Изучение механизма высвобождения АТР и нарушения структурной целостности эритроцитов в условиях гипоксии Сидоренко, Светлана Вадимовна

brief description

Сидоренко,СветланаВадимовна.ИзучениемеханизмавысвобожденияАТРинарушенияструктурнойцелостностиэритроцитоввусловияхгипоксии: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.03.01, 03.01.02 /СидоренкоСветланаВадимовна; [Место защиты: Моск. гос. ун-т им. М.В. Ломоносова]. - Москва, 2019. - 166 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.В. ЛОМОНОСОВА Биологический факультет На правах рукописиСидоренкоСветланаВадимовнаИЗУЧЕНИЕМЕХАНИЗМАВЫСВОБОЖДЕНИЯATP ИНАРУШЕНИЯСТРУКТУРНОЙЦЕЛОСТНОСТИЭРИТРОЦИТОВВУСЛОВИЯХГИПОКСИИСпециальности: 03.03.01 физиология, 03.01.02 биофизика ДИССЕРТАЦИЯ

стр. 2
.......................................... 19 1.2.2 Выброс ATP, вызванныйнарушениемструктурнойцелостностиэритроцитов...................................................................................................................... 23 1.2.2.1 Гемолизэритроцитов........................................................................................ 23 1.2.2.2 Везикуляция плазматической мембраны ............................................................

стр. 27
деоксигенирование приводит к повышению [Ca2+]i что, вероятно, связано с ингибированием Ca2+-ATPазы (Tiffert et al., 1993). Роль везикуляции мембраны внарушениицелостностиэритроцитоввусловияхгипоксииостается неизученной. 1.3МеханизмыподдержанияструктурнойцелостностимембраныэритроцитовДанные, представленные в предыдущем разделе, показывают, чтоизучениесистем, вовлеченных в поддержаниеструктурной...

Оглавление диссертациикандидат наук Сидоренко, Светлана Вадимовна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ........................................................................................................4
ВВЕДЕНИЕ.................................................................................................................................6
Глава 1. Обзор литературы......................................................................................................10
1.1 Механизмы вовлечения эритроцитов в регуляцию сосудистого тонуса..................11
1.1.1 Газотрансмиттеры.................................................................................................14
1.1.2 Пуринэргическая сигнальная система...................................................................15
1.2 Механизм высвобождения АТР из эритроцитов.........................................................18
1.2.1 Поиск транспортёров, участвующих в выбросе ATP..........................................19
1.2.2 Выброс ATP, вызванный нарушением структурной целостности эритроцитов......................................................................................................................23
1.2.2.1 Гемолиз эритроцитов........................................................................................23
1.2.2.2 Везикуляция плазматической мембраны.........................................................26
1.3 Механизмы поддержания структурной целостности мембраны эритроцитов.........27
1.4 Гипоксия как фактор регуляции деформируемости эритроцитов.............................29
1.5 Поиск сенсора, вовлеченного в генерацию р02-зависимых сигналов эритроцитов 31
1.6 Особенности, выявленные в ядерных эритроцитах....................................................33
1.7 Физиологическое и патофизиологическое значение...................................................35
1.7.1 Физическая нагрузка................................................................................................35
1.7.2 Идиопатическая легочная гипертензия (ИЛГ).....................................................36
1.7.3 Диабет второго типа..............................................................................................37
1.8 Нерешенные вопросы.....................................................................................................38
Глава 2. Материалы и методы.................................................................................................39
2.1 Объект и материалы исследования...............................................................................39
2.2 Спектроскопия комбинационного рассеяния (КР)......................................................39
2.3 Вытеснение кислорода из суспензии эритроцитов.....................................................39
2.4 Гемолиз эритроцитов......................................................................................................40
2.5 Измерение содержания ATP..........................................................................................41
2.6 Активность экто-АТРазы...............................................................................................42
2.7 Получение теней эритроцитов.......................................................................................42
2.8 Измерение содержания белка........................................................................................44
2.9 Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ)......................................................44
2.10 Вестерн-блот анализ.....................................................................................................45
2.11 ЭПР-спектроскопия......................................................................................................45
2.12 Исследование белкового состава теней эритроцитов...............................................47
2.12.1 Гидролиз белков трипсином и обессоливание полученных фрагментов..........47
2.12.2 Хромато-масс-спектрометрический анализ......................................................48
2.12.3 Анализ полученных результатов..........................................................................48
2.12.3.1 Качественный анализ состава белков...........................................................48
2.12.3.2 Безметочный количественный анализ белков..............................................49
2.12.4 Выявление кластеров взаимодействующих генов...............................................49
2.13 Методы математической обработки...........................................................................50
2.14 Реактивы........................................................................................................................50
Глава 3. Результаты и обсуждение.........................................................................................51
3.1 Сравнительный анализ действия гипоксии на высвобождение ATP и гемоглобина
из эритроцитов человека и крысы ....................................................................................... 51
3.2 Роль экто-АТРазы...........................................................................................................54
3.3 Роль каналов, сформированных паннексинами...........................................................57
3.4 Влияние гипоксии на вязкость липидного бислоя мембраны эритроцитов.............58
3.5 Влияние гипоксии на белковый состав мембраны эритроцитов...............................59
ЗАКЛЮЧЕНИЕ........................................................................................................................68
Выводы ...................................................................................................................................... 73
Благодарности........................................................................................................................... 74
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.....................................................75
Список литературы..................................................................................................................77
Приложение 1..........................................................................................................................................96
Приложение 2.......................................................................................................................................132
Приложение 3.......................................................................................................................................133
Приложение 4.......................................................................................................................................141