ФАСЦІОЛЬОЗ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ (ЦИТОГЕНЕТИЧНІ ДОСЛІДЖЕННЯ ЗА ВПЛИВУ ФАСЦІОЛОЦИДНИХ ПРЕПАРАТІВ) : Фасциольоз крупного рогатого скота (цитогенетические исследования ЗА ВЛИЯНИЯ ФАСЦИОЛОЦИДНИХ препаратов)

Краткое описание

ЛЬВІВСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ ТА БІОТЕХНОЛОГІЙ ІМЕНІ С.З. ГЖИЦЬКОГО

На правах рукопису

СОБОЛТА АНДРІЙ ГРИГОРОВИЧ

УДК 619: 616. 98: 619: 615: 636. 2

ФАСЦІОЛЬОЗ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ (ЦИТОГЕНЕТИЧНІ ДОСЛІДЖЕННЯ ЗА
ВПЛИВУ ФАСЦІОЛОЦИДНИХ ПРЕПАРАТІВ)

16.00.11 паразитологія, гельмінтологія

Дисертація на здобуття наукового ступеня
кандидата ветеринарних наук

Науковий керівник:
Секретарюк Кім Васильович,
доктор біологічних наук, професор,
заслужений працівник ветеринарної
медицини України

Львів ― 2009

ЗМІСТ

ПЕРЕЛІК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4

ВСТУП . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

5

РОЗДІЛ. 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ І ВИБІР НАПРЯМІВ ДОСЛІДЖЕНЬ

12

1.1. Епізоотологічні особливості фасціольозу великої рогатої худоби . . . . .

12

1.2. Генетичні аспекти системи паразит-хазяїн за гельмінтозів . . . . . . . . . . .

14

1.3. Морфологічні і біологічні аспекти Fasciola hepatica (репродуктивна
система, мітоз та мейоз, ценогенетичні адаптації) . . . . . . . . . . . . . . . . . .

19

1.4. Класифікація та механізм дії фасціолоцидів на Fasciola hepatica
(заміщені феноли, саліциланіди, бензимідазоли, сульфонаміди,
ароматичні аміди) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

24

1.5. Вплив фасціолоцидів на репродуктивну систему
Fasciola hepatica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

31

1.6. Резистентність гельмінтів до антигельмінтиків . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

33

1.7. Резистентність Fasciola hepatica до фасціолоцидів . . . . . . . . . . . . . . . . .

36

1.8. Генетична природа резистентності . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

39

1.9. Підходи до вивчення резистентності до антигельмінтиків . . . . . . . . . . .

40

1.10. Висновок до огляду літератури і вибір напрямів досліджень . . . . . . . .

43

РОЗДІЛ 2 . ЗАГАЛЬНА МЕТОДИКА І ОСНОВНІ МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ

45

РОЗДІЛ 3. РЕЗУЛЬТАТИ ВЛАСНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

55

3.1 Проведення епізоотичного моніторингу щодо
фасціольозу у західному регіоні України . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

55

3.2. Вивчення мітотичної активності та частоти геномної і хромосомної
мінливості у популяціях соматичних клітин селезінки клінічно
здорових та спонтанно заражених збудниками фасціольозу тварин . . .

57

3.3. Вивчення мітотичної активності та частоти геномної і
хромосомної мінливості у популяціях соматичних клітин
печінкових лімфовузлів клінічно здорових та спонтанно
заражених збудниками фасціольозу тварин . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

69

3.4. Вивчення впливу фасціольозної інвазії та фасціолоцидів
на стабільність геному великої рогатої худоби за допомогою
мікроядерного тесту . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

73

3.5. Порівняльна терапевтична ефективність комбітрему,
бровальзен-емульсії та бронтелу 10 % за розвитку фасціольозу . . . . . . . .

75

3.6. Проведення мікроядерного тесту з метою вивчення
мутагенності фасціолоцидів у великої рогатої худоби . . . . . . . . . . . . . .

77

3.7. Дослідження впливу фасціолоцидів на
статевозрілі форми Fasciola hepatica in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

79

3.8. Дослідження біологічної резистентності яєць
Fasciola hepatica до бровальзену in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

82

3.9. Визначення біологічної резистентності яєць
Fasciola hepatica до бронтелу 10 % in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

86

3.10. Визначення біологічної резистентності яєць
Fasciola hepatica до комбітрему in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

87

3.11. Вивчення сперматогенезу у Fasciola hepaticа . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

89

3.12. Вплив фасціолоцидів на сперматогенез
Fasciola hepaticа in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

93

3.13. Вплив фасціолоцидів на мейоз Fasciola hepaticа in vitro. . . . . . . . . . . .

98

РОЗДІЛ 4. АНАЛІЗ І УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ . . . . . .

105

ВИСНОВКИ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

121

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

124

ДОДАТКИ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

125

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

137

ПЕРЕЛІК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ

F. hepatica Fasciola hepatica
DAMD діамфенетид
LC 50 летальна концентрація
TB-SX триклабендазолу сульфоксид
ДР діюча речовина
ЕЕ екстенсефективність
ЕІ екстенсивність інвазії
ІІ інтенсивність інвазії
К.Ф. коефіцієнт фаз
М.І. мітотичний індекс
МТ мікроядерний тест
МЯ мікроядро
Пат.міт. патологічні мітози

ВСТУП

Фасціольоз є одним з найбільш поширених гельмінтозів у різних клімато-географічних зонах. Це завдає значних економічних збитків тваринництву, які складаються: з масової загибелі худоби під час епізоотій; значних втрат маси тіла внаслідок виснаження тварин; зниження надоїв у корів; погіршення якості шкіри; зниження репродуктивної здатності у тварин, народження слабо життєздатного молодняку; вибракування уражених печінок від забитих тварин; погіршення смакових якостей м’яса і зниження забійного виходу у тварин; збільшення витрат на проведення додаткових лікувально-профілактичних заходів.
Плодючість інвазованої фасціолами великої рогатої худоби знижується на 15 %, молочна продуктивність на 34 %, м’ясна продуктивність на 28 %. У фасціольозних ремонтних телиць на місяць затримується поява еструса, а надій у першу лактацію знижується на 9 %. Від заражених фасціолами корів господарства втрачають у середньому за рік 223 кг молока, або 10,2 %. У хворого на фасціольоз молодняку великої рогатої худоби середньодобові прирости на 55 г або на 10,44 %, нижчі порівняно з приростами здорових тварин.
Отже, фасціольоз наносить значних економічних збитків тваринництву і потребує подальшого вивчення на рівні системи паразит-хазяїн з використанням цитогенетичних методів досліджень.
Актуальність теми. Одне з провідних місць у сучасній біології та ветеринарній медицині займає питання вивчення стабільності геному тварин та впливу на нього біотичних і абіотичних чинників. Адже, основою теоретичних та прикладних аспектів ветеринарної гельмінтології є поглиблення знань про характер мутагенної дії гельмінтів та антигельмінтиків на організм хазяїна і паразита. Тому важливим є всебічне пізнання розширених питань патогенезу, як динамічного комплексу, що розвивається в результаті масивного пошкодження систем організму різними подразниками [14, 44, 55, 71, 85, 113, 127, 128, 129].
Вивчення системи паразит-хазяїн та природи механізмів взаємовідносин на цитогенетичному рівні викликає велике зацікавлення у науковців. Це пояснюється не лише загальнотеоретичним, але й широким практичним значенням проблеми. Адже, інвазійні хвороби тварин і досі завдають значних економічних збитків господарствам різних типів та форм власності. Також значною проблемою у ветеринарній гельмінтології, яка щораз зростає, є резистентність гельмінтів до антигельмінтиків. Це одне із важливих завдань для проведення нових досліджень, особливо з виявлення механізмів розвитку антигельмінтної резистентності і можливостей запобігання цього явища та вивчення впливу фасціолоцидів на статевий апарат паразитів, а саме на мітоз та мейоз [7, 64, 65]. У зв’язку із великим значенням проблеми та закономірностям становлення біологічної системи паразит-хазяїн за розвитку гельмінтозів і ролі чинників внутрішнього та навколишнього середовищ в еволюції системи присвячені наукові праці, монографії та оглядові роботи вітчизняних та закордонних авторів [5, 20, 25, 41, 26, 29, 39, 59, 84, 86, 88, 96, 103, 110, 111, 115, 126, 130, 134, 148, 169, 218, 224].
Досягнення значних успіхів у вивченні патогенезу фасціольозу зумовлено інтенсивною розробкою вказаних наукових напрямів. Але використання цитогенетичних методів з вивчення мутагенної дії гельмінтів та антигельмінтиків на організм хазяїна, а відтак і на виникнення ”хромосомних хвороб, ще недостатньо привертає увагу дослідників. Виходячи з цього, нині є актуальним комплексне дослідження впливу фасціол та фасціолоцидних препаратів на хромосомний апарат та цитогенетичний статус великої рогатої худоби. За розвитку фасціольозу, згідно з даними іноземної та вітчизняної літератури, це питання залишається недостатньо вивченим, а в Україні розробляється вперше, має як теоретичне, так і практичне значення.
Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисертаційна робота виконувалась у рамках наукової тематики кафедри паразитології та іхтіопатології Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.3. Гжицького і є фрагментом наукових досліджень теми ”Екосистемний моніторинг паразитозів свиней, великої рогатої худоби і ставових риб: профілактика та терапія (номер держреєстрації 0104U009415).
Мета і завдання дослідження. Мета роботи полягала у вивченні впливу Fasciola hepatica на стабільність геному хазяїна, з’ясуванні окремих ланок патогенезу, а також особливостей мутагенної дії комбітрему, бронтелу 10 % і бровальзен-емульсії та можливої біологічної резистентності до них у системі паразит-хазяїн.
Досягнення цієї мети здійснювали шляхом таких завдань:
вивчити епізоотичну ситуацію щодо фасціольозної інвазії в західному регіоні України;
визначити цитогенетичні та морфологічні зміни в лімфоїдних органах клінічно здорових і спонтанно заражених тварин;
встановити мутагенний вплив F. hepatica на геном тварин за допомогою мікроядерного тесту;
провести порівняльний аналіз терапевтичної ефективності та мутагенної активності препаратів (комбітрему, бронтелу 10 % та бровальзен-емульсії) у великої рогатої худоби;
провести дослідження можливого впливу фасціолоцидних препаратів in vitro на статевозрілих паразитів F. hepatica;
розробити методику оцінки ефективності фасціолоцидів in vitro та встановити вплив комбітрему, бронтелу 10 % і бровальзену на зародки в яйцях і мірацидії F. hepatica in vitro та визначити їх біологічну резистентність;
вивчити сперматогенез F. hepaticа і встановити мутагенність фасціолоцидів на сперматогенез та мейоз F. hepaticа in vitro.
Об’єкт дослідження: система паразит-хазяїн, геном великої рогатої худоби за впливу Fasciola hepatica та фасціолоцидних препаратів, його цитогенетичні показники, дія антигельмінтиків на сперматогенез, зародок яєць гельмінтів та їх личинок.
Предмет дослідження: клінічно здорова та спонтанно інвазована збудником фасціольозу велика рогата худоба, а також дегельмінтизована фасціолоцидними препаратами, активно-мітотичні та імуно-компетентні органи і кров тварин, Fasciola hepatica, антигельмінтики комбітрем, бронтел 10 % і бровальзен-емульсія.
Методи дослідження: паразитологічні, епізоотологічні, клінічні, гематологічні, цитогенетичні, цитологічні, експериментальні та статистичні.
Наукова новизна одержаних результатів. В межах здійснення комплексного підходу до вивчення проблеми фасціольозу у системі паразит-хазяїн із запровадженням цитогенетичних методів дослідження, вивчалися різноманітні прояви мутагенної дії гельмінтів та антигельмінтиків на організм тварин.
Уперше в Україні з’ясовано кількісні характеристики мутагенного впливу фасціол, а також цитогенетичні порушення в соматичних клітинах активно-мітотичних та імуно-компетентних органів (селезінки, печінкових лімфатичних вузлів) великої рогатої худоби, досліджено їх мітотичну активність і частоту спонтанних патологічних мітозів (геномну і хромосомну мінливість).
За допомогою мікроядерного тесту встановлено опосередкований вплив Fasciola hepatica на стабільність геному великої рогатої худоби, який проявлявся збільшенням кількості еритроцитів з мікроядрами, залежно від ступеня інвазії.
На основі вдосконалених нами цитогенетичних і цитологічних досліджень виявлено стадії сперматогенного та мейотичного циклів у Fasciola hepatica. Встановлено вплив фасціолоцидних препаратів на репродуктивну систему, ценогенез, сперматогенез, мейоз F. hepatica, що оптимізує вивчення особливостей розвитку антигельмінтної резистентності цих паразитів.
Про наукову новизну також свідчать вперше отримані дані щодо виявлення біологічної резистентності яєць фасціоли до фасціолоцидних препаратів, отримано деклараційний патент на корисну модель № 7771, Україна МПК 7 А01К67/00 ”Спосіб оцінки ефективності фасціоліцидів іn vitro / Секретарюк К.В., Соболта А.Г./ Заявл. 25.10.2004, Опубл.15.07.2005 р., Бюл. № 7.
Практичне значення одержаних результатів визначається використанням отриманих даних цитогенетичних та цитологічних методів у практиці ветеринарної гельмінтології. В результаті проведених досліджень вивчено прояв мутагенної дії F. hepatica на організм тварин та її патогенність на цитогенетичному рівні, що дозволяє розширити наукові знання з патогенезу за розвитку фасціольозу.
У господарствах західних областей України проведено порівняльну оцінку результатів копроовоскопічних досліджень шляхом аналізу звітної документації лабораторій ветеринарної медицини, що має значення у вивченні епізоотичної ситуації щодо фасціольозу.
Дослідження in vitro дозволили провести скринінг сучасних фасціолоцидів на їх мутагенність та ефективність дії.
На підставі одержаних експериментальних даних були розроблені та затвердженні вченою радою Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.3. Гжицького методичні рекомендації ”Цитогенетична оцінка впливу Fasciola hepatica та фасціолоцидних препаратів на організм великої рогатої худоби.
Одержані результати досліджень використовуються у навчальному процесі та науково-дослідній роботі у Львівському національному університеті ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.3. Гжицького, Національному університеті біоресурсів і природокористування України (м. Київ), Полтавській державній аграрній академії, Житомирському національному агроекологічному університеті, Білоцерківському національному аграрному університеті, Харківській державній зооветеринарній академії за спеціальністю 7.130501 ”Ветеринарна медицина.
Особистий внесок здобувача полягає у аналізі даних літератури, підборі і формуванні груп піддослідних тварин, виконанні експериментальних та лабораторних досліджень, проведенні всього обсягу аналітичної, статистичної обробки та обґрунтуванні отриманих результатів досліджень.
Апробація результатів дисертації. Основні положення дисертаційної роботи доповідались та обговорювались на засіданнях вченої ради Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.3. Гжицького та на Міжнародній науково-практичній конференції ”Молоді вчені у вирішенні проблем аграрної науки і практики (Львів, 1718 червня 2004 року); Міжнародній науковій конференції ”Актуальні проблеми розвитку тваринництва, ветеринарної медицини, харчових технологій, економіки та освіти (Львів, 2526 листопада 2004 року); науково-практичній конференції Українського наукового товариства паразитологів, присвяченій 100-річчю з дня народження академіка НАН України О.П. Маркевича (Севастополь Ласпі, 1924 вересня 2005 року); Міжнародній науковій конференції ”Ветеринарні препарати: розробка, контроль якості та застосування (Львів, 47 жовтня 2005 року); Міжнародній науковій конференції ”Молоді вчені у вирішенні проблем аграрної науки і практики (Львів, 1516 червня 2006 року); Міжнародній науковій конференції присвяченій 140-річчю з дня народження професора Вацлава Морачевського (Львів, 1213 червня 2007 року); Міжнародній науковій конференції ”Молоді вчені у вирішенні проблем аграрної науки і практики (Львів, 1213 червня 2008 року).
Публікації. За матеріалами дисертаційної роботи опубліковано 10 наукових праць у фахових наукових виданнях, що входять до переліку, затвердженого ВАК України (із них 4 одноосібно), одержано патент на винахід, видано методичні рекомендації.
Структура дисертації. Обсяг дисертаційної роботи становить 162 сторінки комп’ютерного тексту, містить 12 таблиць, 39 рисунків, 11 додатків і включає вступ, огляд літератури, загальну методику і основні методи досліджень, результати власних досліджень, аналіз і узагальнення одержаних результатів, висновки, пропозиції виробництву, додатки, список використаних джерел літератури (242 джерела найменування, з яких 134 кирилицею та 108 латиною).

Список литературы

ВИСНОВКИ

У дисертації наведене теоретичне узагальнення і нове вирішення наукової задачі, що виявляється в дослідженнях щодо системи паразит-хазяїн за фасціольозу великої рогатої худоби; вивчено окремі аспекти прояву цитогенетичної нестабільності в геномі соматичних клітин хазяїна за патогенної дії Fasciola hepatica; досліджено резистентність трематоди і її яєць до фасціолоцидних препаратів та вплив їх на репродуктивну систему і на личинки гельмінта.
Проведені дослідження суттєво доповнюють загально біологічні відомості щодо патогенезу фасціольозу великої рогатої худоби і дають можливість для нових методичних підходів у скринінгу фасціолоцидних антигельмінтиків на їх ефективність та резистентність гельмінтів до них.
1. Результати епізоотичного моніторингу підтверджують складну ситуацію по фасціольозу великої рогатої худоби у західних областях України. У Тернопільській області в 2000 р. 18,2 % тварин були інвазовані збудником фасціольозу, у 2004 р. 12,3 %. Розвитку фасціольозу сприяють екологічні умови регіону. В умовах пасовищ Прикарпаття екстенсивність інвазії Lymnaea truncatula церкаріями була вищою ніж у Карпатах (1,5 %) і становила 4,3 %.
2. У соматичних клітинах селезінки та печінкових лімфатичних вузлів великої рогатої худоби виявили значний рівень мітотичної активності. Встановлено, що під впливом екскреторно-секреторних продуктів життєдіяльності фасціол рівень спонтанних патологічних мітозів у клітинах селезінки збільшується від 14,1 до 25,3 %, а в печінкових лімфатичних вузлах від 15,8 до 29,1 %. Метаболіти фасціоли індукують геномну і хромосону мінливість за рахунок збільшення рівнів тригрупових та нерівних метафаз, гігантських клітин, змінених анафаз та анафаз із фрагментами і мостами.
3. Рівень порушень в геномі хазяїна за фасціольозу залежить від ступеня інвазованості тварин і проявляється достовірним збільшенням кількості еритроцитів з мікроядрами майже у 2 рази від 4,6±0,24 до 8,8±0,58 МЯ ‰ (Р<0,001), що свідчить про мутагенність екскреторно-секреторних продуктів життєдіяльності фасціол.
4. Апробовані антигельмінтики: комбітрем, бронтел 10 % і бровальзен у терапевтичних дозах не володіють мутагенною здатністю на організм клінічно здорової великої рогатої худоби, а застосування їх при фасціольозі зменшує кількість еритроцитів з мікроядрами. Найвища протифасціольозна екстенсефективність (100 %) досягнута при дегельмінтизації тварин комбітремом, у дозі 1г/кг маси тварин та бронтелом 10 % 2,5 мг/кг.
5. Найбільш виражений паралізуючий ефект у тесті паралічу гельмінтів на статевозрілих Fasciola hepatica in vitro проявляв комбітрем у концентраціях 0,1 та 0,05 мг/см3 протягом двох годин. Цей тест можна рекомендувати для вивчення ефективності дії фасціолоцидних антигельмінтиків in vitro.
6. Тест виходу мірацидіїв із яєць фасціоли є ефективним методом для визначення біологічної резистентності до фасціолоцидів. Його можна застосовувати при обстеженні польових популяцій з невідомим статусом резистентності та проведенні моніторингу з контролю за резистентністю до фасціолоцидів у зонах неблагополучних щодо фасціольозу великої рогатої худоби. Кількісним показником чутливості яєць під впливом бронтелу 10 % у концентрації 0,07 мг/см3 є загибель 48,6 % личинок, комбітрему (0,00037 мг/см3 52,4 %) та бровальзену (0,00029 мг/см3 52,6 %).
7. Комбінації препаратів різних хімічних груп, типу триклабендазолу та альбендазолу (комбітрем) є високо ефективними і корисними для запобігання виникнення резистентності до фасціолоцидів у Fasciola hepatica.
8. Вплив фасціолоцидних препаратів може бути джерелом цитологічних та цитогенетичних змін у гаметах трематоди, які проявляються дегенеративними формами клітин сперматогенного циклу та морфогенетичними змінами у статевих хромосомах мейотичного поділу, що важливо враховувати при вивченні генетичних механізмів виникнення у фасціол резистентності до фасціолоцидних антигельмінтиків.

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ
1. Акбаев М.Ш. Паразитология и инвазионные болезни животных / Акбаев М.Ш. М.: Колос, 2000. С. 8485.
2. Алов И.А. Митотическое деление клетки / Алов И.А. М.: Медицина, 1975. 78 с.
3. Алов И.А. Цитофизиология и патология митоза / Алов И.А. М.: Медицина, 1972. С. 254.
4. Амеха Т.Г. Фасциолез жвачных животных в Эфиопии: дис. ... канд. вет. наук: 16.00.11 ”Паразитология, гельминтология / Т.Г. Амеха. К., 2003. 139 с.
5. Артеменко Ю.Г. Трихинеллез и эхинококкоз животных в Украинской ССР. Эпизоотология и меры борьбы : автореф. дис. на соиск наук, степени докт. ветер. наук : спец. 03.00.20 ”Эпизоотология/ Ю.Г. Артеменко. М., 1987. 50 с.
6. Астауров Б.Л. Методы биологии развития / Астауров Б.Л. М.: Наука, 1974. С. 541.
7. Астафьев Б.А. Экспериментальные модели паразитозов в биологии и медицине / Астафьев Б.А., Яроцкий Л.С., Лебедева М.Н. М.: Наука, 1989. 259 с.
8. Бабаев А.Г. Имунологические механизмы регуляции восстановительных процессов / Бабаєв А.Г. М. : Наука, 1972. 250 с.
9. Баранов В.С. Анализ нарушений сперматогенеза и эмбриогенеза у мышей / В.С.Баранов, А.П. Дыбан // Генетика, 1968. Т.4, № 12. С. 7083.
10. Бекиш В. Я. Мигрирующие личинки аскарид и их метаболиты как мутагены /В.Я. Бекиш // Сб. науч. тр. ІV съезда врачей-инфекционистов РБ. Витебск, 1997. С. 2122.
11. Бекиш В.Л. Микроядерный тест в клетках костного мозга и семенников мышей линии СВА при гельминтозах / В.Л. Бекиш, В.И. Колмогоров, В.В. Побяржин // Вестник ВГМУ. Витебск, 2003. Том 2. № 2. С. 6772.
12. Бекиш В.Я. Генетические аспекты взаимооношений в системе паразит-хозяин при аскаридозе / В.Я. Бекиш // Тканевые гельминтозы: диагностика, патогенез, клиника, лечение и эпидемиология: тр.научн.практ.конф. Витебск, 2000. C. 1826.
13. Бекиш В.Я. Мутагенная активность антигенов из тканей аскарид / В.Я. Бекиш // Здравоохранение, Витебск,1999. № 6. С. 1719.
14. Бекиш В.Я. Состояние генома хозяина при гельминтозах / В.Я. Бекиш, О.-Я.Л. Бекиш // Вестник ВГМУ. Витебск, 2004. С. 218.
15. Бекиш О.Я. Действие трихинелезной инвазии и метаболитов трихинелл на хромосомный аппарат соматических клеток человека / О.-Я. Л. Бекиш, Л.В. Калинин // Гельминтозоонозы меры борьбы и профилактики: научн. конф., 4 5 окт. 1994 г. М., 1994. С. 1416.
16. Бекиш О.-Я. Л. Цитогенетическое исследование клеток красного костного мозка белах мишей, инвазированые Trichocephalus muris / О.-Я. Л. Бекиш, А.В. Степанов // Роль наследсвенных факторов в патогенезе заболеваний человека. Витебск, 1992. С.9395.
17. Бенедиктов И.И. Адаптивные особенности транспорта електронов у трематоды Fasciola hepatica / И.И. Бенедиктов // II Всесоюзный биохимический съезд: тезисы секционных сообщений. Ташкент, 1969. С. 47.
18. Бенедиктов И.И. Влияние антгельминтных препаратов на биохимические системы трематоды Fasciola hepatica / И.И. Бенедиктов // Мед.паразитол. и паразитарн. болезни. М., 1974, Т. XLIII, № 6. С. 700703.
19. Бенедиктов И.И. Ингибирующие действия ароматических сульфидов, сульфоксидов и сульфонов на биохимические системы Fasciola hepatica / И.И. Бенедиктов // Мед.паразитол. и паразитарн. болезни. М., 1975, Т. XLIV, № 4. С. 474477.
20. Бенедиктов И.И. Пути биологического и энергетического обмена у гельминтов и биохимический механизм действия антгельминтиков: автореф. дис. на соиск наук, степени докт. биол. наук : 03.00.20 ”Паразитология, 03.00.04 ”Биохимия/ И.И. Бенедиктов. М, 1982. 46 с.
21. Бенедиктов И.М. Транспорт электронов в митохондриях трематоды Fasciola hepatica / И.М.Бенедиктов // Тр. Все. Ин-та гельминтол. М., 1971. Т. XVII. С. 5762.
22. Березовський А.В. Лікарські препарати нового покоління для ветеринарної медицини / Березовський А.В. К.: Ветінформ, 2000. 88 с.
23. Березовський А.В. Новий антгельмінтик комбітрем при фасціольозі великої рогатої худоби/ А.В. Березовський [та ін.]// Ветеринарна медицина України. К., 2003. №10. С. 4041.
24. Березовський А.В. Особливості терапії фасціольозу в жуйних / А.В. Березовський // Паразитология. К., 2000. № 12. С. 4445.
25. Березовський А.В. Теоретичні і практичні основи створення лікарських форм хіміотерапевтичних препаратів для терапії та профілактики інвазійних хвороб тварин : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня докт. ветер. наук : спец. 16.00.11 ”Паразитологія, гельмінтологія / А.В. Березовський. Харків, 2003. 36 с.
26. Березовський А.В. Терапевтична і економічна оцінка вітчизняних антигельмінтиків при кишкових гельмінтозах свиней / А.В. Березовський, В.Ф. Галат // Ветеринарна медицина: Міжвід. темат. наук. зб. Харків, 2002. Вип.80. С 7478.
27. Бессонов А.С. Проблемы и перспективы развития ветеринарной паразитологии / А.С. Бессонов // Ветеринария. М., 2002. № 5. С. 2729.
28. Бессонов А.С. Резистентность к паразитоцидам и пути ее преодоления / А.С. Бессонов // Ветеринария. М., 2002. № 7. С.2428.
29. Бессонов А.С. Трихинеллёз / Бессонов А.С. // Итоги науки и техники. Зоопаразитология. М.: Наука, 1979. Т. 6. С. 130139.
30. Вельш У. Введение в цитологию и гистологию животных / У. Вельш, Ф. Шторх. Москва: Мир, 1976. 271 с.
31. Викторов А.В. Ивермектин, развитие резистентности / А.В Викторов, В.А. Дриняев // Ветеринария. М., 2002. № 4. С. 5054.
32. Галат В.Ф. Паразитологія та інвазійні хвороби тварин / Галат В.Ф., Березовський А.В., Прус М.П., Сорока Н.М. Київ, Вища освіта, 2003. 464 с.
33.Гетз П. Хромосомные аберрации, индуцированные циклофосфамидом в мейотических клетках самцов мышей / П. Гетз, А.М. Малашенко, Н.И. Суркова // Цитология и генетика. 1980. Т. XIV, №4. С. 2935.
34. Гинецинская Т.А. Трематоды, их жизненные циклы, биология и эволюция / Гинецинская Т.А. Ленинград: Наука, 1968. С. 222225.
35. Глазко Т.Т. Мікроядерний тест у великих та дрібних ссавців / Т.Т. Глазко, О.А. Ковальова, Л.П. Якименко // Вісник ДАУ. К., 2003. №2. С. 7785.
36. Глазко Т.Т. Мікроядерний тест у великої рогатої худоби / Т.Т. Глазко // Вісник аграрної науки. К., 2001. №3. С. 4548.
37. Графодатский А.С. Хромосомы сельськохозяйственных и лабораторных млекопитающих / А.С. Графодатский, С.И. Раджабли. Новосибирск : Наука, 1988. С. 46.
38. Гребенщиков В.М. Цитоархетиктоника семеников и яичника трематоды / В.М. Гребенщиков, Л.В. Начева // IX научная конференция посв. теорет. и практ. вопросам общей и экологич. паразитологии. Кемерово, 1991. С. 3132.
39. Дахно І.С. Епізоотологія, етіотропна та імунокорегуюча терапія при фасціольозі і дикроцеліозі жуйних тварин : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня докт. ветер. наук : спец. 03.00.18 ”Паразитологія, гельмінтологія / І.С. Дахно. Харків, 2001. 36 с.
40. Даугалиева Э.Х. Особенности реактивности при гельминтозах и ее роль в системе паразит-хазяин / Э.Х. Даугалиева // Вестник с.-х. наук. 1984. С. 125126.
41. Демидов Н.В. Гельминтозы животных / Н.В. Демидов: Справ. М.: Агропромиздат, 1987. 351 с.
42. Довгій Ю.Ю. Вплив фасціольозу на природну резистентність овець : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. ветер. наук: спец. 16.00.11 ”Паразитологія, гельмінтологія/ Ю.Ю. Довгій. Харків, 1996. 21 с.
43. Довгій Ю.Ю. Зміни мікроядер в еритроцитах крові у корів, хворих на фасціольоз / Ю.Ю. Довгій, Г.П. Грищук // Ветеринарна медицина України. К., 2004. № 2. С. 2425.
44. Довгій Ю.Ю. Фасціольоз великої рогатої худоби в умовах тривалого впливу іонізуючого випромінювання (епізоотологія, патогенез та лікування) : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня докт. ветер. наук: спец. 16.00.11 ”Паразитологія, гельмінтологія / Ю.Ю. Довгій. Київ, 2005. 34 с.
45.Дубинин Н.П. Цитологический анализ естественного мутационного процеса / Н.П. Дубинин, В.К. Щербаков, Л.Г. Дубинина, Г.Н. Кеслер // Цитология, М., 1965. № 1 (72). С. 2328.
46. Дыбан А.П. Метод приготовления препаратов мейотических и митотических хромосом из семеников млекопитающих / А.П. Дыбан // Цитология. М., 1969. Т. 12, №5. С. 687689.
47. Дыбан А.П. Цитогенетика развития млекопитающих / А.П. Дыбан, В.С. Баранов. М.: Наука, 1978. 164 с.
48. Житова О.П. Fasciola hepatica L. (Trematoda: Fasciolidae) у проміжних та остаточних хазяях в умовах радіоактивно забрудненої місцевості: автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. ветер. наук : спец. 03.00.08 ”Зоологія / О.П. Житова. Київ, 2003. 20 с.
49. Житова О.П. Особенности сезонной динамики зараженности крупного рогатого скота Fasciola hepatica в условиях Житомирского Полесья / О.П. Житова // ВГМУ: труды IV междунар. научн. конфер. Витебск, 2004. С. 305307.
50. Здун В.И. Обследование моллюсков на зараженность дигенетическими трематодами / Здун В.И. // Методы изучения паразитологической ситуации и борьба с паразитами сельскохозяйственных животных. К.: АН УССР, 1957. С. 4578.
51. Здун В.І. Джерела і шляхи інвазії тварин збудником фасціольозу та боротьба з ним / Здун В.І. К.: Укр. акад. с.-г. наук, 1960. 126 с.
52. Здун.В.І. До проблеми фасціольозної ситуації в Україні / В.І.Здун, Х.Г. Макогон / Збірник статей міжнародної науково-практичної конференції. Львів, 1997. С. 175177.
53. Ильинских Е.Н. Цитогенетические нарушения в лимфоцитах крови больных хроническим описторхозом, сопровождающимся персистенсией вируса Эпштейна-Барр / Е.Н. Ильинских, А.В. Лепехин, С.В. Рыжов, И.Н. Ильинских, Н.Н. Ильинских // Мед.паразит. и паразитарн. болезни, М., 2001. № 2. С. 310.
54. Ильинских Н.Н. Инфекционный мутагенез / Ильинских Н.Н., Ильинских И.Н., Бочаров Е.Ф. Н.: Новосибирск, 1984. 246 с.
55. Ильинских Н.Н. Цитогенетичесий гомеостаз и имунитет / Ильинских Н.Н., Бочаров Е.Ф., Ильинских И.Н. Н.: Новосибирск, 1986. 256 с.
56. Ильинских.Н.Н. Использование микроядерного теста в скрининге и мониторинге мутагенов / Н.Н. Ильинских, И.Н. Ильинских, В.Н. Некрасов // Цитология и генетика. М., 1988. Т. 226, № 1. С. 7880.
57. Ильинських Н.Н. Проблема описторхоза на севере Тюменской области в святи с его влиянием на генетические структуры организма / Ильинських Н.Н. // Особенности патологии коренного и пришлого населения в условиях Крайнего Севера. К. : Красноярск, 1981. Т. 2. С. 198.
58. Калинин Л. В. Микроядерный тест при экспериментальном трихинеллезе / Л. В. Калинин // Роль наследств. факторов в патогенезе забол. человека: Сб. науч. тр. Витебск, 1992. С. 6672.
59. Кеннеди К. Экологическая паразитология / Кеннеди К. М.: Мир, 1978. 230 с.
60. Коваленко О.І. Епізоотологія фасціольозу жуйних тварин в північно-східній частині України, заходи боротьби та профілактики: автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. ветер. наук: спец. 03.00.18 ”Паразитологія, гельмінтологія / О.І. Коваленко. Харків, 2002. 17 с.
61. Колмогоров В. И. Микроядерный тест во время миграции личинок Toxocara canis у мышей линии СВА / В. И. Колмогоров // Тканевые Гельминтозы: Тр. науч.-практ. конф. Витебск, 2000. С. 148152.
62. Колмогоров В.И. Повреждения генома хозяина при экспериментальном токсокарозе в зависимости от дозы введенного инвазионного материала при заражении / В.И. Колмогоров, В.Я. Бекиш // Совр. пробл. общей мед. и ветерин. Паразитологи: тр. IV Международ, науч.-практич. конф. Витебск, 2004. С. 7580.
63. Колмогоров В.И. Повреждения генома хозяина при экспериментальном токсокарозе и при сенсибилизации белковым продуктом из тканей Тохосага canis // В.И. Колмогоров, В.Я. Бекиш // Вестник ВГМУ. В., 2004. № 3. С. 6772.
64. Курило Л.Ф. Динамика преобразования хромосом в профазе мейоза в оогенезе человека / Л.Ф. Курило // Цитология, М., 1980. Т. 22, № 2. С. 154160.
65. Курило Л.Ф. Цитогенетические и цитологические подходы к виявлению нарушений гамет / Л.Ф. Курило // Лабораторное дело. М.: Медицина, 1989. С. 48.
66. Леви А.Ф. Структура и функция клетки / А.Ф.Леви, О.М. Сикевиц. М.: Мир, 1971. 583 с.
67. Либерман Е.А. Как работает живая клетка (цитоскелет) / Либерман Е.А. М.: Знание, 1990. 64 с.
68. Макогон Х.Г. Трематодофауна Lymnaea (Galba) Truncatula Müll.,1774 в умовах пасовищ Передкарпаття і карпат / Х.Г. Макогон, В.В. Кусень, І.П. Яворський, А.Г. Соболта // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини імені С.З.Гжицького. Л., 2004. Т. 6 (3). Ч 2. С. 5359.
69. Мамаев Н.Н. Изучение активности ядрышкообразующих районов хромосом нормальных, лейкозных и опухолевых клеток человека с помощью окрашивания азотнокислым серебром / Н.Н. Мамаев, С.Е Мамаева, Д. Бенданадхайя, Н.В. Медведева // Цитология. 1980. Т. 22, № 2. С. 161165.
70. Мамыкова О.И. Влияние некоторых антгельминтиков на имунно-биологический статус и резистентность овец / О.И. Мамыкова // Селекция с.-х. животных на устойчивость к болезням и повышение резистентности в условиях промышленных технологий. 1988. Вып.8. С. 122.
71. Маркевич А.П. Микропаразитоценоз как этиологический фактор / А.П. Маркевич, В.М. Апатенко // Матер. IV съезда паразитологов Украины: тезиси докл. Харьков, 47 октября 1995 г. Х, 1995. С. 7980.
72. Мюнцинг А. Генетика общая и прикладная / Мюнцинг А. М.: Мир, 1967. 610 с.
73. Онуфриенко М.Э. Возрастная и сезонная динамика фасциолеза крупного рогатого скота / М.Э. Онуфриенко // К. : Ветеринария, 2002. № 12. С. 2931.
74. Онуфриенко М.Э. Сезонная динамика фасциолеза крупного рогатого скота в хазяйствах Ленинградской области / М.Э. Онуфриенко // Всесоюзный институт гельминтологии имени К.И. Скрябина: матер.докладов. М., 2003. Вып. 4. С. 300302.
75. Патент на корисну модель № 7771 Україна, МПК 7 А01К67/00. Спосіб оцінки ефективності фасціоліцидів in vitro / Секретарюк К.В., Соболта А.Г.; заявник та патентовласник Львівська національна академія ветеринарної медицини імені С.З. Гжицького; Заявл. 25.10.2004; Опубл. 15.07.2005 р. Бюл. № 7.
76. Паушева З.П. Практикум по цитологи растений / Паушева З.П. Москва: Агропомиздат, 1988. 271 с.
77. Пенькова Р.А. Изучение хромосом трихинелл / Р.А. Пенькова, Л.Н. Романенко // Труды всес. ин-та гельминтол., 1973. Т. 20. С. 133142.
78. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика / Петров Р.В. М.: Агропромиздат, 1976. 300 с.
79. Побяржин В.В. Взаимосвязь между дозой заражения инвазионным материалом и показателями микроядерного теста в клетках костного мозга мышей при гименолепидозе / В.В. Побяржин // Ткан. гельминтозы: диагностика, патогенез, клиника, лечение и эпидемиология: тр. науч.-практич. конф. Витебск, 2000. С. 7276.
80. Побяржин В.В. Изменения микроядерного теста при экспериментальном гименолепидозе / В.В., Побяржин, В.Я. Бекиш // Совр. паразитол. пробл. и перспективы: тр. конф. посв. 65-летию каф. мед. биологии и общей генетики ВГМУ. Витебск, 1999. С. 99104.
81. Побяржин В.В. Нарушения в геноме хозяина при экспериментальном гименолепидозе в зависимости от дозы введенного инвазионного материала при заражении / В.В., Побяржин, В.Я. Бекиш // Вестник ВГМУ. Витебск, 2003. Т. 2, № 4. С. 8489.
82. Поживіл А.Л. Природна резистентність у поросят при основних шлунково-кишкових нематодозах / А.Л. Поживіл / Матер.ювіл.конф. УНТП. Київ, 1995. С. 7679
83. Пономаренко В.Я. Проблема фасциолеза крупного рогатого скота в лесостепной зоне Украины и пути ее решения / В.Я. Пономаренко, В.И. Бирка, А.Н. Пономаренко, И.Я. Шляхов [и др..] // Методы профілактики и борьбы с трематодозами человека и животных: тез.докл.Всес.научн.конф. Сумы, 911 окт. 1991 г. М., 1991. С. 94.
84. Пономарь С.И. Иммунобиологическая реактивность свиней при аскаридозно-трихоцефалезной инвазии и пути её коррекции: автореф. дис. на соиск наук, степени канд. биол.наук : спец. 08.03.20 ”Гельминтология / С.И. Пономарь. Москва, 1990. 19 с.
85. Приходько Ю.О. Кишкові гельмінтози свиней і собак та експериментальне обґрунтування застосування вітчизняного антгельмінтика альбендазолу : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня докт. ветер. наук : спец. 16.00.11 ”Паразитологія, гельмінтологія / Ю.О Приходько. Київ, 2002. 421 с.
86. Прус М.П. Бабезіоз собак (епізоотологія, патогенез та заходи боротьби) : автореф. дис. на здобуття наук, ступеня докт. ветер. наук : спец. 16.00.11 ”Паразитологія, гельмінтологія / М.П. Прус. Київ, 2006. 39 с.
87.Рамайя Л.К. Цитогенетический эфект Nнитрозоэтилмочевины, гидроксиламина и рентгеновых лучей на половые клетки самцов мышей /Л.К.Рамайя // Генетика, 1969. Том V. № 2. С. 7486.
88. Сварчевський О.А. Цитогенетична дія Аscaris suum та нематоцидних антгельмінтиків за експериментального і спонтанного аскариозу: автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. ветер. наук : спец. 03.00.18 ”Паразитологія, гельмінтологія / О.А. Сварчевський. Біла Церква, 2000. 18 с.
89. Северцов А. Н. Морфологические закономерности эволюции / Северцов А. Н. М.: АН СССР, 1939. 610 с.
90. Секретарюк К. Цитогенетичні порушення клітин кісткового мозку мишей за трихінельозної інвазії / К.Секретарюк, Й. Пекарська, А. Полозовський // Вісник зоології. 2005. Вип.19. Ч 2. С. 280282.
91. Секретарюк К.В. Вивчення впливу нематоцидних препаратів на личинки Ph. Lusiana in vitro / К.В. Секретарюк, Р.І. Тафійчук // Науковий. вісник Львівської державної академії ветеринарної медицини імені С.З. Гжицького. Львів, 2002. Т. 2, № 2. Ч.1. С. 147150.
92. Секретарюк К.В. Вивчення мутагенної дії Ascaris suum / К.В. Секретарюк, В.В. Стибель, І.В. Струбицький // [Паразитологія в Україні. Вчора, сьогодні, завтра.]: мат. ювіл. конф.УНТП Київ, 1996. С. 9296.
93. Секретарюк К.В. Вивчення мутагенності фасціолоцидів у великої рогатої худоби / К.В. Секретарюк, А.Г. Соболта // Науковий вісник Львівської національної академії ветеринарної медицини імені С.З.Гжицького. Львів, 2006. Т. 8, № 2 (29). Ч 1. С. 171174.
94. Секретарюк К.В. Вплив експериментального аскаридозу на цитогенетичний гомеостаз поросят / К.В. Секретарюк, В.В. Стибель, І.А. Сєднєва // Вет. медицина України. К., 1997. № 8. С.2425.
95. Секретарюк К.В. Вплив фасціольозної інвазії та фасціолоцидів на стабільність геному великої рогатої худоби / К.В. Секретарюк, А.Г. Соболта // Науковий вісник Національного аграрного університету. К., 2006. Вип. 98. С. 164168.
96. Секретарюк К.В. Морфофункциональные взаимоотношения в системе паразит-хазяин при ботриоцефалезе и филометроидозе карпа: автореф. дис. на соиск наук, степени докт. биол.наук : спец. 03.00.20 ”Паразитология / К.В. Секретарюк. Москва, 1986. 40 с.
97.Секретарюк К.В. Основи екологічної зоопаразитології / К.В. Секретарюк, О.А. Сварчевський // Львів, Манускрипт. 2007. 358 с.
98. Секретарюк К.В. Спонтанні хромосомні мутації соматичних клітин в нормі у коропа (Cyprinus carpio L.) / К.В. Секретарюк, Ю.В. Лобойко // Пробл.аквакульт. і функц. водних екосистем: міжн. наук.конф. 2528 лютого 2002 р. К., 2002. С. 124125.
99. Секретарюк К.В. Ценогенетичні адаптації та їх роль в резистентності фасціол до фасціоліцидів / К.В. Секретарюк, А.Г. Соболта // Вісник зоології. К, 2005. Вип.19. Ч. 2. Т. 6. С. 286288.
100. Секретарюк К.В. Взаимоотношения между гельминтами при ботриоцефалезе карпа / К.В. Секретарюк / Ветеринария. М., 1982. № 10. C. 3537.
101. Симонов А. П. Механизм овоцидного действия на ультраструктурном уровне / А. П Симонов // Тр. Всесоюз. ин-та гельминтол. 1978. № 24. С. 111123.
102. Скворцова А.А. Иследование по циклу развития Dicrocoelium lanceatum / А.А. Скворцова // Мед. паразитол. Вып. 3. М., 1934. С. 240253.
103. Скрябин К.И. Трематодозы животных и человека / К.И. Скрябин // Издательство Академии Наук СССР. МоскваЛенинград, 1948. Том ІІ. 600 с.
104. Соболта А.Г. Вплив фасціольозної інвазії на геномну та хромосомну мінливість соматичних клітин лімфоїдних органів / А.Г. Соболта, К.В. Секретарюк // Науковий вісник Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З.Гжицького. Львів, 2008. Т. 10, № 2 (37) Ч. 1. С. 305311.
105. Соболта А.Г. Дослідження резистентності яєць Fasciola hepatica до бровальзену іn vitro / А.Г. Соболта // Науково-технічний бюл. ін.-ту б