Биосинтез, выделение и характеристика внеклеточной сериновой протеиназы Bacillus intermedius 3-19 Ицкович, Елена Лазаревна

brief description

Ицкович,ЕленаЛазаревна.Биосинтез,выделениеихарактеристикавнеклеточнойсериновойпротеиназыBacillusintermedius3-19: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.07. - Казань, 1999. - 139 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
А Н а правах рукописиИЦКОВИЧЕЛЕНАЛАЗАРЕВНАБИОСИНТЕЗ,ВЫДЕЛЕНИЕИХАРАКТЕРИСТИКАВНЕКЛЕТОЧНОЙСЕРИНОВОЙПРОТЕИНАЗЫBACILLUSINTERMEDIUS3-19 03.00.07

стр. 8
8 Научная новизна работы Впервые обнаруженавнеклеточнаятиолзависимаясериноваяпротеиназаB.intermedius.Найдены оптимальные условия продукциипротеиназы. препаративного Разработанвыделенияэффективный гомогенного лабораторный препарата методпротеиназыB.intermedius, основанный на ВЭЖХ. Определены

стр. 28
компонентов. обусловлено или пептидных Аналогичной литической активностью по отношению к живым клеткам Г- бактерий и дрожжей, обладает ивнеклеточнаясериноваяпротеиназатермофильного штаммаBacilluslicheniformis. Данные о литической ак:тивности позволяют белков,сериновыхпротеиназразных видов микроорганизмов

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Ицкович, Елена Лазаревна
Список сокращений.
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Основные принципы классификации протеолитических ферментов; сериновые протеиназы микроорганизмов.
2. Секретируемые сериновые протеиназы микроорганизмов; физико-химические свойства и субстратная специфичность субтилизинов.
3.Тиолзависимые сериновые протеиназы микроорганизмов - особое подсемейство субтилизинов.
3.1. Отличительные признаки тиолзависимых протеиназ.
3.2. Характеристика тиолзависимых протеиназ, выделенных из различных источников.
4. Структура и строение активного центра субтилизинов.
4.1. Первичная, вторичная и третичная структуры субтилизинов.
4.2. Механизм действия и строение активного центра субтилизинов.
4.3. Источники стабильности субтилизинов.
5. Участие субтилизинов в синтезе пептидных связей.
5.1. Возможности пептидных синтезов в присутствии субтилизинов.
5.2. Использование сложных эфиров в пептидных синтезах с помощью субтилизинов.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
1. Оптимизация состава питательной среды и условий культивирования для получения максимальной продукции протеиназы.
1.1. Влияние неорганического фосфата и источников углерода на биосинтез протеиназы В.ШегтесИш.
1.2. Оптимизация состава среды для получения протеиназы.
1.3. Влияние аминокислот и субстратов протеиназы на биосинтез фермента.
1.4. Изучение динамики роста культуры, биосинтеза протеиназы и спорообразования В.ШетесИш 3-19.
2. Выделение и очистка протеиназы ВяШегтесИш 3-19.
2.1. Выбор оптимальных условий очистки фермента.
2.2. Получение гомогенного препарата протеиназы из культураль-ной жидкости В.тТегтесИт 3-19.
3. Характеристика протеиназы.
3.1. Спектральная характеристика, молекулярная масса, изоэлектри-ческая точка и кинетические параметр протеиназы.
3.2. Оптимум рН-действия фермента.Температурный оптимум и термостабильность протеиназы.
3.3. Влияние ионов Са на термостабильность фермента;действие ионов двухвалентных металлов на протеолитическую активность.
3.4. Субстратная специфичность протеиназы В. МегтесИж 3-19.
3.5. Влияние ингибиторов и денатурирующих агентов на протеолитическую активность.
3.6. Действие органических растворителей на активность протеиназы.
3.7. Участие протеиназы В.МегтеШт 3-19 в ферментативном синтезе пептидной связи.
3.8. Аминокислотный состав и 14-концевая последовательность протеиназы
В. IШегтесИш 3-19.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.