Клонирование кДНК и функциональный анализ нового белка человека СВР1, принадлежащего к классу КН-доменных белков Лукьянова, Татьяна Ивановна

brief description

Лукьянова,ТатьянаИвановна.КлонированиекДНКифункциональныйанализновогобелкачеловекаСВР1,принадлежащегокклассуКН-доменныхбелков: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.26. - Москва, 1999. - 112 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ ГЕНА На правах рукописи УДК 577.1+599.323.4ЛУКЬЯНОВАТАТЬЯНАИВАНОВНАКЛОНИРОВАНИЕкДНКИФУНКЦИОНАЛЬНЫЙАНАЛИЗНОВОГОБЕЛКАЧЕЛОВЕКАСВР1,ПРИНАДЛЕЖАЩЕГОККЛАССУ^Ш-ДОМЕННЫХБЕЛКОВСпециальность 03.00.26 - молекулярная генетика ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой

стр. 4
человекаСВР1Анализнуклеотидной последовательности клонированнойкДНКЭкспрессия генаСВР1в различных тканяхчеловекаЭкспрессия генаСВР1в различных клеточных линияхчеловекаЭкспрессиябелкаСВР1in vitro Изучение копийности генаСВР1в геномечеловекаФункциональныйанализбелкаСВР1Изучение структуры

стр. 42
подходы к диагностике и лечению уже известных синдромов, связанных с нарушением в КН-доменныхпонятьбелках, и, исходя основы из их полифункциональности, молекулярные многих других заболеваний. В настояш;ей работе описываетсяклонированиекДНК, изучение экспрессии ифункциональныйанализновогоК НдоменногобелкачеловекаСВР1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Ферменты ферменты, Promega и реактивы, В работе...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Лукьянова, Татьяна Ивановна
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
I. Полифункциональные белки: связь между транскрипционными 9 и пост-транскрипционными процессами в клетке
II. Особенности структуры ЬпВМР белков
1. ЛВВ/ЕРМ/1иЧР-С8 домен
2. ЯСС мотив
3. К-Ното1(^у домен
4. Дополнительные домены
III. Пост-транскрипционные и пост-трансляционные 16 модификации
IV. Свойства и функции Ьп1йЧР белков
1. Специфичность связывания с нуклеиновыми кислотами
2. Роль 1т1№Р белков в упаковке мРНК
3. Спаривание цепей РНК
4. Взаимодействие с другими белками
5. Роль ИпШЧР белков в сплайсинге
6. Роль 1тШЧР белков в транспорте зрелой мРНК из ядра
в цитоплазму
7. Специфическая экспрессия ЬпККР белков в различных
типах клеток и участие из в развитии заболеваний
V. Класс КН-доменных белков
1. Связывание ИпИЧР К с нуклеиновыми кислотами
2. КН-домен - основной структурный и функциональный
элемент класса КН-доменных белков
VI. Заключение
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Ферменты и реактивы
Выделение плазмидной ДНК
Агарозный гель-электрофорез ДНК и выделение
фрагментов ДНК из геля
Плазмиды и клонирование
Определение нуклеотидной последовательности ДНК
Культуры клеток
Штаммы бактерий
Трансформация клеток Е. соИ плазмидной ДНК
Выделение тотальной РНК и очистка поли-(А) + РНК
Фракционирование РНК в агарозном геле,
содержащем формальдегид
Перенос РНК на нейлоновую мембрану НуЬопй 14+
Нозерн-блот гибридизация 55 Радиоактивное мечение ДНК-зонда с
использованием рассеянной затравки
Выделение геномной ДНК из клеток человека и
анализ ее по Саузерну
Клонирование кДНК СВР1 с помощью стратегии
вычитания
Полимеразная цепная реакция
Обратная транскрипция 64 Получение делеционных конструкций с
помощью экзонуклеазы BAL31
in vitro транскрипция и трансляция
Анализ связывания белка СВР1 и его делеционных
вариантов с олиго-й( С ) последовательностью
Компьютерная обработка результатов и
использованные базы данных
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
Клонирование кДНК нового белка человека СВР1 70 Анализ нуклеотидной последовательности
клонированной кДНК
Экспрессия гена СВР1 в различных тканях человека
Экспрессия гена СВР1 в различных клеточных
линиях человека
Экспрессия белка СВР1 in vitro
Изучение копийности гена СВР1 в геноме человека
Функциональный анализ белка СВР1
Изучение структуры "вариабельного" участка мРНК СВР1
Определение функциональной значимости
различных участков белка СВР1
ВЫВОДЫ