Разработка технологии получения препарата литических ферментов, расщепляющих клеточные стенки дрожжей и микроскопических грибов, с использованием мутантного штамма Streptomyces griseinus 11-84

Краткое описание

СодержаниеВВЕДЕНИЕ... 5ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1. Ферментативный лизис микробной клеточной стенки... 92. Микроорганизмы - продуценты литических ферментов... 163. Пути увеличения биосинтеза литических ферментов... 203.1. Получение активных штаммов-продуцентов... 203.2. Метаболическая регуляция биосинтеза литических ферментов... 263.3. Влияние состава питательной среды на биосинтез ферментов... 333.4. Влияние условий культивирования на биосинтез литических ферментов актиномицетами... 374. Способы получения препаратов литических ферментов... 475. Области применения литических ферментов... 52МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ1. Методы получения штамма-продуцента литических ферментов... 592. Питательные среды... 613. Математические методы планирования эксперимента... 634. Методы выращивания культуры... 655. Получение препарата литических ферментов... 665.1. Мембранные методы очистки и концентрирования... 665.2. Выделение препарата из концентрата... 675.3. Сушка препарата... 686. Методы, использованные при определении свойств препарата... 686.1. Методы определения активности ферментов... 686.2. Изучение некоторых свойств препарата Лизофунгин... 716.2.1. Определение оптимальных условий действия литических ферментов... 716.2.2. Определение действия препарата на микроорганизмы... 72ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯГлава 1. Получение мутантного штамма... 751.1. Естественная изменчивость продуцента... 751.2. Получение мутантного штамма Streptomyces griseinus 11-84... 771.3. Сравнительная характеристика исходного и мутантного штаммов... 81Глава 2. Разработка оптимального состава питательной среды... 872.1. Влияние специфических субстратов на биосинтез литических ферментов 87 мутантным штаммом Str. griseinus 11-84...2.2. Влияние биомассы микроорганизмов в питательной среде на биосин- 93 тез литических ферментов...2.3. Оптимизация состава питательной среды с использованием методов 98математического планирования эксперимента...Глава 3. Разработка рациональных режимов глубинного культивирования 104Str. griseinus 11-84...3.1. Влияние посевного материала на биосинтез литических ферментов... 1043.1.1. Отработка условий поддержания штамма в активном состоянии... 1043.1.2. Исследование влияния количества и возраста мицелиальной посев- 106 ной культуры на биосинтез литических ферментов...3.1.3. Хранение культуры на сыпучих зерновых субстратах... 1083.2. Влияние начального рН среды на биосинтез литических ферментов... 1093.3. Влияние температуры культивирования... 1113.4. Зависимость образования литических ферментов от аэрирования пи- 113 тательной среды...3.5. Динамика биосинтеза ферментов литического комплекса... 118Глава 4. Разработка условий выделения препарата литических ферментов 1244.1. Изучение стабильности литических ферментов в фугате культураль- 124 ной жидкости...4.2. Изучение процесса очистки и концентрирования литических фермен- 126 тов методом ультрафильтрации...4.2.1. Выбор ультрафильтрационных мембран... 1274.2.2. Влияние предварительной очистки культуральной жидкости на 129 скорость ультрафильтрации...4.2.3. Влияние рН фугата на процесс ультрафильтрации... 1304.2.4. Исследование оптимальной степени концентрирования фугата 132 культуральной жидкости...4.3. Разработка условий осаждения комплекса литических ферментов из 135 концентрата и получение препарата...4.3.1. Влияние рН концентрата на осаждение литических ферментов... 1354.3.2. Влияние концентрации этанола на литическую активность препарата 1364.4. Испытание технологии получения препарата... 1384.5. Описание технологической схемы получения препарата Лизофунгин.. 139 Глава 5. Изучение некоторых свойств препарата... 1455.1. Оптимальные условия действия препарата... 1455.2. Влияния солей некоторых металлов на литическую активность препарата.. 1525.3. Характеристика ферментного комплекса препарата Лизофунгин... 1545.4. Изучение спектра действия Лизофунгина на микроорганизмы... 157Глава 6. Области применения препарата... 161ВЫВОДЫ... 172СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ... 174ПРИЛОЖЕНИЯ... 199