РОЗРОБКА ЖИВИЛЬНИХ СЕРЕДОВИЩ ДЛЯ КУЛЬТИВУВАННЯ КУЛЬТУР КЛІТИН : РАЗРАБОТКА питательной среды для культивирования культур клеток



  • Название:
  • РОЗРОБКА ЖИВИЛЬНИХ СЕРЕДОВИЩ ДЛЯ КУЛЬТИВУВАННЯ КУЛЬТУР КЛІТИН
  • Альтернативное название:
  • РАЗРАБОТКА питательной среды для культивирования культур клеток
  • Кол-во страниц:
  • 139
  • ВУЗ:
  • ІНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ УААН
  • Год защиты:
  • 2002
  • Краткое описание:
  • ІНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЇ МЕДИЦИНИ УААН

    На правах рукопису



    ПІОТРОВИЧ ВІТАЛІЙ АНАТОЛІЙОВИЧ


    УДК 619:576.858:576.34:576.535


    РОЗРОБКА ЖИВИЛЬНИХ СЕРЕДОВИЩ ДЛЯ КУЛЬТИВУВАННЯ КУЛЬТУР КЛІТИН

    16.00.03 ветеринарна мікробіологія та вірусологія


    Дисертація на здобуття наукового ступеня
    кандидата ветеринарних наук

    Науковий керівник:
    Кучерявенко Олексій Олександрович
    кандидат біологічних наук





    КИЇВ 2002








    ЗМІСТ
    ПЕРЕЛІК ВИКОРИСТАНИХ В ДИСЕРТАЦІЇ СКОРОЧЕНЬ 5
    ВСТУП 6
    РОЗДІЛ 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ
    1.1. Культури клітин 14
    1.2. Види живильних середовищ та сольових розчинів 16
    1.3. Метаболічні потреби клітин в культурі 19
    1.3.1. Потреба в амінокислотах 19
    1.3.2. Потреба в вітамінах та мінеральних речовинах 21
    1.3.3. Роль сироватки крові при культивуванні культур
    клітин 23
    1.4. Гідролізати білків тварин 26
    1.4.1. Методи гідролізу білків 26
    1.4.2. Фактори, що сприяють дії ферментів 29
    1.4.3. Ферментативні гідролізати білків основа
    живильних середовищ для культур клітин 31
    РОЗДІЛ 2 ЗАГАЛЬНА МЕТОДИКА ТА ОСНОВНІ МЕТОДИ
    ДОСЛІДЖЕНЬ
    2.1. Культури клітин 38
    2.2. Живильні середовища та розчини 40
    2.3. Методи і матеріали для приготування сироватки крові
    великої рогатої худоби 44
    2.4. Методи і матеріали для приготування живильного
    середовища гемогідролізату 45
    2.5. Методи і матеріали при отриманні лінії перещеплюваних
    клітин тестикулів поросят 48
    2.6. Визначення придатності живильного середовища
    гемогідролізату при культивуванні вірусів 51
    2.7. Статистична обробка експериментальних даних 51

    РОЗДІЛ 3 РЕЗУЛЬТАТИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ
    3.1. Приготування живильного середовища гемогідролізату 54
    3.1.1. Визначення оптимальних умов гідролізу згустків
    крові великої рогатої худоби 54
    3.1.2. Підготовка сировини до гідролізу 59
    3.1.3. Проведення гідролізу 61
    3.1.4. Стерилізація гемогідролізату та отримання
    готового препарату 63
    3.1.5. Здатність середовищ з гемогідролізатом білків
    крові великої рогатої худоби забезпечувати ріст культур клітин 64
    3.1.6. Здатність клітин, вирощених в середовищах з
    експериментальними гемогідролізатами,
    забезпечувати репродукцію вірусів 70
    3.2. Отримання сироватки крові великої рогатої худоби
    нативної без консерванту 75
    3.2.1. Підготовчі етапи виготовлення сироватки крові
    та отримання крові від тварин 77
    3.2.2. Відстоювання сироватки та її збір 77
    3.2.3. Стерилізація сироватки крові 79
    3.2.4. Визначення рістстимулюючої активності
    сироватки крові 79
    3.3. Отримання лінії перещеплюваних клітин тестикулів
    поросят 83
    3.3.1. Приготування первинної культури 86
    3.3.2. Субкультивування первинної культури та
    адаптація до вітчизняного живильного
    середовища 87
    3.3.3 Консервування клітин ПТП для тривалого
    зберігання 91
    3.3.4 Використання культури клітин ПТП для
    вірусологічних досліджень 92
    РОЗДІЛ 4 АНАЛІЗ І УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ
    ДОСЛІДЖЕНЬ 97
    ВИСНОВКИ 110
    СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ 112
    ДОДАТКИ 139






    ПЕРЕЛІК ВИКОРИСТАНИХ В ДИСЕРТАЦІЇ СКОРОЧЕНЬ
    ГЛА гідролізат лактоальбуміну
    ВРХ велика рогата худоба
    ПТП лінія перещеплюваних клітин тестикулів поросят
    НД нормативна документація
    ДМСО диметилсульфоксид
    ПЕО-400 поліетіленоксид з молекулярною масою 400
    ПЕГ поліетиленгліколь
    РП ростові протеїни
    ФГМ ферментативний гідролізат м’язових білків
    ІВМ УААН Інститут ветеринарної медицини Української академії аграрних
    наук
    СН нирка свині
    СНЕВ нирка ембріону свині
    КТП тестикули поросят
    ВНК-21 лінія клітин нирки новонародженого хом’яка
    МПа мегапаскаль (одиниця виміру тиску)
    ПСН перещеплювані клітини нирки свині
    ФГБК ферментативний гідролізат білків крові
    АСИС апарат звертання та інактивування сироватки
    МПБ м’ясо-пептонний бульйон
    МПА м’ясо-пептонний агар








    ВСТУП
    Постійний пошук нових, більш чутливих, специфічних і ефективних методів діагностики, терапії і профілактики захворювань різної етіології потребує вирішення наукових і практичних завдань в ветеринарії.
    Серед захворювань різної етіології особливе місце відводиться вірусним інфекціям, які є суттєвою проблемою в зв’язку з наявністю і розповсюдженням багатьох збудників, появою нових вірусних хвороб, відсутністю ефективних засобів боротьби та по причині великої кількості різних багатоваріантних вірусних, вірусно-бактеріальних і інших асоціацій, що зумовлюють змішані інфекції [1].
    В комплексі заходів, щодо запобігання розвитку вірусних інфекцій, важливе місце займає вакцинопрофілактика, яку справедливо вважають одним із найбільших досягнень біології [2-3].
    Для розмноження вакцинних вірусних штамів в якості субстрату використовують курячі ембріони і особливо культури клітин. Саме метод культур клітин знайшов найбільш широке застосування в багатьох областях біології, медицини та ветеринарії. Масове вирощування клітин в культурі є основою любого технологічного процесу, який оснований на використанні тваринних клітин і в першу чергу виробництва вірусних препаратів.
    Створення противовірусних вакцин залежить в основному від підбору оптимальних клітинних систем для розмноження вакцинних штамів. Успіх в виготовленні ліній перещеплюваних клітин першочергово залежить від отримання високоякісних і в достатній кількості первинних культур клітин, адже їх контамінація може призвести до незадовільних результатів при діагностиці вірусних захворювань та виробництві біопрепаратів. При цьому великої уваги заслуговують гнотобіотичні тварини, із органів яких готують культури тканин та клітин, що вільні від контамінації сторонніми агентами.
    Важливою умовою успішного використання методу культур клітин є розробка живильних середовищ придатних для тривалого культивування клітин. Від якості матеріалів, що містяться в живильному середовищі, залежить і успіх приготування культур клітин.
    По кількості і якості компонентів живильні середовища для культур клітин різняться між собою. Умовно їх можна поділити на 3 великі групи:
    - природні біологічні рідини і екстракти;
    - синтетичні живильні середовища, що складаються повністю із хімічних компонентів;
    - напівсинтетичні живильні середовища, що містять компоненти біологічного походження, в тому числі отримані шляхом ферментативного гідролізу та хімічні інградієнти.
    Великої уваги при роботі з культурами клітин заслуговує третя група середовищ, в яку входять ферментативні гідролізати білків, які є джерелом амінокислот та інших неіндентифікованих факторів росту.
    Живильні середовища на основі ферментативних гідролізатів розпочали використовувати ще в середині минулого століття, а піонерами їх створення були Мельник і Ріордан, які запропонували використовувати для культивування клітин нирки мавпи гідролізат лактоальбуміну (ГЛА) [4]. Даний гідролізат використовується і в теперішній час. Імпортується він фірмою Діфко” та ін., його дефіцитність зумовлює необхідність створення вітчизняного препарату. Синтетичні живильні середовища (199, Ігла, Хема та ін.) відповідають потребам стандартності, але вони дорого коштують і також дефіцитні. Саме значні валютні витрати та складність приготування деяких живильних середовищ є основною проблемою при застосуванні методу культур клітин.
    Ефективне виробництво культур клітин і противовірусних препаратів ставить досить високі вимоги до ростових властивостей і стерильності сироватки крові, яка додається до живильних середовищ. В зв’язку з цим виникає необхідність розробки ефективних методів деконтамінації сироватки крові і кількісної оцінки її ростової активності.

    Актуальність теми
    Постійно зростаючі масштаби використання культур клітин як субстрату при виготовленні біопрепаратів і біологічно активних речовин зумовлюють необхідність розробки економічних і доступних живильних середовищ для їх культивування.
    За кордоном та в країнах ближнього зарубіжжя виготовляють широкий спектр живильних середовищ для культивування культур клітин, вірусів, бактерій. В Україні виробництво живильних середовищ знаходиться на низькому рівні і виникає реальна загроза припинення проведення науково-дослідних робіт з вивчення вірусних хвороб тварин, створення і виробництва діагностичних та вакцинних препаратів. Це також може призвести до втрати досить цінних перещеплюваних ліній культур клітин та вакцинних штамів вірусів, які є основою біофабричного виробництва, та до залежності від іноземних фірм і держав при проведенні протиепізоотичних заходів. Саме тому виробництво живильних середовищ із застосуванням вітчизняної сировини є актуальною проблемою дослідження культур клітин.
    Великої уваги при роботі з культурами клітин заслуговують ферментативні гідролізати білків, оскільки продукти гідролізу в складі живильних середовищ забезпечують високий індекс проліферації клітин. Середовища на їх основі прості в приготуванні, дешеві (коштовний набір окремих амінокислот в них замінений набором амінокислот, отриманих в результаті ферментативного гідролізу білка) і в значній мірі забезпечують стандартні умови культивування клітин.
    Після виготовлення першого середовища на основі ферментативного гідролізату лактоальбуміну багато дослідників займалися розробкою ферментативних гідролізатів із іншої білкової сировини як тваринного так і рослинного походження [5-14].
    Незважаючи на досягнуті успіхи вітчизняних та зарубіжних учених у галузі створення живильних середовищ, все ще багато питань залишається невирішеними. Є дані про декілька сотень рецептів живильних середовищ для культивування клітин та вірусів, проте досить мало із отриманих гідролізатів вийшли за рамки лабораторних досліджень. Недостатньо проводиться порівняльна оцінка відомих гідролізатів з метою виявлення найбільш ефективного вітчизняного живильного середовища, яке змогло б замінити коштовні імпортні препарати.
    Культивування культур клітин виконують в основному на живильних середовищах з вмістом сироватки крові великої рогатої худоби (ВРХ). Ембріональна сироватка стабільна за складом, має високу проліферативну активність, проте застосування її обмежене із-за дефіциту сировини та високої вартості готового препарату. В той же час нестабільність складу сироватки крові дорослих тварин, не обмежує її використання для культивування культур клітин. Необхідно ставити високі вимоги до ростових властивостей та стерильності сироватки крові, а тому пошук технологічних методик виготовлення високоякісної сироватки, придатної для використання у складі живильних середовищ для культивування культур клітин, є актуальним питанням.
    Проблема стерильності культур клітин, які використовуються при виготовленні вакцин та діагностичних препаратів, є також актуальною. Для виробництва багатьох біологічних препаратів необхідно використовувати більш безпечні клітинні субстрати, якими безперечно є культури клітин, приготовлені із органів тварин-гнотобіотів. Створення таких культур клітин, призначених для вірусологічних досліджень, які культивуються на простому, дешевому живильному середовищі, також необхідно збільшити.
    Вирішенню цих важливих питань і присвячені наші дослідження.
    Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами
    Дисертаційна робота виконана згідно Державного плану науково-дослідних робіт Інституту ветеринарної медицини УААН КП И № держреєстрації 0197U012759 інв. № 02.01. Розробити нові конкурентноздатні живильні середовища для вірусологічних досліджень”.

    Мета і завдання досліджень
    Метою нашої роботи було виготовлення ефективного живильного середовища для культивування культур клітин.
    Для реалізації вказаної мети вирішувались такі завдання:
    визначити оптимальні умови гідролізу та спростити методику отримання ферментативного гідролізату згустків крові ВРХ;
    вивчити фізико-хімічні властивості отриманих гідролізатів;
    визначити здатність росту первинних та перещеплюваних клітин в середовищах, на основі отриманих гідролізатів;
    визначити придатність клітин, вирощених на середовищах з гідролізатом, забезпечувати репродукцію вірусів;
    удосконалити методику отримання сироватки крові ВРХ та провести оцінку її ростової активності у складі живильних середовищ для культивування культур клітин;
    адаптувати виведену лінію перещеплюваних клітин тестикулів поросят (ПТП) до отриманого середовища та визначити придатність культури для використання у вірусологічних дослідженнях.
    Об’єкт дослідження культури клітин, живильні середовища.
    Предмет дослідження процес культивування культур клітин та вірусів на різних середовищах з вмістом сироватки крові.
    Методи досліджень: культури клітин отримували методом дрібної трипсинізації; визначення концентрації клітин проводили методом забарвлення трипановим синім та підрахунком в камері Горяєва; життєздатність клітин підтримували методом регулярних пересівів; визначення протеолітичної активності ферментів проводили методом Лейлян-Фольгарда в модифікації; для характеристики фізико-хімічних показників маточних гідролізатів визначали: амінний азот формольним титруванням за спрощеним методом Зеренсен-Гаврилова, концентрацію водневих іонів потенціометрично, вміст триптофану методом М. А. Пешкова, зовнішній вигляд, колір та запах органолептично; визначення ступені токсичності та ростової активності середовищ та сироватки проводили методом культивування культур клітин; накопичення вірусу визначали по величині титру інфекційності методом титрування; розрахунок титру інфекційності проводили по методу Ріда і Менча.
    Наукова новизна отриманих результатів:
    вперше в Україні отриманий і випробуваний з позитивними результатами ферментативний гідролізат білків крові із відходів виробництва сироватки, придатний для виготовлення живильних середовищ для культур клітин;
    удосконалена методика по отриманню ферментативного гідролізату білків із використанням нехарчової білкової сировини на принципах безвідходної технології виробництва;
    запропоновані технологічна схема отримання сироватки крові великої рогатої худоби нативної без консерванту та метод контрольної системи для визначення її ростової активності;
    вперше виведена лінія перещеплюваних клітин тестикулів поросят-гнотобіотів та обґрунтована можливість використання її для вірусологічних досліджень ( отримано патент на винахід № 40865 А).
    Практичне значення отриманих результатів
    Матеріали досліджень використані при розробці нормативної документації (НД), яка затверджена Державним департаментом ветеринарної медицини:
    1. НД по виготовленню і контролю живильного середовища гемогідролізату для культивування культур клітин № 24.4.05510830.640 від 13.11.2001р.;
    2. НД по виготовленню і контролю сироватки крові великої рогатої худоби нативної без консерванту № 24.4.05510830.639 від 13.11.2001р.
    Виведена культура клітин ПТП використана при виготовленні:
    вірусвакцини проти ентеровірусного гастроентериту свиней із штаму УНИВИ ( ТУ У 46. 15. 077 95);
    вірусвакцини проти ентеровірусного гастроентериту свиней із штаму В 386/79 ( ТУ У 46. 15. 078 95);
    вірусвакцини проти трансмісивного гастроентериту свиней із штаму П 1439/81 (ТУ У 46.15.308 98);
    набору для діагностики ентеровірусних захворювань з синдромом SMEDI ( ТУ У 46. 15. 327 98).
    Особистий внесок здобувача
    Експериментальні дослідження, аналіз одержаних результатів, їхнє узагальнення і статистична обробка, а також оформлення рукопису нормативної документації виконані власне дисертантом. При виведенні лінії перещеплюваних клітин тестикулів поросят особистим внеском є субкультивування отриманої культури. Автором самостійно адаптовано лінію клітин ПТП до виготовленого живильного середовища та проведено культивування вірусу хвороби Тешена із застосуванням цієї культури.
    Апробація результатів дисертації проводилась на ІІІ Українсько-австрійському симпозіумі Сільське господарство. Наука і практика” (Чернівці, 14-16 вересня 2000 р.); Всеукраїнській науково-практичній конференції молодих вчених Проблеми патології тварин та шляхи їх вирішення” (м. Київ, 11 жовтня 2000 р). Результати досліджень, викладені в дисертації, заслухані та обговорені на засіданнях вченої ради та методичної комісії Інституту ветеринарної медицини (1998-2001 рр.).
    Публікації. Основні положення дисертаційної роботи викладені в чотирьох опублікованих наукових працях, три з яких у фахових виданнях (Віснику Білоцерківського державного університету, Віснику аграрної науки). Отримано один патент на винахід.
    Об’єм і структура дисертації
    Дисертація викладена на 154 сторінках друкованого тексту і містить: вступ, огляд літератури, загальну методику та основні методи досліджень, результати експериментальних досліджень, аналіз і узагальнення результатів досліджень, висновки, список використаних джерел, додатки. Робота ілюстрована 11 рисунками, 12 таблицями та 11 додатками. До списку літератури входить 221 джерело, у т. ч. 59 - далекого зарубіжжя.
  • Список литературы:
  • ВИСНОВКИ

    1. Розроблено та запропоновано для практики культуральне живильне середовище ферментативний гідролізат білків крові (ФГБК) великої рогатої худоби. Середовище виготовлене із вітчизняних компонентів, дешеве, просте у приготуванні, призначене для культивування первинних і перещеплюваних культур клітин та вірусів різного походження.
    2. Визначені оптимальні умови проведення ферментативного гідролізу білків крові ВРХ: розбавлення субстрату розчином Хенкса у співвідношенні 1:2; концентрація ферментативного препарату 35-45%, трипсину 4-5 гр/дм3 кров’яної маси; температура гідролізу 38-42ºС; початкове значення рН суміші, яка гідролізується 7,4 7,8; тривалість гідролізу 2-3 доби.
    3. Рідкий ФГБК прозора рідина від солом’яно-жовтого до жовто-коричневого кольору різної інтенсивності, зі вмістом амінного азоту 710-949 мг/100см3, триптофану 120,5±4,9 мг/100см3, величиною рН 6,86±0,5 та з характерним без гнильного запахом.
    4. Живильні середовища на основі 5 і 7,5%-го ФГБК, при культивуванні первинних та перещеплюваних культур клітин, забезпечують накопичення біомаси життєздатних клітин і продуктивний їх ріст. За морфологічною характеристикою моношару, строками формування та індексом проліферації клітин препарат не поступається ГЛА та синтетичному живильному середовищі 199.
    5. Встановлена придатність клітин, вирощених із застосуванням живильних середовищ на основі ФГБК, забезпечувати репродукцію вірусу хвороби Тешена. Титр інфекційності вірусу складає на різних культурах 10-7,0 10-8,24 ТЦД 50/см3, що не відрізняється від цього показника при використанні клітин, вирощених на інших середовищах. Середовища на основі ФГБК, поряд із імпортними препаратами на основі чистих амінокислот і гідролізатів білків, використовуються як підтримуючі при репродукції вірусу хвороби Тешена.
    6. Сироватка крові ВРХ нативна без консерванту, одержана за простою методикою, із застосуванням контрольної системи, забезпечує повноцінний ріст та розвиток клітин в культурі.
    7. Отримана стабільна за морфофункціональними якостями лінія перещеплюваних клітин тестикулів поросят із високим індексом проліферації (1:8-1:12). Культура адаптована до вітчизняного живильного середовища і забезпечує високі титри інфекційності різних вірусів свинячого походження.

    Пропозиції виробництву
    При масовому вирощенні клітин в культурі, у разі самостійного виготовлення живильних середовищ та розчинів, пропонуємо використовувати технологію безвідходного виробництва, яка забезпечує використання рідкої частини крові для отримання сироватки, а згустків крові для приготування основ живильних середовищ, призначених для культивування культур клітин.
    На основі результатів дослідних та виробничих випробувань партій ФГБК та сироватки крові нативної без консерванту розроблена і затверджена нормативна документація на їх виробництво і застосування.
    Культуру клітин ПТП, одержану із тестикулів поросят-гнотобіотів, доцільно використовувати для вірусологічних досліджень постановки реакції нейтралізації, титрування інфекційності вірусів по ЦПД, напрацювання біомаси вірусів з метою приготування вакцинних та діагностичних препаратів.






    СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ
    1. Апатенко В. М. Особо опасные вирусные инфекции сельскохозяйственных животных. К.: Урожай, 1991. 144 с.
    2. Van Oirschot J. T. Present and future of veterinary viral vaccinology // 5 tn International Congress of Veterinary Virology: Veterinary Virology in the New Millennium. Brescia (Italy). 2000. P. 18-27.
    3. Сергєєв В. О. Вірусні вакцини. К.: Урожай, 1993. 368 с.
    4. Melnik J. L., Riordan J. T. Poliomyelitis viruses in tissue culture ІV. Protein-free nutrient media in stationary and roller tube cultures // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. (N. Y.). 1952. Vol. 81. P. 208-213.
    5. Ферментативный гидролизат мышечных белков как основа питательных сред для клеточных культур / В. А. Сергеев, В. И. Жестерев, Г. А. Сафонов, Н. Д. Скичко // Вопросы вирусологии. 1988. - № 5. С. 623-627.
    6. Матюшина Л. В. Подбор компонентов отечественного производства и разработка на их основе питательных сред для тканевых культур клеток: Автореф. дис. канд. биол. наук: 03.00.06 / Всесоюз. научн.-ислед. ящурный ин-т. Владимир, 1989. 23 с.
    7. Строгов С. Е., Дудник Н. В. Оптимизация процессов приготовления питательной среды на основе сернокислотного гидролизата казеина для культур клеток животных. Сообщ. 1. Гидролиз казеина / Всес. н.-и. и проектн.-конструкт. ин-т прикл. биохимии. М., 1989. 11 с.: ил. Рус. Деп. в НПО Медбиоэкономика 13.06.89, № 487-мб89.
    8. А. с. 1693042 СССР, МКИ С 12 N 1/20. Способ получения белкового гидролизата / Л. В. Ефремова, С. Ф. Яблонская, И. А. Аболиня и др. (СССР). № 4634159/13; Заявлено 09.01.89; Опубл. 23.11.91. Бюл. № 43. 5 с.
    9. Тарасов В. Н. Культуры клеток в вирусологии / Итоги науки и техн. ВИНИТИ. Сер. Вирусология / Под ред. А. А. Новохатского. М., 1990. Т. 19. 256 с.
    10. Конструирование бессывороточных питательных сред для культивирования клеток млекопитающих. I. Изучение ростостимулирующей активности ферментативного гидролизата казеина / А. С. Пригода, А. И. Коренева, Е. Ю. Коновалова, И. В. Андреева // Биотехнология. 1990. - № 2. С. 35-39.
    11. Иванов И. В., Строгов С. Е. Питательная среда на основе солянокислого гидролизата куриных эмбрионов для культивирования клеток животных. І. Гидролиз эмбрионов // Биотехнология. 1991. - № 3. С. 54-56.
    12. Изучение ростостимулирующих компонентов гель - фильтрационных фракций панкреатических белковых гидролизатов / Л. Я. Телишевская, Н. Н. Максимюк, А. А. Комаров, Б. Е. Караваев // Биотехнология. 1993. - № 11-12. С. 33-38.
    13. Пивненко Т. Н., Поздняков Ю. М., Давидович В. В. Получение и характеристика белковых гидролизатов с использованием ферментных препаратов различной специфичности // Изв. Тихоокен. н.-и. рибохоз. центра. 1997. С. 23-31, 260, 269.
    14. Культивирование клеток млекопитающих с применением сухих стерильных питательных сред на основе ферментативных гидролизатов: Тез. докл. на Всеросс. симп. "Биология клетки в культуре”, С.-Пб, 20-22 окт., 1998 / Л. Д. Мартынец, Е. А. Сорокин, Т. Б. Сироткина и др. // Цитология. 1999. Т. 41. - № 3-4. С. 290.
    15. Биология клеток в культуре / Н. Н. Никольский, Ю. Б. Вахтин, Т. Н. Игнатова и др. Л.: Наука, 1984. 280 с.
    16. Бактемиров Т. А. Безопасность препаратов, полученных в перевиваемых клеточных линиях // Актуальные вопросы биотехнологии: Матер. Всесоюз. научн. конф. Ленинград, 1987. С. 51-52.
    17. Quality assessment of bovine IVF embryos cultured on Vero cells / C. Guyader-Joly, S. Ponchon, M. Durand et al. // Proc. Of 12th Scientific Meeting, 13-14 September, 1996. Lyon, 1996. P. 136.
    18. Generation of murine monoclonal antibodies in serum-free medium // Liu Ru-Shya, Ta Danh, Poyne Janice et al. // Hybridoma. 1998. Vol. 17. - № 1. P. 69-72.
    19. Кузнєцова І. Б. Ефективність розвитку in vitro зародків ВРХ одержаних поза організмом, на моношарі клітин BRL // Вісн. проблемної біології і медицини. 1999. - № 13. С. 43-37.
    20. Бакарджева А., Бауэрк К. Биосинтез, выделение и поглощение карнозина в первичных культурах // Биохимия. 2000. Т. 65, № 7. С. 917-920.
    21. А. с. 1613487 СССР, МКИ С 12 N 5/00. Штамм перевиваемых клеток почки новорожденного кролика для производства и контроля медицинских вирусных препаратов / Г. Г. Колесникова, С. М. Раскатова, Н. П. Глинских и др. (СССР). № 4459837/30-13; Заявлено 01.06.88; Опубл. 15.12.90. Бюл. № 46. 3 с.
    22. Культивирование клеток продуцентов вируса иммунодефицита / В. М. Жданов, А. И. Громыко, Ф. И. Ершов и др. // Вопросы вирусологии. 1988. - № 2. С. 192-196.
    23. Word Health Organization. Cell culture as a substrate for the production of influenza vaccines: memorandum from a WHO meeting // Bull. Wld Hlth Org. 1995. Vol. 73. P. 431-435.
    24. Клеточная культура щитовидной железы новонарожденных поросят как объект исследования в эндокринологии / И. Н. Шостак, Н. Д. Тронько, Ю. Н. Зурнаджи, И. П. Пастер // Гормональная регуляция в норме и при патологии: Тез. докл. област. научн. конф. Харьков, 1989. С. 61-62.
    25. Мусиенко М. И., Лобунцова Д. В., Дьяконов Л. П. Культурально-морфологическая характеристика почки трансгенного хряка (ген HBS) // Новые направления биотехнологии: Тез. докл. Всесоюз. конф. Пущино, 1990. С. 30.
    26. Первичная монослойная культура астроцитов человека как эксперементальная модель для изучения ВИЧ-нейроинфекции in vitro / З. Б. Квачева, В. Ф. Еремин, В. Ф. Вотяков // Матер. Междунар. конф.: Молекулярная генетика и биотехнология. Минск, 1998. С. 42-43.
    27. Kallos Michael S., Behie Leo A. Inoculation and growth conditions for high- cell-density expansion of mammalian neural stem cells in suspension bioreactor // Biotechnol. And Bioeng. 1999. Vol. 63. - № 4. P. 473-483.
    28. Kallos Michael S., Behie Leo A., Vescovi Angelo L. Extended serial passaging of mammalian neural stem cells in suspension bioreactor // Biotechnol. And Bioeng. 1999. Vol. 65. - № 5. P. 589-599.
    29. Apoptosis induced by infection of primary brain cultured with diverse human immunodeficiency virus 1 isolates: Evidence for a role of the envelope / Ohagen Asa, Chosh Sayal, He Yinglin et al. // J. Virol. 1999. Vol. 73. - № 2. P. 897-906.
    30. Изучение функционирования системы интерферона разных линий перевиваемых клеток / Т. Г. Орлова, Ф. В. Воронина, М. Гаджилиева и др. // Биотехнология. 2000. - № 5. С. 88-92.
    31. Получение и характеристика линий перевиваемых клеток органов и тканей эмбриона африканской зеленой мартышки № 4179 / Л. Л. Миронова, В. И. Стобецкий, В. Д. Попова и др. // Биотехнология. 2000. - № 6. С. 48-53.
    32. Изучение репродукции вируса КЧС в клеточных культурах / А. И. Егорова, Ж. А. Шажко, В. Н. Герасимов и др. // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: Матер. научн.-практ. конф. ВНИИВВиМ: Классическая чума свиней неотложные проблемы науки и практики. Покров, 1995. С. 18.
    33. Использование перевиваемых линий клеток для размножения штама «Катанга-350» вируса АЧС / В. И. Репин, Ю. И. Петров, А. В. Киселев и др. // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: Матер. научн.-практ. конф. ВНИИВВиМ: Классическая чума свиней неотложные проблемы науки и практики. Покров, 1995. С. 139-140.
    34. Герасимов В. Н., Дьяконов Л. П., Бабкин В. Ф. Особенности репродукции вирусов животных в культурах клеток при длительном пассировании // Ветеринарна медицина: Міжвідомчий тематичний науковий збірник. Харків, 1997. № 73. С. 64-65.
    35. Герасимов В. Н., Михалишин В. В., Бабкин В. Ф. Опыт выращивания вирусов животных в постоянных культурах клеток без смены ростовой среды // Ветеринарна медицина: Міжвідомчий тематичний науковий збірник. Харків, 1997. № 73. С. 66-67.
    36. Клональная характеристика перевиваемой линии клеток почки поросенка / О. Л. Колбасов, С. Г. Юрков, В. В. Куриннов и др. // Докл. Рос. акад. с.-х. наук. 2000. - № 4. С. 39-41.
    37. Алипер Т. И., Василев В. Ф., Сергеев В. А. Персистенция вируса и эпизоотологическая опасность реконвалисцентов при ТГС // Ветеринария. 2001. - № 5. С. 16-21.
    38. Коротяев А. И., Бабичев С. А. Медицинская микробиология и вирусология: Учебник. СПб: Специальня литература, 1998. 592 с.
    39. Адамс Р. Методы культуры клеток для биохимиков. М.: Мир, 1983. 264 с.
    40. Crane M. S. Mutagensis and cell transformation in cell culture. // Methods Cell Sci. 1999. Vol. 21. - № 4. P. 245-253.
    41. Ветеринария: Большой энциклопедический словарь / Гл. ред. В. П. Шишков. М.: Советская энциклопедия, 1998. 640 с.
    42. Сергеев В.А., Собко Ю.А. Культуры клеток в ветеринарии и биотехнологии. К.: Урожай, 1990. 152 с.
    43. Опыт создания банка авторских линий перевиваемых клеток и их применение в вирусологической практике / Л. Л. Миронова, В. Д. Попова, О. И. Конюшенко и др. // Биотехнология. 2000. - № 6. С. 41-47.
    44. Дьяконов Л. П. Специализированная коллекция клеточных культур с/х и промысловых животных (СХЖ РАСХН) РККК РАН и криобанка ВИЭВ // Консервация генетических ресурсов: Матер. 14 Раб. совещ., Пущино, 28-30 мая, 1996. Пущино, 1996. С. 76-79.
    45. Криопротекторы / Н. С. Пушкарь, М. И. Шраго, А. М. Белоус, Ю. В. Калугин. К.: Наукова думка, 1978. 204 с.
    46. Гусев А. А., Куляшбекова Ш. К., Герасимов В. Н. Развитие биотехнологии культур клеток во ВНИИЗЖ // Матер. научн.-практ. конф.: Современные аспекты ветеринарной патологии животных. Владимир, 1998. С. 168-173.
    47. Стегний Б. Т. Восстановление клеточных культур после хранения в глубокозамороженом состоянии // Ветеринария. 1994. - № 7. С. 25-28.
    48. Стегній Б. Т. Цитогенетична характеристика клітин культури, які підлягали кріоконсервації і мікоплазменій контамінації // Інформаційний бюлетень ІЕКВМ. Харків, 1995. С. 13-14.
    49. Стегний Б. Т. Консервирование клеток и фрагментов тканей животных // Ветеринария. 1982. - № 2. С. 37-39.
    50. Бусол В. О., Стегній Б. Т., Берус П. Т. Кріоконсервування культури клітин FLK, які продукують вірус лейкозу великої рогатої худоби // Інформаційний бюлетень ІЕКВМ. Харків, 1995. С. 11-12.
    51. Особенности митотического режима культуры клеток СПЭВ после замораживания / В. С. Белоконь, П. Т. Берус, Г. Б. Герус и др. // Ветеринария. 1981. - № 6. С. 28-30.
    52. Стегній Б. Т. Проблеми стабілізації клітинних культур, які використовують у біотехнології ветеринарних біопрепаратів // Ветеринарна медицина: Міжвідомчий тематичний наук. зб. Київ, 1994. Вип. 69. С. 29-32.
    53. Enders G. Bovine amniotic fluid as tissue culture medium in cultivation of poliomyelitis and other viruses // Proc. Soc. Exp. Biol. 1953. Vol. 82. - № 1. P. 100.
    54. Resultats de la culture in vitro du virus poliomyelitique sur differ entes suches cellulaires d’origine humaine / G. Barski, P. Souza, V. Monaci et al. // Ann. Inst. Past. 1953. Vol. 85. - № 5. P. 576.
    55. Morgan J. F., Morton H. J., Parcer R. C. Nutrition of animal cells in tissue culture. I. Initial studies on a synthetic medium // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1950c. Vol. 73. - № 1. P. 1-8.
    56. Eagle H. Amino acid metabolism in human cell cultures // Federat. Proc. 1958. Vol. 17. - № 4. P. 985-986.
    57. Eagle H., Preeman A., Levi M. Amino acid requirements of monkey kidney cells in firet culture passage // J. Exp. Med. 1958. Vol. 107. - № 5. P. 643-652.
    58. Protein turnover in mammalian cells culture / H. Eagle, K. A. Piez, H. Fleischman, V. I. Oyama // J. Biol. Chem. 1959. Vol. 234. № 3. P. 592-597.
    59. Dugas T.R., Morel D. W., Harrison E.H. Novel cell culture medium for use in oxidation experiments provides insights into mechanisms of endothelial cell-mediated oxidation of LDL // J. In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 2000. Vol. 36. - № 9. P. 571-577.
    60. Long L. H., Clement M. V., Halliwell B. Artifacts in cell culture: rapid generation of hydrogen peroxide on addition of (-)-epigallocatechin, (-)-epigallocatechin gallate, (+)-catechin, and quercetin to commonly used cell culture media // J. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. Vol. 273. - № 1. P. 50-53.
    61. Water channel AQP-1 in the primary cell culture of rat peritoneum / T. Akiba, T. Ota, K. Fushimi et al. // Marumo Adv. Perit. Dial. 1999. Vol. 15. P. 3-6.
    62. Grzelak A., Rychlik B., Bartosz G. Light-dependent generation of reactive oxygen species in cell culture media // J. Free radical biology et medicine. 2001. Vol. 30. - № 12. Р. 1418-1425.
    63. Hu J., Bok D. A cell culture medium that supports the differentiation of human retinal pigment epithelium into functionally polarized monolayers // J. Mol. Vis. 2001. Vol. 7. P. 14-19.
    64. High-precision isotope ratio mass spectrometry and stable isotope precursors for tracer studies in cell culture / M. C. Huang, S. Muddana, E. N. Horowitz et al. // J. Anal. Biochem. 2000. Vol. 287. - № 1. P. 80-86.
    65. Alveolar mononuclear cells can develop into multinucleated osteoclasts: an in vitro cell culture model // J. S. Sun, W. S. Chang, R. C. Hong et al. // J. Biomed. Mater. Res. 2000. Vol. 52. - № 1. P. 142-147.
    66. Misik V., Riesz P. EPR characterization of free radical intermediates formed during ultrasound exposure of cell culture media / J. Free Radic. Biol. Med. 1999. Vol. 26. - № 7-8. P. 936-943.
    67. А. с. 1345626 СССР, МКИ С 12 N 1/20, А 23 J 1/10. Способ получения белкового гидролизата из мясных отходов производства для питательных сред / А. П. Шпокене, С. Л. Григишкис, М. П. Гуреева и др. (СССР). № 4046551/28-13; Заявлено 23.01.86; Для служебного пользования. Экз. № 233 4 с.
    68. Пригода А. С., Коренева А. И. Конструирование бессывороточных питательных сред для культивирования клеток млекопитающих. ІI. Изучение ростостимулирующей активности ультрафильтрационных фракций панкреатического гидролизата казеина // Биотехнология. 1991. - № 4. С. 38-40.
    69. Коновалова Е. Ю., Андреева И. В., Пригода А. С. Конструирование бессывороточных питательных сред для культивирования клеток млекопитающих. ІІI. Изучение пептидного спектра панкреатического гидролизата казеина и его ультрафильтрационных фракций с ростостимулирующей активностю // Биотехнология. 1991. - № 5. С. 72-76.
    70. Лабораторные опыты по культивированию клеток ВНК/13 в роллере с использованием питательной среды на базе яичного энзиматического гидролизата / Е. Велева, И. Генов, Л. Стефанова и др. // Veterinary scines. Sofia, 1980. - № 9-10. С. 37-41.
    71. Питательная среда на основе солянокислого гидролизата куриных эмбрионов для культивирования клеток животных. ІІ. Отработка режима очистки гидролизата и состава питательной среды / И. В. Иванов, С. Е. Строгов, Е. Ю. Коновалов и др. // Биотехнология. 1991. - № 5. С. 59-62.
    72. Чувствительность к вирусу ящура клеточной культуры, выращенной в среде из плацентарного гидролизата / П. А. Сергеева, Н. И. Васлянина, Ш. Н. Шарипов, Т. Н. Романович // Ящур: Тематический сборник работ по проблеме ящура. Владимир, 1970 б. - № 1. С. 276-277.
    73. Пат. 2020153 РФ, МКИ С 12 N 5/00, С 12 Р 21/06. Способ получения ферментативного гидролизата и питательная среда для культивирования клеток эукариотов / Р. И. Искендеров, Б. Б. Егоров, И. Г. Ермишина и др. (РФ). - № 4918806/13; Заявлено 17.01.91; Опубл. 30.09.94. Бюл. № 18. 8 с.
    74. Гизитдинов Н. Н., Куликова К. С., Вовк. В. И. Результаты изучения вируса, выращенного в культуре клеток с использованием среды, приготовленной из белкового гидролизата сои // Вестник сельскохозяйственной науки. Алма-Ата, 1970. - № 7. С. 64-69.
    75. Выращивание культуры Р. multocida на питательных средах, приготовленных на основе гидролизата крови КРС / Ю. Д. Поярков, А. В. Новиков, Ю. И. Юдин и др. // Сборник матер. Междунар. науч.-практ. конф.: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. Покров, 1998. С. 31-32.
    76. Создание технологи производства живой вакцины против пастереллеза птиц / В. В. Гусев, Э. А. Свиточ, Ю. Г. Степаншин, Ю. П. Падерин // Сборник матер. Междунар. науч.-практ. конф.: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. Покров, 1998. С. 32-33.
    77. Разработка новых питательных сред для выращивания лептоспир / Л. В. Семенов, Е. В. Сусский, Е. А. Горбунов и др. // Сборник матер. Междунар. науч.-практ. конф.: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. Покров, 1998. С. 40-41.
    78. Селективная питательная среда для кампилобактерий / Л. Я. Телишевская, О. Д. Скляров, З. Ф. Богаутдинов, О. С. Пивоварова // Тез. докл. Всеросс. научн. конф.: Совершенствование методов контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов. Москва, 2001. С. 78.
    79. Перспективы рационального использования сырья в производстве питательных сред для имунопрепаратов / Б. М. Раскин, В. А. Мельникова, С. В. Денисов и др. // Актуальные вопросы биотехнологии: Матер. Всесоюз. научн. конф. Ленинград, 1987. С. 161-162.
    80. Изучение возможности применения основ питательных сред, выпускаемых в НИИМ МО РФ, для выделения культур актинобацилл при эпидемиологическом обследовании животноводческих комплексов в ряде регионов Росии / А. В. Кибирев, А. В. Миронин, И. В. Живов и др. // Сборник матер. Междунар. науч.-практ. конф.: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. Покров, 1998. С. 47-48.
    81. Использование сухого белкового концентрата в качестве азотсодержащей основы бактериологических питательных сред / В. В. Доценко, А. Ф. Карышева, С. В. Карышев и др. // Ветеринария. 1995. - № 10. С. 29.
    82. Разработка технологии серийного производства сухих питательных сред из непищевого сырья с применением метода распылительной сушки для обеспечения выпуска ветеринарных вакцин / С. А. Маслов, Г. В. Комоско, Б. А. Левчук и др. // Сборник матер. Междунар. науч.-практ. конф.: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. Покров, 1998. С. 52.
    83. Приготовление основ микробиологических питательных сред из мясокостного фарша тушек пушных зверей с использованием элементов безотходного производства / С. А. Маслов, А. Л. Ковтун, Н. А. Черкасов и др. // Сборник матер. Междунар. науч.-практ. конф.: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. Покров, 1998. С. 52-53.
    84. Фролова И. В., Трошкова Г. П., Камший Л. П. Разработка технологии изготовления сухих стерильных питательных сред для культур клеток млекопитающих // Биотехнология. 1999. - № 4. С. 38-44.
    85. Трошкова Г. П. Технологические основы электронно-лучевой стерилизации питательных сред // Биотехнология. 2000. - № 6. С. 54-60.
    86. Изучение сроков годности и причин снижения качества сухих стерильных питательных сред / М. П. Багрянцева, Г. П. Трошкова, Н. А. Мазуркова, В. Т. Ночевный // Биотехнология. 1999. - № 4. С. 49-54.
    87. Eagle H. The specific amino acid requirements of a human carcinoma cells (strain HeLa) in tissue culture // J. Exp. Med. 1955a. Vol. 102. - № 1. P. 37-48.
    88. Eagle H. The specific amino acid requirements of a mammalian cells (strain L) in tissue culture // J. Biol. Chem. 1955b. Vol. 214. - № 2. P. 839-852.
    89. Eagle H. Relative growth-promoting activity in tissue culture of co-factors and parent vitamins // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1956. Vol. 91. P. 358-361.
    90. Eagle H. Utilization of dipeptides by mammalian cells in tissue culture // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1955c. Vol. 89. - № 1. P. 96-99.
    91. Mitsuhashi S. Nutritional requirements of insect cells cultured in vitro // 20 Int. Congr. Entomol., Franze, Aug. 25-31, 1996: Proc. Firenze, 1996. P. 168.
    92. Некоторые аспекты получения и контроля сывороток крови животных / В. Т. Ночевный, Л. И. Игудин, Н. А. Башашкина, Г. М. Гнуни // Актуальные вопросы биотехнологии: Матер. Всесоюз. научн. конф. Ленинград, 1987. С. 129-130.
    93. Свойства сыворотки крови плодов коров, полученной по новой технологии / Н. И. Гурьянов, Р. Х. Юсупов, В. А. Гурьянова, В. П. Коксин // Ветеринария. 1991. - № 12. С. 63-64.
    94. Ермолаев М. В. Биологическая химия. Изд. 2-е, перераб. и доп. М.: Медицина, 1978. 320 с.
    95. Waymouth C. W. A serum-free nutrient solution sustaining rapid and continuous proliferation of strain L (Earle) mouse cells // J. Nat. Cancer. Inst. 1956. Vol. 17. P. 315-328.
    96. Eagle H. Amino acid metabolism in mammalian cell cultures // Science. 1959. Vol. 130. P. 432-437.
    97. Morgan J. F., Pasieka A. E. Amino acid metabolism of normal and malignant cell cultures // Canad. J. Biochem. Physiol. 1960. Vol. 38. - № 4. P. 399-408.
    98. Сергеев В. А. Репродукция и выращивание вирусов животных. М.: Колос, 1976. 304 с.
    99. Персистенция вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) в присутствии α-интерферона в клетках МТ-4 / Л. М. Селимов, С. Н. Чорданский, Е. В. Козенинова, А. В. Бобков // Вопросы вирусологии. 2001. - № 2. С. 17-20.
    100. Levintow L., Eagle H., Piez K. A. The role of glutamine in protein biosynthesis in tissue culture // J. Biol. Chem. 1957. Vol. 227. - № 2. P. 929-941.
    101. Eagle H., Piez K. A. The population-dependent requirement try cultured mammalian cells for metabolites which they can synthesize // J. Exp. Med. 1962. Vol. 116. - № 1. P. 29-42.
    102. The population dependent requirement by cultured mammalian cells for metabolites wich they can synthesize. II. Glutamic acid and glutamine, aspartic acid and asparagine / H. Eagle, C. L. Washington, M. Levy, L. Cohen // J. Biol. Chem. 1966. Vol. 241. - № 21. P. 4994-5008.
    103. Renard C.B., Bornfeldt K. E. Human arterial smooth muscle cells rapidly deplete cell culture media of glucose // J. Diabetologia. 2001. Vol. 44. - № 8. Р. 1067-1068.
    104. Donnelly M., Scheffler I. E. Energy metabolism in respiration-deficient and wild type Chinese hamster fibroblasts in culture // J. Cell. Physiol. 1976. Vol. 89. № 3. P. 39-50.
    105. Improvement of CHO cell culture medium formulation: simultaneous substitution of glucose and glutamine / C. Altamirano, C. Paredes, J. J. Cairo F. Godia // Biotechnol. Prog. 2000. Vol. 16. - № 1. P. 69-75.
    106. Eagle H., Piez K. A., Levy M. The intracellular amino acid concentration required for protein synthesis in cultured human cells // J. Biol. Chem. 1961. Vol. 236. - № 5. P. 2039-2047.
    107. Morgan J. F., Morton H. J. Studies on the sulfur metabolism of tissues cultivated in vitro. I. A critical requirement for L-cystine // J. Biol. Chem. 1955. Vol. 212. - № 2. P. 539-545.
    108. Morgan J. F., Morton H. J. Studies on the sulfur metabolism of tissues cultivated in vitro. III. Interrelationships between cysteine, methionine, cysteamine and cystamine // Canad. J. Biochem. Physiol. 1957a. Vol. 35. - № 10. P. 785-794.
    109. Строгов С. Е., Королев В. И. Аминокислоты в гидролизных средах для культивирования клеток животных // Биотехнология. 1987. - № 5. С. 596-601.
    110. Биотехнология клеток животных: Пер. с англ. / Под ред. Р. Е. Спиер, Дж. Б. Гриффитс. М.: Агропромиздат, 1989. Т.1. 365 с.
    111. Stimulation of the initiation of DNA synthesis and cell division in several cultured mouse cell types / M. K. O’Farrel, D. Clingan, P. S. Rudland, L. J. de Asua // Exp. Cell Res. 1979. Vol. 118. P. 311-321.
    112. Monitoring of ascorbate at a constant rate in cell culture: effect on cell growth / T. Chepda, M. Cadau, P. Girin et al. // J. In Vitro Cell Dev. Biol. Anim. 2001. Vol. 37. - № 1. P. 26-30.
    113. Общая вирусология: Руководство. Том 1 / Под ред. Жданова В. М., Гайдамович С.Я.; АМН СССР. - М.: Медицина, 1982. 496 с.
    114. Методические рекомендации по получению сыворотки крови плодов свиней, со специфическим сывороточным фактором роста для клеточных культур / Украинский н.-и. вет. и-т.; Разраб.: А.Н. Жуковский, А-й. А. Кучерявенко, Ал-р. А. Кучерявенко и др. Киев, 1989.- 10 с.
    115. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии). / Под ред. Дьяконова Л. П., Ситькова В. И. М., 2000. 400 с.
    116. Wang P., Ou S., Peilin C. Optimization of conditions for safflower cell culture and accumulation of cellicolous product tocopherols // Chin. J. Biotechnol. 1999. Vol. 15. - №. 4. P. 231-237.
    117. Calcium and pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide induced expression of circadian clock gene mPer1 in the mouse cerebellar granule cell culture / M. Akiyama, Y. Minami, T. Nakajima et al. // J. of neurochemistry. 2001. Vol. 78. - № 3. P. 499-508.
    118. Cellular characterization of an in-vitro cell culture model of seal-induced cardiac ischaemia / K. Takahashi, Y. Ohyabu, S. W. Schaffer, J. Azuma // J. pharmacy and pharmacology. 2001. Vol. 53. -
  • Стоимость доставки:
  • 150.00 грн


ПОИСК ДИССЕРТАЦИИ, АВТОРЕФЕРАТА ИЛИ СТАТЬИ


Доставка любой диссертации из России и Украины