Топоизомераза II и ее участие в незаконной рекомбинации: Эксперименты в модельной системе Иванова, Ольга Николаевна

brief description

Иванова,ОльгаНиколаевна.ТопоизомеразаIIиееучастиевнезаконнойрекомбинации:Экспериментывмодельнойсистеме: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 2006. - 109 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
61:06-3/939 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ ГЕНА На правах рукописи УДК 576.315.42ИВАНОВАОльгаНиколаевнаТопонзомераза II и ееучастиевнезаконнойрекомбинации: экснерименты вмодельнойсистемеСпециальность: 03.00.03 -молекулярная биология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой стенени кандидата

стр. 3
59 59 60 61 63 64 67 Результаты исследования и их обсуждение Созданиемодельнойсистемыдля количественной оценки частотынезаконнойрекомбинацииПроверка функционирования гена KIL Ш Декатенированиемодельныхконструктов Количественная оценка частотынезаконнойрекомбинацииИндукциянезаконнойрекомбинации

стр. 66
пазвана pKIL2TTC-ori. 66 Результаты исследования и их обсуждение Созданиемодельнойсистемыдля количественной оценки частотынезаконнойрекомбинацииНами была созданамодельнаясистема, позволяющая обнаружить фактнезаконнойрекомбинации, а также оценить ее частоту. Используемый метод анализа основан на

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Иванова, Ольга Николаевна
Содержание.:.
Список сокращений и терминов, использованных в работе.
Введение.
Обзор литературы.
Точки разрывов при хромосомных перестройках.
Хромосомные перестройки и ассоциированные с ними заболевания.
Группы химерных белков.
Кластеры точек разрыва.
Механизм рекомбинации.
Структура белка и кажущаяся кластеризация точек разрыва.
Роль ядерной архитектуры в образовании хромосомных перестроек.
Структура и механизм действия топоизомераз II типа.
Основные свойства топоизомераз II.
Структура белка.
Механизм действия.
Клеточная роль топоизомеразы II.
Репликация.
Транскрипция.
Конденсация хромосом.
Рекомбинация.
Ингибирование топоизмеразы II.
Постановка задачи и методические подходы.
Материалы и методы.
Приготовление и трансформация компетентных клеток Е. coli.
Трансформация бактериальных клеток.
Манипуляции с плазмидной ДНК.
Полимеразная цепная реакция.
Выделение бакмидной ДНК из бактерий.
Положительная селекция клонов, содержащих KIL.
Декатенация плазмид.
Индукция незаконной рекомбинации in vitro.
Трансфекция.
Выделение плазмидной ДНК из эукариотических клеток.
Радиоактивное мечение олигонуклеотидов и гибридизация их с ДНК.
Обработка ядер микрококковой нуклеазой и Саузерн-гибридизация.
Конструирование плазмид.
Результаты исследования и их обсуждение.
Создание модельной системы для количественной оценки частоты незаконной рекомбинации.
Проверка функционирования гена KIL.
Декатенирование модельных конструктов.72.
Количественная оценка частоты незаконной рекомбинации.
Индукция незаконной рекомбинации in vitro.
Эксперименты in vivo.
Эписомная репликация модельных плазмид в эукариотических клетках.
Индукция незаконной рекомбинации in vivo и влияние ингибиторов.
Предположительная модель действия топоизомеразы II.
Картирование участков разрыва в рекомбинантных плазмидах.81"
Нуклеосрмный статус трансфецированных модельных плазмид.
Выводы.