Накарякова Наталья Ивановна. Разработка лекарственных препаратов на основе пиона садовых сортов : Накарякова Наталія Іванівна. Розробка лікарських препаратів на основі півонії садових сортів Natalya Ivanovna Nakaryakova. Development of medicinal products based on garden varieties of peony

Краткое описание

Накарякова Наталья Ивановна. Разработка лекарственных препаратов на основе пиона садовых сортов: диссертация ... кандидата Фармацевтических наук: 14.04.01 / Накарякова Наталья Ивановна;[Место защиты: ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации], 2019

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования
«Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства
здравоохранения Российской федерации
На правах рукописи
Накарякова Наталья Ивановна
РАЗРАБОТКА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ
ПИОНА САДОВЫХ СОРТОВ
14.04.01 - технология получения лекарств
ДИССЕРТАЦИЯ
на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук
Научный руководитель:
Кандидат фармацевтических наук, доцент М.М. Смирнова
Пермь - 2018
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 7
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 16
1.1. Сведения о пионе уклоняющемся и пионе садовых сортов 16
1.1.1. Характеристика и распространение рода Paeonia L 16
1.1.2. Морфологическая характеристика 17
1.1.3. Распространение 19
1.1.4. Заготовка 20
1.1.5. Химический состав 21
1.2. Основные группы БАВ и их фармакологическое действие 21
1.2.1. Монотерпеновые гликозиды (иридоиды) 21
1.2.2. Флавоноиды 23
1.3. Современные подходы к анализу сырья пиона уклоняющегося и пиона
молочноцветкового 25
1.3.1. Анализ монотерпеновых гликозидов 25
1.3.2. Анализ флавоноидов 26
1.4. Применение пиона в медицине 27
1.4.1. Область применения 27
1.4.2. Лекарственные препараты на основе пиона уклоняющегося и пиона
садовых сортов 29
1.5. Современное состояние и тенденции разработки фитопрепаратов
седативного действия 32
Заключение по главе 1 41
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 42
2.1. Объекты исследования и вспомогательные вещества 42
2.1.1. Объекты исследования 42
2.1.2. Вспомогательные вещества 43
2.2. Методы исследования 44
2.2.1. Определение подлинности ЛРС 44
2.2.2. Определение числовых показателей ЛРС 44
2.2.3. Качественный анализ БАВ 45
2.2.3.1. Качественные реакции 45
2.2.3.2. Хроматографический анализ БАВ 46
2.2.4. Количественное определение монотерпеновых гликозидов 47
2.2.5. Исследование микроэлементного состава 49
2.2.6. Физико-химические и технологические методы исследования
«Пионифит» экстракта сухого 49
2.2.6.1. Потеря в массе при высушивании 49
2.2.6.2. Растворимость 50
2.2.6.3. Степень сыпучести порошков 50
2.2.7. Определение микробиологической чистоты 51
2.2.8. Методы анализа пленок лекарственных 51
2.2.8.1. Определение относительной вязкости 51
2.2.8.2. Анализ по физико-химическим показателям 51
2.2.9. Биофармацевтические методы исследования пленок
лекарственных 53
2.2.10. Фармакологические методы исследования 53
2.2.10.1 Острая токсичность 53
2.2.10.2. Тест Ирвина 54
2.2.10.3. Тест спонтанной двигательной активности 54
2.2.10.4. Оценка противовоспалительной активности 55
2.2.10.5. Анксиолитическое действие 56
2.2.11. Обработка результатов 57
ГЛАВА 3. ФИТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ТРАВЫ ПИОНА УКЛОНЯЮЩЕГОСЯ И ПИОНА САДОВЫХ СОРТОВ 58
3.1. Оценка качества травы пиона уклоняющегося и пиона садовых сортов... 58
3.1.1. Макроскопический анализ 58
3.1.2. Микроскопический анализ 60
3.1.3. Товароведческий анализ 65
3.2. Фитохимический анализ БАВ пиона уклоняющегося и пиона садовых сортов 66
3.2.1. Качественный анализ флавоноидов 66
3.2.2. Качественный анализ монотерпеновых гликозидов 67
3.2.3. Исследование БАВ в траве пиона уклоняющегося и пиона садовых
сортов методом ГХ-МС 68
3.3. Количественное определение БАВ в траве пиона уклоняющегося и
пиона садовых сортов 71
3.3.1. Определение содержания экстрактивных веществ 71
3.3.2. Количественное определение флавоноидов 71
3.3.3. Количественное определение монотерпеновых гликозидов 77
3.3.4. Количественное определение пеонифлорина 78
3.3.5. Исследование макро- и микроэлементного состава 87
Выводы по главе 3 88
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ «ПИОНИФИТ» ЭКСТРАКТА СУХОГО И ЕГО СТАНДАРТИЗАЦИЯ 90
4.1. Оптимизация условий экстрагирования травы пиона садовых сортов... 90
4.1.1. Выбор экстрагента 90
4.1.2. Определение соотношения сырье - экстрагент 91
4.1.3. Определение оптимальной температуры извлечения БАВ из травы
пиона садовых сортов 92
4.1.4. Определение степени измельчения сырья 93
4.1.5. Определение времени наступления равновесной концентрации 94
4.1.6. Определение кратности экстракции 95
4.2. Технологическая схема получения «Пионифит» экстракта сухого 96
4.3. Стандартизация «Пионифит» экстракта сухого 99
4.3.1. Определение качественного состава «Пионифит» экстракта сухого 99
4.3.1.1. Определение БАВ в «Пионифит» экстракте сухом с использованием
качественных реакций 99
4.3.1.2. Хроматография в тонком слое 100
4.3.1.3. Исследование «Пионифит» экстракта сухого методом ГХ-МС 105
4.3.2. Количественное определение БАВ в «Пионифит» экстракте сухом ... 106
4.3.2.1. Определение содержания монотерпеновых гликозидов в
«Пионифит» экстракте сухом 106
4.3.2.2. Количественное определение флавоноидов в «Пионифит» экстракте
сухом 111
4.3.2.3. Анализ пеонифлорина в «Пионифит» экстракте сухом методом
ВЭЖХ 118
4.3.3. Исследование физико-химических и технологических показателей
«Пионифит» экстракта сухого 123
4.3.4. Изучение микробиологической чистоты 124
4.3.5. Изучение сроков годности и условий хранения «Пионифит» экстракта
сухого 125
Выводы по главе 4 129
ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА СОСТАВА, ТЕХНОЛОГИИ И ИССЛЕДОВАНИЕ ПЛЕНОК ЛЕКАРСТВЕННЫХ «ПИОНИФИТ» 130
5.1. Разработка состава и технологии пленок лекарственных
«Пионифит» 130
5.1.1. Выбор компонентов основы пленок лекарственных 130
5.1.2. Кинетические исследования процесса растворения пленок
лекарственных 133
5.1.3. Разработка технологии пленок лекарственных «Пионифит» 137
5.2. Стандартизация пленок лекарственных «Пионифит» 140
5.2.1. Анализ по физико-химическим показателям 140
5.2.2. Качественный анализ и количественное определение БАВ в пленках
лекарственных «Пионифит» 141
5.3. Изучение микробиологической чистоты пленок лекарственных
«Пионифит» 145
5.4. Исследование стабильности пленок лекарственных «Пионифит» 146
Выводы по главе 5 149
ГЛАВА 6. ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРЕПАРАТОВ ПИОНА САДОВЫХ СОРТОВ 150
6.1. Исследование безопасности «Пионифит» экстракта сухого 150
6.1.1. Определение острой токсичности 150
6.1.2. Исследование нейротоксикологического про филя 151
6.1.3. Исследование влияния «Пионифит» экстракта сухого на спонтанную
двигательную активность 151
6.2. Исследование эффективности препаратов на основе пиона садовых сортов 153
6.2.1. Изучение противовоспалительной активности 153
6.2.2. Изучение анксиолитического действия 155
Выводы по главе 6 159
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 160
СПИСКОК СОКРАЩЕНИЙ 162
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 164
ПРИЛОЖЕНИЯ 178
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования
В настоящее время важным вопросом в медицине, требующим решения, является терапия неврозов и неврозоподобных состояний, рост которых обусловлен возросшим числом и интенсивностью психотравмирующих факторов, действующих на человека в современном обществе [97].
При лечении невротических расстройств и фармакологической коррекции стресса широко используются транквилизаторы, антидепрессанты и седативные средства [23].
Поскольку данные состояния требуют длительного лечения, особое значение приобретает безопасность и переносимость применяемых
лекарственных средств. Использование синтетических лекарственных препаратов для лечения заболеваний центральной нервной системы (ЦНС) сопровождается рядом побочных эффектов: гиперседация, нарушения памяти и внимания, метаболические, гормональные изменения, развитие лекарственной зависимости и т.д [57, 58]. Данные факторы ограничивают возможность их применения.
Поэтому особый интерес вызывают препараты растительного
происхождения, применяющиеся в медицине для лечения расстройств тревожно- депрессивного спектра. К растениям, используемым для изготовления таких фитопрепаратов, относятся зверобой продырявленный (Hipericum perforatum L.) и зверобой пятнистый (Hipericum maculatum Crantz), мята перечная (Mentha piperita L.), валериана лекарственная (Valeriana officinalis L.), пустырник пятилопастный (Leonurus quinquelobatus Gilib.) и пустырник сердечный (Leonurus cardiaca L.) и т.д. Кроме того, по данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 80% населения планеты отдают предпочтение именно препаратам растительного происхождения [110].
Одним из перспективных источников для получения фитопрепаратов седативного действия являются растения рода Пион (Paeonia). Пион уклоняющийся (Paeonia anomala L.) - ценное лекарственное растение, широко применяемое медицине. Лечебные препараты на его основе обладают
успокаивающим, противосудорожным, анксиолитическим,
противовоспалительным, обезболивающим, тонизирующим, бактерицидным действием [5, 87]. Однако в настоящее время объем заготовок сырья этого вида ограничен, поскольку пион уклоняющийся произрастает рассеянно, не образуя продуктивных зарослей, необходимо использование ручного труда при заготовке сырья, повторные заготовки допускается проводить только через 5 лет. Помимо этого, растение занесено в Красную книгу Среднего Урала в 1996 году. Морфологически близкими видами пиона уклоняющегося являются
культивируемые пионы садовых сортов. Использование травы пиона садовых сортов в качестве сырья для разработки лекарственных препаратов позволит решить вопрос недостаточности сырьевой базы.
В настоящее время из сырья пиона уклоняющегося предложено изготавливать водные извлечения, кроме того, выпускается настойка, которая является седативным препаратом растительного происхождения. Однако данная лекарственная форма имеет ряд существенных недостатков (неточность дозирования, неудобство применения и транспортировки), имеет ограничения в применении у детей и лиц пожилого возраста, пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта. Решением данной проблемы является разработка экстракта сухого из сырья пиона садовых сортов с целью получения субстанции для создания новых лекарственных препаратов.
Усиленное развитие научных исследований в области биофармации убедительно показало, что важное значение имеет правильно выбранная лекарственная форма, которая обеспечивает и удобство применения, и эффективность действия содержащихся в ней фармакологически активных веществ. С этой точки зрения перспективной лекарственной формой являются пленки лекарственные. Поэтому разработка пленок лекарственных на основе экстракционных препаратов травы пиона садовых сортов открывает новые возможности для применения данного растения.
Таким образом, актуальным вопросом современной медицины является разработка и внедрение новых препаратов растительного происхождения для профилактики и лечения заболеваний нервной системы.
Цель и задачи исследования
Целью настоящего исследования является сравнительное изучение пиона уклоняющегося и пиона садовых сортов и разработка экстракционных и полимерных лекарственных форм на основе пиона садовых сортов.
Для достижения поставленной цели требовалось решить следующие задачи:
- провести сравнительный анализ травы пиона уклоняющегося и травы пиона садовых сортов по морфологическим признакам и химическому составу;
- подобрать оптимальные условия экстракции основных групп биологически активных веществ (БАВ) из травы пиона садовых сортов и разработать технологию экстракта сухого - «Пионифит»;
- разработать методики качественного и количественного анализа основных групп БАВ в траве пиона садовых сортов и «Пионифит» экстракте сухом;
- разработать состав и технологию пленок лекарственных (ПЛ) «Пионифит»;
- установить оптимальные условия и сроки хранения «Пионифит» экстракта сухого и пленок лекарственных «Пионифит»;
- изучить безопасность и фармакологическую активность «Пионифит» экстракта сухого и ПЛ «Пионифит».
Научная новизна
На основании фитохимических исследований установлено сходство пиона уклоняющегося и пиона садовых сортов по морфологическим признакам и химическому составу. Адаптированы методики, и впервые проведено количественное определение флавоноидов и пеонифлорина в траве пиона уклоняющегося и пиона садовых сортов.
В результате проведенных научно-экспериментальных исследований подобраны условия выделения комплекса БАВ из травы пиона садовых сортов, которые легли в основу способа получения экстракта сухого - «Пионифит». Предложены методы анализа, валидированы методики определения основных групп БАВ, и проведена стандартизация «Пионифит» экстракта сухого. Определены условия и срок хранения «Пионифит» экстракта сухого.
Впервые подобран состав и разработана технология пленок лекарственных «Пионифит». Проведена стандартизация разработанной лекарственной формы по содержанию основных групп БАВ, технологическим и физико-химическим показателям. Изучена стабильность ПЛ при хранении. Проведено исследование острой токсичности и различных видов специфической фармакологической активности препаратов на основе травы пиона садовых сортов, доказано противовоспалительное и анксиолитическое действие.
Подано и зарегистрировано заявление о выдаче патента Российской федерации на изобретение «Способ переработки травы пиона садовых сортов», регистрационный № 2018115893 от 28.04.2018 (приложение 5).
Практическая значимость
Разработан способ получения «Пионифит» экстракта сухого. На основании проведенных исследований разработаны и внедрены:
- опытно-промышленный регламент на производство пиона садовых сортов экстракта сухого, согласованный с ОАО «Биохиммаш» (акт апробации от 14.12.2016) (приложение 1, 2);
- методики количественного определения флавоноидов и монотерпеновых гликозидов в пиона садовых сортов экстракте сухом (акты апробации от 20.02.2017 - воспроизведение методик в условиях лаборатории ФКП «Армавирская фабрика) (приложение 3, 4);
- учебно-методическое пособие «Пленки лекарственные на основе извлечений из травы пиона садового» (утверждено и одобрено Центральным Методическим Советом ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава России (протокол № 6 от «15» мая 2018 г.) (акт внедрения от 08.06.2018; акт апробации от 04.07.2018 в условиях лаборатории РИЦ «Фарматест» ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России) (приложение 6, 7);
- технология пленок лекарственных «Пионифит» (акт апробации от
20.06.2018) (приложение 8).
Результаты исследований используются в учебном процессе:
- на кафедре фармацевтической технологии ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава России (акт внедрения от 08.06.2018) (приложение 9);
- на кафедре Фармации и химии фармацевтического факультета ФГБОУ ВО «Южно-уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (акты внедрения от
30.04.2018) (приложение 10, 11);
Методология и методы исследования
Методология исследования основана на фармакогностическом изучении лекарственного растительного сырья, основных технологических условиях разработки экстракционных и полимерных лекарственных форм, а также базируется на комплексном подходе разработки унифицированных методик сквозной стандартизации лекарственного растительного сырья и готовых препаратов.
В диссертационном исследовании использованы теоретические, технологические, химические, физико-химические, микробиологические биофармацевтические, фармакологические и статистические методы, обеспечивающие разработку эффективных и безопасных лекарственных препаратов.
Положения, выносимые на защиту
- результаты изучения морфологических признаков, качественного химического анализа и количественного определения БАВ в пиона уклоняющегося траве и пиона садовых сортов траве;
- результаты изучения оптимальных условий экстрагирования БАВ из пиона садовых сортов травы с целью получения экстракта сухого;
- результаты стандартизации «Пионифит» экстракта сухого по органолептическим, технологическим, химическим, микробиологическим параметрам и определения их стабильности;
- результаты по выбору оптимального состава и технологии ПЛ «Пионифит», включая биофармацевтические исследования кинетики высвобождения активных компонентов из ПЛ;
- результаты стандартизации ПЛ «Пионифит» по показателям подлинность, количественное определение БАВ, физико-химическим параметрам, а также изучения их стабильности в процессе хранения ПЛ;
- результаты исследования безопасности и специфической фармакологической активности препаратов пиона садовых сортов (анксиолитической и противовоспалительной).
Степень достоверности
Экспериментальные исследования проводились с использованием современных технологических, химических, физико-химических, биофармацевтических и фармакологических методов, позволяющих получать воспроизводимые и однозначные результаты. Все полученные данные статистически обработаны и достоверны. Статистическая обработка результатов исследований проведена согласно ГФ XIII с использованием программы «Microsoft Exel», статистического пакета «Statistica 6.0». Заключения и научные положения, изложенные в диссертационной работе, достоверны и вытекают из полученных результатов.
Апробация результатов
Основные положения и результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на:
- межрегиональной студенческой научной конференции с международным участием «Актуальные вопросы студенческой молодежной медицинской науки» (г. Рязань, 2014 г.);
- всероссийской научно-практической конференции с международным участием «YSRP-2015» (2015 г.);
- научно-практической конференции памяти профессора А.В. Казьянина «Инновации в биофармацевтике» (г. Пермь, 2015 г.);
- научно-практической конференции с международным участием «Фармацевтическая наука и практика: достижения, инновации, перспективы» (г. Пермь, 2015 г.);
- XXII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва, 2015 г.);
- научно-практической конференции с международным участием «Создание конкурентоспособных лекарственных средств - приоритетное направление инновационного развития фармацевтической науки» (г. Пермь, 2016 г.);
- VI всероссийской научной конференции студентов и аспирантов с международным участием «Молодая фармация - потенциал будущего» (г. Санкт-Петербург, 2016 г.);
- научно-практической конференции с международным участием «Создание конкурентоспособных лекарственных средств - приоритетное направление инновационного развития фармацевтической науки» (г. Пермь, 2017 г.);
- Всероссийской научно-практической конференции с международным участием, посвященной памяти доцента Пешковой В.А. «Инновационные технологии в фармации» (г. Иркутск, 2018 г.).
Личный вклад автора
Автором диссертационной работы осуществлен научно-информационный поиск и обоснование темы диссертационной работы, выбор объектов исследования, постановка целей и задач. Все экспериментальные фрагменты выполнены при личном участии автора, выполнен комплекс лабораторных исследований и статистическая обработка полученных результатов. Оформлены результаты исследования и подготовлены публикации по теме работы.
Связь темы диссертации с планом основных научно-исследовательских
работ
Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России при поддержке программы «УМНИК» Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере (Пермь, 2015 г.)
Соответствие паспорту научной специальности
Основные положения диссертации соответствуют паспорту специальности 14.04.01 - технология получения лекарств. Результаты исследования
соответствуют области исследований специальности по пунктам 1, 3, 6.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 14 научных работ, из них 4 в журналах, рекомендованных ВАК при Минобрнауки России и 1 - в журнале, индексируемом реферативной базой Scopus.
Структура и объем диссертации
Диссертационная работа содержит основные разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, 4 главы экспериментальных исследований, заключение, список использованной литературы и приложения.
Диссертация изложена на 190 страницах печатного текста, содержит 59 таблиц и 31 рисунок. Список использованной литературы включает 137 литературных источников, в том числе 32 иностранных.
Во введении сформулирована актуальность исследования, цели и задачи, научная новизна и практическая значимость, положения, выносимые на защиту.
Глава 1 посвящена обзору отечественной и зарубежной литературы по исследованию травы пиона. Изложены данные по распространению рода Paeonia L., ареалу обитания, химическому составу, применению пиона уклоняющегося и пиона садовых сортов в научной и народной медицине, анализу ассортимента препаратов пиона. Показана необходимость использования пиона садовых сортов, а также расширения номенклатуры препаратов на основе изучаемого сырья.
В главе 2 описаны объекты, материалы и методы исследования, использованные в работе.
В главе 3 приведены результаты сравнительного фитохимического исследования травы пиона уклоняющегося и травы пиона садовых сортов.
В главе 4 представлены данные по установлению оптимальных условий экстрагирования травы пиона садовых сортов, получению пиона садовых сортов экстракта сухого - «Пионифит», по изучению основных показателей качества, условий и сроков хранения полученного препарата.
В главе 5 представлены результаты исследования оптимального состава ПЛ, технология получения ПЛ «Пионифит», результаты стандартизации полученного препарата.
Г лава 6 посвящена изучению безопасности и фармакологического действия препаратов на основе пиона садовых сортов.
В приложении представлены опытно-промышленный регламент на производство пиона садовых сортов экстракта сухого и акт апробации технологии в ОАО «Биохиммаш», акты апробации методик количественного определения суммы флавоноидов и суммы монотерпеновых гликозидов в пиона садовых сортов экстракте сухом и методик контроля качества ПЛ «Пионифит», учебно¬методическое пособие «Пленки лекарственные на основе извлечений из травы пиона садового», акты внедрения результатов научных исследований в учебный процесс.

Список литературы

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. В результате морфолого-анатомического исследования травы пиона уклоняющегося и травы пиона садовых сортов установлены идентичные морфолого-анатомические признаки. Установлено содержание основных групп биологически активных веществ: флавоноидов в пересчете на рутин в траве пиона уклоняющегося 3,69±0,15%, в траве пиона садовых сортов - от 3,15±0,12 до 3,59±0,17 %; монотерпеновых гликозидов в пересчете на пеонифлорин в траве пиона уклоняющегося 6,15±0,30%, в траве пиона садовых сортов - от 5,83±0,29 % до 7,81±0,38%; пеонифлорина в траве пиона уклоняющегося 0,103±0,004%, в траве пиона садовых сортов от 1,190%±0,010 до 1,214±0,010%.
2. Подобраны оптимальные условия экстракции травы пиона садовых сортов, позволяющие извлечь 98,54% суммы флавоноидов и 99,14% суммы монотерпеновых гликозидов от общего содержания в сырье. Разработана технологическая схема получения «Пионифит» экстракта сухого.
3. Разработаны методики качественного анализа и количественного определения биологически активных веществ в пиона садовых сортов траве и «Пионифит» экстракте сухом. Установлено содержание основных групп биологически активных веществ в «Пионифит» экстракте сухом: флавоноидов в пересчете на рутин 5,27 - 5,83%, монотерпеновых гликозидов в пересчете на пеонифлорин 12,18 - 13,71%, пеонифлорина 1,53±0,03%.
4. В результате проведенных органолептических, реологических и биофармацевтических исследований разработан состав и технология пленок лекарственных «Пионифит». Установлено содержание основных групп БАВ на 1 дозу ПЛ: флавоноидов в пересчете на рутин 2,350±0,056 мг, монотерпеновых гликозидов в пересчете на пеонифлорин 6,430±0,208 мг, пеонифлорина 0,725±0,008 мг. Определены физико-химические параметры ПЛ «Пионифит»: описание, однородность массы, толщина, время растворения, pH водного раствора, потеря в массе при высушивании.
Данные показатели подтверждают доброкачественность разработанного состава и позволяют контролировать качество лекарственной формы в процессе изготовления и хранения.
5. Исследованы условия и сроки хранения «Пионифит» экстракта сухого и ПЛ «Пионифит». Определен срок хранения «Пионифит» экстракта сухого 2 года при температуре не выше 25 °С и относительной влажности воздуха не более 60±5%. Установлена стабильность ПЛ «Пионифит» в течение 1 года при хранении при температуре 15 - 25 оС и относительной влажности не более 60±5%.
6. Установлено, что «Пионифит» экстракт сухой относится к IV классу
(малотоксичный препарат) согласно классификации токсичности по Hodge и Sterner. Доказано наличие противовоспалительной активности
«Пионифит» экстракта сухого и ПЛ «Пионифит» в дозах 25 мг/кг и 125 мг/кг на модели каррагенинового отека. Подтверждено анксиолитическое действие «Пионифит» экстракта сухого и ПЛ «Пионифит» в дозе 50 мг/кг в тестах «Приподнятый крестообразный лабиринт» и «Темная камера с отверстиями».