Исследование механизмов натрийуретического действия пролактина в модели холестаза беременных Абрамичева Полина Александровна

Краткое описание

Абрамичева,ПолинаАлександровна.Исследованиемеханизмовнатрийуретическогодействияпролактинавмоделихолестазабеременных: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.03.01 /АбрамичеваПолинаАлександровна; [Место защиты: Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова]. - Москва, 2019. - 143 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.В.ЛОМОНОСОВА Биологический факультет На правах рукописиАбрамичеваПолинаАлександровнаИССЛЕДОВАНИЕМЕХАНИЗМОВНАТРИЙУРЕТИЧЕСКОГОДЕЙСТВИЯПРОЛАКТИНАВМОДЕЛИХОЛЕСТАЗАБЕРЕМЕННЫХСпециальность 03.03.01 физиология Диссертация на соискание ученой степени

стр. 5
ключевых посредников сигналинга короткой изоформы ПРЛР во внешнем мозговом слое и коре почки прихолестазебеременныхи в группах сравнения.............................................................................................................................90 3.2. Молекулярные мишенипролактина, участвующие в реализациинатрийуретическогодействияпролактинавмоделихолестазбеременныхв почке...

стр. 6
4.1. Пролактиновый сигналинг в почке вмоделихолестазабеременных.........................103 4.2. Варианты опосредованногодействияпролактинана почку вмоделихолестазабеременных..........................................................................................................................................106 4.3. Молекулярные мишенипролактина, участвующие в реализациинатрийуретическогодействия...

Оглавление диссертациикандидат наук Абрамичева Полина Александровна
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Холестаз беременных
1.1.1. Признаки патологии
1.1.2. Причины возникновения холестаза беременных
1.1.3. Компенсаторная роль почки в детоксикации организма и поддержании водно-солевого баланса в условиях патологии
1.1.4. Вклад гиперпролактинемии в развитие холестаза беременных
1.1.5. Проявление эволюционно древних функций пролактина в условиях холестаза беременных
1.1.6. Роль других гормонов и гормоноподобных веществ в патогенезе холестаза беременных
1. 2. Пролактин: строение, функции
1.2.1. Пролактиновые рецепторы, особенности передачи сигнала (на примере человека и грызунов)
1.2.1.1. Длинная изоформа ПРЛР
1.2.1.2. Средняя изоформа ПРЛР
1.2.1.3. Короткая изоформа ПРЛР
1.2.2. Участники сигналинга ПРЛР и его терминации
1.2.2.1. Трансдукторы сигнала и активаторы транскрипции STATs (Signal Transducers and Activators of Transcription)
1.2.2.2. Транскрипционный фактор семейства Forkhead 3 FOXO3 (Forkhead Transcription Factor 3)
1.2.2.3. Галактоза-1-фосфат-уридилтрансфераза GALT
1.2.2.4. Семейство супрессоров цитокинового сигналинга SOCS (Suppressors of Cytokine Signaling)
1.2.2.5. Белковый ингибитор активированного STAT - PIAS (protein inhibitor of activated STAT)
1.2.3. Тканеспецифичная экспрессия рецептора пролактина
1.2.3.1. Яичник
1.2.3.2. Молочная железа
1.2.3.3. Простата
1.2.3.4. Матка
1.2.3.5. Печень
1.2.3.6. Почка
1.2.3.7. Зубы
1.3. Строение и функции почки
1.3.1. Натрий как ключевой электролит, участвующий в поддержании водно-солевого баланса
1.3.2. Топография натриевых транспортеров в нефроне
1.3.3. Прямые регуляторы работы натриевых транспортеров
1.3.3.1. 81К
1.3.3.2. 80К1
1.3.3.3. СА II
1.3.4. Регуляция работы натриевых транспортеров. Ка+/К+ - АТФаза
1.3.5. Ключевые натриевые транспортеры почки и гормональный контроль их экспрессии, трафика и фосфорилирования
1.3.5.1. 1ЧНБ3
1.3.5.2. 1ЧСС
1.3.5.3. 1ЧКСС2
1.3.5.4. БШС
1.3.6. Роль бикарбонатов в поддержании кислотно-щелочного баланса
1.3.6.1. КБСе1
1.3.6.2. Пендрин
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Биологический материал
2.1.1. Экспериментальные группы животных
2.2. Материалы
2.2.1. Реактивы
2.3. Экспериментальные методы
2.3.1. Хирургические методы
2.3.1.1. Перевязка общего желчного протока
2.3.1.2. Трансплантация гипофиза под капсулу почки - модель гиперпролактинемии
2.3.1.3. Анализ концентрации эстрадиола в сыворотке крови при холестазе беременных и в группах сравнения
2.3.1.4. Выделение внешнего мозгового и коркового слоев почки, обоснование выбора зон почки для дальнейшего анализа
2.3.1.5. Препаровка гипофиза
2.3.2. Биохимические методы
2.3.2.1. Дифференциальное центрифугирование и выделение микросомальной фракции из внешнего мозгового слоя и коры почек
2.3.2.2. Метод Лоури
2.3.2.3. Определение активности Na+/K+ - АТФазы (метод Ратбуна и Бетлах)
2.3.2.4. Электрофорез в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (метод Леммли)
2.3.2.5. Вестерн-блоттинг
2.3.2.6. Определение концентрации натрия в моче и сыворотке крови
2.3.2.7. Определение концентрации бикарбонатов в моче и сыворотке крови
2.3.2.8. Определение концентрации эстрадиола в сыворотке. Иммуноферментный анализ
2.3.3. Молекулярно-биологические методы
2.3.3.1. Выделение РНК из тканей почки
2.3.3.2. Выделение РНК из гипофиза
2.3.3.3. Обработка РНК ДНКазой I
2.3.3.4. Очистка РНК на колонках RNeasy Plus Mini Kit
2.3.3.5. Синтез первой цепи кДНК
2.3.3.6. Полимеразная цепная реакция в «реальном» времени» с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) в присутствии интеркалирующего красителя SYBR Green I
2.3.3.7. Анализ результатов ОТ-ПЦР
2.3.4. Статистическая обработка данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Пролактиновый сигналинг в почке в модели холестаза беременных
3.1.1. Анализ экспрессии мРНК длинной и короткой изоформ ПРЛР во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.1.2. Анализ экспрессии белка STAT5, его фосфорилированной формы pSTAT5 и экспрессии мРНК STAT5A и STAT5B во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.1.3. Анализ экспрессии мРНК терминаторов пролактинового сигналинга, обладающих STAT-чувствительным элементом, во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.1.4. Анализ экспрессии мРНК ключевых посредников сигналинга короткой изоформы ПРЛР во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.2. Молекулярные мишени пролактина, участвующие в реализации натрийуретического действия пролактина в модели холестаз беременных в почке
3.2.1. Суточный клиренс натрия
3.2.2. Na+/K+ - АТФаза: анализ изменения активности, экспрессии мРНК и белка а1- и ß1-субъединиц в коре и внешнем мозговом слое почки
3.2.3. Анализ экспрессии мРНК натриевых транспортеров NHE3, NCC, ENaC и NKCC2 во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.2.4. Анализ экспрессии мРНК регуляторов работы натриевых транспортеров CAII, Nedd 4-2 и SGK1 во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.3. Молекулярные мишени пролактина в почке, связанные с бикарбонатным обменом в модели холестаза беременных
3.3.1. Суточный клиренс и реабсорбция бикарбонатов
3.3.2. Анализ экспрессии мРНК и белка NBCe1 во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.3.3. Анализ экспрессии мРНК и белка пендрина во внешнем мозговом слое и коре почки при холестазе беременных и в группах сравнения
3.4. Анализ экспрессии генов гипофиза, связанных с пролактиновым сигналингом
3.4.1. Анализ экспрессии гена пролактина, ERß, Sp1 и DRD2 в гипофизе при холестазе беременных и в группах сравнения
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1. Пролактиновый сигналинг в почке в модели холестаза беременных
4.2. Варианты опосредованного действия пролактина на почку в модели холестаза беременных
4.3. Молекулярные мишени пролактина, участвующие в реализации натрийуретического действия пролактина в модели холестаз беременных в почке
4.4. Молекулярные мишени пролактина в почке, связанные с бикарбонатным обменом в модели холестаза беременных
4.5. Анализ экспрессии генов гипофиза, связанных с пролактиновым сигналингом
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
БЛАГОДАРНОСТИ