Прогнозирование и профилактика послеоперационного адгезиогенеза брюшины Шалмагамбетов Марат Салимжанович

Краткое описание

Шалмагамбетов Марат Салимжанович. Прогнозирование и профилактика послеоперационного адгезиогенеза брюшины: диссертация ... кандидата Медицинских наук: 14.01.17 / Шалмагамбетов Марат Салимжанович;[Место защиты: ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации], 2019
Прогнозирование и профилактика послеоперационного адгезиогенеза брюшины Шалмагамбетов Марат Салимжанович
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИ
кандидат наук Шалмагамбетов Марат Салимжанович
Введение

Глава 1. СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОЙ СПАЕЧНОЙ БОЛЕЗНИ БРЮШИНЫ

1.1 Эпидемиология спаечной болезни

1.2 Расходы здравоохранения на лечение

1.3 Эволюция учения о спаечной болезни

1.4 Особенности патогенеза послеоперационного спаечного процесса

1.5 Современные взгляды ведущих научных школ

1.6 Возможности и перспективы профилактики адгезиогенеза брюшины

1.6.1 Первичная профилактика

1.6.2 Вторичная профилактика

1.7 Резюме

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Организация экспериментов с лабораторными животными и описание экспериментальных моделей

2.2 Методика моделирования спаечного процесса

2.3 Сравнение способов моделирования спаечного процесса

2.4 Биохимический метод исследования гемостаза крови

2.4.1 Забор образцов крови у лабораторных животных

2.4.2 Приготовление анализируемых образцов крови

2.4.3 Методы исследования состояния коагуляционного звена гемостаза и фибринолитической системы крови животных

2.4.3.1 Определение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ)

2.4.3.2 Определение протромбинового времени (ПВ)

2.4.3.3 Определение тромбинового времени (ТВ)

2.4.3.4 Определение содержания фибриногена

2.4.3.5 Определение растворимых фибрин мономерных комплексов (РФМК-тест)

2.4.3.6 Определение фибринолитической активности плазмы крови

(Х11а - зависимый фибринолиз)

2.4.3.7 Определение активности антитромбина III

2.4.3.8 Определение активности плазминогена оптическим методом

2.5 Оценка морфологических изменений брюшины после оперативного адгезиолизиса

2.6 Сравнение эффективности средств профилактики спаек

2.7 Методика оценки морфологических изменений брюшины

2.8 Общая характеристика группы больных

2.8.1 Критерии включения и исключения пациентов в проспективное исследование

2.8.2 Техника размещения противоспаечного барьера

2.8.3 Оценка качества жизни пациентов после операции

2.9 Статистический метод обработки данных

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Сравнение методик моделирования адгезиогенеза брюшины

3.2 Результаты исследования гемостаза крови крыс

3.3 Морфологические изменения в брюшной полости после адгезиолизиса

3.4 Оценка эффективности средств профилактики спаек

3.5 Характеристика больных клинической группы

3.5.1 Клинико-анамнестические данные

3.5.2 Диагностика заболевания

3.5.3 Интраоперационная характеристика больных

3.5.4 Патологические изменения в брюшной полости

3.5.5 Клиническое обоснование эффективности применения противоспаечной мембраны КолГара

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список литературы

Особенности патогенеза послеоперационного спаечного процесса
Развитие послеоперационного адгезиогенеза, по современным представлениям, предполагает повреждение мезотелия брюшины в результате воздействия травмирующей силы во время операции и развития воспаления с преобладанием пролиферативной фазы [77; 103; 160]. Изучение межклеточных контактов мезотелия показывает, что упорядоченность распределения мезотелиоцитов в пласте по степени связанности наступает при контакте клетки с шестью окружающими соседними клетками, которые связаны между собой посредством свободных межклеточных мостиков. Такая слабая тканевая взаимосвязь обуславливает нежность брюшины и ее восприимчивость к травме [12; 130; 134].
Интраоперационное повреждение мезотелия происходит в результате разреза хирургическими инструментами; трения перевязочным материалом и соседних органов между собой; ишемии, высушивания и использования электрокоагуляции. Высушивание и ретракция соседних органов также обуславливают повреждение брюшины и последующее развитие спаек в удаленных анатомических областях от зоны оперативного вмешательства [31; 74; 97].
Несмотря на различную природу травмирующей силы, патогенетические механизмы реакции брюшины на повреждение одинаковы. Более того, в основе физиологической и репаративной регенерации мезотелия лежат одни и те же механизмы, но различаются степенью их выраженности [12]. Так, если в нормальных условиях только у 0,16 0,5% всех мезотелиоцитов в единицу времени происходит митоз, то после повреждения количество таких клеток возрастает до 30-60% за аналогичный период времени [133].
В работе Heltzera (1919) продемонстрировано другое уникальное свойство брюшины заживление мезотелия отлично от восстановления эпителия кожи, которое происходит от периферии к центру [96; 187]. Хотя последние исследования пролили свет на последовательность процесса регенерации травмированного мезотелия, который происходит одновременно на всем протяжении очага повреждения [31; 74; 97; 111; 144], но общая картина восстановления брюшины остается неясной [133; 149], потому что достоверно неизвестно происхождение вновь появившихся мезотелиоцитов на участке повреждения [97].
Существует 4 основных гипотезы, объясняющих механизм появления мезотелиоцитов в очаге повреждения брюшины:
1. При репаративной регенерации восстановление брюшины происходит за счет сохранившегося на раневой поверхности и по ее краю жизнеспособного мезотелия путем усиления процессов репарации и появления многочисленных митозов ДНК-синтезирующих клеток [12].
2. В результате дифференцировки мультипотентных стволовых мезенхимальных или периваскулярных (лимфоциты, гистиоциты, тканевые базофилы и др. мононуклеары) клеток [97].
3. Благодаря миграции мезотелиоцитов с соседних неповрежденных участков и за счет свободных клеток [104; 128]. В нормальных условиях 4-6 % от общего числа мезотелиальных клеток оказываются взвешенными в перитонеальной жидкости. Более того, мезотелий в отличие от других эпителиев лишен контакта с внешней средой. Поэтому данная отличительная особенность нашла свое отражение в способе получения питательных веществ не только из подлежащей соединительной ткани, но и из серозной жидкости [12].
4. За счет трансформации клеток перитонеальной жидкости [128].
Данный процесс занимает в среднем 7 дней с момента повреждения и не имеет существенной разницы между париетальным и висцеральным листками брюшины. Благодаря лучшему кровоснабжению регенерация мезотелиального слоя брюшины печени происходит на 1 сутки быстрее [153]. По другим данным, процесс ремезотелизации поврежденного участка занимает 5-7 дней [96]. А при обширном и глубоком повреждении целостность покрова париетальной брюшины восстанавливается в течение 10 суток [12; 89].
Выделяют 5 стадий адгезиогенеза брюшины [31] (рисунок 1): 1. Повреждение и дезорганизация мезотелиального слоя приводят к кровотечению из мелких капилляров с последующей кратковременной вазоконстрикцией. Данные клинические и морфологические изменения составляют реактивную фазу, которая длится первые 12 часов.
2. В дальнейшем происходит повышение проницаемости сосудистых капилляров на травмированном участке, что ведет к экссудации способом пассивной диффузии, мультипотентных мезенхимальных клеток, жидкой части плазмы, богатой фибриногеном и хемотаксису медиаторов воспаления [142], что составляет основу экссудативной фазы воспаления, длительностью до 3-х суток.
3. Выпадение фибрина на поврежденной поверхности брюшины и склеивание соседних участков, начиная с 3-х суток, составляют морфологическую основу фазы адгезии, во время которой мультипотентные мезенхимальные клетки дифференцируются в фибробласты и продуцируют коллаген.
Еще Р.А. Женчевскому и соавторам (1989) удалось установить, что основным патогенетическим механизмом формирования спаек является выпадение тонкого слоя фибрина на поврежденные участки брюшины. Последующая миграция сальника в область деструкции, продуцирование им мезотелиоцитов, которые, в конечном итоге, покрывают фибриновые наложения одновременно по всей поверхности дефекта [15].
4. Фаза молодых сращений. На месте адгезии к 7-14 суткам образуются рыхлые спаечные сращения, бедные коллагеном. Таким образом закладывается основа для новообразования сосудов и миграции гладкомышечных клеток.
5. Продукция и уплотнение коллагена делают соединительнотканные спайки плотными [124; 132]. Затем они прорастают сосудами и нервными волокнами, что составляет фазу зрелых сращений, которая происходит на 2 8-й неделях.
Всякое повреждение эндотелия кровеносного сосуда в результате травмы или воспаления является стимулом для запуска коагуляционного звена гемостаза. В этом реализуется эволюционно выработанный механизм адаптации организма к кровопотере. Рисунок 1 Схема патогенеза спайкообразования (D.Moris 2017)
Локальная коагулопатия, реализуемая через различные механизмы регуляции, приводит к превращению протромбина (II фактор) в тромбин (фактор IIa), который преобразовывает фибриноген в мономер-фибрина и способствует выпадению последнего в поврежденной области брюшины. Этот момент является ключевым этапом в процессе физиологической регенерации мезотелиев [148]. Первоначально растворимый мономер-фибрина под воздействием XIIIа фактора преобразуется в нерастворимый фибрин [78], что является морфологическим субстратом для последующего формирования коллагеновой ткани и организации спайки. Но благодаря активации фибринолитической системы на 3-5 сутки после травмы, ключевым механизмом которой является превращение плазминогена в плазмин, последний разрушает фибриновые отложения до продуктов деградации.
Определенная ясность в процессах регенерации мезотелия брюшины и развития адгезиогенеза подарила надежду на успех в борьбе со спаечным процессом, однако, причина, по которой происходит либо заживление серозной оболочки, либо формируются спайки, остается неопределенной [144]. Основная теория, способная объяснить данный феномен построена на антагонизме процессов организации и деградации фибрина, где ключевую роль играет фибринолитическая система крови [15; 41; 97; 129; 138; 142; 165].
Последняя состоит из 4-х компонентов:
1. Плазмин.
2. Плазминоген (неактивный предшественник плазмина).
3. Активаторы плазминогена.
4. Ингибиторы активаторов плазминогена.
Сравнение методик моделирования адгезиогенеза брюшины
В ходе эксперимента 4 крысы выведены из него по причинеам септических осложнений (n=1), ятрогенного повреждения магистральной артерии (n=1), эвисцерации органов брюшной полости вследствие аутоканибализма (n=2).
Группа 1: десерозирование париетальной брюшины (n=13);
В этой группе лабораторных животных при релапаротомии спаечных сращений как в месте непосредственного механического повреждения брюшины, так и за его пределами выявлено не было 0% (n=0). Участок механической травмы париетальной брюшины полностью ремезотелизирован.
Группа 2: десерозирование обоих листков (n=15, Мe=5,00 [0,00; 5,00], 95% ДИ 1,65-5,02);
При аутопсии крыс данной группы спаечные сращения в месте предшествующей механической травмы развились в 10 (67%) случаях. Геморрагически измененная поверхность слепой кишки сочеталась с деформацией стенки. У 3 крыс спайки были плоскостными, плотными, в длину не превышающими 0,5 см. В 1 случае адгезивные изменения были представлены перепончатым тяжем. У других 6 экспериментальных моделей произошло интимное срастание купола слепой кишки с пристеночной брюшиной в месте перитонеальной травмы, поддающееся разделению тупым путем.
Хотя время с момента предыдущей лапаротомии было одинаково, зрелость спаек была вариабельной: от аваскуляризованной перепончатой (n=1), плоскостных (n=3) и сращений слепой кишки с вентральным листком (n=3) до умеренно и обильно васкуляризованных образований стенки слепой кишки с париетальной брюшиной (n=3) (рисунок 8).
Адгезия ранее поврежденных органов была изолированной лишь у 6 крыс, у 4 других моделей, кроме того, прежде нетравмированная стенка тонкой кишки была патологически изменена.
Сращения измененных органов поддавались разделению тупым способом. Из перечисленных случаев лишь у 3-х крыс в спайкообразовании участвовал сальник (таблица 11).
Группа 3: десерозирование обоих листков брюшины с наложением узловых швов (n=14; Ме=6,00, [5,00;9,00]; 95% ДИ 4,32-7,97).
В данной группе животных развитие послеоперационных изменений в брюшной полости носило неоднородный характер как по степени адгезии соседних органов, так и по вовлечению органов смежных анатомических областей. У 12 (86%) (р=0,018) животных данной группы развились исследуемые послеоперационные осложнения, из которых у 5 крыс слепая, тонкая кишки и сальник были патологически изменены. Стенки данных органов были припаяны к вентральному листку в области нахождения швов. Спаечные сращения у других экспериментальных моделей (n=4) представляли собой обильные шнуровидные и плоскостные тяжи, связывающие париетальный листок со слепой кишкой. У 3-х крыс данной группы сальник был подпаян к пристеночным швам (таблица 11). В данной группе животных степень зрелости спаек была неоднородной: от плоскостных неваскуляризованных (n=3) до умеренно васкуляризованной шнуровидной (n=1) и интимных срастаний париетального листка с куполом слепой кишки (n=8). Исследуемый патологический процесс в брюшной полости лишь в половине случаев развился на ранее поврежденных органах, в других 6 экспериментальных моделях адгезивный процесс распространялся в смежные анатомические области брюшной полости.
При попытке разделения купола слепой кишки и париетальной брюшины формировались глубокие десерозированные дефекты стенки органов, характеризующиеся умеренным кровотечением из капилляров. Поэтому такие патологические образования поддавались адгезиолизису только острым путем. Сальник был вовлечен в спаечный процесс в 9 случаях.
Группа 4: десерозирование париетальной и висцеральной брюшины с применением стандартной проленовой сетки (n=14; Ме=7,00, [5,75;9,25]; 95% ДИ 4,88-8,70);
У 12 животных (86%) (р=0,004) данной группы развились послеоперационные спайки между разными отделами кишечника, сальником и вентральным листком брюшины в месте локализации проленовой сетки (рисунок 9).
Различная степень зрелости спаек сопровождалась разным уровнем васкуляризации, высоким в шнуровидных спайках (n=2) и спаечных сращениях слепой кишки с вентральной стенкой (n=3) (рисунок 9), умеренным в 4 спаечных сращениях и отсутствием в плоскостной спайке (n=1) (таблица 11).
При аутопсии у 2 животных послеоперационные патологические изменения брюшины были ограничены областью предыдущего механического повреждения мезотелиального слоя брюшины. У 7 крыс процесс распространялся в другие анатомические области, в оставшихся 3-х случаях в массивный спаечный процесс были вовлечены все отделы брюшной полости.
При ручном разделении послеоперационных сращений тупым способом образовались глубокие десерозированные участки, сопровождающиеся массивным кровотечением из капилляров
У 6-ти крыс, из-за угрозы перфорации полого органа сращения удалось разделить только острым способом. У 2 лабораторных животных мезотелиальный слой травмированных участков брюшины был восстановлен. При ревизии брюшной полости патологических сращений как в области предшествующего вмешательства, так и за его пределами не выявлено.
Гипотеза об отсутствии межгрупповых различий (2,3,4-й групп) с использованием критерия Крускала-Уоллиса была отклонена, р=0,008. При попарном сравнении статистически значимое различие (p=0,004) было выявлено между 2-й и 4-й группами, 2-й и 3-й группами (р=0,018) (рисунок 10).
По результатам аутопсии животных первой группы можно судить о недостаточности изолированного повреждения париетальной брюшины для развития спаек (0%). Учитывая тот факт, что в 3-х других группах в спаечный процесс вовлекались участки тонкого и толстого кишечника, предварительно не подвергавшиеся скарификации, можно предположить, что висцеральная брюшина более подвержена послеоперационному адгезиогенезу в сравнении с париетальной.