ПОИСК СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ ГИПОКСИИ ЗАМКНУТОГО ПРОСТРАНСТВА : ПОШУК ЗАСОБІВ ПРОФІЛАКТИКИ ГІПОКСІЇ ЗАМКНУТОГО ПРОСТОРУ

brief description

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ
ЛУГАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

УДК 615.2:616-001.83+616-08-039.71

НЕМЯТЫХ Оксана Дмитриевна

ПОИСК СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ ГИПОКСИИ ЗАМКНУТОГО ПРОСТРАНСТВА

14.03.05 фармакология

Диссертация на соискание ученой степени кандидата
фармацевтических наук

Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор, Заслуженный деятель науки и техники Украины Лукьянчук В.Д.

Луганск 2003

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ4
Глава 1. Современные аспекты патогенеза гипоксического синдрома и фармакологии соединений германия (обзор литературы)...12
1.1.Современные вопросы патогенеза гипоксических состояний......12
1.2.Фармакологические эффекты германийорганических соединений...24
Глава 2. Материалы и методы исследования33
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 3. Скрининг потенциальных средств фармакокоррекции гипоксии замкнутого пространства...44
3.1.Скрининг потенциальных антигипоксантов на различных моделях гипоксического синдрома....44
3.2.Сравнительная оценка антиоксидантной активности потенциальных антигипоксантов...59
Глава 4. Разработка дозового режима применения наиболее эффективного препарата германий-содержащего комплексного соединения при изучаемом экстремальном состоянии..66
Глава 5. Влияние координационного соединения германия с никотиновой кислотой на состояние прооксидантно-антиоксидантного равновесия у крыс с моделируемой формой гипоксии79
5.1.Биохемилюминисцентный анализ протекторного действия комплексного германийорганического соединения в условиях гипоксии замкнутого пространства...79
5.1.1. Влияние МИГУ-1 на биохемилюминисценцию в модельных опытах...80
5.1.2. Влияние МИГУ-1 на биохемилюминисценцию в тканях организма крыс с гипоксией замкнутого пространства...86
5.2.Влияние координационного соединения германия с никотиновой кислотой на интенсивность процессов перекисного окисления липидов у крыс с гипоксией замкнутого пространства ...91
5.3.Влияние МИГУ-1 на состояние основных компонентов антиоксидантной системы защиты организма животных с гипоксической гипоксией на фоне гиперкапнии .96
Глава 6. Влияние координационного соединения германия с никотиновой кислотой на активность ферментов у крыс с гипоксией замкнутого пространства109
6.1. Состояние энергетического гомеостаза у крыс с гипоксией замкнутого пространства на фоне введения координационного соединения германия с никотиновой кислотой..109
6.2. Выяснение роли NO-синтазы в механизме противогипоксического действия МИГУ-1123
Глава 7. Электронно - парамагнитный анализ противогипоксического действия изучаемого комплексного соединения германия......................128
Глава 8. Фармакокинетические исследования координационного соединения германия с никотиновой кислотой у интактных крыс и в условиях гипоксии замкнутого пространства.141
8.1.Фармакокинетика на этапах абсорбции и распределения141
8.2. Обратимое взаимодействие с транспортными белками..145
8.3. Фармакокинетика на этапе выведения.152
АНАЛИЗ И ОБОБЩЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ ДАННЫХ...157
ВЫВОДЫ...173
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ177

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Проблема изыскания высокоэффективных и безопасных антигипоксантов среди природных и синтетических соединений обусловлена ключевой ролью гипоксического синдрома в возникновении и развитии патологических состояний различного генеза. Широкая распространенность кислороддефицитных состояний, включая экстремальные, диктует острую необходимость разработки новых путей их фармакологической коррекции.
Решение этой проблемы особенно актуально для крупного промышленного региона Донбасса, где достаточно часто имеют место производственные аварии и катастрофы на угледобывающих предприятиях. Так, частота травматизма со смертельным исходом на шахтах в 7 раз выше, чем в других отраслях промышленности [155]. По данным специалистов [162] на каждые 1 млн тонн угля, поднятые на-гора за последние 5 лет, приходится 3,6-4,7 человеческих жизней. За 2000 г летальность шахтеров составила 1,57%, что соответствует 306,27 несчастным случаям. Только за 7 месяцев 2002 г в глубоких угольных шахтах травмировано 6850 человек и погибло 158 горнорабочих. Комплексный анализ травматизма свидетельствует, что в основе генеза шахтных травм лежит гипоксический фактор. Зачастую течение неотложных состояний при завалах в угольных выработках усугубляется психологическим аспектом замкнутого пространства [59,128].
Кроме того, в последнее время значительно участились случаи стихийных бедствий, военных катастроф и террористических актов, при которых пострадавшие нередко оказываются в условиях гипоксической гипоксии в сочетании с гиперкапнией. В частности, достаточно вспомнить гибель 118 моряков подлодки Курск” (август 2000 г), а также сотен людей, оказавшихся под обломками разрушенных зданий в Нью-Йорке (США, сентябрь 2001г).
К сожалению, до настоящего времени оказание первой медицинской помощи как на догоспитальном этапе, так и дальнейшее лечение пострадавших от острого недостатка кислорода и избыточных количеств углекислоты сводятся лишь к применению симптоматических средств терапии, которые далеко не всегда обеспечивают необходимую терапевтическую эффективность, что, по понятным причинам, существенно отражается на результатах лечения и, в конечном итоге, на уровне летальности пострадавших. Исходя из этого, приоритетным направлением развития экологической фармакологии, в том числе и фармакологии экстремальных состояний, как в Украине, так и во всем мире является поиск эффективных и безопасных антигипоксантов.
На сегодняшний день является доказанным тот факт, что эффективным лечение пострадавших может быть только в том случае, если тактика фармакотерапии основывается на знании патогенетических аспектов любого экстремального состояния и позволяет вмешиваться в патогенетические механизмы формирования любой патологии. В плане изучения лимитирующих звеньев патогенеза экстремальных кислороддефицитных состояний, возникающих у горнорабочих глубоких угольных шахт, установлено, что центральное место занимают нарушения энергетического гомеостаза [98,133], антиоксидантно-прооксидантного равновесия, синтеза продуктов каскада арахидоновой кислоты, углеводного обмена и внутриклеточной передачи сигнала [16,22,146].
Многовекторность структурно-функционально-метаболических повреждений при острой гипоксической гипоксии предопределяет поиск высокоэффективных антигипоксантов с многогранной фармакодинамикой, способных одновременно коррегировать различные звенья патогенеза этого неотложного состояния. На сегодняшний день экспериментально доказана эффективность и изучены молекулярно-биохимические механизмы антигипоксического действия биофлавоноидов, ацелизина, производных ксантина, блокаторов кальциевых каналов, бемитила и некоторых других препаратов на различных моделях гипоксического синдрома [16,48,88,146].
В последнее время внимание ученых привлекает биологическая активность органических соединений германия. Так, многочисленными исследованиями [12,24,43,129] обнаружены разнонаправленные эффекты, в т. ч. анксиолитические, ноотропные свойства, антиоксидатная активность различных органопроизводных этого металла. Изучена фармакокинетика и отмечена низкая токсичность физиологически активных веществ, созданных на основе комплексных соединений германия с биолигандами [32,41,187]. Таким образом, разнообразие фармакологических эффектов, а также безвредность германийорганических веществ и созданных на их основе лекарственных препаратов позволяют рассматривать биогерманийорганические соединения в качестве перспективных потенциальных антигипоксантов, что и послужило теоретическим обоснованием к изучению их возможного протекторного действия при гипоксии замкнутого пространства.
Связь работы с научными программами, планами, темами. Работа выполнена в рамках плана научных исследований кафедры фармакологии Луганского государственного медицинского университета «Экспериментальная разработка средств фармакокоррекции экстремальных состояний» (№ гос. регистрации 0198U4009100, 1999-2003 гг), а также по просьбе руководства угольных предприятий Донбасса (ГОАО «Шахты Крепенская» Государственной холдинговой компании «Антрацит» (письмо № 02-87 от 12.01.2002 г), ГОАО «Шахты им. В.В. Вахрушева» Государственной холдинговой компании «Ровеньки-Антрацит» (письмо № 02-105 от 03.02.2002).
Цель и задачи исследования. Цель работы обосновать патогенетическую целесообразность применения координационного соединения германия с никотиновой кислотой и выяснить возможные механизмы его протекторной активности при гипоксии замкнутого пространства.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
1. Провести скрининг потенциальных антигипоксантов среди лекарственных препаратов разных фармакологических групп и оригинальных химических соединений на двух моделях гипоксического синдрома, а также исследовать их антиоксидантную активность в опытах in vitro.
2. Разработать оптимальный режим дозирования изучаемого координационного соединения германия с никотиновой кислотой (МИГУ-1), как наиболее эффективного антигипоксанта в условиях острой гипоксической гипоксии в сочетании с гиперкапнией.
3. Исследовать влияние МИГУ-1 на состояние окислительно-антиоксидантного гомеостаза, с использованием биохемилюминисцентного анализа на модели гипоксии замкнутого пространства.
4. В динамике изучить активность ферментов энергетического обмена в условиях изучаемой формы гипоксии на фоне введения МИГУ-1, а также выяснить вклад NO-синтазы в реализацию его противогипоксического действия.
5. Оценить влияние МИГУ-1 на состояние отдельных компонентов митохондриальной и микросомальной электронтранспортных цепей гепатоцитов крыс с гипоксией замкнутого пространства.
6. Изучить фармакокинетику координационного соединения германия с никотиновой кислотой у интактных животных и на модели острой гипоксической гипоксии с гиперкапнией.
Объект исследования лекарственная профилактика гипоксического синдрома, развивающегося в условиях острой гипоксической гипоксии с гиперкапнией.
Предмет исследования - исследование протекторной активности координационного соединения германия с никотиновой кислотой при гипоксии замкнутого пространства.
Методы исследования - использовался комплексный методический подход с привлечением набора биохимических, биофизических, математических методов исследования с привлечением методов экспериментальной фармакотерапии, в т.ч. и фармакокинетики.
Научная новизна полученных результатов. В работе впервые дано теоретическое обоснование и экспериментальное подтверждение целесообразности использования одного из представителей принципиально нового класса химических веществ координационного соединения германия с биолигандом (никотиновой кислотой) в качестве высокоэффективного и безопасного средства защиты организма в условиях гипоксии замкнутого пространства, а также разработан режим дозирования изучаемого антигипоксанта при моделируемой форме гипоксического синдрома.
Впервые исследованы тонкие механизмы протекторного действия МИГУ-1 на фоне гипоксии замкнутого пространства в части его влияния на окислительно-антиоксидантное равновесие и энергетический гомеостаз, а также изучены и проанализированы в сравнительном аспекте параметры фармакокинетики МИГУ-1 у интактных животных и у крыс с гипоксией замкнутого пространства на этапах абсорбции, биотранспорта, распределения и элиминации.
Получены новые данные о способности координационного соединения германия с никотиновой кислотой проявлять протекторный эффект в отношении ЭПР - активных компонентов митохондриальной и микросомальной электронтранспортных цепей гепатоцитов в условиях острого кислороддефицитного состояния на фоне гиперкапнии.
Впервые показана роль оксида азота в реализации механизма противогипоксического действия МИГУ-1.
Практическое значение полученных результатов. Экспериментально обоснованный подход к лекарственной профилактике гипоксии замкнутого пространства с помощью координационного соединения германия с никотиновой кислотой наметил один из перспективных путей целенаправленного синтеза оригинальных высокоэффективных элементоорганических биологически активных веществ, обладающих противогипоксической активностью с антиоксидантными свойствами, что используется в работе химиками-синтетиками Одесского национального университета им. И.И. Мечникова.
Результаты экспериментальных исследований легли в основу разработки и издания методических рекомендаций по доклиническому изучению антигипоксантов «Пошук та експериментальне вивчення потенційних протигіпоксичних засобів» (2002), утвержденных Государственным Фармакологическим центром МЗ Украины.
Материалы исследований внедрены в учебный процесс на кафедрах фармакологии Национального фармацевтического университета Украины, Одесского, Винницкого, Запорожского государственных медицинских университетов, а также Украинской медицинской стоматологической академии.
Результаты отдельных фрагментов исследований внедрены в работу научно-исследовательских организаций: Института фармакологии и токсикологии АМН Украины, Государственного научного центра лекарственных средств МЗ и НАН Украины, Института биоорганической химии и нефтехимии НАН Украины.
Полученные в работе данные могут служить экспериментальным обоснованием для исследований в части оптимизации фармакопрофилактики и терапии гипоксического синдрома.
Личный вклад диссертанта. Автором самостоятельно сформулированы цель и задачи, определены направление, объем и методические подходы к исследованию, проведен патентно-информационный поиск с использванием серверов Yandex, Alta Vista, Rambler, а также медицинской базы данных Medline сети Интернет.
Все этапы экспериментального исследования, включая анализ и обобщение данных, статистическую обработку полученных результатов, разработку основных положений работы, ее выводов, а также написание обзора литературы автором проведены лично.
Соавторы опубликованных работ предоставляли консультативную помощь по методическим и теоретическим вопросам.
Апробация материалов диссертации. Основные положения диссертационной работы докладывались и получили положительную оценку на III Международной конференции студентов и молодых ученых «Медицина - здоров’я XXI сторіччя» (Днепропетровск, 2002); Международной научно-практической конференции Політравма - сучасна концепція надання невідкладної медичної допомоги” (Киев, 2002); IX Конгрессе Всемирной Федерации Украинских врачебных обществ (Луганск, 2002); Международной научно-практической конференции молодых ученых Вчені майбутнього” (Одесса, 2002); 57-й Научно-практической конференции студентов и молодых ученых Национального медицинского университета им. О.О. Богомольца Актуальні проблеми сучасної медицини” (Київ, 2002); 139-й Британской фармацевтической конференции (Лондон, 2002); совместных заседаниях кафедры фармакологии Луганского государственного медицинского университета и Луганского отделения Украинского научного общества фармакологов (Луганск, 2002); І научно-практической конференции студентов и молодых ученых Актуальні питання сучасної неврології” (Луганск, 2003); ІІ Международной научно-практической конференции Динаміка наукових досліджень 2003” (Днепропетровск-Луганск-Черновцы, 2003); VІІ Съезде Всеукраинских врачебных обществ (Тернополь, 2003); Международной научно-практической конференции Україна наукова 2003” (Днепропетровск-Симферополь, 2003); І Межрегиональной конференции молодых ученых Актуальні питання біології та медицини” (Луганськ, 2003).
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 23 научные работы, в т.ч. 10 статей в специализированных периодических изданиях, 1 методические рекомендации, утвержденные Государственным Фармакологическим центром МЗ Украины, 11 тезисов докладов на научных форумах, а также 1 декларационный патент на изобретение.
Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из вступления, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследований», 6 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы, который включает 189 отечественных и 245 зарубежных источников. Работа изложена на 176 страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 рисунками и 24 таблицами.

bibliography

ВЫВОДЫ
В диссертационной работе приведено новое решение актуальной научной проблемы, определяемой экспериментальным обоснованием целесообразности и эффективности профилактического применения представителя нового класса химических веществ координационного соединения германия с никотиновой кислотой для предупреждения нарушений, возникающих в условиях острой гипоксической гипоксии с гиперкапнией. Протекторная активность оригинального германийорганического субституента реализуется его способностью коррегировать лимитирующие звенья патогенеза моделируемого экстремального кислороддефицитного состояния посредством установленных в работе особенностей фармакодинамики и фармакокинетики.
1. Комплексными скрининговыми исследованиями на экспериментальных моделях гипоксии замкнутого пространства и острой гипоксической гипоксии, развивающейся на фоне гипертермии, установлено, что из 24 изученных соединений, в том числе 8 оригинальных, наиболее высокой протекторной активностью обладает координационный комплекс германия с никотиновой кислотой (МИГУ-1), что проявляется максимальным увеличением значений коэффициента противогипоксической защиты и относительного показателя увеличения времени жизни (Кз=1,5, П=50%), а также весьма высокой выживаемостью крыс на фоне благоприятного течения клинической картины течения гипоксического синдрома. В опытах in vitro показано, что МИГУ-1 обладает антиоксидантными свойствами на уровне препарата сравнения α-токоферола ацетата.
2. Разработан оптимальный режим дозирования координационного соединения германия с никотиновой кислотой, применяемого при гипоксии замкнутого пространства, согласно которого наиболее высокую протекторную активность МИГУ-1 проявляет при его интраперитонеальном введении в дозе 117,4 мг/кг за 77 минут до начала воздействия повреждающих факторов.
3. Биохемилюминисцентный анализ противогипоксической активности координационного соединения германия с никотиновой кислотой в опытах in vivo указывает на способность субституента существенно коррегировать кинетику сверхслабого свечения, путем резкого (на 20%) снижения значений амплитуд быстрой вспышки в сыворотке крови и коре головного мозга, а также медленной вспышки БХЛ (на 13 %) в сыворотке крови крыс с гипоксией замкнутого пространства и уменьшения площади под кривой биохемилюминисценции, что свидетельствует о высокой антирадикальной активности соединения в исследуемых биосубстратах. Антирадикальные свойства исследуемого антигипоксанта подтверждены в опытах in vitro на 2 моделях инициации БХЛ: Н2О2 и Fe2+.
4. Координационное германий-содержащее соединение с никотиновой кислотой, применяемое на фоне острой гипоксической гипоксии с гиперкапнией оказывает выраженное мембранопротекторное действие, в основе которого лежат антиоксидантные свойства, реализуемые в динамике за счет снижения в сыворотке крови и головном мозге животных образования первичных (диеновые конъюгаты) и конечных (ТБК-реактанты) продуктов липидпереокисления, а также предупреждения снижения активности и содержания основных компонентов антиоксидантной системы защиты организма (супероксиддисмутазы, каталазы, SH-групп биосубстратов, в том числе глутатиона восстановленного).
5. Особенностью фармакодинамики комплексного германийорганического соединения, используемого с профилактической целью в условиях гипоксии замкнутого пространства, является его способность коррегировать в различные сроки после начала реоксигенации дисбаланс в энергетическом гомеостазе за счет повышения содержания АТФ в клетках крови, а также предупреждения модификации активности ферментов энергетического обмена (лактатдегидрогеназы, кретинкиназы, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы) с одновременной активацией глютаматдегидрогеназы, обеспечивающей быстрый и экономный путь ресинтеза макроэргов
6. Протекторная активность исследуемого органического соединения германия на фоне моделируемой формы гипоксии в определенной степени коррелирует с уровнем эндогенного оксида азота, о чем свидетельствуют снижение (на 3,25%) величины коэффициента противогипоксической защиты МИГУ-1, а также усугубление клинических проявлений гипоксического синдрома у животных в условиях ингибирования активности индуцибельной и конститутивной изоформ NO-синтазы.
7. Одной из сторон механизма протекторного действия координационного соединения германия с никотиновой кислотой у животных на фоне гипоксической гипоксии в сочетании с гиперкапнией является его способность предупреждать снижение уровня железосерных белков (в 2 раза), свободных радикалов (на 17%), а также ингибировать накопление нитрозильных комплексов железа (более, чем в 2 раза). Наряду с этим, МИГУ-1 предохраняет от деградации компоненты микросомальной цепи переноса электронов.
8. Фармакокинетические параметры МИГУ-1 у крыс в условиях воздействия моделируемой формы гипоксии существенно изменяются в сравнении с интактными животными. При гипоксическом синдроме резко увеличиваются значения таких кинетических параметров МИГУ-1, как время достижения максимальной концентрации в крови (в 2 раза), кажущаяся начальная концентрация в крови (на 35%), константы скоростей экскреции и элиминации (более, чем в 2,2 раза), время достижения максимальной концентрации в моче (в 1,5 раза), а также общий клиренс (на 49%), при уменьшении величин объема распределения (в 1,5 раза), площади под фармакокинетической кривой (в 2,22 раза), периодов полуэкскреции и полуэлиминации (более, чем в 2 раза).
9. Германийорганическое соединение с никотиновой кислотой с высокой степенью аффинитета связывается с сывороточным альбумином (Касс=5,31 моль-1), и несколько меньше с белками цельной сыворотки крови (Касс=4,69 моль-1) и мембранами эритроцитов (Касс=4,58 моль-1) интактных животных. При этом МИГУ-1 фиксируется на биосубстратах одним активным центром (N=1). На фоне развивающейся гипоксии замкнутого пространства происходит существенная модификация связывающей способности сывороточных протеинов в отношении исследуемого антигипоксанта, что особенно резко выражено в первые 3 и 6 часов с момента реоксигенации, когда значения Касс снижаются в 3,6 и 1,7 раза, соответственно, в сравнении с белками сыворотки крови интактных животных.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1. Авцын А.П., Жаворонков А.А. Микроэлементозы человека. - М.: Медицина, 1991.-213 с.
2. Ажипа Я.И. Медико-биологические аспекты применения метода электронного парамагнитного резонанса. М.: Наука, 1983. 528с.
3. Акбаров А.Б., Харитонов Ю.Я., Исламов М.Н. Бионеорганические аспекты особенностей взаимосвязи типа состав-строение-специфическая активность биокомплексов // Журн. неорган. химии. -1993. - Т.38, N 2. - С. 312-327
4. Анаэробное образоваие сукцината и ресинтез АТФ в митохондриях тканей крысы / Е.И. Маевский, Е.В. Гришина, М.С. Окон, В.П. Кутышенко // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний / Под ред. проф Л.Д. Лукьяновой. М.,1989. С. 80-81
5. Андронов Д.Ю., Годован В.В. Использование лазерной корреляционной спектроскопии при экспериментальной патологии печени // Труды IV науч.-практ.конф. «Современные достижения валеологии и спортивной медицины».- К., 1997.-С.6
6. Антиоксидантна система захисту організму (огляд) / І.Ф. Бєлєнічев, Є.Л. Левицький, Ю.І. Губський, С.І. Коваленко, О.М. Марченко // Современные проблемы токсикологи. 2002. - №3. С.24-31.
7. Антоненко П. Б. Вплив нових похідних германію на збудливість головного мозку: Тези доп. 66-ої підсумкової наукової конференції молодих вчених Одес. мед. ун-ту. - Одеса, 1997. -С.54.
8. Антоненко П. Б., Годован В.В. Вплив сполук германію на агресивну поведінку тварин // Тези доповідей 3-го Між нар. мед. конгр. молодих вчених. - Тернопіль, 1999. - С. 267.
9. Антоненко П. Б., Кресюн В.Й. Вплив нових сполук германію на поведінку щурів за умов тестів форсованого плавання і «відкритого поля» // Одес. мед. журнал. -1998. - № 6 (50). - С. 8-11.
10. Антоненко П. Б., Кресюн В.Й., Шандра О.А. Вплив сполук германію з бюлігандами на експериментальні форми судомного синдрому // Ліки. -1997. - № 4. - С. 47-50.
11. Антоненко П.Б. Нейротропна дія нових БАВ - координаційних сполук германію з біолігандами // Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Одеса, 2001.-19с.
12. Антоненко П.Б. Протисудомні ефекти нового похідного германію (МІГУ-3) за умов хімічного кідлінгу в експериментальних тварин // Одеський мед. журн. 1998. №1(45). С.3-4.
13. Аряев В.Л., Кресюн В.И., Ворикличко А.Е. К фармакологической характеристике нового комплексного соединения германия с никотиновой кислотой (МИГУ-1) // Материалы науч.-практ. конф. "Здоровый образ жизни". - Одесса, 1991.- С. 9.
14. Барабой В.А., Сутковой Д.А. Окислительно-антиоксидантный гомеостаз в норме и патологии. В 2 частях.- К.:Чернобыльинтеринформ, 1997.- 406с.
15. Безверхая И.О. Фармакокинетика при старении- К.: Здоров'я, 1996. -168с.
16. Бєлоусова І.П. Патогенетичне обґрунтування фармакокорекції гіпоксичного синдрому похідними ксантину: Автореф. дис. ...канд. мед. наук. Одеса 2000. 20 с.
17. Бєлоусова І.П. Фармакотерапевтична ефективність пентоксифіліну при гіпоксичному синдромі // Матеріали республіканської науково-практичної конференції з міжнародною участю Ефективні методи лікування захворювань серця, судин і інших органів”. Вінниця, 1999.- С. 9-10
18. Бибик В.В., Болгов Д.М. Тиотриазолин: фармакология и фармакотерапия // Український медичний альманах. 2000. Т.3., №4. С.226-229.
19. Бибик Е.Ю. Влияние ацелизина в комбинации с тиотриазолином на интенсивность липидпереокисления в различных структурах ишемизированного мозга // Матеріали V Конгресу студентів та молодих вчених.-Тернопіль, 2001.-С.195
20. Бибик Е.Ю., Лысенко Е.А., Савченкова Е.А. Сравнительная оценка состояния процессов липидпереокисления в различных структурах мозга при острой церебральной ишемии на фоне комбинированного применения ацелизина и тиотриазолина // Буковинський медичний вісник. 2001. - №4. С.143-147
21. Бибик Е.Ю., Мищенко Е.М. Антиоксидантная активность с антирадикальными свойствами нового цереброактивного препарата тиотриазолина в комбинации с ацелизином / Тези доповідей II Національного з’їзду фармакологів України Фармакологія 2001-крок у майбутнє”.- Дніпропетровськ, 2001.-С.22
22. Бибик О.Ю. Експериментальне обгрунтування комбінованого застосування ацелізину та тіотриазоліну в умовах гострої ішемії головного мозку: Автореф. дис.... канд. мед. наук.- К, 2002.-20с.
23. Бибик О.Ю. Пошук засобів медикаментозної профілактики rocтpoї ішемії головного мозку // Ліки. - 1999. - №2. - С.83-85.
24. Биологическая активность соединений германия / Э.Я. Лукевиц, Т.К. Гар, Л.М. Игнатович, В.Ф.Миронов Рига: Зинатне, 1990. 191с.
25. Болгов Д.М. Режим дозирования тиотриазолина при синдроме длительного раздавливания // Материалы научно-практической конференции «Лекарства-человеку» Харьков, 2001. Т.ХІ, №1-2. С.12-13
26. Болгов Д.М. Стан перекисного окислення ліпідів та антиоксидантної системи в структурах мозку щурів при синдромі тривалого роздавлювання // Український журнал екстремальної медицини імені Г.О. Можаєва. 2001. - Т.2, №4. С.41-44.
27. Болгов Д.М., Савченкова Л.В. Порівняльна хемілюмінометрія структур мозку у щурів з компресійною травмою при застосуванні тіотриазоліну // Ліки. 2001. - № 5-6. С. 18-23.
28. Бронштейн И.Н., Семендяев К.А. Справочник по математике. М.: Наука, 1967. 608с
29. Ванин А.Ф., Киладзе С.В., Кубрина Л.Н. О факторах, влияющих на образование динитрозильных комплексов негемового железа в органах животных in vivo // Биофизика. 1977. Т.22, №5. С. 850-854.
30. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика.- М.: Медицина, 1999.-715с.
31. Вербенко Е.В., Ежова М.Н., Варфоломеев В.Н. Исследование парамагнитных центров крови и ткани при некоторых дерматозах // Вестник дерматологии и венерологии. 1986. - №2. С.4-7
32. Відавська Г.Г. Фармакокінетика нових біологічно активних речовин на основі оксіетилідендифосфонату: Автореф. дис. ...канд. мед. наук. Одеса 2003. 19 с.
33. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252с.
34. Влияние координационных соединений германия на синтез и активность ферментов / И.И. Сейфуллина, Е.Э. Марцинко, О.А. Батракова, Н.В. Борзова, Е.В. Иванко, Л.Д. Варбанец // Мікробіологічний журнал. 2002, Т.64. - №4. С. 3-9
35. Влияние линолеата гидроксамовой кислоты на развитие гипоксического состояния организма при остром воздействии / Е.В.Розова, В.И.Пертниченко, Т.Б.Кукота, А.И.Назаренко, М.М.Середенко // Журн. АМН України. 2001. Т.7, №2. С. 377-386.
36. Влияние острой гипоксии на образование окиси азота у доношенных новорожденных / А.А.Андреева, Т.И.Опарина, И.И.Евсюкова, А.В.Арутюнян // Педиатрия. 1999. - №5. С. 9-11.
37. Вовлечение глутаматных рецепторов (NMDA-типа) в реакции нейронов мозга на аноксию различной длительности / М.О.Самойлов, А.А.Мокрушин, Д.Г.Семенов, Е.И. Тюлькова // Вестник РАМН. 2000. - №9. С.34-35.
38. Вплив антигіпоксантів на зміни вмісту окремих компонентів мікросомального та мітохондріального електронтранспортного ланцюгів у клітинах печінки при гіпоксії на фоні перегріву / Л.В.Савченкова, І.О.Семенова, О.В.Січанова, В.Д. Лук’янчук // Журн. АМН Украины. 1996. - №4. С.732-737
39. Годован В.В. Мембранотропные эффекты новых производных никотиновой кислоты // Ліки. 1996. - №4. С.134-137
40. Годован В.В. Нові сполукі нікотинової кислота в лікуванні токсичних гепатитів // Праці І Національн. з'їзду фармакол. України "Сучасні проблеми фармакології". -Київ, 1995. - С. 39.
41. Годован В.В. Фармакология гепатозащитного действия новых координационных соединений германия с биолигандами: Автореф. дис. канд. мед. наук. Одеса, 1998. 16 с.
42. Годован В.В. Эффективность новых соединений германия с биолигандами при экспериментальной патологии печени // Труды науч.-практ. конф. «Фундаментальные и клинические аспекты современной реабилитации». Полтава, 1995. С.201
43. Годован В.В., Сейфулліна І.Й. Координаційні сполуки германію як нові гепатопротекторні засоби // Одеський медичний журнал. 1997. - №1. С.10-12
44. Голиков А.П., Рябинин П.П., Голиков П.П. Эффективность эмоксипина и неотона при нестабильной стенокардии // Терапевтический архив 1996. - №1. - С.31-33.
45. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов.-М.: Медицина, 1978. 286 с.
46. Гусев Е.И, Бурд Г.С., Гехт А.Б. Метаболическая терапия ишемического инсульта: применение ноотропила // Журн. невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова -1997. - Т. 97, №10. - С.24-28.
47. Действие никотинамида на систему адениловых нуклеотидов, а также на процессы митохондриального окисления и фосфорилирования в печени мышей линии db/db / И.Г.Обросова, С.Н. Кирпуть, Ю.С.Островский, Ф.С.Ларин, А.С.Ефимов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1988. Т.106, №12. С.681-683.
48. Дзубан К.М. Експериментальне обгрунтування профілактичного застосування блокаторів кальцієвих каналів в умовах гіпоксії на фоні перегріву: Автореф. дис.... канд. мед. наук.- К, 1996.-20с.
49. Дзубан Е.М., Савченкова Л.В. Разработка дозового режима применения блокаторов кальциевых каналов при гипоксическом синдроме // Матер. ІІ Наук.симп. «Актуальні проблеми екологічної та клінічної імунології». - Київ-Луганськ, 1994.- С. 18
50. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты: в 3-х томах: Пер. с англ. / Под ред. В.Н. Антонова и А.Е. Браунштейна. М.: Мир, 1982. 22с.
51. 2,4-діоксотіазолідин-5-ацетатна кислота та її аміди - перспективні синтони для створення комбінаторних бібліотек біологічно активних сполук / Р.Б.Лесик, Б.С. Зіменковський, С.М. Голота, М.М. Леб’як // Фармацевтичний журнал. 2001. - №5. С. 57-62.
52. Доклинические исследования лекарственных средств: Методические рекомендации / Под ред. член-кор. АМН Украины А.В. Стефанова. К., 2002. 567с
53. Доклиническое изучение фармакокинетики лекарственных средств / Под ред. проф. В.С. Даниленко // Доклинические исследования лекарственных средств: Методические рекомендации. К.: ГФЦ МЗ Украины, 2002. С.548-559
54. Доклінічне вивчення геріатричних препаратів: Методичні рекомендації. К.: ДФЦ МОЗ України, 2000. 20с
55. Ерецкая Е.В., Вовенко С.И., Корчевая Л.М. Влияние аппликационно-сорбционной терапии на динамику активности молекулярных переносчиков электронов энергетической и детоксицирующей систем клетки при экспериментальной ожоговой болезни // Вопросы медицинской химии. 1995. Т.41, №2. С.15-19.
56. Ефективність тіотриазоліну за умов експериментальних шокових станів / Г.І.Степанюк, А.Б.Осовська, С.А. Лисенко та ін. // Актуальні проблеми клінічної фармакології: Тези доповідей Української наукової конференції з міжнародною участю. - Вінниця, 1998.- С.168
57. Ещенко Н.Д., Путилина Ф.Е. Процессы липогенеза в головном мозге при гипоксии // Вестник РАМН. 2000. - №9. С.12-16.
58. Журавлева И.А., Мелентьев И.А., Виноградов Н.А. Роль окиси азота в кардиологии и гастроэнтерологии // Клиническая медицина. 1997. - №4. С.18-21
59. Заболотный В.Н. Доктрина оказания неотложной помощи пострадавшим при авариях и катастрофах на угольных шахтах: Автореф. дис. ... д-ра мед. наук Киев, 1994. - 36 с
60. Заморський І.І., Пішак В.П., Ходоровський Г.І. Вплив мелатоніну на рівень кортикостерону і пролактину в плазмі щурів за різної довжини фотоперіоду та гострої гіпоксії // Ендокринологія. 2000. Т.5, №1. С.22-26.
61. Захарова Н.Б., Рубин В.И. Тонкослойная хроматография нуклеотидов эритроцитов на пластинках силуфол // Лабораторное дело. 1980. - №12. С.735-738
62. Изменения адаптации и их корекция у детей грудного возраста с постгипоксическими изменениями ЦНС / Т.Д. Измайлова, С.В. Петричук, В.А. Агейкин, Е.Ю. Кузнецова // Педиатрия. 2002. - №1. С.27-30.
63. Интерпритация сложных спектров ЭПР / Г.М. Жидомиров, Я.С.Лебедев, С.Н. Добряков, Н.Я. Штейншейдер М.: Наука. 1975. 213с.
64. Исследование системы эритрона при гипоксиях различной этиологии / Л.В. Токарева, Н.А. Сибирная, Н.Н. Великий, Я.Н. Романишин // Лабораторная диагностика. 2000. - №4. С.36-38.
65. Карп В.К., Храпак В.П. Антигіпоксичні властивості унітіолу // Современные проблемы токсикологи. 2002. - №2. С.76-78.
66. Клинико патогентическое обоснование применения солкосерила у новорожденных с перинатальной гипоксией / Ф.С.Шамсиев, Х.Т Мухамедова., И.А.Сердешнова, Г.С. Хасанова // Российский педиатрический журнал. 2001. - №4. С.53-56
67. Кондрашова М.Н. Трансаминазный цикл окисления субстратов в клетке как механизм адаптации к гипоксии // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний / Под ред. проф. Л.Д. Лукьяновой М.,1989. С. 51-56
68. Королюк В.А., Иванова Л.И., Майорова И.Г. Метод определения активности каталазы //Лаб. дело. 1988. - №1.-С. 16-19
69. Костюк В.А., Потапович И.И., Ковалева Ж.В. Простой и чувствительный метод определения активности СОД, основанный на реакции окисления кверцетина //Вопр. мед. химии. 1990. - №2. С. 88-90
70. Кравец Д. С. Оптимизация методических приемов расчета параметров хемобиокинетики с помощью прикладных программ для ЭВМ // Укра їнський медичний альманах.- 2000.- Т1., №2.- С. 90-91.
71. Кравец Д.С. Разработка дозового режима комбинированного применения силибора с ацетатом α-токоферола при интоксикации динитроортокрезолом // Український медичний альманах. 1999. Т.2, №4. С.73-75
72. Кравец Д.С. Расчет фармакокинетических параметров ксенобиотиков с помощью ПЭВМ. // Матеріали V національного з’їзду фармацевтів України «Досягнення сучасної фармації та перспективи її розвитку у новому тисячолітті». - Харків. - 1999.- С. 679-680.
73. Кравець Д. С. Токсикокінетика динитроортокрезолу в умовах профілактичного застосування силібору з ацетатом α-токоферолу. Автореф. дис. ... канд. мед. наук - Киів, 2001. - 20 с.
74. Кресюн В.В., Годован В.В., Сейфуллина И.И. К фармакологии новых соединений германия с биолигандами // Праці наук. конф. Школа академіка О.І. Черкеса: ідеї, розвиток, перспективи”. Київ, 1994. С.56
75. Кресюн В.И., Годован В.В., Кресюн Н.В. Гепатопротекторные свойства нового класса координационных соединений германия // Наук. вісн. Ужгород, ун-ту 1999. - № 10. - С. 99-100.
76. Кресюн В.Й., А.Г. Відавська, Шемонаєва К.Ф. Єкстракційно-фотометричне визначення мікрокількостей германію у тканинах експериментальних тварин. // Одеський медичний журнал 2000.- №6(62). С.7-11
77. Кресюн В.Й., Годован В.В. К механизму гепатопротекторного действия координационных соединений германия. // Наукові записки з питань медицини, біології, хімії, аграрії та сучасних технологій навчання : Щорічник. К., 1997. - Вип.1,Ч1. С.143-145
78. Кресюн В.Й., Годован В.В., Антоненко П.Б. Фармакологічний аналіз нової сполуки германію МІГУ- 3 // Матер. научн.- практ. конф. Лекарства человеку. Харьков, 2001. Т. 15, № 1-2. С. 29-30
79. Кресюн В.Й., Шандра О.А., Антоненко П.Б. Вплив нових похідних германію на формування умовної реакції активного уникнення // Одес. мед. журнал. -1998. - № 3. - С. 40-41.
80. Кресюн Н.В. Вплив комплексної сполуки германію з янтарною кислотою на біоенергетику серцевого м'язу при хронічному стресі // Тези доповідей 66-ої підсумкової студентської наукової конференції - Одеса, 1997.-С. 18.
81. Кудрин А.В., Скальный А.В., Жаворонков А.А. Иммунофармакология микроэлементов. М.: КМК, 2000. 537 с.
82. Кулинский В.И., Колисниченко Л.С. Биологическая роль глутатиона // Успехи современной биологии. 1990. Т.110, №1. С.20-33.
83. Лазерная корреляционная спектроскопия при экспериментальной патологии печени / Ю.И. Бажора, В.И. Кресюн, В.В. Годован, Д.Ю. Андронов: Информ. листок № 287-96. Одесса: ЦНТЭИ, 1996. 2с.
84. Лапик С. В., Жмуров В. А, Попова Т.В.Эмоксипин в лечении бронхиальной астмы/ // Пульмонология. - 2000. - №1 - С 62-65.
85. Легонькова Л.Ф., Бушма М.И., Лукиенко П.И. Сравнительное изучение влияния никотинамида и диэтилникотинамида на монооксигеназную, глюкуронил- и глутатионконъюгирующую системы печени // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1990. Т.110, №12. С.633-635.
86. Лесик Р.Б., Зіменковський Б.С., Троцько Н.Я. Синтез тіазолідин- 3 ацетатної кислоти та її 5- ариліденпохідних перспективних Building bloks” для комбінаторної терапії // Фармацевтичний журнал. 2001. - №2. С. 57-60.
87. Липперт Г. Международная система единиц (СИ) в медицине. М.: Медицина, 1980. 208 с
88. Лисенко О.А. Вплив бемітилу на функціональний стан печінки при гіпоксичній гіпоксії на фоні перегріву. Автореф. дис канд. біол. наук. Київ, 1994. 22с.
89. Луйк А.И., Лукьянчук В.Д. Сывороточный альбумин и биотранспорт ядов.-М.:Медицина, 1984.-224с.
90. Лук/янчук В.Д., Міщенко К.М., Бибик О.Ю. Прооксидантно-антиоксидантний гомеостаз в ранньому постішемічному періоді при профілактичному застосуванні ацелізіну і тіотриазоліну // Ліки. 2000. - №6. С. 48-51.
91. Лук’янчук В.Д., Бибик О.Ю. Вплив комбінованого застосування тіотриазоліну з ацелізіном на динаміку змін комплексоутворюючих властивостей сироваткових білків при церебральному ішемічному інсульті // Клінічна фармація. 2001. - №3. С. 75-77.
92. Лук’янчук В.Д., Бибик О.Ю. Розробка дозового режиму комбінованого застосування ацелізину та тіотриазоліну за умов гострої ішемії головного мозку // Одеський медичний журнал. 2000. Т.61, №5. С.13-15
93. Лук’янчук В.Д., Коробков О.А., Кравець Д.С. Розробка режиму дозування пентоксифіліну при синдромі довготривалого розчавлювання з використанням елементів математичного аналізу // Ліки. 2001. №1-2. С.94-98
94. Лук’янчук В.Д., Савченкова Л.В., Бибик О.Ю. Окисний гомеостаз мозку при ішемії і досвід експериментальної фармакотерапії (огляд літератури та власних джерел) // Журн. АМН України. 2001. Т.7, № 4. С. 647-659
95. Лукевиц Э.Я., Германе С.К, Трушуле М А Нейротропная активностъ германийорганических адамантанов и азотсодержащих гетероциклов // Хим.-фармац. журн. -1987. - Т. 21, №9. - С. 1070- 1074.
96. Лукиенко П.И., Бушма М.И. Влияние никотиновой кислоты и никотинамида на активность ферментов НАДФ.Н- и НАД.Н-зависимых редокс-цепей эндоплазматического ретикулума печени крыс // Фармакология и токсикология. 1982. Т.45, №2. С.78-81.
97. Лукьянова Л.Д. Биоэнергетические механизмы формирования гипоксических состояний и подходы к их фармакологической коррекции // Фармакологическая коррекция гипоксических состояний / Под ред. проф. Л.Д. Лукьяновой М.,1989. С. 11- 45
98. Лукьянова Л.Д. Современные проблемы гипоксии // Вестник РАМН. 2000. - №9. С. 3-12.
99. Лукьянова Л.Д., Дудченко А.М. Биоэнергетика клетки при гипоксии.- М.: Медицина, 1998 - -15с.
100. Лукьянчук В.Д. Влияние фенобарбитала на кинетику изменения уровня парамагнитных комплексов некоторых металлопротеидов при интоксикации динитрофенолами // Фармакология и токсикология.- 1985. -№6. С.102-104.
101. Лукьянчук В.Д. Гипоксический синдром: перспективные пути фармакокоррекции // Матеріали 5 нац. з´їзду фармацевтів України «Досягнення сучасної фармації та перспективи Ії розвитку у новому тисячолітті». Харків: Вид-во Української фармацевтичної академії, 1999. С.598-599.
102. Лукьянчук В.Д. Молекулярные основы механизма токсического действия и разработка принципов детоксикации динитрофенольных соединений: Автореф. дис. докт. мед. наук.-К.,1988.-42с.
103. Лукьянчук В.Д., Кравец Д.С. Разработка дозового режима комбинированного применения силибора с ацетатом α-токоферола при интоксикации динитроортокрезолом // Український медичний альманах. 1999. Т.2, №4. С.73-75
104. Лукьянчук В.Д., Савченкова Л.В., Новосельцева Н.В. Монооксигеназная система как мишень в действии гипоксии в сочетании с гипертермией // Врачебное дело. 1995. - №5. С.100-102.
105. Лукьянчук В.Д., Савченкова Л.В., Семенова И.А. Биохемилюминисцентный анализ фармакотерапевтической активности ацетилсалициловой кислоты в комбинации с кверцетином при гипоксическом синдроме // Эксперим. и клин. фармакология. 1997. - №1. С.62-64.
106. Лысенко Е.А., Бибик Е.Ю. Влияние ацелизина в комбинации с тиотриазолином на сост