Ружинська Олена Едуардівна. Морфофункціональна характеристика гемопоетичних клітин, особливості їх апоптозу та проліферативної активності при мієлодиспластичному синдромі

brief description

Ружинська Олена Едуардівна. Морфофункціональна характеристика гемопоетичних клітин, особливості їх апоптозу та проліферативної активності при мієлодиспластичному синдромі : Дис... канд. наук: 14.01.31 2007

Ружинська О.Е.Морфофункціональна характеристика гемопоетичних клітин, особливості їх апоптозу та проліферативної активності при мієлодиспластичному синдромі. Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 14.01.31 гематологія та трансфузіологія. ДУ «Інститут гематології та трансфузіології АМН України», Київ, 2007.
У дисертації наведено матеріал щодо морфологічних, цитохімічних, імунофенотипових особливостей, рівня експресії апоптоз-асоційованих маркерів (анексіну V, АГ CD95, білка Bcl-2) та параметрів КЦ гемопоетичних клітин у хворих на різні форми МДС.
Для хворих було характерним порушення морфологічних ознак клітин КМ і ПК, їх ензимохімічної організації та рівня експресії деяких поверхневих антигенів, що відображає функціональну неповноцінність гемопоетичних клітин при МДС.
Відмічено високий рівень апоптозу гемопоетичних клітин у хворих на МДС, що є їх маркерною ознакою. Встановлено залежність кількості апоптотичних клітин в КМ пацієнтів від форми захворювання. Даний параметр має достовірне прогностичне значення.
Однією з причин експансії пухлинного клону є значне зростання рівня експресії антиапоптотичного білка Bcl-2 бластними клітинами при зниженні кількості CD95+-клітин в процесі прогресування захворювання. При цьому було відмічено перевищення кількості Bcl-2+-клітин над кількістю апоптотичних клітин у хворих на МДС.
Отримані дані щодо високого проліферативного потенціалу гемопоетичних клітин та значної варіабельності показників їх КЦ у хворих на МДС. Параметри КЦ та наявність анеуплоїдної популяції клітин мають прогностичне значення для оцінки загальної виживаності хворих.

У дисертації наведено теоретичне узагальнення і нове вирішення наукової задачі щодо ролі апоптозу і проліферативної активності в патогенезі МДС, які недостатньо вивчені внаслідок біологічної неоднозначності їх регуляторних процесів, значної варіабельності проявів і складнощах верифікації патології.
1. Підтверджено гіпотезу щодо ролі порушення регуляції апоптозу як однієї з ключових ланок патогенезу МДС. Встановлено підвищення кількості апоптотичних клітин при МДС в порівнянні з практично здоровими особами і ГМЛ. Посилений апоптоз гемопоетичних клітин є основною відмітною ознакою у хворих на МДС.
2. Виявлено дисбаланс про- і антиапоптотичних процесів в гемопоетичних клітинах КМ хворих на МДС, що характеризується зміною рівнів експресії апоптоз-ассоційованих маркерів в порівнянні з контролем: антиапоптотичного білка Bcl-2 (підвищенням в 3 рази) і рецепторної молекули FAS (зниженням в 1,2 рази). У хворих на ГМЛ рівень експресії білка Bcl-2 гемопоетичними клітинами зростав у порівнянні з аналогічним показником при МДС (у 1,5 рази) та в порівнянні з контрольною групою (у 5 разів).
3. Встановлено, що підвищений рівень експресії білка Bcl-2 спостерігався в популяції незрілих клітин КМ хворих на МДС, тоді як апоптотичному процесу піддавалися зрілі клітини всіх паростків гемопоезу.
4. Виявлено прогностичну значимість апоптотичного індексу для оцінки загальної виживаності хворих на МДС: збільшення кількості апоптотичних клітин понад 20% порогового значення корелює зі сприятливим прогнозом.
5. Доведено, що МДС є захворюванням, яке характеризується не тільки збільшеним рівнем апоптозу, але й високим проліферативним потенціалом, що відрізняється значною варіабельністю. Параметри клітинного циклу і плоїдності при МДС є важливими маркерами ступеня злоякісності захворювання, а також мають прогностичне значення для оцінки загальної виживаності хворих. Встановлено, що збільшення кількості клітин у фазі спокою G0/1 відповідає накопиченню пухлинної маси (бластних клітин), а високий проліферативний потенціал є притаманним більш зрілим мієлоїдним клітинам.
6. Виділено прогностично маркерні параметри клітинного циклу і плоїдності. Показано, що ознаками несприятливого прогнозу загальної виживаності хворих на МДС є: величина проліферуючого пулу гемопоетичних клітин S+G2/M менша за 14,6%, фаза спокою G0/1 більша за 85%, значення цитокінетичного показникабільше за 6,2, а також наявність анеуплоїдної популяції клітин.
7. Констатовано наявність взаємозв’язаних з апоптоз-ассоційованими маркерами кількісних і якісних змін морфофункціональних характеристик гемопоетичних клітин у хворих на МДС, які корелюють з несприятливим прогнозом захворювання: вірогідне звуження гранулоцитарного паростка кровотворення (менше 33%); зниження рівня активності МП в зрілих клітинах мієлоїдного ряду з одночасним підвищенням в них активності КФ і появою відсутньої в нормі НЕ; збереження аномально високої експресії антигену клітин-попередників CD33 і зниженої експресії активаційного антигену CD45 в популяції зрілих мієлоїдних клітин.