ДЕСТРУКТИВНО - ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ ПРИ КРИОПОВРЕЖДЕНИИ КОЖИ И ОЗОНОТЕРАПИИ : ДЕСТРУКТИВНО – ВІДНОВНІ ПРОЦЕСИ У ШКІРІ ПРИ КРІОПОШКОДЖЕННІ ТА ОЗОНОТЕРАПІЇ

Краткое описание

НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ НАУК УКРАИНЫ
ИНСТИТУТ ПРОБЛЕМ КРИОБИОЛОГИИ И КРИОМЕДИЦИНЫ

На правах рукописи

Сомова Екатерина Владимировна

УДК 615.832.9:615835.3

ДЕСТРУКТИВНО - ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ
ПРОЦЕССЫ ПРИ КРИОПОВРЕЖДЕНИИ КОЖИ
И ОЗОНОТЕРАПИИ
14.01.35 - криомедицина

Диссертация
на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук

Научный руководитель:
Сандомирский Борис Петрович,
доктор медицинских наук, профессор,
Заслуженный деятель науки и техники Украины

Харьков 2009

СОДЕРЖАНИЕ

Перечень условных сокращений
ВВЕДЕНИЕ
РАЗДЕЛ 1. Обзор литературы
1.1. Механизмы криоповреждений тканей
1.2. Классификации, методы диагностики и лечения холодовых повреждений
1.3. Применение озонотерапии для лечения ран
РАЗДЕЛ 2. Материалы и методы исследования
2.1. Моделирование криоповреждений
2.2. Экспериментальные группы
2.3. Приготовление озонированных растворов
2.4. Макроскопическое определение площади поражения кожи
2.5. Регистрация потока инфракрасного излучения с поверхности кожи
2.5.1. Устройство для измерения потока излучения поверхности в инфракрасной области спектра
2.5.2. Калибровка разработанного устройства
2.6. Микробиологическое исследование
2.7. Морфологический и гистохимический методы исследования кожи
2.8. Метод индуцированной хемилюминесценции, метод
трехмерной флуоресцентной спектроскопии
2.9. Спектрофотометрический метод исследования
Раздел 3. Результаты собственных исследований
3.1. Показатели ИК - излучения поверхности криоповреждений кожи
3.2. Микробиологическая характеристика кожи крыс после моделирования криоповреждений и лечения
3.3. Определение перекисного окисления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной активности (АОА) в сыворотке крови крыс, исследование экстракта плаценты официнального методом трехмерной флуоресцентной спектроскопии
3.4. Макроскопическая оценка раневого процесса кожи крыс после моделирования криоповреждения и лечения
3.5. Изучение морфологических и гистохимических препаратов кожи после моделирования криоповреждений и лечения
анализ и обобщение результатов
ВЫВОДЫ
список использованной ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АОА антиокисидантная активность
ИК - излучение инфракрасное излучение
ЛП локальные показатели инфракрасного излучения
МДА малоновый диальдегид
ОФР озонированный физиологический раствор
ПОЛ перекисное окисление липидов
ТБК тиобарбитуровая кислота
ТБК АП активно реагирующие с тиобарбитуровой кислотой
продукты химических реакций в сыворотке крови
Ф Р физиологический раствор
ФП фоновые показатели инфракрасного излучения
ЭПл экстракт плаценты официнальный

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Проблема лечения травм, в том числе и холодовых, остается одной из актуальных задач современной медицины [17, 35]. Практическое применение криохирургии вызывает потребность в детальном изучении динамики процессов деструкции и репарации тканей после действия низких температур с помощью новых методов исследования [36, 40 - 46]. Нарушения микроциркуляции в патологическом очаге, отек тканей затрудняют проникновение антибактериальных препаратов для профилактики и лечения гнойных осложнений при криоповреждениях. Увеличение штаммов возбудителей, резистентных к антибактериальным средствам, рост числа иммунодефицитных состояний, и, как результат, аллергических реакций у больных, нарастание частоты инфекционных осложнений раневого процесса (синегнойная палочка, клебсиелла, протей) вызывают потребность в поиске новых и совершенствовании существующих методов лечения ран. В последние годы активно изучаются методы воздействия на раневой процесс, основанные на использовании озона. В литературе описано стимулирующее действие малых доз озона на функциональные свойства биологических систем [84,124]. Озонированые растворы успешно применялись в хирургии [68,70]: в комплексном лечении больных с панкреатонекрозом [90], при перитоните [94], при остром парапроктите [91]; имеется опыт применения озонированных растворов в клинической практике для лечения гнойных и воспалительных процессов мягких тканей [125 - 130]. Возникает необходимость в комплексном объединении разных методов наблюдения за деструктивно-восстановительными процесами в коже для усовершенствования существующих схем лечения и диагностики криоповреждений, в анализе общих закономерностей влияния разных доз озона на биологические системы, рассмотрении возможности его использования для интенсификации репарационных процессов в тканях после действия холода и сравнения эффективности озонированных растворов в сопоставлении со стандартными лечебными средствами.

Связь работы с научными программами. Диссертация выполнялась с 2004 по 2008 гг. в соответствии с планами научно - исследовательских работ по темам (шифр 2.2.6.05, номер гос. регистрации 0102U002027) «Исследование влияния и механизма действия криоконсервированных тканевых препаратов из ксеногенных органов на течение ряда патологических процессов в организме» и (шифр 2.28.7.4, номер гос. регистрации 0105U03918) «Повышение эффективности технологий криоконсервирования биологических систем путем интенсификации репарационных процессов после действия холода и снижения ризка контаминации микроорганизмов на разных этапах криоконсервирования» Института проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось определение особенностей течения деструктивно- восстановительных изменений в коже под действием низких температур, после дозированного местного применения озона.
В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи.
1. Изучить динамику деструктивно - восстановительных процессов на модели криоповреждений при местном применении озонированного физиологического раствора (ОФР), определить концентрацию ОФР, обеспечивающую лечебное действие на кожу.
2. Сравнить лечебное действие ОФР на криоповреждения кожи с действием других методов лечения: применением мази «Левомеколь» и экстракта плаценты официнального (ЭПл).
3. Исследовать динамику показателей: перекисного окисления липидов (ПОЛ), уровня антиоксидантной активности (АОА) сыворотки крови крыс в ходе заживления криоповреждений кожи после применения ОФР.
4. Изучить качественные характеристики микрофлоры криоповреждений при местном применении ОФР с различным содержанием озона.
5. Дать структурно-функциональную характеристику кожи в зоне криоповреждения при применении ОФР.
6. Провести регистрацию интенсивности инфракрасного излучения кожи после холодовых влияний разработанным нами портативным устройством для бесконтактной диагностики процесса заживления криоповреждения.

Объект исследования. Деструктивно-восстановительные процессы в коже крыс после моделирования криоповреждения и озонотерапии.

Предмет исследования. Динамика раневого процесса в коже после моделирования криоповреждения и под влиянием озонотерапии.

Методы исследования
1. Моделирование криоповреждений.
2. Структурно - функциональная характеристика тканей в зоне раневого процесса.
3. Микробиологическое исследование криоповреждений.
4. Исследование термографическим методом показателей инфракрасного излучения с поверхности кожи в зоне холодовых воздействий. Изучение характеристик уровня теплового баланса по величине теплового излучения и теплового потока на поверхность тела.
5. Изучение перекисного окисления липидов в сыворотке крови под влиянием озонированных растворов спектрофотометрическим методом на модели криоповреждений.
6. Изучение состава ЭПл методом спектральной флуоресценции.
7. Изучение АОА в сыворотке крови методом индуцированной хемилюминесценции на модели криоповреждений.
Научная новизна работы. Впервые исследована динамика раневого процесса после криоповреждения кожи при использовании в качестве лечебного средства озонированных физиологических растворов.
Впервые определена концентрация озонированного физиологического раствора, обеспечивающая лечебный эффект при криоповреждениях кожи.
Впервые при помощи специально разработанного устройства бесконтактным методом изучены изменения показателей инфракрасного излучения над областью криоповреждения в динамике заживления.
Впервые экпериментально обнаружены отличия в динамике показателей потока инфракрасного излучения при применении различных методов лечения криоповреждений, что дает основание для использования потока инфракрасного излучения, как показателя, характеризующего течение воспалительных изменений в области криоповреждений.

Практическая значимость работы. Проведенные исследования показывают перспективность использования озонированных физиологических растворов при совершенствовании схем местного лечения криоповреждений кожи. Лучший эффект наблюдается при использовании озонированных растворов с концентрацией озона 1 мг/л.
Разработан портативный прибор, регистрирующий поток теплового излучения из области криоповреждений, отработана методика его применения, позволяющая оценить процессы репарации тканей и качество проводимого лечения криоповреждений кожи крыс.

Личный вклад соискателя. Представленные к защите научные
результаты получены диссертантом лично. Исследования были проведены под руководством професора, доктора мед. наук Б.П. Сандомирского.
Личный вклад соискателя состоит: в постановке задач исследований, совместно с научным руководителем, в проведении патентно-информационного поиска, аналитической работы и экспериментальных исследований, статистической обработке и анализе данных, в разработке основных положений и выводов диссертации. В научных трудах, выполненных в соавторстве [175,176, 177,
190, 195], соискателю принадлежит планирование исследовательской работы, организация эксперимента и его реализация, обработка результатов исследований.
Соавторами работ, опубликованных по теме диссертации, являются:
доктор биол. наук В.Д. Зинченко консультации по выбору биофизических методик исследования, помощь в работе с экспериментальным озонаторным оборудованием [175,176,177];
канд. хим. наук А.Д. Рошаль помощь в подготовке экспериментов и консультации по проведению исследований методами спектроскопии и спектрофлуориметрии, хемилюминесценции [190];
канд. биол. наук Н.Г. Кадникова консультации по проведению микробиологических исследований и помощь в подготовке экспериментов по изучению влияния озонированных растворов на динамику заживления кожи после холодовых воздействий в работах [175,176,177];
канд. биол. наук В.В.Волина консультации по описанию морфологических препаратов кожи в работе [195];
канд. биол. наук Л.Н.Тыныныка, консультации по проведению исследований и помощь в подготовке экспериментов по влиянию озонированных растворов концентрации 1 мг/л на динамику заживления кожи после холодовых воздействий в работах [175,176].

Апробация результатов диссертации. Материалы работы доложены на: конференции с международным участием «Актуальные проблемы и
достижения криобиологиии и криомедицины. Структурная и функциональная организация стволовых клеток при действии низких температур» г. Харьков, 2005г., ІV Украинской научно - практической конференции с международным участием «Современные аспекты применения озона в медицине и экологии», г. Евпатория 2005 г., ежегодной конференции молодых ученых «Холод в биологии и медицине», ИПК и К НАН Украины, г. Харьков 2005, 2006, 2007 гг., IV съезде УБФТ «Біофізика» Донецьк 2006 г., на V международном симпозиуме «Актуальные проблемы биофизической медицины» г. Киев 2007 г., на Всеукраинской научно практической и учебно - методической конференции «Фундаментальні науки ‑ хірургії» г. Полтава 2007 г., на научной конференции с международным участием «Новые криобиотехнологии для решения фундаментальных и прикладных задач медицины» Харьков 2008 г.
В 2006 г. материалы диссертации были представлены на первый конкурс Харьковской Государственной Областной администрации «Найкращий молодий науковець Харківщини», было получено первое место в разделе медицина и ветеринария.

Публикации. По результатам исследования опубликовано 13 научных работ, среди которых 4 статьи, опубликованных в профессиональных научных изданиях, и 8 тезисов докладов в сборниках научных работ международных, научно-практических конференций, симпозиумов; без соавторов 2 публикации, 1 патент на полезную модель.

Объем и структура диссертации. Диссертация является экспериментальным исследованием, изложена на 159 страницах печатного текста, 129 листов основного текста, включает в себя введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты исследований и их обсуждение, заключение, выводы и список литературы. Текст иллюстрирован 89 рисунками и 7 таблицами. Библиография включает 203 наименования на 20 страницах.

Список литературы

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что озонированные физиологические растворы (ОФР) обеспечивают лечебное действие на кожу, поврежденную холодом. Лучший лечебный эффект наблюдается при введении ОФР с концентрацией 1мг/л.
2. Биохимическими исследованиями установлено, что при введении ОФР с концентрацией 1мг/л крысам с криоповреждениями в динамике не происходит истощения антиоксидантной активности (АОА) сыворотки крови. До 16 суток наблюдается достоверное (Р ≤ 0,05) повышение АОА в сравнении с группой интактных животных.
3. Выявлены общие черты действия ОФР различных концентраций на микроорганизмы в зоне криоповреждений: применение ОФР способствовало эрадикации криоповреждений от анаэробных микроорганизмов и грибов.
4. При морфологическом исследовании установлено, что стимуляция процессов репарации при использовании ОФР с различной концентрацией озона (от 12 мг/л до 1 мг/л) повышается при снижении концентрации озона.
5. Установлено, что характерной особенностью макромолекулярной архитектоники раневого дефекта в группе животных, леченых ОФР с концентрацией озона 1 мг/л, является ориентированное расположение макромолекул коллагена, что имеет особое значение для образования косметичного рубца и сохранения функции кожного покрова. ОФР с концентрацией озона 1 мг/л, значительно уменьшает проявления воспалительной реакции, ускоряет эпителизацию раневого дефекта и способствует формированию тонкой и нежной рубцовой ткани. При ежедневном введении под струп ОФР с концентрацией озона 12 мг/л наблюдается замедление процессов репарации тканей после холодовых воздействий.
6. Установлено, что при анализе изменений потока ИК - излучения (Δ = Ι раны - Ι кожи) после нанесения криоповреждений можно выделить общие черты: значительный рост показателей в 1 сутки, наличие локального максимума на 7-8 сутки в большинстве случаев у животных разных групп эксперимента. Установлены различия в сроках возвращения к исходным значениям показателей ИК - излучения.
7. Показано, что в группе с введением ОФР с концентрацией озона 1 мг/л, наблюдаются самые высокие абсолютные значения ИК - излучения с поверхности криоповреждения, в группе с лечением мазью «Левомеколь» отмечаются также высокие абсолютные значения, но регистрируются они в более поздние сроки.
8. При проведении исследования состава ЭПл «официнального», с которым сравнивали действие ОФР, в результате анализа трехмерных спектров флуоресценции, подтверждено наличие в нем свободного, не связанного с белками триптофана, который может обеспечивать антиоксидантное действие экстракта.

Список литературы

1. Korpan N. N. Hepatic Cryosurgery for Liver Metastases. Long Term FollowUp / Korpan N. N. // Ann. Surg. 1997. Vol. 225 , №2 . Р. 193 201.
2. Adam R. Place of Cryosurgery in the Treatment of Malignant Liver Tumors / Adam R., Akpinar E., Johann M. // An. Surg. 1997. Vol. 225, №1. Р.39 50.
3. Korpan N. N. Pancreas Cryosurgery / Korpan N. N. // 1st European Congress of Cryosurgery. (Spain, March 29 April 2, 2000): Abstract Book. San Sebastian , 2000. P. 7.
4. Uchida M. Percutaneous cryosurgery for renal tumors / Uchida M, Imaide Y., Sugimoto K. // Br. J. Urol. 1995. Vol. 75, P. 132 137.
5. Корпан Н. Н., Atlas of Cryosurgery / Н. Н. Корпан ; Ed. N. Korpan . New York; Wien. ; Springer , 2002. 513 p.
6. Pancreatic cryosurgery a new surgical strategy for pancreatic cancer / Korpan N. N., Hochwarter C., Sellner F., Zharkov J.V. // 37th World Congress of Surgery, International Surgical Week ISW97. (Acapulco, Mexico, August 2430, 1997): Abstract Book. Acapulco: 1997. P. 156.
7. Korpan N. N. Moeglichkeiten and Grenzen der modernen Kryochirurgie / Korpan N. N. // Neugebauer H, ed. Was gibt es Neues in der Medizin. (Vienna, Dr. Peter Mueller Verlag, 1996) : Abstract Book. Vienna , 1996. P. 207213.
8. Tanaka S. Cryosurgical treatment of advanced breast cancer / Tanaka S. // Skin Cancer.1995. Vol. 10, P. 9 18.
9. Корпан Н. Н. Basics of Cryosurgery / Н. Н. Корпан ; Ed. N. Korpan . New York ; Wien ; Springer , 2002. 325 p.
10. Goncalves J. C. Fractional cryosurgery. A new technique for basal cell carcinoma of the eyelids and periorbital area / Goncalves J. C. // Dermatol. Surg. 1997. Vol. 23 , № 6 . Р. 475 481.
11. Комкова Т. Б. Применение криохирургии при лечении хронического болевого панкреатита / Т.Б.Комкова // Клиническая хирургия. 1987. №11.
С. 2426.
12. Cryosurgery as a treatment for prostate carcinoma, results and complications. / [Wong W. S., Chinn D. O., Chinn M. et al. ] // Cancer. 1997. Vol. 79. Р. 963 974.
13. Chinn D. Prostate cryosurgery: scientific and technical advancements / Chinn D. // Urology. News. 1999. Vol. 3, №4. Р. 10 12.
14. Histologic findings of longterm cryolesions in a patient with ventricular tachycardia / [ Watanabe H., Eguchi S., Miyamura H. et al. ] Cardiovasc. Surg. 1996. Vol. 4, №3. Р. 409 411.
15. Gage A. A. History of Cryosurgery / Gage A. A. // Sem. Surg. Oncol. 1998. Vol. 14, Р. 99 109.
16. Korpan N. N., Concept of technical requirements for cryosurgical equipment / Korpan N. N., Zharkov J. V., Hochwarter G. // 10th World Congress of Cryosurgery (Orlando, Florida, USA, October 29November 1, 1998): Abstract Book. Orlando, 1998. Р. 3 4.
17. Криохирургические методы лечения неоперабельных опухолей органов брюшной полости./ [С. А. Шалимов, Л. В. Кейсевич, А. А. Литвиненко, И.И.Волченскова и др.] Газета «Здоров'я України» № 74 июль 2003г. Разделы: Онкология, Хирургия. [Электронный ресурс] http://healthua.com/parts/surgery/
18. Cooper G. S. Cryogenetic Surgery for cancer / G. S. Cooper // Fed. Proc. 1965. Vol. 24, № 2 . Р. 237.
19. Mawr P. Interactions of cooling velocity temperature and warning velocity on the surzvival of frozen and thawed yeast. / Mawr P // Cryobiology. 1968. № 5. P. 1 7.
20. Diller К. R. Intracellular freezing: Effect of extracellular superooling / Diller К. R. // Cryobiology. 1975. № 12. P. 480 485.
21. Ninomiya Т. Histologic and histochemical changes in experimental carcinomas following cryosurgery / Ninomiya Т., Mori M. // Int. J. Oral. Surg. 1985. Vol. 14, P. 362 370.
22. Кандель Э. И. Криохирургия. / Э. И. Кандель . М. : Медицина, 1974. 302 с.
23. Ре Л. Консервация холодом./ Ре Л. // M. : Медицина, 1962. 312 с.
24. Белоус А. M. Механизмы криоповреждения клеток: роль трансмембранных дефектов / А. M. Белоус , В. А. Бондаренко // Достижения и перспективы развития криобиологии и криомедицины; международная конференция: тезисы докл. Х., 1988. С. 1011.
25. Lovelock Т. Е. The denaturation oflipdprotein complexes as a cause of damage by freezing. / Lovelock Т. Е. // Proc. Ray. Soc. London Series В., 1957. Vol. 147. Р. 427 433.
26. Gill W. A look at cryosurgery. / Gill W., Frazer I. // Soot. med. J. 1968. Vol. 13. P. 268 273.
27. Persidky M. D. Lysosomes as primary targers of crionjur. / Persidky M. D. // Cryobiology. 1974 , № 8. P. 482 488.
28. Weiss W. Dose primate lebarkarzinoma. / Weiss W // Chir. Prax. 1979. Bd. Vol. 25 , № 2 . P. 235 256.
29. Киндзельский Л. П. Использование радиоизотопного теста для оценки нарушений при различных условиях криовоздействия / Л. П. Киндзельский , В. П. Ананенко , А. В. Рикберг // Применение радиоэлектроники в области медицинских и биологических исследований: республиканская научная конференция : тезисы докл. К. , 1976. С. 8586.
30. Whittaker D. К. Mechanisns of rissuedestruction following cryosurgery. / Whittaker D. К. //Ann. Roy. Surg. Engl. 1984. Vol. 66, № 5. Р. 313 318.
31. Даценко Б. М. Криохирургия в проктологии / Б. М. Даценко, И. А. Арсений, А. К. Арсений. Кишинев , 1990. 132 с.
32. Федоров В. Д. Анализ выживаемости больных, оперированных по поводу рака прямой кишки / В. Д. Федоров , Ю. М. Милитарев , В. Н. Юлаев // Хирургия. 1974. № 1. С. 151152.
33. Комбинированное лечение опухолей пищевого канала / И. П. Дедков , В. А. Черный , В. А. Черныченко и др. // К.: Здоров’я, 1983. 184 с.
34. Выбор рабочих температур криоинструментов для локального разрушения биологических тканей / Филиппов Ю. П., Боярский М. Ю., Бродянский В. М., Штуха Т. П. // Медицинская техника. 1977. № 2. С. 40 44.
35. Прохоров Г. Г. Достижения криомедицины / Г. Г. Прохоров // СПб. : Наука, 2001. С.5562.
36. Криохирургия в ХХI веке / [ Корпан Н. Н., Шарков Я. В., Хохвартер Г., Зелнер Ф. ] Мед. Криология : Сб. науч. тр. Н. Новгород, 2001. Вып.2. С. 119137.
37. Коченов В. И. Криолазерные методы лечения злокачественных новообразований / В. И. Коченов , Н. В. Скачков // Изобретательство и рационализация в медицине. М., 1988. С. 6264.
38. Арьев Т. Я. Ожоги и отморожения / Т. Я. Арьев . Л.: Мед-на, 1971. 285 с.
39. Арьев Т. Я. Термические поражения / / Т. Я. Арьев . Л. : Медицина, 1966. 704 с.
40. Lehmuskallio E. Thermophysical effects of ointments in cold: an experimental study with a skin model / Lehmuskallio E. , Anttonen H. // Acta Derm Venereol.1999. Vol. 79, № 1. P. 33 36.
41. Junila J. The formation of the demarcation line at experimental frostbite / Junila J. , Kaarela O. , Waris T. // Int. J. Circumpolar Health Jan. 1999. Vol. 58, №1. Р. 44 51.
42. Frostbite: pathogenesis and treatment / Murphy J. V. , Banwell P. E. , Roberts A. H. , McGrouther D. A. // J. Trauma. 2000. Vol. 48, № 1. P. 171178.
43. Yang Z.R. Effect of cold acclimation on hemorheological behavior in rats with frostbite / Yang Z.R. , Liu J.Y. , Yan P.H. // Clin Hemorheol Microcirc. 2003. Vol. 29 , №2. Р.103 109.
44. Petrone P. Surgical management and strategies in the treatment of hypothermia and cold injury / Petrone P. , Kuncir E.J. , Asensio J.A. // Emerg Med Clin North Am. 2003. Vol. 21 , № 4. Р. 1165 1178.
45. Beise R.D. Psychophysical study of stinging pain evoked by brief freezing of superficial skin and ensuing shortlasting changes in sensations of cool and cold pain / Beise R.D. , Carstens E. , Kohlloffel L.U. // Pain. 1998. Vol. 74 , №23. Р. 275 286.
46. Effect of alphatrinositol on interstitial fluid pressure, oedema generation and albumin extravasation in experimental frostbite in the rat / Berg A., Aas P., Gustafsson T., Reed R.K.// Br J Pharmacol. 1999. V. 126, №6. Р.1367 1374.
47. Вихриев Б. С. Местные поражения холодом / Б. С. Вихриев , С. Х. Кичемасов , Ю. Р. Скворцов . Л. : Медицина , 1991 . 192 с.
48. Воздвиженский С. И. Лазерная доплеровская флоуметрия в определении глубины ожогов у детей / С. И. Воздвиженский // Актуальные проблемы травматологии и ортопедии: материалы научной конференции. Часть II, Термическая травма . К. : Вища освіта, 2001 . С. 8789.
49. Pape S. A. An audit of the use of laser Doppler imaging (LDI) in the assessment of burns of intermediate depth / Pape S. A. , Skouras C. A. , Byrne P. O. // Burns. 2001 . Vol. 27 , № 3 . Р. 233 239.
50. The use of high frequency ultrasonography in the prediction of burn depth / Adams T. S. T , Murphy J. V. , Gillespie P. H. et al. // J Burn Care Rehabil . 2001 . Vol. 22 , № 3 . Р. 261 262.
51. Correlation between magnetic resonance imaging and histopathology of an amputated forearm after an electrical injury / Ohashi M. , Koizumi J. , Hosoda Y. et al. // Burns. 1998. Vol. 24 , № 4 . Р. 362 368.
52. Assessment of tissue viability in complex extremity injuries: utility of the pyrophosphate nuclear scan / Affleck D. G. , Edelman L. , Morris S. E. , Saffle J. R. // J Trauma . 2001 . Vol. 50 , № 2 . Р. 263 269.
53. Diagnosis of burn depth using laserinduced indocyanine green fluorescence: a preliminary clinical trial / Still J.M. , Law E.J. , Klavuhn K.G. et al. // Burns . 2001 . Vol. 27 , № 4 . Р. 364 371.
54. Баиндурашвили А. Г. Проблемы в хирургическом лечении ожогов IIIА степени у детей / А. Г. Баиндурашвили , Е. В. Цветаев , К. А. Афоничев // Актуальные проблемы термической травмы: матералы международной конференции. СанктПетербург , 2002. С. 320321.
55. Immuno histochemical analysis of burn depth. / HoAsjoe M. , Chronnell C. M. , Frame J. D. et al. // J Burn Care Rehabil. 1999 . Vol. 20 , № 3 . Р. 207 211.
56. Burn depth and its histological measurement / Watts A. M. , Tyler M. P. , Perry M. E. et al. // Burns. 2001 . Vol. 27 , № 2 . Р. 154 160.
57. Термические субфасциальные поражения. / [ Гусак В. К. , Фисталь Э. Я. , Баринов Э. Ф. , Штутин А. А. ] . Донецк , 2000 . 192 с.
58. Попов С. В. Вопросы этиологии, патогенеза, клиники и лечения местной и общей холодовой травмы / С. В. Попов , Кузнецов В. А. // Комбустиология. 2004. № 2021. электронный журнал.: http://www.burn/ru/all/number/?ic/=366
59. Воинов А. И. Комплексное лечение отморожений конечностей / А.И. Воинов // Здравоохранение. МЗ. Респ. Беларусь . 1999 . №10 . С. 3640.
60. Григорьева Т. Г. Холодовая травма 2. Отморожения / Т. Г. Григорьева // Межд. мед. журн. Х. , 2001. №2 . С. 4248.
61. Опыт лечения местной холодовой травмы в Российском ожоговом центре / [В. А. Жегалов , А. В. Воробьев, С. П. Перетягин с соавт.] // Комбустиология. 2000. №3. электронный журнал.: http://www.burn/ru/all/number/?ic/=352
62. Рациональная антимикробная фармакотерапия: руководство для практикующих врачей. / Ред. Яковлев В. П., Яковлев С. В. М. : Медицина , 2003 . 1008 с.
63. Dellinger E. P. Quality standard for antimicrobial prophylaxis in surgical procedures. Infect. Contr. Hosp. / Dellinger E. P, Gross P. A. // Epidemiol. 1994 . Vol. 15 , Р. 182 188.
64. Антибактериальная терапия абдоминальной хирургической инфекции / [ Б. Р. Гельфанд , В. А. Гологорский , С. З. Бурневич и др] . М. : Медицина , 2000 . 144 с.
65. Гостищев В. К. Пути и возможности профилактики инфекционных осложнений в хирургии / В. К. Гостищев // Рациональные подходы к профилактике инфекционных осложнений в хирургии: методические рекомендации . М. , 1997 . С. 211.
66. Антибиотикопрофилактика и антибиотикотерапия основных форм хирургических инфекций: Методические рекомендации / [ Н. А. Ефименко , В. И. Хрупкин , П. Ф. Хвещук и др.] . М. : ГВМУ МО РФ , 2002 . 50с.
67. Зубков М. Н. Практическое руководство по клинической микробиологии и антимикробной терапии для врачей стационарной помощи / М. Н. Зубков . М. : МГУП. , 2002 . 270 с.
68. Антибактериальная терапия в комплексном лечении больных перитонитом / Брискин Б. С., Хачатрян Н. Н., Ионов С. А., Хмелевский С. В. // В кн.: Антимикр. терапия тяжелых инфекций в стационаре. М. , 2003 . С. 3445.
69. Антибиотикопрофилактика и терапия при панкреонекрозе / Гельфанд Б. Р. , Бурневич С. З. , Брюхов А. Н. , Пухаев А. Д. // В кн. : Антимикробная терапия тяжелых инфекций в стационаре . М. , 2003. С. 4658.
70. Гуляев А. Е. Антимикробная профилактика в хирургии / А. Е. Гуляев , С. В. Лохвицкий , В. Г. Ширинский. М. : Триада Х , 2003. С. 125.
71. Burke A. D. Antibiotic essentials / Burke A. , Cunha M. D. Physicians’ Press. 2003 . 406 p.
72. Biver A. L’infection de la plaie operatoire. Analyse et measures de prevention / Biver A. // Rev. med. Liege. 1973 . Vol. 28 . P.569 578.
73. Krizek T. J. Evolution of quantitative bacteriolodgy in wound management / Krizek T. J. , Robson M. C. // Am. J. Surg. 1975 . Vol. 130 . P.579 584.
74. Давыдовский И. В. Раневая инфекция, раневая интоксикация и раневое истощение / И. В. Давыдовский // В кн. : Труды конференции по раневой инфекции. М. : Медицина , 1946 . С.21 40.
75. Коррекция антибактериальной терапии при лечении озоном гнойновоспалительных процессов в неотложной хирургии / [Васина Т. А. , Лазарева Е.Б. , Шестоперов В. Е. , Гогось Б. М.] Озон в биологии и медицине: тезисы докладов 2й Всерос. научнопракт. конф. Н. Новгород. , 1995 . С. 32.
76. Лазутиков О. В. Применение растворов, барботированных озоном в лечении первичных гнойных ран челюстнолицевой области и шеи: автореф. дис. канд. мед. наук / О. В. Лазутиков Воронеж , 1997 . 20 с.
77. Муратов И. Д. Использование озона для местного лечения гнойновоспалительных процессов / И. Д. Муратов // Детская хирургия . М. : Медицина , 2005 . №1 . С. 50 53.
78. Necrotizing fasciitis successfully treated with extracorporeal blood oxygenation and ozonization (EBOO) / Di Paolo N., Bocci V., Cappelletti F. et al. // Int. J. Artif. Organs. 2002 . Vol. 25 . Р. 1194 1198.
79. Stubinger S. The use of ozone in dentistry and maxillofacial surgery: a review / Stubinger S., Sader R., Filippi A. // Quint. Int. 2006 . Vol. 37 , № 5 . Р.353 359.
80. Гречко Б. Н. Использование озона и озонированныхрастворов в лечении гнойных ран / Б. Н. Гречко // Озон и методы эфферентной терапии в медицине: 3й Всерос. н.практ. конф. : тезисы докл. Н. Новгород , 1998 . С. 74 75.
81. Безрукова И. В. Использование медицинского озона в стоматологии / И. В. Безрукова , А. И. Грудянов // Стоматология. М.: Медиасфера, 2001. том №80, №2. С 6163.
82. Anterior chamber irrigation with an ozonated solution as prophylaxis against infectious endophthalmitis / Takahashi H. , Fujimoto C. , Matsui H. et all // J Cataract. Refract. Surg. 2004 . Vol. 30 , № 8 . Р. 1773 1780.
83. Di Paolo N. Extracorporeal blood oxygenation and ozonation: clinical and biological implications of ozone therapy / Di Paolo N., Gaggiotti E., Galli F. // Redox Rep. 2005 . Vol. 10 . № 3 . Р. 121 130.
84. Маслеников О. В. Озонотерапия / О. В. Маслеников , К. Н. Конторщикова // Внутренние болезни. Н. Новгород : ВекторТиС. , 2003 . С. 24 26.
85. Белобородова Н. В., Меновщикова Л. Б. // Consilium Medicum. 2000 . Т. 2 ,
№ 4 . С. 162166.
86. Глухое А. А. Лечение перитонита с применением новых технологий, включающих гидропрессивную санацию брюшной полости и озонотерапию: Автореф. дис. д. мед. наук / А. А. Глухое . Воронеж , 1999. 20 с.
87. Дмитриев В. В. Местное применение озонированного раствора у больных с переломами нижней челюсти: Автореф. дис. к. мед. наук / В.В. Дмитриев Воронеж , 2000 . 20 с.
88. Sciatica: Treatment with Intradiscal and Intraforaminal Injections of Steroid and OxygenOzone versus Steroid Only / Gallucci M. , Limbucci N. , Zugaro L. // Radiology . 2007 . Vol. 242 , №3 . Р. 907 913.
89. Применение озонотерапии в комплексном лечении трофических язв нижних конечностей венозной этиологии /[ Н. А. Кузнецов, Г. В. Родоман , Л. А. Лаберко и др.] Матер. 2й конф. Асс. флебологов России . М. 1999 . С. 21.
90. Использование озонированного раствора в комплексном лечении больных с панкреатонекрозом / [Ю. А. Пархисенко , А. А. Глухов , И. П. Мошуров и др. ] Нижнегород. Мед. журн. : приложение Озонотерапия . 2005 . С. 149 150.
91. Снигоренко А. С. Озонотерапия острого парапроктита / А. С. Снигоренко , С. В. Семенов , В. А. Мормышев // Нижнегород. Мед. журн.: приложение Озонотерапия. 2005 . С. 156.
92. Huth K. C. Effect of ozone on noncavitated fissure carious lesions in permanent molars. A controlled prospective clinical study / Huth K. C. , Paschos E. , Brand K. // Am J Dent. 2005 . Vol. 18 , № 4 . Р. 223 228.
93. Колесова О. Е. Озон в биологии и медицине / О. Е. Колесова , Г. В. Леонтьева // Материалы 2й Всерос. Г. В. н.практ. конф. с междунар. участием. Н. Новгород , 1995 . С. 45.
94. Васильев И. Т. Антибактериальное и иммунокоррегирующее действие озона при перитоните / И. Т. Васильев , И. Н. Марков , Р. Б. Мумладзе // Вестник хирургии . 1995 . Т. 54 , №3 . С. 5660.
95. Влияние озонированной питательной среды на кинетику роста и отмирания культуры Escerichia coli / Белых И. А., Высеканцев И. П., Зинченко В. Д., Казанжан С. В. // Місцеве та парентеральне використання озонотерапії в медицині: збірник наукових робіт ІІІ Української науковопрактичної конференції з міжнародною участю . Харків , 2003 . С. 42.
96. Мирошин С. И. Результаты изучения сравнительной бактерицидности озонированных и неозонированных антисептиков / С. И. Мирошин , Г.Н. Ладыгина // Озон в биологии и медицине : Тезисы докладов 2й Всерос. научнопракт. конф. Н. Новгород . 1995 . С. 10.
97. Озонотерапия в комплексе лечения больных с обширными поражениями мягких тканей, вызванными анаэробной инфекцией / Родоман Г. В., Лаберко Л.А., Кальсин Г. А., Оболенский В. Н. // Современные проблемы практической хирургии : сб. научн. трудов . М . 2000 . С. 158 170.
98. Achen M. Efficacy of ozone against Escherichia coli 0157:H7 on apples / Achen M., Yousef A. E. // J Food Sci. 2001 . Vol. 66 , № 9 . P. 1380 1384.
99. Андоус В. Н. Эффективность озона против микроорганизмов на тестповерхностях / В. Н. Андоус // Экологоэпидемиологический надзор за природноочаговыми инфекциями в Северном Прикаспии: сб. науч. трудов . Астрахань , 1996 . С. 154.
100. Давиденко В. Б. Використання озонотерапії в лікуванні хірургічних захворювань у дітей / В. Б. Давиденко , С. Ю. Штикер // Харківська хірургічна школа . 2007 . №3 . С. 104 106.
101. Озонотерапия в неврологии / [Густов А. В. , Котов С. А. , Конторщикова К. Н. , Потехина Ю. П.]. Н. Новгород : Литера , 1999 . 179 с.
102. Микробиология /[ Т. В. Трухаева , В. Б. Гаврилов , Г. А. Малама , В. А. Астахов ] . 1992 . Т. 61 , № 4 . С. 660665.
103. In vitro assessment of antibacterial activity of ozonized water against Staphylococcus aureus / Velano H. E. , do Nascimento L. C. , de Barros L. M. , Panzeri H. // Pesqui Odontol Bras . 2001 . Vol. 15 , № 1 . Р.1822.
104. Evidence for antibodycatalyzed ozone formation in bacterial killing and inflammation / Wentworth P. Jr. , Mc Dunn J. E. , Wentworth A. D. , et all //