Специфичность встраиваний P элемента в локус генов бтш70 D. melanogaster и влияние инсерций на функционирование этих генов Шилова, Виктория Юрьевна

brief description

Шилова,ВикторияЮрьевна.СпецифичностьвстраиванийPэлементавлокусгеновбтш70D.melanogasterивлияниеинсерцийнафункционированиеэтихгенов: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 2006. - 99 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
61:07-3/92 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Институт молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта на правах рукописиШиловаВикторияЮрьевнаСпецифичностьвстраиванийР элемеита влокусгеновбтшЮ D.melanogasterивлияниеинсерцийна функцнонироваииеэтихгеновСпециальность: 03.00.03 -молекулярная биология

стр. 6
получения транспозиций вгеныбтш70методом Р-инсерционного мутагенеза. Целью данной работы было: выявлениеспецифичностивстраиванияРэлементавлокус, кодирующий белкиБТШ70у дрозофилы; исследованиевлиянияинсерцийРэлементанафункционированиегеновбтшЮ; рассмотрение роли различных семействгенов

стр. 6
точной локализацииинсерцийконструкции на основе Рэлемента(EPgy2) в районгенов, кодирующихБТШ70Drosophilamelanogaster. 2) ЛокализоватьинсерцийEPgy2. 3) ИсследоватьвлияниеинсерцийEPgy2 нафункционированиегеновбтшЮ на уровне транскрипции и трансляции. 4) РассмотретьвлияниеинсерцийEPgy2 в

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Шилова, Виктория Юрьевна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Белки и гены теплового шока: общая характеристика
1.1.1. Гены теплового шока
1.1.2. Основные семейства БТШ
1.1.3. Механизмы регуляции ответа на тепловой шок
1.2. Структура кластера генов бтш70 у Diptera
1.3. Мобильные элементы как возможный фактор эволюции генов ТШ
1.4. Особенности Р элемента и его использование в инсерционном мутагенезе
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Линии Drosophila
2.2. Модель генетического анализа
2.3. Выделение геномной ДНК из мух
2.4. Гибридизация геномной ДНК по Саузерну
2.5. ПЦР-анализ
2.6. Выделение фрагментов ДНК
2.7. Секвенирование ДНК
2.8. Количественный ПЦР-анализ в реальном времени (qRT-PCR) 43 2.9 Выделение мРНК из мух и ее анализ методами электрофореза и Нозерн-гибридизации
2.10. Лигирование фрагментов ДНК
2.11. Трансформация компетентных клеток Е. coli
2.12. Выделение плазмидной ДНК
2.13. Одномерный электрофорез белков
2.14. Вестерн-блоттинг
2.15. Двумерный электрофорез белков
2.16. Включение метионина- S в белки слюнных желез Drosophila
2.17. Определение термоустойчивости мух
2.18. Определение фертильности трансгенных мух 48 2.19 Иммунофлуоресцентное окрашивание транскрипционых факторов 48 2.20. Статистическая обработка данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Характеристика системы скрещиваний для получения инсерций конструкции на основе Р элемента в гены бтшЮ методом Р-инсерционного мутагенеза
3.2. Идентификация инсерций EPgy2 методом Саузерн-блот анализа 53 3.3 Точная локализация полученных инсерций EPgy
3.4. Влияние инсерций EPgy2 на уровень транскрипции бтшЮ
3.5. Анализ синтеза БТШ70 в трансгенных линиях
3.6. Анализ инсерций EPgy2, сопровождающихся перестройками геномной ДНК
3.7. Базальная и индуцированная термоустойчивость трансгенных линий
3.8. Определение плодовитости потомства трансгенных линий
3.9. Вклад нмБТШ в термоустойчивость
4. ВЫВОДЫ