Изучение структуры и метаболизма отдельных фракций неорганических полифосфатов у дрожжей Saccharomyces сerevisiae Трилисенко, Людмила Васильевна

Короткий опис

Трилисенко,ЛюдмилаВасильевна.ИзучениеструктурыиметаболизмаотдельныхфракцийнеорганическихполифосфатовудрожжейSaccharomycesсerevisiae: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Пущино, 2005. - 114 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Российская Академия Наук Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина на правах рукописиТрилисенкоЛюдмилаВасильевнаИзучениеструктурыиметаболизмаотдельныхфракцийнеорганическихполифосфатову дрожмсейSaccharomycescerevisiae (специальность - 03.00.04 ~ биохгшия) Диссертация

стр. 1
Пущино - 2005 г. ОГЛАВЛЕНИЕ Введение • • ' ст]Э, 6 ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Глава 1.Полифосфаты, иж локализация в клеткахдрожжей,метаболизми функции. 1.1. Содержание, локализация и длина цепифракцийполифосфатовв клеткахдрожжей. J. и. СодержаниеполифосфатовJ.J.2. Фрак?fillполифосфатови их

стр. 4
97 98 СЛМСОК СОК.РАТЦЕНМЙ • ПолиР -неорганическиеполифосфатыПолиР 1 - кислоторастворимаяфракцияполифосфатовПолиР2-солерастворимаяфракцияполифосфатовПолиРЗ - щелочерастворимаяфракцияполифосфатовпри рН 9-J0 ПолиР4 - шелочерастворимаяфракцияполифосфатовв 0,05 11 NaOH ПолиРЗ - лабильный

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Трилисенко, Людмила Васильевна
Введение 6 ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУ РЫ
Глава 1. Полифосфаты, их локализация в клетках дрожжей, метаболизм и функции.
1.1. Содержание, локализация и длина цепи фракций полифосфатов в клетках дрожжей.
1.1.1. Содержание полифосфатов
1.1.2. Фракции полифосфатов и их локализация в клетках дрожэ/сеу
1.1.3. Длина iienu полифосфатов у дрожжей
1.2. Динамика содержания полифосфатов в клетках в процессе роста дрожжей
1.3. Явление гиперкомпенсации полифосфатов у микроорганизмов
1.3.1. Прокариоты
1.3.2. Эукариоты.
1.4. Синтез и деградация полифосфатов в клетках дрожжей.
1.4.1. Пути синтеза
1.4.2. Ферменты деградации
1.5. Функции полифосфатов в клетках дрожжей.
Глава 2. Влияние ингибиторов на содержание полифосфатов в клетках дрожжей.
Глава 3. Влияние инактивации генов полифосфатного метаболизма на уровень полиР в клетках мутантов S. cerevisiae 38 ЧАСТЬ 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Объект исследования
2.2. Условия культивирования.
2.3. Получение биомассы клеток
2.4. Получение сферопластов из клеток дрожжей
2.5. Выделение вакуолей
2.6. Методы экстракции полифосфатов 44 2. б. 1. Метод Лангена и Лисса в модификации Кулаева и др.
2.6.2. Метод Лангена к Лисса в модификации Чернышевой и др.
2.6.3. Метод Кларк и др.
2.7. Определение различных фосфорных соединений во фракциях.
2.В. Сорбция нуклеотидов на уголь
2.9. Подготовка образца полиР для 31Р-ЯМР-спектроскопии
2.10. Рабочие параметры прибора при снятии Э1Р-Я№Р-спектров полиР.
2. "J 1. Количественные методы определения фосфора. 49 2.11.1. Метод Беренблюма и Чейиа в модификации Вейль - Малеров и
Грина.
2. Л. 2. Метод Якке и др.
2.12. Определение белка по методу Лоури в модификации Петерсона.
2.13. Определение глюкозы 51 2.14 Разделение экзополифосфатаз I и II цитозоля
2.15. Определение ферментативных активностей.
2.15.1. Определение экзополифосфатазной активности цитозоля.
2.15.2. Определение экзополифосфатазной активности вакуолей.
2.15.3. Определение АТФазной активности вакуолей.
2.15.4. Определение о.-маннозидазы.
2.14.5. Определение а-глюкозидазы. '
2.16. Очистка полиР от примесей низкомолекулярных компонентов.
2.17. Определение сухой биомассы клеток дрожжей. 53 ЧАСТЬ 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
3.1. Сравнительный анализ фракций полифосфатов, выделенных различными методами из клеток S. cerevisiae.
3.2. Зависимость содержания и длины цепи фракций полифосфатов от фазы роста дрожжей S .cerevisiae.
3.2.1. Изменение содержания фракций полифосфатов в прогрессе роста дрожжей.
3.2.2. Изменение длины цепи отдельных фракций полифосфатов в процессе роста дрожжей.
3.3. Влияние концентрации Р; в среде на накопление и степень полимерности различных фракций полифосфатов у дрожжей S. cerevisiae.
3.3.1. Подбор оптимальных условий культивирования дрожжей, обеспечивающих феномен гитркомпенсагии полифосфатов.
3.3.2. Динамика содержания полифосфатов в клетках дрожжей в условиях фосфорного голодания и гиперкомтнсагпт. 71 3.3.3. Изменение длины tie ни полифосфатов в клетках дрожжей в условиях фосфорного голодания и гиперкомпенсаиии.
3.4. Полифосфатазная активность в дрожжевых сферопластах и вакуолях в условиях фосфорного голодания и гиперкомпенсации полиР.
3.5. Влияние ингибиторов на накопление полифосфатов у S .cerevisiae в условиях интенсивного их синтеза.
3.6. Влияние инактивации генов РРХ1 и PPN1 на уровень полифосфатов у
S. cerevisiae.