Влияние веществ изопреноидного пути биосинтеза (стеринов и цитокининов) на устойчивость растений к патогенам рода Phytophthora и солям тяжелых металлов Андреева, Елена Александровна

Краткое описание

Андреева,ЕленаАлександровна.Влияниевеществизопреноидногопутибиосинтеза(стериновицитокининов)наустойчивостьрастенийкпатогенамродаPhytophthoraисолямтяжелыхметаллов: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.15. - Санкт-Петербург, 2004. - 139 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
61:04-3/1078 САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ На правах рукописи УДК 575.1:581.143.6:582.4:581.554АНДРЕЕВАЕленаАлександровнаВЛИЯНИЕВЕЩЕСТВИЗОПРЕНОИДНОГОПУТИБИОСИШБЗА (СТЕРИНОВИЦИТОКИНИНОВ) НАУСТОЙЧИВОСТЬРАСТЕНИЙКПАТОГЕНАМРОДАPHYTOPHTHORAИСОЛЯМТЯЖЕЛЫХМЕТАЛЛОВСпециальность:

стр. 46
агробактериального гена синтезацитокининовipt, содержаниемцитокининовпри инфицировании вирулентной расойпатогена. Кроме того, известно овлияниицитокининовнаустойчивостьрастенийк абиотическим факторам среды, например,солямтяжелыхметаллов. Оценкаустойчивостирастенийкартофеля с геном ipt к этому фактору

стр. 56
Показано, что повышенный уровеньцитокининовувеличиваетустойчивостьрастенийтабака к гусеницам вредителя AfyzMjper^icae, индуцирует накопление белков, связанных с развитием реакцииустойчивости. Однако, оценкавлиянияизмененного уровняцитокининовнаустойчивостькпатогенамродаPhytophthoraне была изучена. Получитьрастенияс повышенным уровнемцитокининовв тканях возможно при введении в геном...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Андреева, Елена Александровна
Введение
Глава 1. Характеристика растительных защитных ответов
1.1. Механизмы вертикальной устойчивости
1.1.1. Гены авирулентности
1.1.2. Гены устойчивости растений
1.1.3. Характеристика основных защитных ответов
1.2. Участие цитокинина в защитных реакциях
1.3. Биология патогенов р. РкуШрЫкога.
1.3.1. Механизмы инфицирования растений
1.3.1.1. Гены РкуЮрЫкога, принимающие участие в патогенезе
1.3.1.2. Расо-специфичные Я- и ауг-гены
1.3.1.3. Элиситоры Рку^рЫкога
1.3.2. Зависимость патогенов рода РЬу^рЫкога от стеринов
1.4. Мутанты растений по биосинтезу стеринов 38 Заключение
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Растительный материал
2.2. Агробактериальные штаммы
2.3. Изоляты Р. т/ез1ат
2.4. Изолят Р. ЪгаББкае
2.5. Метод агробактериальной трансформации растений картофеля
2.6. Подтверждение трансгенной природы полученных 49 растенийметодом полимеразной цепной реакции (ПЦР)
2.7. Анализ экспрессии бактериального гена ipt в трансгенных 50 растениях картофеля
2.8. Тестирование трансгенных растений картофеля при заражении 51 вирулентным изолятом P. infestons
2.8.1. Методика заражения изолированных листьев
2.8.2. Отбор вирулентного изолята P. infestans
2.9. Оценка реакции эксплантов растений картофеля на ионы 52 металлов
2.9.1. Подбор условий для проведения теста с ионами меди (сульфат 52 меди)
2.9.2. Подбор условий для проведения теста с ионами никеля 52 (хлорид никеля)
2.10. Получение растений арабидопсиса, устойчивых к полиеновому 53 антибиотику нистатину
2.10.1. Культивация растений арабидопсиса в асептических условиях
2.10.2. Получение каллусных тканей арабидопсиса
2.10.3. Подбор сублетальной концентрации нистатина для 53 микрокаллусов арабидопсиса
2.10.4. Регенерация растений арабидопсиса из устойчивых к 53 нистатину каллусных линий
2.11. Проверка сохранения признака «устойчивость к нистатину» у 54 полученных растений
2.11.1. Анализ устойчивости к нистатину у растений-регенерантов 54 при вегетативном размножении
2.11.2. Анализ устойчивости к нистатину у растений-регенерантов 54 при половом размножении
2.12. Оценка восприимчивости растений арабидопсиса к расе Р. 54 brassicae
2.13. Анализ влияния стеринов на рост мицелия и образование 55 конидий у P. brassicae, P. infestons
Глава 3. Результаты.
3.1. Реакция трансгенных растений картофеля с геном ipt на 56 биотический стресс - заражение вирулентным изолятом P. infestans 3.1.1 .Получение трансгенных растений с геном синтеза цитокининов 5 6 ipt методами агробактериальной трансформации
3.1.1.1. Агробактериальная трансформация междоузлий растений 56 картофеля
3.1.1.2. Подтверждение трансгенной природы полученных 58 регенерантов с применением метода ПЦР с праймерами к гену nptll
3.1.2. Изучение экспрессии гена ipt в трансгенных растениях 58 картофеля
3.1.3. Изучение реакции трансгенных ipt растений картофеля на 65 абиотический стресс - соли металлов
3.1.3.1. Подбор концентраций солей меди и никеля для проведения 65 теста
3.1.3.2. Анализ реакции эксплантов трансгенных растений картофеля 68 на среде с солями меди и никеля
3.1.4. Отбор вирулентного изолята P. infestans 1Ъ
3.1.5. Результаты заражения изолятом №5 P. infestans трансгенных 75 растений картофеля
3.2. Изучение влияния различных доз стеринов на скорость роста 77 мицелия P. infestans и P. brassicae в условиях in vitro и in vivo
3.2.1. Влияние стеринов, содержащихся в среде для культивации, на 78 эффективность развития Р. infestans и Р. brassicae
3.2.2. Получение растений арабидопсиса, устойчивых к нистатину, 81 методом клеточной селекции
3.2.2.1. Подбор условий для селекции микрокаллусов арабидопсиса 83 на устойчивость к нистатину
3.2.2.2. Получение каллусных линий, устойчивых к нистатину
3.2.2.3. Регенерация побегов и их укоренение
3.2.2.4. Анализ сохранения признака «устойчивость к нистатину» у 87 регенерированных растений при вегетативном размножении
3.2.2.5. Анализ сохранения признака «устойчивость к нистатину» у 89 потомков устойчивых растений Яо от самоопыления
3.2.3. Изучение реакции на заражение патогеном Р. Ьгазякае 92 растений, полученных методом клеточной селекции
3.2.4. Изучение реакции на заражение патогеном Р. Ьгаязгсае у 93 растений - Т-ДНК инсерционных мутантов по генам синтеза стеринов
3.2.4.1. Отбор гомозиготных по вставке Т-ДНК растений
3.2.4.2. Заражение мутантов dwfl патогеном P. brassicae
Глава 4. Обсуждение 96 Заключение 104 Выводы 107 Список сокращений 109 Приложение 111 Список литературы