспалительных заболеваний суставов, что позволяет расширить арсенал современных противовоспалительных и анальгетических средств.
Результаты проведенных исследований внедрены в научно-педагогическую деятельность кафедр фармакологии Национального медицинского университета, Луганского государственного медицинского університету, Крымского государственного медицинского университета им.С.И.Георгиевского, Тернопольского государственного медицинского университета им. И.Я.Горбачевского, Винницкого национального медицинского университета им. М.И.Пирогова.
Препарат «Индотрил» (содержит индометацин 0,015 г и тиотриазолин 0,045 г) в виде таблеток разрешен к клиническому применению. На сегодня закончена вторая фаза клинических исследований препарата Индотрил” для фармакологической коррекции заболеваний суставов.
Личный вклад диссертанта. Диссертация является самостоятельной завершенной научной работой. При участии консультанта выбрано направление, сформулированы цели и задачи и проведено планирование и подбор методических приемов. Автором был осуществлен патентно-информационный поиск и обобщен мировой опыт ученых по теме диссертации, проведены экспериментальные исследования, статистическая обработка данных, анализ и систематизация полученных результатов, сформулированы выводы работы и практические рекомендации. В научных публикациях, опубликованных в соавторстве, автором приведены результаты собственных экспериментальных исследований.
Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертационной работы были представлены на 2-ом Российском конгрессе по патофизиологии с международным участием «Патофизиология органов и систем, типовые патологические процессы» (Россия, г.Москва, 2000), европейском конгрессе по лечению острой, хронической и раковой боли (Швейцария, г.Лугано, 2001), 2-м международном конгрессе международного института боли (Турция, г. Стамбул, 2001), международной научно-практической конференции «Динамика научных исследований» (г.Днепропетровск, 2002), международной научно-практической конференции «Наука і освіта» (г.Днепропетровск, 2003), международной научно-практической конференции «Дні науки» (г.Днепропетровск, 2006), международном товариществе клиницистов по проблемам боли (Италия, Сардиния, 2002), 2-м съезде российского научного товарищества фармакологов «Фундаментальные проблеммы фармакологии» (Россия, г. Москва, 2003), Х-м российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Россия, г. Москва, 2003), 4-м конгрессе Европейськой федерации IASP «Pain in Europe» (Чехия, г.Прага, 2003), IV Украинской научно-практичной конференции с с международным участием по клинической фармакологии «Актуальні питання фармакології» (г.Винница, 2004), ІХ и ХІ Международных конгрессах студентов и молодых ученых (г.Тернополь, 2005, 2007), конференции Украинского товарищества нейронаук (г.Донецьк, 2005), VI Национальном съезде фармацевтов Украины (г. Харьков, 2005), ІІІ Национальном съезде фармакологов Украины «Фармакологія 2006 крок у майбутнє» (г.Одеса, 2006), III съезд фармакологов России «Фармакология практическому здравоохранению» (г.Санкт-Петербург, 2007), IV Международной научной конференции студентов и молодых ученых (г.Винница¸2007), Всеукраинскому конгрессе «Сьогодення та майбутнє фармації» (м.Харків, 2008).
Публикации. По теме диссертации опубликовано: 48 научных работ, из них 19 статей в центральных научных журналах, 26 тезисов, 2 патента на изобретение, 1 декларационный патент.

Структура и объем диссертации. Диссертация представлена на 404 страницах машинописного текста и состоит из обзора литературы, описания материалов и методов исследования, анализа результатов исследований, выводов, списка использованной литературы. Работа содержит 181 рисунок, 52 таблицы, 7 схем. Библиография включает 468 источник информации, из них 120 с кириллической и 348 с латинской графикой.

Список литературы

ВЫВОДЫ

В диссертации приведены теоретические обобщения данных о применении антиоксидантов в комплексной терапии воспалительных и болевых синдромов вместе с НПВС, и предложены новые подходы к решению проблемы снижения токсичности и повышения эффективности симптоматической терапии воспалительных заболеваний суставов путем создания нового комбинированного средства.
1. Тиотриазолин проявляет противовоспалительное и антиноцицептивное действие, обнаруживаемое при воздействии разных этиологических факторов. Объединение этого антиоксиданта в дозе 15 мг/кг с подпороговой дозой индометацина в дозе 5 мг/кг ускоряет наступление эффекта и значительно повышает порог болевого реагирования, воздействуя преимущественно на центральные механизмы развития болевой реакции. Такая комбинация не уступает по эффективности другим исследованным лекарственным средствам, которые можно расположить в следующий ряд в порядке снижения антиноцицептивной активности: индометацин (5 мг/кг)+тиотриазолин (15 мг/кг) > нимесулид (80 мг/кг) > лорноксикам (0,3 мг/кг) > диклофенак (10 мг/кг) > диклофенак натрий (5 мг/кг)+тиотриазолин (15 мг/кг) > индометацин (5 мг/кг)+кверцетин (2,5 мг/кг) > индометацин (10 мг/кг) > диклофенак натрий (5 мг/кг)+кверцетин (2,5 мг/кг) > индометацин(5 мг/кг)+хондроитин сульфат с глюкозамина гидрохлоридом (500 мг/кг по хондроитину) ≥ диклофенак натрий (5 мг/кг)+хондроитин сульфат с глюкозамина гидрохлоридом (500 мг/кг по хондроитину) > целекоксиб (50 мг/кг).
2. Комбинированное лекарственное средство таблетки «Индотрил» превосходит другие исследованные НПВС и их комбинации с антиоксидантами и хондропротектором по противовоспалительной активности в условиях экссудативного воспаления с использованием различных флогогенов благодаря синергичному действию компонентов: мощного антициклооксигеназного эффекта индометацина и антиоксидантному, мембраностабилизирующему, противоишемичному и противовоспалительному действию тиотриазолина.
3. Тиотриазолин позволяет снизить токсичность индометацина (LD50 163,5±17,5 мг/кг) при комбинированном использовании индометацина с тиотриазолином в соотношении 1:3 (LD50 766,5±15,2 мг/кг по индометацину) в 4,7 раз.
4. Хроническое введение (30 дней) таблеток «Индотрил» показало слабое влияния препарата на функционирование желудка, печени, почек и других органов в отличие от индометацина и диклофенака натрия. Комбинированное средство в 2-3 раза меньше, чем индометацин, влияет на повышение трансаминазной активности, не вызывает развития признаков холестаза, обладает слабым воздействием на механизмы реабсорбции и секреции, но не на ткань гломерулярного аппарата и почечных канальцев, по гастротоксичности в 4 и 3,7 раз уступает индометацину и диклофенаку натрию соответственно.
5. Препарат «Индотрил» не влияет на факторы неспецифического иммунитета в отличие от индометацина, который уменьшает абсолютное число как лейкоцитов так и лимфоцитов и снижает фагоцитарную и бактерицидную активности макрофагов. Также исследуемый препарат не влияет на биоэлектрическую активность сердца и не обладает эмбрио- и тератогенным действием.
6. Исследуемый комбинированный препарат является эффективным симптоматическим и патогенетическим средством для лечения воспалительных заболеваний суставов. Тиотриазолин препятствует развитию деструктивных изменений в хряще, вызванных индометацином в ходе лечения адъювантного артрита и артроза у животных, что подтверждено показателями содержания глюкозаминогликанов, свободного оксипролина, серомукоидов, сиаловых кислот в крови, а также гистоморфологическим исследованием тканей суставов.
7. Тиотриазолин обеспечивает хорошую переносимость индометацина. Морфологические и макроскопические исследования тканей желудка свидетельствуют о низкой гастротоксичности препарата «Индотрил». Все исследуемые лекарственные средства можно расположить в следующий ряд в порядке убывания величины язвенного индекса: индометацин (5 мг/кг) ≥ диклофенак натрий (5 мг/кг) > лорноксикам (0,3 мг/кг) ≥ индометацин (5 мг/кг)+хондроитина сульфат с глюкозамина гидрохлоридом (500 мг/кг по хондроитину) > диклофенак натрий (5 мг/кг)+хондроитина сульфат с глюкозамина гидрохлоридом (500 мг/кг по хондроитину) ≥ индометацин (5 мг/кг)+кверцетин (2,5 мг/кг) > диклофенак натрий (5 мг/кг)+кверцетин (2,5 мг/кг) > нимесулид (80 мг/кг) > диклофенак натрий (5 мг/кг)+тиотриазолин (15 мг/кг) ≥ индометацин (5 мг/кг)+тиотриазолин (15 мг/кг) > хондроитина сульфат с глюкозамина гидрохлоридом (500 мг/кг по хондроитину) > целекоксиб (50 мг/кг) > кверцетин (2,5 мг/кг) > тиотриазолин (15 мг/кг).
8. Квантово-химические расчеты подтверждают совместимость молекул веществ исследуемой композиции и рациональность создания фиксированной лекарственной формы таблеток «Индотрил». Синергизм компонентов препарата является следствием общности патогенетических механизмов боли и воспаления синтез ПГЕ2 и активацию процессов ПОЛ.
9. Исследованное комбинированное лекарственное средство «Индотрил» рационально сочетает в себе низкую дозу индометацина и антиоксидант тиотриазолин. Это расширяет диапазон анальгетической и противовоспалительной активности и нивелирует нежелательные побочные эффекты НПВС, что позволяет рекомендовать препарат для лечения хронических воспалительных заболеваний соединительной ткани.

ЛИТЕРАТУРА
1. Яременко О. Б. Лечение ревматоидного артрита. Periculum in mora (Опасность в промедлении) / О. Б. Яременко // Клиническая иммунология. Аллергология. Инфектология. - 2006. - № 3 С. 36-41.
2. Насонов Е. Л. Глюкокортикоиды при ревматоидном артрите: за и против / Е. Л.Насонов, Н. В.Чичасова, Е. В. Супоницкая // Русский медицинский журнал - 2004. Т. 12, № 5. С. 16-18.
3. Quinn M. A. The therapeutic approach of early intervention for rheumatoid arthritis: what is the evidence? / M. A. Quinn, P. G. Conaghan, P. Emery // Rheumatology (Oxford). 2001. Vol. 40, № 11. Р. 1211-1220.
4. Etanercept treatment of psonatic arthritis safety, efficacy and effect on disease progression / P. J. Mease, A. J. Kivitz, F. X. Burd [et al.] // Arth. Rheum. 2004. - № 50. Р. 2264-2272.
5. Efficacy and safety of abatacept (CTLA 4lg) a selective co-stimulation modulator in RA patients not responding adequately to a TNF therapy results of the phase III A TTAIN trial / M. Genovese, M. Luggen, M. Schrift [et al.] // Arth. Rheum. - 2004. - № 50. Р. 4103.
6. Eisenberg R. Update on rituximab / R. Eisenberg // Ann. Rheum. Dis. 2005. - № 64. - Р. 55-57.
7. Treatment of rheumatoid arthritis with anakmra, a recombinant human interleukin-1 receptor antagonist, in combination with methotrexate results of twenty-four-week, multicenter randomized, double-blind, placebo-controlled trial / S. Cohen, E. Hurd, J. Cush [et al] // Arth. Rheum. 2002. - № 46. Р. 614-624.
8. Treatment continuation on patients receiving biological agents or conventional DMARD therapy / A. Zmk, J. Listing, S. Kary [et al.] // Ann. Rheum. Dis. 2005. - № 64. Р. 1274-1279.
9. Anti-TNF antibody treatment does not change serum levels of corfIsoibinding globulin in patients with rheumatoid arthritis but it increases androstenedione relative to cortisol / F. H. Straub, P. Sarzi-Puttmi, F. Altzem [et al.] // Ann. Rheum. Dis. 2005. - № 64. Р. 1353-1356.
10. Repeated infusions of mfliximab, a chimeric anti-TNF-α monoclonal antibody, in patients with active spondyloarthropafhy one year follow up / E. KruithoIf, F. Van der Bosch, D. Baeten [et al.] // Ann. Rheum. Dis. 2002. - № 61. Р. 207-212.
11. Sustained benefites of mfliximab therapy for dermatologic and articular manifestations of psonatic arthritis resultes from the mfliximab multinational PsA controlled trial (IMPACT) / C. E. Antoni, A. Kavanugh, В. Kirkhan [et al.] // Arth. Rheum. 2005. № 52. Р. 1227-1236.
12. Infliximab in combination with methotrexate in active ankylosing spondilytis a clinical and imaging study / H. Marzo-Ortega, D. Mс Gonagle, S. Jarrett [et al.] // Ann. Rheum. Dis. 2005. - № 64. Р. 1568-1575.
13. Балабанова Р.М. Изменится ли роль нестероидных противовоспалительных препаратов в эру биологических агентов / Р. М. Балабанова, А. К. Каптаева // Русский медицинский журнал 2006. - Т. 14, № 4. - С. 278-281.
14. Насонова В. А., Рациональная фармакотерапия ревматических заболеваний / Насонова В. А., Насонов Е. Л. М.: Литтерра, 2003. 506 с.
15. EULAR Recommendations 2003: an evidence based medicine approach to the ma-nagement of knee osteoarthritis. Report of a task force of the Standing Committee for International Clinical Studies Including Therapeutic Trials (ESCISIT)/K.M. Jordan, N.K. Arden, M. Doherty [et al.] //Ann. Rheum. Dis. 2003. Vol. 62. P. 1145-1155.
16. Consensus italiana sulle raccomandazioni EULAR 2005 per il trattamento dell’artrosi dell’anca Italian consensus on EULAR recommendations 2005 for the management of hip osteoarthritis / L. Punzi, M. Doherty, W. Zhang [et al.] // Reumatismo. 2006. Vol. 58, №4. Р.301-309.
17. Bradykinin-evoked sensitization of neuropeptide release from afferent neurons in the guinea-pig lung / R. Schuligoi, B. A. Peskar, J. Donnerer [et al.] // Br. J. Pharmacol. 1998. Vol. 125, № 2. Р. 388-392.
18. Effects of COX-1 and COX-2 inhibitors on eicosanoid biosynthesis and the release of substance P from the guinea-pig isolated perfused lung / R. Amann, R. Schuligoi, B.A. Peskar [et al.] // Inflamm. Res. 2001. Vol. 50, № 1. Р. 50-53.
19. Effects of indometacin on itochondrial ATP synthesis / J. Molly, B. Ingvar, R. J. Simpson [et al.] // Biochem. Soc. Trans. 1998. Vol. 26, № 2. Р. 161.
20. Маянский Д. Н. Хроническое воспаление / Маянский Д. Н. - АМН СССР. М. : Медицина, 1991. 240с.
21. Indomethacin as inhibitor of hyaluronidase / A. Szary, S. H. Kowalczyk-Bronisz, J. Gieldanowski [et al.] // Arch. Immunol. Ther. Exp. (Warsz).- 1975. - Vol.23, №1. Р. 131-134.
22. Hayasaka S. Effects of epinephrine, indomethacin, acetylsalicyclic acid, dexamethasone, and cyclic AMP on the in vitro activity of lysosomal hyaluronidase from the rabbit iris / S. Hayasaka, M. Sears // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 1978. Vol. 17, № 11. Р. 1109-1113.
23. Hardman J. G. Goodman and Gilman`s. The pharmacological basis of therapeutics / Hardman J. G., Gilman A. G., Limbird L. E. [Ninth edition]. New York: The McGrow-Hill Company, 1996. P. 616-655.
24. Stuhlmeier K. M. Ibuprofen: New explanation for an old phenomenon / K. M. Stuhlmeier, H. Li, J. J. Kao // Biochem.Pharmacol. - 1999. Vol. 57. P. 313-320.
25. Treatment of refractory rheumatoid arthritis with a monoclonal antibody to intercellular adhesion molecule / A. F. Kavanaugh, L. S. Davis, L. A. Nichols [et a1.] // Arthritis Rheum. 1994. Vol. 37. P. 992-999.
26. Heme oxygenase-1 induction may explain the antioxidant profile of aspirin / N. Grosser, A. Abate, S. Oberle [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun.-2003. - Vol. 308, № 4. - P. 956-960.
27. Takayma F. Effect of diclofenak, a non-steroidal anti-inflamatory drug, on lipid peroxidation caused by ischemia- reperfusion in rat liver / F. Takayma, T. Egashira, Y. Yamanaka // Japanese Journal of pharmacology. - 1994. - Vol. 64, № 2. - Р. 71-78.
28. Spоntaneous chemiluminescence production, lipid peroxidation and covalent binding in rat hepatocytes exposed to acetaminophen / Y. Minamide, T. Horie, A. Tomaru [et al.] // Journal of Pharmacology Science. -1998. - Vol. 87, № 5. - Р. 640-646.
29. Agha A.M. Modulation of oxidant status by meloxicam in experimentally induced arthritis / A.M. Agha, A.S. El-Khatib, H. Al-Zuhair // Pharmacol. Res. - 1999. Vol. 40, № 4. - P. 385-392.
30. Тринус Ф. П. К фармакологии ненаркотических анальгетиков / Ф. П. Тринус, Т. А. Бухтиарова // Фармакология и токсикология. - 1991. - Т. 54, № 6. - С. 57-60.
31. Carlsson K. Comparison of central antinociceptive and analgesic effects of pyrosolon derivatives metamizol (dipyron) and aminophenazon (Pyramidon’’) / K. Carlsson, J. Helmreich, I. Jurna // Schmerz-Pain-Doleur. - 1986. - Vol. 7, № 3. Р. 93-100.
32. Inhibition of the spinal nociceptive transmission by non- steroidal anti-inflammatory drugs in the neonatal rat spinal cord in vitro / I. Ohta, K. Harasawa, A. Kida [et al.] // Anesth. and Analg. - 1997. - Vol. 84, № 2, Suppl. - Р. 177.
33. Brune K. Spinal cord effects of antipyretic analgesics/ K. Brune // Drugs. 1994. Vol. 47, Suppl. 5. Р. 21-27.
34. Electrophysiological evidence for a spinal antinociceptive action of dipyrone / V. Neugebauer, H. G. Schaible, X. He [et al.] // Agents & Actions. 1994. Vol. 41, № -2. Р. 62 70.
35. Effect of aspirin on serotonin and met-enkefalin in brain: correlation with the antinociceptive activity of the drug / A. Gropetti, C. Braga, G. Biella [et al.] // Neuropharmacology. 1988. Vol. 27,. - № 5. Р. 499-505.
36. Лемина Е. Ю. Центральный компонент в механизме болеутоляющего действия нестероидных противо-воспалительных средств / Е. Ю. Лемина, В. В. Чурюканов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1995. - Т. 58, № 4 . - С. 59 62.
37. Fereira S.H. Handbook of inflammation / Fereira S. H. 1985. Vol. 5. - Р. 107-116.
38. Regional distribution of cyclooxygenase-3 mRNA in the rat central nervous system / B. Kis, A. Snipes, F. Bari [et al.] // Brain Res. Mol. Brain Res. 2004. Vol. 5, № 126 Р. 78-80.
39. Berenbaum F. COX-3: Fact or fancy / F. Berenbaum // Joint. Bone Spine. 2004. Vol. 71, № 6. Р. 451-453.
40. Botting R. COX-3 and the mechanism of action of paracetamol/acetaminophen / R. Botting, S.S. Ayoub // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids. 2005. Vol. 72, № 2. Р. 85-87.
41. The depletion of substance P by diclofenac in the mouse / F. Papworth, P. Corville-Nash, C. Alam [et al.] // European Journal of Pharmacology. - 1997. - Vol. 325, № 2-3. - Р. 1-2.
42. Kress M. Inhibition of a capsaicin induced ionic current in sensory neurons- a new mechanism of action for aspirin like drugs? / M. Kress, L. Vycklicky, P.W. Reeh // Gottingen Neurobiol. - 1996. - Vol. 2. - Р. 641.
43. Бухтиарова Т. А. Экспериментальное обоснование направлений поиска и изучение новых неопиодных анальгетиков в ряду производственных азотистых гетероциклов: Дис.д-ра мед. наук: 14.03.05 / Бухтиарова Т. А. Киев, 1998. 330 с.
44. Goldwin J. S. Inhibition of rheumatoid factor production by nonsteroidal anti-inflammatory agents / J. S. Goldwin // Inflammation. 1983. Vol. 8. P. 49-55.
45. Rocha P. N. Eicosanoids: lipid mediators of inflammation in transplantation / P.N. Rocha, T.J. Plumb, T. M. Coffman // Springer. Semin. Immunopathol. 2003. Vol. 25, № 2. Р. 215-227.
46. Bennett A. Nimesulide: an NSAID that preferentially inhibits COX-2, and has various unique pharmacological activities / A. Bennett, G.Villa // Expert Opin Pharmacother. 2000. Vol. 1, № 2. - Р. 277-286.
47. Викторов А.П. Костная и хрящевая ткани: проблема нежелательных побочных реакций при фармакотерапии / А.П.Викторов // Рациональная фармакотерапия. 2008. - №3. С.72-77.
48. Dingle J. T. NSAID Stimulation of Human Cartilage Matrix Synthesis / J. T. Dingle, M. Parker // Clin Drug Invest. 1997. - Vol.14, № 5. Р. 353362.
49. Раціональне застосування нестероїдних протизапальних препаратів при лікуванні захворювань суглобів / [Зупанець І. А., Коваленко В. М., Дзяк Г. В. та ін.]. Харків: Національна фарм. акад. України, 2002. 24с.
50. Arachidonic acid metabolism / P. Needleman, J. Turk, B.A. Jakschik [et al.] // Annu. Rev. Biochem. 1986. Vol. 55. P. 69-102.
51. Brater D. C. Renal effects of COX-2-selective inhibitors / D. C. Brater // Am. J. Nephrol. 2001. Vol. 21. P. 1-15.
52. Laufer S. Inflammation and Rheumatic Diseases / S. Laufer, S. Gay, K. Brune // The molecular basis of novel therapies. - 2003. P. 30-31.
53. Ibanez L. Agranulocytosis associated with dipyrone (metamizol) / L. Ibanez, X. Vidal, E. Ballarin [et al.] // Eur. J. Clin. Pharmacol. 2005. Vol. 60, № 11. Р. 821-829.
54. Acute agranulocytosis after prolonged high-dose usage of intravenous dipyrone--a different mechanism of dipyrone toxicity? / J. Sabbaga, C. Osawa, F. H. Pahl [et al.] // Ann. Hematol. 1993. Vol. 66, № 3. Р. 153-155.
55. Яковлева Л.В. Современные аспекты рационального обезболивания в медицинской практике / Яковлева Л. В., Шаповал О. Н., Зупанец И. А. К.: Морион, 2000. С. 6-10.
56. Molecular mechanism of diclofenac-induced apoptosis of promyelocytic leukemia: dependency on reactive oxygen species, Akt, Bid, cytochrome and caspase pathway / A. Inoue, S. Muranaka, H. Fujita [et al.] // Free Radic. Biol. Med. 2004. Vol. 37, № 8. Р. 1290-1299.
57. Potentiation of doxorubicin-induced apoptosis and differentiation by indomethacin in K-562 leukemia cells / L. Cipak, H. Paulikova, L. Novotny, [et al.] // Neoplasma. 2004. Vol. 51, № 3. Р. 188-192.
58. Ethanol binging enhances hepatic microvascular responses to acetaminophen in mice / Y. Ito, E. R. Abril, N. W. Bethea [et al.] // Microcirculation. 2004. Vol. 11, № 7. Р. 625-632.
59. Осложнения фармакотерапии. Неблагоприятные побочные реакции лекарственных средств. / Под ред. Д.В.Рейхарта. - Том 1. 2007. 256с.
60. Hepatotoxic effects of anti-rheumatic drugs in cultured rat hepatocytes / Akesson A., Akesson B. // Acta Gastroenterol. Latinoam. 1987. Vol. 17. - № 2. Р. 105-111.
61. NSAID-related psychiatric adverse events: who is at risk? / G. Onder, F. Pellicciotti, G. Gambassi [et al.] // Drugs. - 2004. Vol. 64, № 23. Р. 2619-2627.
62. Browning C. H. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs and severe psychiatric side effects / C. H. Browning // Int. J. Psychiatry Med. 1996. Vol. 26, № 1. Р. 25-34.
63. Defromont L. Psychiatric side effects of nonsteroidal anti-inflammatory agents / L. Defromont, C. Portenart, A. Couvez // Encephale. 1999. Vol. 25, № 1. Р. 11-15.
64. Prostaglandin-mediated control of rat brain kynurenic acid synthesis - opposite actions by COX-1 and COX-2 isoforms / L. Schwieler, S. Erhardt, C. Erhardt [et al.] // J. Neural Transm. - 2005. - Vol.112, № 7. Р. 863-872.
65. Klang S. Influence of emulsion droplet surface charge on indomethacin ocular tissue distribution / S. Klang, M. Abdulrazik, S. Benita // Pharm. Dev. Technol. 2000. Vol. 5, № 4. Р. 521-532.
66. Toler S. M. Oxidative stress plays an important role in the pathogenesis of drug-induced retinopathy / S. M. Toler // Exp. Biol. Med. (Maywood). 2004. Vol. 229, № 7. Р. 607-615.
67. Ridder W. H. Effect of ibuprofen on contrast sensitivity / W. H. Ridder, A. Tomlinson // Optom. Vis. Sci. 1992. Vol. 69, № 8. Р. 652-655.
68. Алексеева Л. И. Основные достижения в лечении остеоартроза / Л. И. Алексеева // Качество жизни. Медицина: болезни костно-мышечной системы. - 2003. - № 3. С. 34-38.
69. Острахович Е. А. Активные формы кислорода и азота в клетках крови у больных ревматоидным артритом: эффект лазерной терапии / Е. А. Острахович, О. Илич-Стоянович, И. Б. Афанасьев // Вестник РАМН. 2001. - № 5. С. 23-27.
70. Paoletti R. Pathological significance of the thromboxane-prostacyclin hypothesis / R. Paoletti, P. Maderna, E. Tremoli // J. Cardiovasc. Pharmacol. 1985. - № 7, Suppl 3. - P. 179-185.
71. Carpenter M. P. Antioxidant effects on the prostaglandin endoperoxide synthetase product profile / M. P. Carpenter // Fed. Proc. - 1981. Vol. 40, № 2. P. 189-194.
72. Пшенникова М. Г. Защитная роль простагландинов при повреждающих воздействиях / М. Г. Пшенникова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1991. - № 6. С. 54-58.
73. Follow-up of prostaglandin plasma levels after acute myocardial infarction / T. Friedrich, J. Lichey, S. Nigam [et al.] // Am. Heart. J. - 1985. Vol. 109, № 2. Р. 218-222.
74. Inhibition of prostaglandin synthesis in rabbit kidney medulla slices by antioxidants / Y. Fujimoto, H. Tanioka, E. Toibana [et al.] // J. Pharm. Pharmacol. 1984. Vol. 36, № 3. Р. 195-197.
75. Funk C. D. Effects of selenium-deficient diets on the production of prostaglandins and other oxygenated metabolites of arachidonic acid and linoleic acid by rat and rabbit aortae / C. D. Funk, W. Boubez, W. S. Powell // Biochim. Biophys. Acta. 1987. Vol. 921, № 2. Р. 213-220.
76. Selenium, glutathione peroxidase, peroxides and platelet functions / D. Vitoux, P. Chappuis, J. Arnaud [et al.] // Ann. Biol. Clin. (Paris). - 1996. Vol. 54, № 5. - Р. 181-187.
77. Differential inhibitory effects of vitam