Фотіна, Ганна Анатоліївна. Фармако-токсикологічна та клінічна оцінка хіміотерапевтичних засобів для схем ротації в птахівництві : Фотина, Анна Анатольевна. Фармако-токсикологическая и клиническая оценка химиотерапевтических средств для схем ротации в птицеводстве

Краткое описание

МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ

СУМСЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ АГРАРНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

На правах рукопису

ФОТІНА ГАННА АНАТОЛІЇВНА

УДК 619:616.98:578.27:636.2

ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГІЧНА ТА КЛІНІЧНА ОЦІНКА ХІМІОТЕРАПЕВТИЧНИХ ЗАСОБІВ ДЛЯ СХЕМ РОТАЦІЇ В ПТАХІВНИЦТВІ
Том 1

16.00.04 ветеринарна фармакологія та токсикологія

ДИСЕРТАЦІЯ
на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук

Науковий консультант:
доктор ветеринарних наук, професор,
Березовський Андрій Володимирович

Суми 2015

ЗМІСТ

Перелік умовних скорочень..

8

Вступ

10

РОЗДІЛ 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ.

19

1.1. Світове і вітчизняне промислове птахівництво:основні тенденції розвитку
1.2. Поширення бактеріальних інфекцій птиці в птахівничих господарствах України..
1.3. Проблема резистентності мікроорганізмів до антибактеріальної
терапії.......................................................................................................
1.4. Використання імуномодуляторів та антистресів у птахівництві
1.4.1. Стреси у птиці: молекулярні механізми.
1.4.2. Профілактика стресів у птиці
1.4.3. Використання імуномодуляторів у птахівництві
1.4.3.1. Імуномодулятори мікробного (бактеріального) походження.
1.4.3.2. Імуномодулятори ендогенного походження
1.4.3.3. Імуномодулятори кістково-мозкового походження (мієлопептиди)
1.4.3.4. Індуктори інтерферонів.....
1.4.3.5. Хімічно чисті та синтезовані імуномодулятори..........
1.4.3.6. Клінічне застосування імуномодуляторів у птахівництві
1.5. Дезінфекційні засоби, які зареєстровані та застосовуються у птахівничих господарствах України
1.6. Неспецифічна профілактика бактеріальних хвороб птиці - основа епізоотичного благополуччя птахогосподарств.....
1.6.1. Антибіотикопрофілактика бактеріальних хвороб птиці.
1.6.2. Механізми стійкості мікроорганізмів до антибактеріальних засобів.
1.6.3. Раціональна антибактеріальна хіміопрофілактика в птахівництві
1.6.4. Синергія та антагонізм ветеринарних препаратів
1.7. Заключення по огляду літератури та формулювання основних завдань

19

24

32
36
36
39
44

47
49

51
56
56
59

60

62
63

65

66
77
78

РОЗДІЛ 2 ВИБІР НАПРЯМІВ ДОСЛІДЖЕНЬ, МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ВИКОНАННЯ РОБОТИ.

80

2.1. Матеріали досліджень...........

80

2.1.1. Методики першого напрямку досліджень
2.1.2. Методики другого напрямку досліджень..
2.1.3. Методики третього напрямку досліджень.
2.1.4. Статистична обробка отриманих результатів..

83
98
101
115

2. 2. Висновок до розділу 2
3. РОЗДІЛ 3. РЕЗУЛЬТАТИ ВЛАСНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ
3.1 Перший напрямок. Створення та фармако-токсикологічна оцінка антимікробних препаратів з різних хімічних груп та формування потенціалу засобів для ротації ..
3.1.1. Створення та доклінічні випробування комплексного антибактеріального препарату "ТімТіл 250"
3.1.1.1. Розробка рецептури та технології виготовлення лікарської форми препарату "ТімТіл 250"
3.1.1.2. Обґрунтування оптимального співвідношення складових частин комплексного препарату "ТімТіл 250".
3.1.1.3. Фармакокінетика складових препарату "ТімТіл 250"
3.1.1.4. Визначення параметрів гострої токсичності препарату "ТімТіл 250" на білих мишах..
3.1.1.5. Визначення оптимальної терапевтичної дози препарату "ТімТіл 250" на білих мишах ..
3.1.1.6. Вивчення терапевтичної ефективності комплексного препарату "ТімТіл 250" в умовах виробництва .
3.1.2. Розробка та випробування комплексного антибактеріального препарату "Бровасептол-концентрат"..............
3.1.2.1. Обґрунтування оптимального співвідношення складових частин комплексного препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.2. Визначення мінімальної інгібуючої концентрації та фармакологічних властивостей препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.3. Визначення гострої токсичності препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.4. Визначення хронічної токсичності препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.5. Вивчення кумулятивних властивостей препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.6. Вивчення ембріотоксичної та тератогенної дії препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.7. Визначення індексу захисту препарату "Бровасептол-концентрат"
3.1.2.8. Вивчення терапевтичної ефективності комплексного препарату "Бровасептол концентрат" в умовах виробництва ..
3.1.3. Випробування антибактеріального препарату "Цефтіокур"
3.1.3.1. Фармако - токсикологічні дослідження препарат "Цефтіокур".
3.1.3.2. Доклінічні випробування з визначення in vitro антимікробної активності препарату "Цефтіокур"...
3.1.4. Визначення ефективності застосування препарату "ВетОкс-1000" з метою профілактики бактеріальних інфекцій птиці...
3.1.5. Обґрунтування напрямків основних бактеріальних ризиків у промисловому птахівництві.
3.1.6. З’ясування чутливості бактеріальної флори птахогосподарств до активно діючих компонентів сучасних протимікробних засобів

3.1.7. Схеми засобів для ротації протимікробних препаратів у птахівництві та принципи її проведення
3.2. Другий напрямок. Створення та фармако-токсикологічна оцінка мийно-дезінфікуючого препарату "Бі-дезтм" та формування засобів для забезпечення схем ротації їх в системі профілактики бактеріальних інфекцій
3.2.1. Теоретичне обґрунтування складників нового дезінфекційно

Список литературы

ВИСНОВКИ

У дисертаційній роботі науково-теоретичне обґрунтована доцільність розробки вітчизняних препаратів неспецифічної профілактики бактеріозів птиці. Проведена фармако-токсикологічна оцінка створених антимікробних, дезінфікуючих та імуномоделюючих засобів, розроблені технічні умови по їх використанню. Експериментально-теоретично розроблені та наведені схеми ротації досліджених засобів за умови з’ясування чутливості ізольованих, потенційних збудників бактеріальних інфекцій птиці. Економічно аргументовано перспективу застосування сконструйованих препаратів у технологіях промислового птахівництва для скорочення імпортозалежності галузі.
1. Створено новий антимікробний препарат "ТімТіл 250" на основі комбінації двох антибіотиків: тіамулін гідроген фумарату та тілозин тартрату, взятих в оригінальному співвідношенні 58 до 42%. Така комбінація діє синергічно та забезпечує широкий антимікробний спектр дії щодо збудників основних бактеріозів, мікоплазмозів, рикетсіозів, спірохетозів тощо. Встановлено, що за параметрами гострої токсичності і ступенем впливу на організм, "ТімТіл 250" належить до мало небезпечних речовин (IV клас небезпеки за ГОСТ 12.1.007-76). ДЛ50 для білих мишей, при введенні в шлунок становило понад 5000 мг / кг м. т.
2. Використання препарату "ТімТіл 250" в умовах виробництва, порівняно з енрофлоксацином, забезпечувало підвищення збереженості птиці на 1,7 % за ешерихіозу, на 0,3 % за сальмонельозу, а при асоційованого їх перебігу на 3,4 %.
3. Створено новий антимікробний препарат "Бровасептол-концентрат" на основі комбінації натрієвих солей двох сульфаніламідів (сульфадіазину й сульфадиметоксину) та триметоприму, взятих у співвідношенні 2:2:1. Така комбінація діє синергічно та забезпечує широкий спектр антимікробної дії щодо грампозитивних і грамнегативних бактерій та ряду видів найпростіших. За параметрами гострої токсичності і ступенем впливу на організм "Бровасептол-концентрат" належить до мало небезпечних речовин (IV клас небезпеки за ГОСТ 12.1.007-76). При підшкірному введенні білим мишам щоденно, 14 діб поспіль, у терапевтичній дозі та 1/50 DL50, препарат не спричиняв суттєвих змін загального стану, маси тіла, морфологічних та біохімічних показників крові. Коефіцієнт кумуляції препарату "Бровасептол-концентрат" становив 5,6. Індекс захисту у дозах 0,05 та 0,1см3/кг маси тварин, при лікуванні білих мишей, заражених культурами S.pullorum, S. aureus, P. vulgaris, E. coli, Y.enterocolitica, C. perfringens, був у межах 70-100 %, що вказувало на його високу терапевтичну ефективність.
4. Доведено доцільність використання антимікробного препарату "Цефтіокур" з метою профілактики бактеріальних інфекцій птиці. Встановлено, що мінімальна інгібуюча концентрація АДР (цефтіофура гідрохлориду) до S. aureus, S.fecalis, S. pullorum, S. typhimurium, S. enteritidis, Е. coli, P. vulgaris, P. mirabilis, P.aeruginosa, K. pneumoniae, C. perfringens, Y.еnterocolitica, C. jejuni, C. diversus, E.agglomerans при кратності розведення 1:10 склала 0, 049 мкг/см3. "Цефтіокур" за параметрами гострої токсичності належить до малонебезпечних речовин (IV клас небезпеки за ГОСТ 12.1.007-76). Для білих мишей ДЛ50 становить 34628 мг/кг, не володіє кумулятивними властивостями (Ккум 2,36) та має велику терапевтичну широту (терапевтичний індекс = 128,5).
5. Доведено, що при експериментальному ешерихіозі і сальмонельозі курчат застосування препарату "Цефтіокур" забезпечило високу збереженість птиці, яка на 2,5 - 4,5 % перевищувала ефективність препаратів порівняння (доксициклін і енрофлоксацин), що сприяє зменшенню загибелі курчат в 1,5 - 3,5 раза.
6. Водні розчини препарату "ВетОкс-1000" діють бактерицидно щодо всього ізольованого спектра мікрофлори. Застосування їх для санації повітряного середовища забезпечувало зниження рівня загальної бактеріальної забрудненості в 1,5 раза, а санація інкубаційних яєць сприяла зростанню виведення та виводимості курчат на 1,4 - 3,0 % та 2,2 - 3,1 % відповідно. При токсикоінфекції курчат ешерихіозного походження, додавання препарату "ВетОкс-1000" до питної води забезпечувало підвищення збереженості молодняку на 1,4%.
7. Мікробіологічний моніторинг ряду птахівничих господарств України свідчить, що збудники хвороб бактеріальної етіології широко розповсюдженні. Поміж ізольованої мікрофлори найбільшу кількість становили ешерихії (62,3 %) та кокова мікрофлора (24,2 %). Сальмонели різних серологічних груп становили 3,6 %. Решту (9,9 %) становили ізольовані культури протею, синьогнійної палички, клебсієл, ієрсиній, кампілобактерій, ентеробактерій, цитробактерій та клостридій. Це вказує на необхідність систематичного контролю за наявністю збудників бактеріальних інфекцій на всіх критичних точках виробництва продукції птахівництва.
8. Поміж тест-культур мікроорганізмів і ізолятів, які були виділені від хворої птиці та з об’єктів птахівництва, виявили відмінності в їх чутливості до протимікробних засобів з числа АДР хіміотерапевтичних засобів, офіційно зареєстрованих у нашій країні. Бактерицидну активність щодо ізольованих культур виявили: апраміцин, енрофлоксацин, колістин, поліміксин, триметоприм, тілазин, тіамулін, сульфадіазин. P.aeruginosa була високочутлива до апраміцину, тілозину та поліміксину. Польові ізоляти S. aureus, S.pullorum, C.jejuni, E.coli О2 виявляли вибіркову чутливість лише до антибіотиків з класу хінолонів та цефалоспоринів третього покоління.
9. Створено дезінфектант "Бі-дезтм" на основі оригінальної комбінації двох АДР (ПГМГ-гідрохлорид та додецил діпропілен триамін), які разом з допоміжними компонентами забезпечують: бактерицидну і спороцидну дію на грампозитивні і грамнегативні бактерії; туберкулоцидну на M.bovis, M.аvium, M.fortuitum, фунгіцидну на гриби (Aspergillus spp.); а також високий мийний ефект та дезодоруючу здатність. За ступенем впливу на організм дезінфектант належить до мало небезпечних речовин (IV клас небезпеки за ГОСТ 12.1.007-76), для білих мишей ЛД50 при введенні в шлунок > 5000 мг/кг. Дезінфектант, в рекомендованих робочих концентраціях, не чинить подразнюючої та алергічної дії, не токсичний, без гострого запаху, не викликає корозії металевих предметів, не руйнує вироби з гуми, пластмас і тканин. Безпечність використання розчинів 2 % концентрації дезінфектанту "Бі-дезтм" у присутності птиці доведена за гематологічними та біохімічними показниками. При цьому маса тіла та збереженість дослідних бройлерів перевищувала аналогічні показники у контролі на 2,4 та 4,5 % відповідно.
10. Створено новий імуномодулятор "Авесстимтм" на основі морфоліній 2-[5-(піридин-4-іл)-1,2,4-тріазол-3-ілтіо] ацетату, що належить до похідних триазолу. Він виявляє комбіновану дію на організм птиці шляхом активізації біохімічних процесів у клітинах, антиоксидантного впливу, нормалізації обміну речовин, протизапальної, гепатопротекторної та детоксикантної активності. Визначено оптимальноефективну дозу препарату "Авесстимтм", що для курчат становить 5 мг/ кг маси тіла та запропоновано схему застосування даного засобу шляхом випоювання з питною водою. За параметрами гострої токсичності (ЛД505733мг/кг) і ступенем впливу на організм препарат належить до мало небезпечних речовин (IV клас небезпеки за ГОСТ 12.1.007-76).
11. Доведено, що запропонована доза й схема застосування "Авесстимутм" у дослідних курчат стимулює розвиток імунокомпетентних органів, підвищуючи відносну масу тимуса на 0,14 - 0,17 %, фабрицієвої сумки на 0,05 - 0,07 %. Під його впливом, порівняно з контролем, у сироватці крові вірогідно підвищується кількість загального білка (на 22 %), альбумінів (на 14 %), γ - глобулінів (на 35 %), бактерицидна активність (на 13 %); зростає кількість еритроцитів на 38 %; гемоглобіну на 17 %; В-лімфоцитів на 29%. Відсоток імунної птиці підвищується на 4 %, збереженість - на 1,2 % та отримання однорідності ділової молодки - на 1,3%.
12. Препарат "Авесстимтм" в комплексі з препаратом "Євітсел" позитивно впливає на фізіологічний статус організму м'ясних гусей. При цьому вірогідно збільшується кількість еритроцитів (15,9 %), вміст гемоглобіну (на 11,4 %), число лейкоцитів (на 7,3 %), рівень гематокриту (на 16,5 %), рівень загального білка (на 7,4 %), загальна антиоксидантна активність (на 9,1 %), бактерицидна активність (на 10,4 %), лизоцимна (на 6,6 %). Абсолютний приріст маси тіла на 20,7 % вірогідно перевищував контроль.
13. Використання антистресової кормової добавки "Фід Фуд Меджик Антистрес Мікс" у раціонах бройлерів та молодняку яйценосної птиці забезпечувало зростання показників їх природної резистентності та підвищувало збереженість птиці дослідних груп на 4,5 %. Включення даної добавки до раціону курей-несучок сприяло збільшенню концентрації амінокислот у крові та кращому засвоєнню і використанню їх в обмінних процесах та утворенні яйця. Це забезпечувало в пік несучості додаткове зростання продуктивності у дослідних курей (на 7,0 - 8,5 %) порівняно з контролем.
14. Встановлено, що експериментальна мікроелементна кормова добавка "Мікростимулін" забезпечувала високу ефективність (100%) при перебігу експериментального ешерихіозу та мікоплазмозу у курчат та значну профілактичну здатність (90 %) при попередньому (корекційному) застосуванні.
15. Створені комплексні антибактеріальні препарати "ТімТіл 250" і "Бровасептол-концентраттм", одноосновний антибіотик "Цефтіокур" та мийно-дезінфікуючий засіб "Бі-дезтм", за своїми фармако-токсикологічними параметрами відповідають кращим іноземним зразкам, які офіційно представлені на вітчизняному ринку. Водночас, порівнюючи вартість дози препарату "ТімТіл 250", рекомендованої птиці для випоювання із 1м3 води, подібними засобами іноземного виробництва, з’ясували, що ціни препаратів порівняння є вищими на 141,6-185,3%. При цьому, брендові лікарські форми, що аналогічні препарату "Бровасептол-концентраттм", переважають його вартість в 3,2-3,7 раза. Ціна флакону препарату порівняння вища за аналогічну кількість "Цефтіокуру" на 156,4%. Аналіз затрат для приготування робочих розчинів дезінфектантів відповідно до норм витрат на 1000м2 площі пташника свідчать, що ціна іноземних засобів порівняння вища за вартість "Бі-дезутм" на 172,6-182%. Така цінова відмінність дозволяє не лише здешевлювати собівартість продукції птахівництва для вітчизняних виробників, а й конкурувати на міжнародних ринках.

ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

1. За результатами досліджень розроблено технічні умови, настанови із застосування та іншу нормативно-технічну документацію для реєстраційного досьє, що дало можливість отримати реєстраційні посвідчення на наступні препарати та розпочати їх серійне виробництво в НВФ "Бровафарма": "ТімТіл 250"; "Бровасептол-концентрат"; "Бі-дезтм"; "Авестимтм".
Названі розробки дозволили не лише створити ротаційні схеми для промислового птахівництва з вітчизняних засобів, а й становлять значний експортний потенціал і в даний час вже активно експортуються до 6 країн світу.
2. Для профілактики бактеріальних хвороб птиці з респіраторним комплексом, який обумовлено видами S. aureus, S. pneumoniae, C. perfringens, E. coli, K. pneumoniae, P. aeruginosa, P. mirabilis, P. vulgaris, S. enteritidis, M. gallisepticum, P.multocida, A. fumigatus, пропонуємо наступну схему ротації: "ТімТіл 250" "Цефтіокур" "Бі-септим".
3. Для профілактики бактеріальних хвороб при кишковому синдромі, який обумовлений S. aureus, S. faecalis, C. fetus, C. jejuni, C. perfringens, E. agglomerans, E.coli, P. aeruginosa, P. mirabilis, P. vulgaris, S. enteritidis, S. pullorum-gallinarum, більш ефективною є ротація наступних препаратів - "Бровасептол-концентрат" Бровафом-новий" "ВетОкс 1000".
4. Для проведення дезінфекції в птахівничих господарствах пропонуємо наступну схему ротації дезінфіктантів: "Бровадез-плюстм" "Бі-дезтм" "Бровадез-20".
5. З метою підвищення природної резистентності птиці та підвищення ефективності профілактичних заходів при бактеріальних інфекціях птиці запропонована схема ротації імуномодуляторів: "Фід Фуд Меджик Антистрес Мікс" "Мікростимулін" "Авесстимтм".
6. Теоретичні дані роботи рекомендуємо використовувати для вивчення курсів "Ветеринарна фармакологія", "Ветеринарна мікробіологія" для студентів вищих навчальних закладів ветеринарного профілю різних рівнів акредитації.

СПИСОК ВИКОРИСТАННОЇ ЛІТЕРАТУРИ

1. Brown Е. Antibiotic cycling оr rotation, а systematic review of the evidence of efficacy / Е. Brown, D. Nathwanc // J. Antimicrob. Chemother. 2005. Vol. 55 (1). P. 69.
2. Борисенкова А. Н. Проблема бактериальных болезней птиц на современном этапе развития промышленного птицеводства / А.Н.Борисенкова // Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние и стратегия борьбы: науч.-практ. конф.СПб. 2007. С. 198202.
3. Толстанов О. К. Пріоритетні завдання педіатричної освіти та науки в контексті реформування галузі охорони здоров'я // Новости медицины и фармации. 2013. № 16. С. 2022.
4. Стегній Б. Т. Епізоотологічний моніторинг бактеріальних хвороб птиці в Україні / Б. Т. Стегній, К. В. Глєбова, Е. П. Петренчук, І.А.Бобровицька, О.В.Майборода // Ветеринарна медицина. 2014. Вип. 98. С. 99102.
5. Фотіна Т. І. Епізоотологічне та епідеміологічні значення харчових бактеріальних патогенів / Т. І. Фотіна, О. І. Касяненко, Г. А. Фотіна, ЮЄ.Дворська // Наук.-техн. бюлетень Інституту біології тварин і ДНДКІ вет. препаратів та кормових добавок. 2014. Вип. 15. № 2-3. С. 141148.
6. Фещенко Ю. І. Антибіотикорезистентність мікроорганізмів. Стан проблеми та шляхи вирішення / Ю. І. Фещенко, М. І. Гуменюк, О.С.Денисов // Український хіміотерапевтичний журнал. 2010. № 1. 410 с.
7. Чекман I. С. Антибіотикорезистентність: погляд на проблему / I.С.Чекман // Східноєвропейс