Каталитические свойства глутамин (аспарагин) азы из Рseudomonas Aurantiаca BKM-548 Кабанова, Елена Алексеевна

brief description

Кабанова,ЕленаАлексеевна.Каталитическиесвойстваглутамин(аспарагин)азыизРseudomonasAurantiаcaBKM-548: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 1984. - 175 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
i;/:Sf'3A^e^^ ОРДЕНА ДРУЖБЫ НАРОДОВ УНИВЕРСЖЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ ш е ш П А М С А ЛУМгавЫ На правах рукописиКАБАНОВАЕЛЕНААЛЕКСЕЕВНАУДК 577.152.02КАТАЛИТИЧЕСКИЕСВОЙСТВАГЛУТАМШ(АСПАРАГИН)АЗЫИЗ PSEUDOMOHAS AURANTIACA ВШ-548(03.00.04 - биохшшя) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических

стр. 61
данных относительно юшетических и регужторныхсвойствглутамин(аспарагин)аз, исследования, планируемые в данной работе,направлены на детальное изучениекаталитическихсвойствглутамин(аспарагин)азыиз Pseudomonas aurantiaca ВКМ-548, получен­ ной в гомогенном состоянии. Перспективность исследованияглутамин(аспарагин)азы

стр. 139
каталитическихсвойствглуташн(аспарагин)азыиз aurantiaca Ра. BM-548основным требованшм предварительной оценки, -136Таблща 17 Кинетические параметрыглутамин(аспарагин)азыиз Ре . aurantiaca ВШ-548. • jtij_ Субстрат или инитбитор L -ГлутаминL-АспарагинДОН^ Азасерин* ДОН^ рН 7,4 К т ИЛИ К? , М сек"

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Кабанова, Елена Алексеевна
Список сокращений и обозначений
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. Общие сведения о глутамин (аспарагин) азах
1.1. Методы выделения и очистки глутамин-(аспарагин)аз.II
1.2. Влияние физико-химических факторов на активность и стабильность дезамидаз
ГЛАВА 2. Исследования структуры дезамидаз
2.1. Молекулярная масса и субъединичное строение.
2.2. Аминокислотный состав и первичная структура.
2.3. функциональные группы активного центра и их модификация.
ГЛАВА 3. Субстратная специфичность и ингибиторы глутамин(аспарагин)аз
3.1. Реакции, катализируемые глутамин(ас-парагин)азами
3.2. Константы Михаэлиса.
3.3. Механизм действия.
3.4. Аффинные метки.
3.5. Обратимые ингибиторы.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
ГЛАВА 4. Соединения, использованные в работе
4.1. Реактивы и их очистка
4.2. Очистка глутамин (аспарагин) азы. а) Источник выделения фермента. б) Культивирование микроорганизма в) Приготовление ацетонового порошка г) Выделение фермента. д) Доказательство гомогенности фермента с помощью диск-электрофореза.
ГЛАВА 5. Методы определения белка и активности фермента
5.1. Определение белка
5.2. Определение активности с помощью реактива Несслера.
5.3. Определение активности с помощью глутаматдегидрогеназы.
5.4. Определение активности в реакциях гидролиза и синтеза гидроксаматов дикарбоновых аминокислот
ГЛАВА 6. Исследование каталитических свойств глутамин(аспарагин)азы
6.1. Субстратная специфичность.
6.2. Влияние концентрации субстратов на скорость реакций гидролиза и гидро-ксиламинолиза.
6.3. Влияние рН и температуры на активность и стабильность фермента
6.4. Действие Ь-глутамата на процесс тепловой инактивации фермента
6.5. Влияние катионов металлов и метаболитов на ферментативную активность.
6.6. Ингибирование фермента дикарбоновыми аминокислотами.
6.7. Кинетика инактивации глутамин(аспара-гин)азы под действием ДОН и азасерина.
6.8. Влияние рН и температуры на инактивацию фермента под действием
ДОН яр
6.9. Влияние лигандов на ингибирование фермента ДОН.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
ГЛАВА 7. Исследование оптимальных условий функционирования глутамин(аспарагин)азы
7.1. Влияние рН и температуры на активность и стабильность глутамин(аспарагин)азы ^ gg
7.2. Регуляция активности глутамин(аспарагин) азы .QQ а) Влияние метаболитов на активность фермента. б) Влияние катионов металлов на активность фермента. gj
ГЛАВА 8. Изучение взаимодействия фермента с эффекторами в условиях термоинактивации
8.1. Кинетика инактивации фермента при
50° в присутствии ь -глутамата
8.2. Влияние структуры эффекторов на тепловую стабильность фермента . . . юо
ГЛАВА 9. Субстратная специфичность глутамин(аспарагин) азы
9.1. Реакции гидролиза. Определение для ь-глутамина и l -аспарагина
9.2. Трансферазные реакции.
9.3. Влияние рН на гидролиз и синтез гидроксамовых кислот
9.4. Зависимость скорости трансферазной реакции от концентрации субстратов
ГЛАВА 10. Исследование каталитических свойств глутамин(аспарагин)азы методами ингибиторного анализа
10.1. Влияние аналогов субстратов и продуктов на ферментативную активность.
10.2. Определение кинетики процесса ингибирования фермента ДОН и азасерином.
10.3. Изучение взаимодействия фермента с L-аспартатом в условиях инактивации ДОН.
10.4. Влияние структуры аналогов субстратов на инактивацию фермента под действием ДОН.
10.5. Влияние температуры и рН на ингибирование фермента ДОН
10.6. Влияние органических кислот и их аналогов на взаимодействие фермента с ДОН.
10.7. Стабилизация фермента от инактивации при низких значениях рН
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.