Акушерско-гинекологические факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний Рожкова Ольга Владимировна

brief description

Рожкова Ольга Владимировна. Взаимосвязь специфических факторов риска развития сердечно-сосудистых заболеваний у женщин с биологией теломер: диссертация ... кандидата Медицинских наук: 14.01.01 / Рожкова Ольга Владимировна;[Место защиты: ГБУЗ МО Московский областной научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии], 2017.- 149 с.
Акушерско-гинекологические факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний Рожкова Ольга Владимировна
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИ
кандидат наук Рожкова Ольга Владимировна
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Этапы старения женской репродуктивной системы

1.2. Менархе - фактор женского здоровья

1.3. Осложненная беременность - фактор риска развития сердечно-сосудистых заболеваний у женщин

1.4. Ключевые риски развития сердечно-сосудистых заболеваний в постменопаузе

1.5. Современный взгляд влияния половых гормонов на сердечно-сосудистую систему женщин

1.6. Теории старения. Биомаркеры старения

1.7. Роль биологии теломер в развитии возраст-ассоциированных заболеваниях

1.8. Влияние менопаузальной гормональной терапии на длину теломер у женщин в постменопаузе

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Общая характеристика исследуемых групп

2.2. Методы исследования

2.3. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНОГО ОБСЛЕДОВАНИЯ ПАЦИЕНТОК С ФАКТОРАМИ РИСКА РАЗВИТИЯ ССЗ

3.1. Клиническая характеристика обследованных пациенток

3.2. Анализ специфических и традиционных факторов риска развития ССЗ у женщин

3.3. Взаимосвязь специфических и традиционных факторов риска развития ССЗ у женщин

3.4. Взаимосвязь специфических для женщин факторов риска развития сердечнососудистых заболеваний с длиной теломер и активностью теломеразы

3.5. Оценка взаимосвязи традиционных факторов риска развития ССЗ с уровнем половых гормонов у женщин в разных возрастных группах

3.6. Взаимосвязь уровней половых гормонов с длиной теломер и активностью теломеразы у женщин в разных возрастных группах

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

148

ВВЕДЕНИЕ

bibliography

Осложненная беременность фактор риска развития сердечно-сосудистых заболеваний у женщин
Климактерий (климактерический период) возрастное физиологическое состояние организма, переход от репродуктивного периода к менопаузе. Он обусловлен инволюционной перестройкой высших отделов ЦНС, приводящей к нарушению цикличности и интенсивности секреции гонадотропных гормонов гипофизом, в результате чего возникает недостаточность функции половых желез.
По данным Федеральной службы государственной статистики, в 2013 г. Россия достигла самого высокого в истории страны показателя продолжительности жизни женщин 76,5 лет [69].
Наряду с характерной для современного общества тенденцией ростом продолжительности жизни женщин, увеличивается число женщин, находящихся в климактерии, а также риск развития возраст-ассоциированных заболеваний. Сердечно-сосудистые заболевания остаются главной причиной смерти женщин. Согласно данным АНА (American Heart Association) от 2012 г., более трети взрослых женщин имеют те или иные сердечно-сосудистые заболевания [202]. В отличие от мужчин, у женщин, уже в перименопаузе определяется множество факторов риска развития ССЗ.
Повышение риска развития ССЗ выявляется у 37,2% женщин в возрасте 4059 лет, 71,9% женщин в возрасте 60 79 лет и 86,7% женщин в возрасте 80 лет и старше [202]. В РФ распространенность метаболических факторов риска среди женщин представлена следующим образом: у 48,4% женщин наблюдается повышенное АД, избыточная масса тела у 62,8%, ожирение у 32,9%, повышенный уровень общего холестерина выше 5 ммоль/л встречается у 56,4% [73, 187]. Все эти патологические состояния приводят к формированию менопаузального метаболического синдрома (ММС). В настоящее время метаболический синдром рассматривают как важнейший фактор риска развития атеросклероза и сахарного диабета (СД) 2 типа, являющихся главными причинами фатальных ССЗ, цереброваскулярных осложнений, ранней смертности женщин. Главные его проявления абдоминальное ожирение, дислипидемия и нарушение углеводного обмена. К основным клинико-лабораторным показателям ММС относятся: увеличение окружности талии (более 80 см), гипертриглицеридемия (более 1,7 ммоль/л), низкий уровень холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) (менее 1,29 ммоль/л), повышение АД (более 130/85 мм рт. ст.), увеличение уровня глюкозы в плазме крови натощак (более 6,1 ммоль/л), нарушение толерантности к глюкозе [14, 16]. Недооценка роли эстрогенного дефицита в развитии этих патологических состояний у женщин, в последнее время сменилась значительным ростом интереса исследователей. Наличие центрального (абдоминального) ожирения и 2-х из дополнительных критериев (нарушение толерантности к глюкозе /инсулинорезистентность, повышение уровня триглицеридов (ТГ), снижение ХС-ЛПВП и АГ) является основанием для постановки диагноза менопаузального метаболического синдрома (ММС), который выявляется у 13,7-41,5 % женщин старшего возраста [122, 190].Сопутствующие метаболические расстройства могут маскировать клиническую картину ССЗ, тем более, что основные симптомы нестабильной стенокардии и даже ранние признаки острого инфаркта миокарда (ОИМ) у женщин часто носят атипичный характер. Вероятно, причиной диагностических трудностей является быстро развивающаяся на фоне эстрогенного дефицита эндотелиальная дисфункция и нарушение процессов микроциркуляции в сердечной мышце еще до появления структурных атеросклеротических изменений в стенке коронарных сосудов.
Практически все метаболические нарушения, возникающие после наступления менопаузы, взаимосвязаны и еще более усугубляют неблагоприятное влияние дефицита половых стероидов на сердечно-сосудистую систему. Особенно это касается инсулинорезистентности, которая считается ключевым признаком ММС и практически всегда сочетается с абдоминальным ожирением. Известно, что женские половые гормоны контролируют обмен жиров и углеводов в организме, ускоряя расщепление жиров и подавляя синтез липидных фракций, способствующих развитию атеросклероза. Постепенное снижение уровня эстрогенов в перименопаузе приводит к нарушению липидного обмена атерогенного характера достоверному повышению содержания в крови общего холестерина, триглицеридов и липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) при снижении ЛПВП и формированию инсулинорезистентности, что и обусловливает склонность к увеличению массы тела в климактерический период [62, 85]. Висцеральная жировая ткань оказывает непосредственное влияние на печень и является метаболически более активной, чем подкожная клетчатка, в ней происходят как процессы липогенеза, так и процессы липолиза. Прямое поступление свободных жирных кислот, а также других биологически активных субстанций, секретируемых висцеральной жировой тканью, в печень, по мнению ряда исследователей, представляет собой один из патогенетических механизмов развития инсулинорезистентности [5].
Методы исследования
Определение активности теломеразы. Анализ теломеразной активности мы определяли на чисто выделенной моноцитарной фракции клеток крови (примесь эритроцитов мешает анализу), 10000 клеток на анализ. Клетки моноцитов лизировались буфером с мягким детергентом, отделялся экстракт. Для этого клетки, полученные из моноцитарного кольца на градиенте плотности Ficoll и промытые буфером PBS ресуспендировались в лизирующем буфере (10 мМ Tris-HCl или 10мМ HEPES-KOH, рН 7.5, 1.0 мМ MgCl2, 1 мМ EGTA, 5 мМ -меркаптоэтанол, 5% глицерин, 0.5% CHAPS, 0.1 мМ PMSF), 1 мл на 0,1-10 млн клеток, в зависимости от необходимой концентрации. Инкубировали 30 минут во льду. Центрифугировали 10 минут при 4С на 15000 об/мин и отбирали надосадочный раствор. Экстракт делили на аликвоты и замораживали в жидком азоте. С полученным экстрактом проводилась теломеразная полимеразная реакция. Готовилось 28 мкл смеси 1: 1х TRAP-буфер (1х TRAP-буфер: 20 мM HEPES-KOH pH 8.3, 1,5 мM MgCl2, 63 мM KCl, 1мM EGTA, 0,1 мг/мл BSA, 0,005% v/v Tween-20), по 20 мкM dNTP, 10 пмоль олигонуклеотида TS (AATCCGTCGAGCAGAGTT) и экстракт моноцитов или клеток контрольных клеточных линий. Реакционную смесь инкубировали 30 минут при 25C. Полученные продукты амплифицировались с помощью ПЦР в реальном времени. К смеси добавляли 1,5 ед. Taq-ДНК полимеразы (Хеликон”), 10 пмоль олигонуклеотида ACX (GCGCGGCTTACCCTTACCCTTACCCTAACC) и Sybr Green I до 0.2x концентрации в финальной смеси и проводилась ПЦР-рв на приборе CFX-96: 35 c 94C, 35 с 50C 90 с 72C (30 циклов, амплификатор Mastercycler (Eppendorf”, Германия).
К инструментальным методам исследования относились: - Ультразвуковое исследование органов малого таза, которое проводилось с помощью продольных и поперечных сечений аппаратом Voluson 730 PRO с трехмерным высокочастотным вагинальным датчиком (GeneralElectric) частотой 3,56 МГц. - Маммография. Все пациентки до включения в исследование проходили рентгенографию молочных желез в прямой и косой проекциях. - Ультразвуковое исследование молочных желез. - Регистрация ЭКГ, с помощью электрокардиографа SCHILLER CARDIOOVIT AT-10. Все инструментальные исследования проводились в «ГНИЦ ПМ». и МО ГБУЗ «МОНИИАГ».
Всем обследуемым, которые соответствовали критериям включения/исключения по итогам проведенного скрининга, были проведены основные методы исследования. При выявлении критериев исключения участник выбывал из исследования на любом этапе. Протокол исследования был одобрен этическим комитетом, и все участники дали письменное информированное согласие на участие в исследовании. 2.3. Статистическая обработка данных
Полученные в ходе исследования результаты наблюдения и обследования вносились в электронную таблицу MS Exсel. Каждая строка рабочей таблицы Exсel содержала данные одной из пациенток, столбцы таблицы соответствовали исследуемым параметрам. Такое представление позволило провести статистическую обработку полученных данных при помощи пакета прикладных Statistica 10 фирмы StatSoft. Было получено графическое представление, позволяющее визуально оценить близость распределения к нормальному. На следующем этапе проводился анализ однородности выборки, то есть оценивалась возможность сопоставимости групп по следующим показателям: рост, вес, ИМТ, окружность талии, окружность бедер, индекс ОТ/ОБ. На начальном этапе был проведен анализ распределения исследуемых параметров, в ходе которого путем использования процедур описательной статистики были получены следующие числовые характеристики выборки: число наблюдений, среднее, минимальное, максимальное значения, стандартное (среднее квадратическое) отклонение. Для сравнения средних по независимым выборкам использовался t-критерий Стьюдента. Но если требуется сравнить выборочные средние трех и более совокупностей, нужен другой подход, который реализуется в дисперсионном анализе-методе, разработанном английским статистиком Р.А. Фишером. Однофакторный дисперсионный анализ позволяет оценить влияние некоторого фактора (одного) на результат эксперимента. F-тест в однофакторном дисперсионном анализе устанавливает, значимо ли различаются средние нескольких независимых выборок. Нулевая гипотеза для F-теста в данном случае утверждает, что k генеральных совокупностей, представленных k выборками, имеют одно и то же среднее значение. Альтернативная гипотеза заключается в том, что не все средние равны между собой, т.е., по крайней мере, у двух совокупностей средние различны. Если мы отвергаем нулевую гипотезу на некотором уровне значимости, то тем самым установлен факт наличия различий между средними. Однако F-тест не дает ответа на вопрос, какие средние различаются значимо. Для ответа на этот вопрос используется метод, основанный на t-критерии средней разности между выборками. Проблема состоит в том, что выполняется t-тест для каждой пары выборок, и групповая ошибка может быть выше, даже если вероятность отдельной ошибки остается на уровне 0,05. Какие пары различаются, более четко высчитается при помощи теста наименьшего значимого различия. Проводился также корреляционный анализ: линейные корреляции Пирсона, ранговые корреляции Спирмена, а также проводился множественный линейный регрессионный анализ с построением регрессионных моделей. При этом оценивался и уровень значимости p. При оценке достоверности выявленных различий и связей статистически достоверными считали различия с р 0,05. По общепринятой терминологии утверждения, имеющие вероятность ошибки р 0,05, называются достоверными; утверждения с вероятностью ошибки р 0,01 — очень достоверным, а утверждения с вероятностью ошибки р 0,001 — максимально достоверными.