ТЕОРЕТИЧНІ ТА ПРАКТИЧНІ АСПЕКТИ ВИГОТОВЛЕННЯ ГІПЕРІМУННИХ СИРОВАТОК (на моделі вірусів хвороби Ауєскі, геморагічної хвороби кролів і чуми м’ясоїдних) : ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИЗГОТОВЛЕНИЕ гипериммунную СЫВОРОТОК (На модели вирусов болезни Ауески, геморрагической болезни кроликов и чумы плотоядных)

Краткое описание

БІЛОЦЕРКІВСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ АГРАРНИЙ УНІВЕРСИТЕТ
На правах рукопису

КОРНІЄНКО ЛЕОНІД ЄВГЕНОВИЧ

УДК 619: 578.82/.83]: 616.988.07/.08

ТЕОРЕТИЧНІ ТА ПРАКТИЧНІ АСПЕКТИ
ВИГОТОВЛЕННЯ ГІПЕРІМУННИХ СИРОВАТОК
(на моделі вірусів хвороби Ауєскі,
геморагічної хвороби кролів і чуми м’ясоїдних)

16.00.03. ветеринарна мікробіологія та вірусологія

Д и с е р т а ц і я
на здобуття наукового ступеня
доктора ветеринарних наук

Науковий консультант
доктор ветеринарних наук,
член-кореспондент УААН
Стегній Борис Тимофійович

м. Біла Церква 2006

З М І С Т
стор.
ПЕРЕЛІК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ............................................................. 5
ВСТУП.............................................................................................................. 7
Розділ 1. ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ.................................................................. 15
1.1. Потреба у виробництві специфічних гіперімунних
сироваток із діагностичною й лікувальною метою............................ 15
1.2. Тварини-донори гіперімунних сироваток............................... 25
1.3. Схеми та методи отримання діагностичних і лікувальних
сироваток, ад’юванти............................................................................ 39
1.4. Застосування гіперімунних сироваток у діагностиці,
лікуванні й профілактиці окремих вірусних захворювань
(на прикладі вірусів геморагічної хвороби кролів, хвороби Ауєскі
та чуми м’ясоїдних)...... 51
1.5. Висновок з огляду літератури................................................ 56
Розділ 2. ВИБІР НАПРЯМІВ ДОСЛІДЖЕНЬ, МАТЕРІАЛ ТА МЕТОДИ
ВИКОНАННЯ РОБОТИ.................................................................... 59
Розділ 3. КУЛЬТИВУВАННЯ (ПІДТРИМАННЯ), ІНАКТИВАЦІЯ,
ОЧИЩЕННЯ І КОНЦЕНТРУВАННЯ ВІРУСІВ........................ 69
3.1. Культивування й підтримання вірусів 69
3.1.1. Вірус чуми м’ясоїдних........................................................ 69
3.1.2. Вірус геморагічної хвороби кролів..................... 73
3.2. Інактивація вірусів................................................................. 78
3.2.1. Вірус чуми м’ясоїдних......................................................... 79
3.2.2. Вірус геморагічної хвороби кролів..................... 81
3.2.3. Інактивація вірусів чуми м’ясоїдних і вірусу
геморагічної хвороби кролів теплом. 82
3.3. Очищення й концентрування вірусного антигену для
імунізації тварин-донорів.. 84
Розділ 4. ПРИГОТУВАННЯ ВІРУСНИХ АНТИГЕНІВ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОЇ ДІАГНОСТИКИ ТА РОЗРОБКА ІМУНОЛОГІЧНИХ РЕАКЦІЙ ДЛЯ КОНТРОЛЮ АКТИВНОСТІ ОТРИМАНИХ ГІПЕРІМУННИХ СИРОВАТОК. 104
4.1. Методи діагностики хвороби Ауєскі..................................... 104
4.2. Методи діагностики чуми м’ясоїдних .. 111
4.3. Методи діагностики геморагічної хвороби кролів............... 115
4.4. Використання розроблених серологічних реакцій
з метою визначення серологічного статусу тварин, вивчення
патогенезу чуми м’ясоїдних у собак і вірусної геморагічної
хвороби у кролів................................................................................. 119
Розділ 5. РОЗРОБКА СХЕМ І МЕТОДІВ ІМУНІЗАЦІЇ ДОНОРІВ.. 129
5.1. Отримання гіперімунних сироваток від тварин різних видів 129
5.1.1. Морські свинки............................................................ 129
5.1.2. Кролі................................................................................ 136
5.1.3. Коні....................................................................................... 144
5.1.4. Свині................................................................................... 148
5.1.5. Велика рогата худоба........................................................... 152
5.2. Вивчення реактогенних та антигенних властивостей
концентрованих інактивованих антигенів із застосуванням
ад’ювантів різного походження...................................................... 162
5.2.1. Неорганічні сорбенти........................................................... 162
5.2.2. Масляні ад’юванти вітчизняного виробництва 165
5.3. Порівняльне вивчення впливу різних типів масляної
емульсії на основі вітчизняних ад’ювантів на активність
гіперімунних сироваток................................................................... 178
5.4. Вивчення реактогенних та імуностимулювальних
властивостей масляних ад’ювантів фірми SEPPIC”................ 182
5.4.1. Кролі.................................................................................. 182
5.4.2. Велика рогата худоба........................................................ 184
5.4.3. Коні.................................................................................... 186
5.4.4. Свині................................................................................... 187
5.4.5. Застосування концентрованих комбінованих антигенів
і їх реактогенність у тварин-донорів.............................................. 189
5.5. Отримання гіперімунних сироваток на інактивовані
й неінактивовані антигени.............................................................. 194
5.6. Використання феномену вторинної імунної
відповіді при отриманні гіперімунних сироваток......................... 201
5.7. Динаміка елімінації антитіл у донорів............................ 206
Розділ 6. ВІДПРАЦЮВАННЯ СПОСОБІВ ОЧИЩЕННЯ ГІПЕРІМУННИХ СИРОВАТОК................................................. 211
6.1. Застосування поліетиленгліколю й аеросилу.................... 211
6.2. Низькошвидкісне центрифугування................................... 213
6.3. Застосування дезмолу.......................................................... 214
6.4. Застосування формаліну...................................................... 215
Розділ 7. ВИВЧЕННЯ ЛІКУВАЛЬНИХ ВЛАСТИВОСТЕЙ ОТРИМАНИХ ГІПЕРІМУННИХ СИРОВАТОК.......................................... 219
7.1. Гіперімунні сироватки проти чуми м’ясоїдних...................... 219
7.2. Гіперімунні сироватки проти геморагічної хвороби кролів.222
Розділ 8. УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХ АНАЛІЗ 227
ВИСНОВКИ................................................................................................. 261
ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ.............................................................. 265
СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ.................................................. 268
ДОДАТОК...................................................................................................... 326

ПЕРЕЛІК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ
РРІД реакція радіальної імунодифузії
РДП реакція дифузійної преципітації
РІД реакція імунодифузії
РЗК реакція зв’язування комплементу
РТЗК реакція тривалого зв’язування комплементу
РН реакція нейтралізації
РГА реакція гемаглютинації
РЗГА реакція затримки гемаглютинації
РПГА реакція пасивної гемаглютинації
РНГА реакція непрямої гемаглютинації
ІФМ імуноферментний метод
ПЕС поліетилксилоксанова рідина
НАФ неповний ад’ювант Фрейнда
ПАФ повний ад’ювант Фрейнда
ПЕГ поліетилегліколь
ГОА гідроксид алюмінію
GН-91 культура клітин гонад кози
ВНК-21 культура клітин нирки новонародженого хом’яка
ПТП культура клітин тестикул поросяти
СН культура клітин свинячої нирки
КФ первинна культура клітин курячих фібробластів
ПСГК культура клітин сибірського гірського козерога
ТЦД50 50%-на тканинна цитопатична доза
ЛД50 50%-на летальна доза
ЦПД ципотична дія
ВДНКІ Всеросійський науково-дослідний контрольний інститут
ВНДІТіБП Всеросійський науково-дослідний інститут технологічної і біологічної промисловості
ВНДЯІ (ВНИЯИ) Всесоюзний науково-дослідний ящурний інститут
ВНДІЗТ (ВНИИЗЖ) Всеросійський науково-дослідний інститут захисту тварин
ВНДІВВіМ Всеросійський науково-дослідний інститут ветеринарної вірусології та мікробіології
ІЕКВМ Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини
ІВМ Інститут ветеринарної медицини

ВСТУП
Актуальність теми. Існує актуальна проблема ефективного виробництва імунних препаратів як у ветеринарній, так і у гуманній медицині. Важливе значення серед таких препаратів мають специфічні імуноглобуліни і сироватки, які можуть використовуватись для негайного запобігання епідемічному, епізоотичному або вогнищевому поширенню (серопрофілактика, пасивна імунізація) і лікування (серотерапія) інфекційних захворювань [4, 9, 79, 90, 110, 217, 227, 230, 281, 297].
Сучасні дослідження із застосування гіперімунних сироваток у системі заходів профілактики та боротьби з інфекційними хворобами обґрунтовують передчасність ігнорування серопрофілактики і серотерапії [20, 34, 35, 36, 63, 127, 136, 180, 181, 191, 204, 321]. Імуноглобуліни є єдиним засобом профілактики і лікування так званих емерджентних неконтрольованих захворювань [3, 162, 246]. Серотерапія не має альтернативи також у випадку захворювань, що спричинені зокрема герпесвірусами, аденовірусами, параміксовірусами, арбовірусами тощо [252].
Існуючі схеми і методи імунізації донорів різняться між собою кількістю ін’єкцій, кратністю та якістю антигену, що вводиться, й ад’ювантами [29, 84, 195, 441, 514]. Здебільшого схеми отримання гіперімунних сироваток обираються відповідно з особливостями певного діагностичного методу [50, 289]. Універсалізація цього процесу із застосуванням технології концентрування антигенів та сучасних ад’ювантів на основі удосконалених схем і методів їх введення є першочерговим завданням вірусологів і біотехнологів. Однак, потреба у виробництві специфічних високоактивних сироваток не обмежується лише застосуванням їх у діагностичній практиці. Актуальність отримання імунних сироваток та імуноглобулінів зумовлюється також необхідністю використання останніх як засобів серопрофілактики й терапії у практиці ветеринарної та гуманної медицини. Переваги імунних препаратів полягають у тому, що інтенсивна імунізація тварин дозволяє досягти високої концентрації антитіл. Крім того, при цьому розширюється можливість у підборі продуцентів [30, 281].
В Україні реєструються захворювання собак і хутрових звірів на чуму [96], геморагічну хворобу кролів [48]. Значна частина свинарських господарств залишаються неблагополучними з хвороби Ауєскі [132], тому потрібна розробка схем отримання гіперімунних сироваток до збудників цих хвороб, та на підставі цього удосконалення діагностичних методів і серотерапії кожного із них.
Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дослідження з вірусом хвороби Ауєскі (штами УНДІЕВ-18ВС”, К”) виконані в рамках НДР ІЕКВМ УААН згідно із завданням Розробити фундаментальні основи біотехнології одержування та принципи застосування нового покоління специфічних засобів профілактики хвороби Ауєскі” (19911995 рр., номер державної реєстрації UA 01009822Р) відповідно до проекту Ветеринарне забезпечення” УААН.
Робота з вірусом чуми м’ясоїдних (вакцинним (ЕПМ”) і вірулентним) була ініціативною; з вірусом геморагічної хвороби кролів (вірулентними штамами: Воронезький-87” та НК/99”) здійснювалась на основі творчих угод з асоціацією Агробіологічних підприємств України.
Метою досліджень є теоретичне і клініко-експериментальне обґрунтування методів отримання антигенів і гіперімунних сироваток для діагностики і лікування хвороби Ауєскі, чуми м’ясоїдних і вірусної геморагічної хвороби кролів.
Для досягнення мети необхідно було вирішити наступні завдання:
розробити нові та удосконалити існуючі методики інактивації і концентрування вірусів чуми м’ясоїдних і вірусу геморагічної хвороби кролів;
розробити методи виготовлення очищених, концентрованих інактивованих вірусних антигенів, які можуть застосовуватись для імунізації тварин і як компоненти імунохімічних реакцій;
розробити раціональні способи гіперімунізації, більш технологічні і досконалі методи отримання гіперімунних сироваток від морських свинок, кролів і великої рогатої худоби;
визначити вплив формальдегіду, тепла, азиридинів на антигенні характеристики збудників хвороби Ауєскі, чуми м’ясоїдних і геморагічної хвороби кролів при отриманні гіперімунних сироваток, провести порівняльні дослідження таких сироваток з тими, що отримані на неінактивовані вірусні антигени;
приготувати різні типи емульсії та визначити їх вплив на якість гіперімунних сироваток;
розробити раціональні способи консервування й очищення гіперімунних сироваток;
охарактеризувати профілактичні та лікувальні властивості гіперімунних сироваток проти чуми м’ясоїдних та геморагічної хвороби кролів;
розробити метод оцінки активності вірусовмісної суспензії печінки, отриманої від загиблих кролів, з метою подальшого впровадження контролю активності антигену при виготовленні вакцинних препаратів;
вивчити динаміку накопичення та елімінації різних груп антитіл при гіперімунізації кролів і великої рогатої худоби антигенами вірусів хвороби Ауєскі, чуми м’ясоїдних, геморагічної хвороби кролів;
з’ясувати особливості використання феномену вторинної імунної відповіді” при отриманні гіперімунних сироваток;
вивчити у порівняльному аспекті з антигенами вірусів хвороби Ауєскі, чуми м’ясоїдних і геморагічної хвороби кролів ад’ювантну активність неорганічних сорбентів, масляних ад’ювантів вітчизняного і зарубіжного виробництва при отриманні гіперімунних сироваток;
впровадити у практику ветеринарної медицини гіперімунні сироватки проти чуми м’ясоїдних і вірусної геморагічної хвороби кролів.
Об’єкт дослідження профілактичні, лікувальні та діагностичні препарати, виготовлені з сироватки крові гіперімунізованих тварин при інфекційних вірусних хворобах.
Предмет дослідження вірусні антигени (культуральні та виготовлені з паренхіматозних органів тварин); індикація, очищення і концентрування вірусів; способи та схеми гіперімунізації тварин при виготовленні імунізуючих та діагностичних препаратів проти хвороби Ауєскі, чуми м’ясоїдних та геморагічної хвороби кролів.
Методи дослідження вірусологічні (культури тканин, титрування вірусів, біопроби на тваринах), морфологічні (патолого-анатомічний), біохімічні (загальний білок), імунологічні та статистичні.
Наукова новизна одержаних результатів. Теоретично та експериментально обґрунтовані технологічні аспекти виготовлення діагностичних і лікувально-профілактичних препаратів із використанням антигенів вірусів хвороби Ауєскі, чуми м’ясоїдних, геморагічної хвороби кролів. Визначено та відпрацьовано технологічні етапи і схеми очищення та концентрування антигенів, які придатні для умов біофабричного виробництва діагностичних і лікувально-профілактичних препаратів на основі специфічних сироваток. З урахуванням доступності та рентабельності визначені методи і засоби очищення та концентрування вірусів різних родин, які відрізняються між собою структурно-морфологічними і біологічними особливостями (герпесвіруси, параміксовіруси, каліцивіруси). Встановлено, що препарати ПЕГ, аеросил, їх комбінація дозволяють здійснювати очищення вірусів на 8099% від баластних білків, не порушуючи їх антигенної структури. Експериментально обґрунтована ефективність повної інактивації вірусів без порушення їх антигенної структури при використанні препаратів азиридинового ряду (аміноетилетиленімін), а також можливість пролонгування імуностимулювальної дії шляхом емульсування антигенів. Експериметально підтверджено більш високі показники імуностимулювальних властивостей масляних ад’ювантів (НАФ, ПАФ, SEPPIC”) порівняно з сорбентами, що опосередковано підтверджує тезу про те, що при застосуванні останніх утворюється ліпопротеїнова структура за принципом ліпосом, чим зумовлюється зниження інтенсивності перетравлювання імунізуючого антигену, в результаті чого розвивається більш виражена імунна відповідь. Проведено оцінку різних типів емульсій. Показано, що антиген, корпускульований у маслі, в свою чергу пролонгує антигенне подразнення імунокомпетентної системи і підвищує імунну відповідь організму тварин-донорів. Оптимізовано кратність застосування антигенів з використанням можливості локальної реакції лімфатичних вузлів та врахуванням факторів вторинної імунної відповіді” на уведення антигену. Обґрунтована і експериментально підтверджена можливість застосування дезмолу і формальдегіду для очищення і консервування (формальдегід) специфічних сироваток, що скорочує термін випуску препаратів і забезпечує їх стерильність. Вперше розроблені принципово нові схеми отримання гіперімунних сироваток крові морських свинок, кролів, великої рогатої худоби (патенти РФ № 2036660 та № 2044548, патент України № 35684 А).
Практичне значення одержаних результатів. На підставі проведених досліджень поліпшені існуючі та створені нові схеми й методи одержання гіперімунних сироваток на всіх технологічних етапах їх виготовлення. В результаті досліджень запропонований метод отримання універсального антигену, придатного як для імунізації тварин-донорів, так і для постановки імунохімічних реакцій.
Результати досліджень можуть бути використані науково-дослідними лабораторіями, виробничими цехами і біологічними фабриками України при виробництві діагностичних і лікувальних препаратів.
Державним Департаментом ветеринарної медицини затверджені: Настанова по застосуванню гіперімунної сироватки проти чуми м’ясоїдних (хвороба Карре) із культурального вірусу” (реєстраційний № 1514/34, 30.05.1995) та ТУ У на цей препарат (30.05.1995); Тимчасова настанова по застосуванню полівалентної сироватки проти чуми, парвовірусних інфекцій та вірусного гепатиту собак та хутрових звірів” (реєстраційний № 1514/87, 31.07.1996); Настанова по застосуванню інактивованої тканинної концентрованої формол-вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кролів із штаму НК/99” (реєстраційний № 1514/177, 11.10.1999) і ТУ У 46.15.41899 на цей препарат; Настанова по застосуванню сироватки проти вірусної геморагічної хвороби кролів” (реєстраційний № 1514/178, 11.10.1999) і ТУ У 46.15.41799 на цей препарат.
Матеріали дисертації використовуються у навчальному процесі при викладанні курсу Загальна та спеціальна епізоотологія”, вони використані також при написанні Практикуму із загальної епізоотології” (1999) та підручника Загальна епізоотологія” (2002), затверджених Міністерством аграрної політики України відповідно як посібник і підручник для викладачів і студентів факультетів ветеринарної медицини вищих навчальних аграрних закладів ІІІ і IV рівнів акредитації, та підручника Епізоотологія з мікробіологією” (2006) для студентів факультетів ветеринарної медицини І і ІІ рівнів акредитації.
Матеріали дисертації використані при написанні наукових монографій Чума м’ясоїдних” (перше й друге видання) (2000, 2002), Вірусна геморагічна хвороба кроликів” (2001), Хвороба Ауєскі” (2002), Інфекційні та інвазійні хвороби кролів” (2003).
Особистий внесок здобувача. Автором самостійно виконано, проаналізовано та узагальнено увесь обсяг експериментальних досліджень.
Здобувач також розробив та обґрунтував технологію отримання гіперімунних сироваток із застосуванням концентрованих емульсованих антигенів, запропонував: нові методичні підходи щодо схем отримання специфічних гіперімунних сироваток із використанням локальної реакції лімфатичних вузлів; методи концентрування та інактивації вірусовмісних суспензій; очищення гіперімунних сироваток. Здійснював безпосереднє проведення досліджень, статистично обрахував та узагальнив одержані результати, сформував висновки та пропозиції виробництву.
Вірусологічні, імунологічні, біохімічні дослідження, лікування тварин проводив разом із співробітниками кафедр епізоотології (Ярчук Б.М., Корнієнко Л.М.) та терапії і клінічної діагностики Білоцерківського ДАУ (Головаха В.І., Розумнюк А.В), співробітниками лабораторії біотехнології клітинних культур ІЕКВМ (Білокінь В.С.) та фахівцями агробіологічних підприємств України (Главацький В.П.) а також із лікарями ветеринарної медицини Білоцерківської міської лікарні ДВМ (Власенко В.В).
Апробація результатів дисертації. Матеріали дисертації доповідалися та обговорювалися на Міжнародній науковій конференції Общая эпизоотология: иммунологические, экологические и методологические проблемы” (Харків, 1995), ІІІ-, IV- і VI-й Міжнародних науково-практичних конференціях Проблеми ветеринарного обслуговування дрібних домашніх тварин” (Київ, 1998, 1999, 2000), Міжнародній конференції молодих вчених Стан та перспективи розвитку ветеринарної науки” (Харків, 1999), Міжнародній науково-практичній конференції Ветеринарна наука на порозі ХХІ віку” (Харків, 2000), Міжнародній науково-практичній конференції "Наукові та практичні аспекти ветеринарної медицини в Україні" (Біла Церква, 2006), конференції молодих учених і спеціалістів України Проблеми ветеринарної медицини по обслуговуванню тваринництва колективних та фермерських господарств” (Харків, 1992), Українській конференції молодих учених Сучасні проблеми ветеринарної медицини” (Київ, 1994), науково-практичній конференції Вчені Білоцерківського державного сільськогосподарського інституту виробництву” (Біла Церква, 1994), науково-практичній конференції Наукове забезпечення агропромислового комплексу України в сучасних умовах” (Біла Церква, 1995), першій Всеукраїнській науково-виробничій конференції ветеринарних патологів Актуальні питання ветеринарної патології” (Київ, 1996), науково-практичній конференції Розвиток ветеринарної науки в Україні: здобутки та проблеми” (Харків, 1997), науково-практичній конференції з питань ветеринарного забезпечення хутрового звірівництва (Черкаси, 2005), науково-практичній конференції, присвяченій 75-річчю Новогалещинської біофабрики (Полтава, 2006), на засіданнях товариства ім. І.І. Мечнікова (Біла Церква, 1998), на наукових конференціях науково-педагогічних працівників факультету ветеринарної медицини (Біла Церква, 19942005).
Публікації. Результати експериментальних досліджень представлені у 53 наукових працях: у підручниках для викладачів і студентів факультетів ветеринарної медицини вищих навчальних закладів (3); у наукових монографіях (5); 26 (11 одноосібних) наукових статтях у профільних журналах і фахових збірниках наукових праць; у патентах на винахід (3); матеріалах тез міжнародних та державних конференцій з ветеринарної медицини (16).

Список литературы

ВИСНОВКИ

1. У дисертації теоретично узагальнено і вирішено наукове завдання щодо удосконалення схем і методів отримання гіперімунних сироваток від тварин-донорів. На підставі отриманих даних експериментально обґрунтовані та розроблені засоби діагностики, лікування та профілактики чуми м’ясоїдних, геморагічної хвороби кролів і хвороби Ауєскі; розроблена технологія отримання діагностичних та імунізуючих препаратів, що включає класичні та альтернативні методи очищення і концентрування антигенів, оптимізовані схеми гіперімунізації тварин-донорів емульсованими препаратами. На основі запропонованих методик гіперімунізації виготовлені гіперімунні лікувальні сироватки проти чуми м’ясоїдних і вірусної геморагічної хвороби кролів, на які розроблені й затверджені відповідні ТУ.
2. Найбільш придатними для репродукції та накопичення вірусів чуми м’ясоїдних є первинні (ФЕК) та перещеплювані (ПТП, ВНК-21, GH-91) культури клітин, які забезпечують їх репродукцію з інфекційною активністю в середньому 7,5 і 6,83 lg ТЦД50/см3, відповідно, а для вірусу геморагічної хвороби кролі, в печінці яких його титр інфекційності досягає 4,254,5 lg ЛД50/см3.
3. Азиридини в концентрації 0,040,08% при температурі 37оС повністю інактивують віруси чуми м’ясоїдних без зміни їх антигенної активності за 8 год, при 26оС за 610 год, формальдегід в концентрації 0,070,035% за 4 і 6 год, відповідно. Прогрівання при 56оС впродовж 1 год повністю інактивує параміксовіруси і неповністю каліцивіруси, про що свідчить залишкова інфекційність (вірус геморагічної хвороби кролів).
4. При виготовленні антигенів для гіперімунізації тварин-донорів ефективною є технологія, що складається з процесів напрацювання вірусної сировини, освітлення вірусовмісної суспензії центрифугуванням при 30004000 g протягом 2030 хвилин, комбінованого концентрування шляхом сорбції вірусу 0,030,06%-ним розчином аеросилу А-300, осаджування 1012%-ним розчином ПЕГ 6000, інактивації 0,120,16%-ним розчином аміноетилетиленіміну і емульсування в масляному ад’юванті.
5. Розроблено схеми гіперімунізації лабораторних тварин (морських свинок та кролів), які передбачають триразове введення концентрованих емульсованих антигенів, що дозволяє за 3040 діб отримувати високоактивні специфічні сироватки, придатні для використання в РДП, РРІД, РН, РЗК і РТЗК.
6. Розроблено схему імунізації великої рогатої худоби, що передбачає триразове почергове введення інактивованих концентрованих антигенів на основі масляного ад’юванту із використанням локальної реакції лімфатичних вузлів. Вона дозволяє отримувати на 2935 добу від початку імунізації специфічні сироватки з активністю до вірусів хвороби Ауєскі в РН 7,8±0,28,9±0,09 log2, чуми м’ясоїдних 11,15±0,02 log2 і геморагічної хвороби кролів в РЗГА 14,2±0,2 log2.
7. У процесі порівняльного випробування існує кореляція між ступенем запальних процесів у місці введення ад’ювантів вітчизняного виробництва (НАФ і ПАФ) та ефектом індукції антитіл. Установлено, що препарати французької фірми SEPPIC” (ISA25, ISA27, ISA28, ISA35, ISA50, ISA206) мають значний імуностимулювальний і пролонгуючий ефект на фоні мінімальної реактогенності для тварин.
8. Для гіперімунізації тварин найбільш стабільною є емульсія типу вода в маслі”, в якій антиген повністю корпускульований, що забезпечує виражену імунну відповідь внаслідок більш тривалого часу асиміляції антигену.
9. Заміна фенолу на формалін при консервуванні гіперімунних сироваток дає значний економічний ефект; формальдегід в концентрації 0,005% очищує сироватку крові до стандартів центрифугування за 1218 годин. Оптимальне очищення від баластних білків сироваток крові (до 16,222,4 г/л проти 67,3 г/л загального білка у вихідному препараті) забезпечує 0,050,1%-ний розчин дезмолу з наступним відстоюванням протягом 5 годин і центрифугуванням при 2,5 тис. об/хв упродовж 2030 хв. Очищення сироваток з використанням ПЕГ і аеросилу знижує їхню активність на 68 і 38 log2, відповідно, внаслідок виснаження сироваток щодо гамма-глобулінів.
10. Застосування гіперімунних специфічних сироваток проти чуми м’ясоїдних (моновалентної й відповідної у складі полівалентної) з активністю 7 log2 в РН у дозі 1,02,0 см3/кг живої маси тварини забезпечує лікувальний ефект і може бути використане в системі заходів профілактики та боротьби з цією хворобою.
11. Гіперімунна сироватка проти геморагічної хвороби кролів має лікувальні та превентивні властивості. Застосування сироватки в дозі 0,5 см3 попереджає зараження тварин через 11,5 год після її введення і забезпечує несприйнятливість до інфікування впродовж 40 діб. Вона проявляє лікувальні властивості при застосуванні тваринам з клінічними ознаками захворювання.
12. Для контролю вірусовмісної сировини при виробництві вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кролів обов’язковим є застосування РГА та РЗК з метою контролю активності антигену. Активність 10%-ної вірусовмісної суспензії печінки повинна становити не менше 9 ГАО log2 в РГА.
13. При гіперімунізації тварин-донорів оптимальним інтервалом між введенням антигену є 1020 діб, що співпадає з феноменом вторинної імунної відповіді і дозволяє отримувати максимальне накопичення антитіл у сироватці крові. Подовження інтервалів між введенням антигену до 80 діб збільшує терміни отримання специфічної сироватки. Вірусонейтралізуючі та гемаглютинуючі антитіла утримуються в крові імунізованих тварин протягом 10 міс, а преципітувальні і комплементозв’язувальні 36 міс.

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ
Розроблено й запропоновано для ветеринарної медицини (в співавторстві):
1. Гіперімунна сироватка проти чуми м’ясоїдних (хвороба Карре) із культурального вірусу (ТУ затверджені Головним управлінням ветеринарної медицини з держветінспекцією Міністерства сільського господарства і продовольства України, травень 1995 р.).
2. Настанова по застосуванню гіперімунної сироватки проти чуми м’ясоїдних (хвороба Карре) із культурального вірусу (затверджені Головним управлінням ветеринарної медицини з держветінспекцією Міністерства сільського господарства і продовольства України, № 15-14/34, травень 1995 р.).
3. Сироватка проти вірусної геморагічної хвороби кролів (ТУ У 46.15.417-99 затверджені Головою Державного департаменту ветеринарної медицини Міністерства агропромислового комплексу України, жовтень 1999 р.).
4. Настанова по застосуванню сироватки проти вірусної геморагічної хвороби кролів (затверджена Головним державним інспектором ветеринарної медицини України, № 15-14/178, жовтень 1999 р.).
5. Інактивована тканинна концентрована формол-вакцина проти вірусної геморагічної хвороби кролів із штаму ГК/99 (ТУ У 46.15.418-99 затверджені Головою Державного департаменту ветеринарної медицини Міністерства агропромислового комплексу України, жовтень 1999 р.).
6. Настанова по застосуванню інактивованої тканинної концентрованої формол-вакцини проти вірусної геморагічної хвороби кролів із штаму ГК/99 (затверджена Головою Державного департаменту ветеринарної медицини Міністерства агропромислового комплексу України, № 15-14/177, жовтень 1999 р.).
7. Тимчасова настанова по застосуванню полівалентної сироватки проти чуми, парвовірусних інфекцій та вірусного гепатиту собак і хутрових звірів (затверджена начальником Головного управління ветеринарної медицини з держветінспекцією Міністерства сільського господарства і продовольства України, № 15-14/87, липень 1996 р.).
8. Запропоновані:
8.1. Спосіб отримання діагностичної сироватки до вірусу чуми м’ясоїдних (деклараційний патент України № 35684 А, 2001 р.).
8.2. Способ получения диагностической сыворотки к вирусу болезни Ауески (патент РФ № 2036660, 1995 г.).
8.3. Способ получения диагностической сыворотки к вирусу болезни Ауески (патент РФ № 2044548, 1995 г.).
8.4. Виділений, паспортизований і депонований в ДНКІБіШМ штам НК/99 вірусу геморагічної хвороби кролів.
8.5. Методи і схеми імунізації морських свинок, кролів, свиней, коней і великої рогатої худоби концентрованими антигенами на основі масляних ад’ювантів.
8.6. Метод отримання очищених і концентрованих у 10100 разів за об’ємом вірусних антигенів чуми м’ясоїдних, геморагічної хвороби кролів.
8.7. Метод інактивації вірусів чуми м’ясоїдних, геморагічної хвороби кролів із застосуванням азиридинів (аміноетилетиленімін), які не впливають на антигенні структури збудників.
8.8. Масляні ад’юванти вітчизняного виробництва, на основі яких готують емульсії типу вода в маслі”, які забезпечують найвищі пролонгуючі імуностимулювальні властивості.
8.9. Дезмол для очищення виробничих (великомасштабних) об’ємів гіперімунних сироваток у біофабричних умовах виробництва, який скорочує терміни випуску препарату.
8.10. Метод визначення гемаглютинабельної активності вірусу геморагічної хвороби кролів в РЗГА при виробництві вакцин і специфічних сироваток.
8.11. З огляду на те, що імуностимулювальна активність ад’ювантів французької фірми SEPPIC” перевищує відомі вітчизняні аналоги та у таких препаратів практично відсутня реактогенність, пропонуємо біологічним підприємствам України впроваджувати у вакцинному виробництві і при проведенні циклів гіперімунізації тварин застосування таких препаратів. З препаратів цієї фірми рекомендуємо застосовувати емульсії типу масло у воді”, що мають найбільш виражені імуностимулювальні властивості.
9. Результати досліджень увійшли в наукові монографії: Чума м’ясоїдних” (м. Біла Церква, 2000. 129 с.; 2002. 176 с.), Вірусна геморагічна хвороба кроликів” (м. Біла Церква, 2001, 64 с.), Хвороба Ауєскі” (м. Біла Церква, 2002. 220 с.); Інфекційні та інвазійні хвороби кролів” (м. Біла Церква, 2003. 288 с.); підручники: Практикум із загальної епізоотології” (м. Біла Церква, 1999. С.5255, 5761, 66, 7678), Загальна епізоотологія” (м. Біла Церква, 2002. С. 347353, 357362, 445448, 452455).

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ДЖЕРЕЛ
1. Аденовирус, клетка, организм. Взаимодействие вируса с антителами и другими факторами иммунитета / Н.С. Дяченко, И. Нас, Д. Беренчи и др. Киев: Наук. думка, 1988. 232 с.
2. Азаренюк К.С., Генералов И.И. Новые функции антител // Терап. архив. 1990. № 5. С. 149153.
3. Анастасиев В.В., Короткова Т.В. Примененение иммуноглобулина для внутривенного введения в педиатрической практике // Клиническое применение иммуноглобулинов для внутривенного введения. Н.Новгород: НТМА, 1999. С. 514.
4. Анджапаридзе О.Г. Серопрофилактика и серотерапия вирусных инфекций в эксперименте и клинике. М.: Медицина, 1968. 195 с.
5. Антигенна активність вакцин проти вірусної геморагічної хвороби кролів / Л.Є. Корнієнко, Л.М. Корнієнко, О.Б. Домбровський та ін. // Проблеми вет. обслуговування дрібних домашніх тварин: Зб. матер. VI-ї Міжнар. наук.-практ. конф. К., 2001. С. 4043.
6. Антигенная активность промышленных серий инактивированной вакцины против ССЯ-76 в процессе хранения / В.В. Борисов, О.А. Борисова, В.Н. Ирза и др. // Науковий вісник НАУ. 2001. Вип. 36. С. 271274.
7. Антигенные свойтсва штамма вируса ящура типа А Армения/98 / В.М. Захаров, В.К. Спирин, А.И. Гриценко А.И. и др. // Соврем. аспекты вет. патологии животных. Владимир, 1998. С. 6871.
8. Антигенные свойства эпизоотических штаммов вируса ящура типов А и О / Л.Н. Соколов, Е.В. Гусева, В.А. Мищенко, В.К. Спирин // Науковий вісник НАУ. 2001. Вип. 36. С. 5357.
9. Антирабический гамма-глобулин, полученный из гиперимунной ослиной сыворотки / Ф.И. Рахимова, Г.С. Исматова, Е.М. Шахметова и др. // Актуальные проблемы мед. вирусологии. М. 1985. С. 157158.
10. Антитела. Методы. Кн. 1. Пер. с англ. Под ред О.В. Рохлина. М.: Мир, 1991. 287 с.
11. Антитела. Методы. Кн. 2. Пер. с англ. Под ред Ю.Ю. Венгерова. М.: Мир, 1991. 884 с.
12. Ассоциированная вакцина против реовирусного теносиновита и ньюкаслской болезни птиц / В.В. Ельников, С.К. Старов, Л.В. Вдовина и др. // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: 80 років ІЕКВМ. Вип. 80. Харків, :ІЕКВМ, 2002. С. 227230.
13. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. 179 с.
14. Бабкин А.Ф., Орлов С.Н. Влияние адъювантов на иммуногенность инактивированной бруцеллаовисной вакцины // Пробл. зооінженерії та вет. медицини. Вет. науки: Зб. наук. праць; Матер. 5-го з’їзду паразитоценологів України (56 квітня 2001 р., ХЗВІ). Харків, 2001. Вип. 7 (31). С. 312315.
15. Бабкин А.Ф., Орлов С.М. Експериментальне дослідження інактивованої емульсин-вакцини з ад’ювантом MONTANIDE ISA50 проти бруцела-
овісної інфекції // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: 80 років ІЕКВМ. Вип. 80. Харків: ІЕКВМ, 2002. С. 4750.
16. Бакулов И.А., Вишняков И.Ф., Семенихин А.Л. Вирусная геморрагическая болезнь кроликов (расшифровка этиологии, разработка методов диагностики и борьбы) // Ветеринария. 1992. № 78. С. 3032.
17. Бакуменко М.Д., Кучерявенко Л.И., Наумец З.П. Профилактика и лечение пневмоэнтеритов телят комбинированными препаратами на основе сыворотки крови // Ветеринарная медицина: экономические, социальные и экологические проблемы: Тез. докл. Республ. конф. Харьков, 1990. С. 177178.
18. Басова Д.К., Блотова Г.А., Диев В.И. Получение cпецифического антигена и гипериммунной сыворотки для диагностики оспы верблюдов // Ученые записки Витебской ГАВМ: Матер. III Междунар. научн.-практ. конф. 1999. Т. 35, ч. 1. С. 1112.
19. Баталова Т.Н., Чернохвостова Е.В. Получение и анализ антисывороток к легким цепям иммуноглобулинов человека // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1975. № 4. С. 5762.
20. Белявцева Е.А. Изучение влияния специфической иммунной сыворотки на формирование иммунитета у цыплят против инфекционного бурсита // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: Ветеринарна наука на порозі ХХІ віку. Вип. 78, т 1. Харків:ІЕКВМ, 2000. С. 1316.
21. Белявцева Е.А. Прменение сывороточных растворов селенита натрия при неонатальных диареях телят // Повышение продуктивности с/х животных и совершенствование мер борьбы с болезнями в условиях интенсивного ведения животноводства и создания фермерских хозяйств: Тез. докл. Всесоюз. науч. конф. Харьков, 1991. С. 107108.
22. Биологические свойства возбудителя эпизоотического лимфангита лошадей / А.А. Гусев, В.Д. Борзионов, О.И. Гетманский, Е.Г. Кузнецова // Соврем. Аспекты вет. патологии животных. Владимир, 1998. С. 124127.
23. Биохимия мембран. Кн. 9. Клеточные мембраны и иммунитет: Учеб. пособ. / Р.В. Петров, Р.И. Атауллаханов. Под ред. А.А. Болдырева. М.: Высш. шк., 1991. 144 с.
24. Блоцкая О.Ф. Эффективность различных адъювантов при получении диагностических энтеровирусных сывороток // Разработка и использование новых адъювантов для биотехнологических целей: Матер. семинара спец. стран-членов СЭВ. Владимир, 1990. С. 78.
25. Бодя К., Вртяк О.Я. Ветеринарная медицина ХХI века // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России: Сб. матер. науч. сессии РАСХН. М., 1999. Ч. 1. С. 8995.
26. Бондаренко А.Ф. Влияние формальдегида на комплементсвязывающую активность вируса ящура // Ящур: Тематический сборник научных работ ВНИЯИ. Т. 2. 1974. С. 209213.
27. Бондаренко А.Ф. Иммуногенность и компонентный состав суспензий вируса ящура: Автореф.дис. канд. вет. наук: 03.00.06/ ВНИЯИ. Владимир, 1974. 135 с.
28. Бондаренко А.Ф., Онуфриев В.П., Холин Ю.А. Влияние формальдегида на комплементсвязывающую активность вируса ящура // Ящур: Тем.сб.науч.работ Владимир, 1974.Т.2.С.209212.
29. Борисов В.В., Сурнев Д.С., Борисов А.В. Изучение иммунобиологических свойств масляных адъювантов монтанид ИЗА 70 и монтанид ИЗА 206 в составе инактивированной вакцины против синдрома гидроперикардита кур // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: Ветеринарна наука на порозі ХХІ віку. Вип. 78, т 1. Харків: ІЕКВМ, 2000. С. 2328.
30. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: М.: ООО Медицинское информационное агенство”. 2002. 736 с.
31. Будулов Н.Р. Иммунобиологические свойства герпесвируса лошадей 1 (ринопневмонии): Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / ВИЭВ. М., 1986. 24 с.
32. Бусол В.О., Морозова І.Я. Серопрофілактика лейкозу великої рогатої худоби у новонароджений період // Збереженість молодняка с/г тварин запорука розвитку тваринництва України: Зб. статей наук.-практ. конф. 1994. С. 7778.
33. Вакцинация новорожденных телят против ИРТ и ПГ-3 крупного рогатого скота / В.А. Мищенко, Ю.А. Костыркин, Н.А. Яременко и др. // Ветеринария. 2003. № 7. С. 79.
34. Вербицький П.І. Результати одержання гіперімунної сироватки проти вірусу хвороби Гамборо // Зб. наук. праць ЛДАУ. Луганськ, 1999. Сер. Ветеринарні науки. С. 810.
35. Вербицький П.І. Специфічна профілактика інфекційної бурсальної хвороби та інфекційного бронхіту при вирощуванні курчат // Вісник Сумського ДАУ. Суми, 1999. Вип. 4. С. 2729.
36. Вербицький П.І. Удосконалення заходів боротьби і профілактики інфекційної бурсальної хвороби в сучасних умовах ведення птахівництва України: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.08 / ІЕКВМ. Харків, 2000. 18 с.
37. Вершигора А.Е. Основы иммунологии. М.: Медицина, 1975. 232 с.
38. Верютина Н.А., Краснопольский Ю.М., Пустовар А.Я. Совершенствование схемы гипериммунизации лошадей-продуцентов для получения антирабического иммуноглобулина // Проблеми зооінженерії та ветеринарної медицини: Зб. наук. праць Харківського ЗВІ. Харків, 2000. С. 146148.
39. Вірусна геморагічна хвороба кроликів / Л.Є. Корнієнко, В.П. Главацький, Б.М. Ярчук та ін. Біла Церква, 2001. 64 с.
40. Вивчення лікувального ефекту гіперімунної сироватки проти чуми м’ясоїдних / М.В. Косенко, І.К. Авдосьєва, В.В. Регенчук та ін. // Збірник праць співробітників ДНДКІВПіКД. Львів, 1996. С. 4748.
41. Використання гіперімунних сироваток для пасивної імунізації проти інфекційних пневмоентеритів / А.М. Головко, В.Ю. Кассіч, В.О. Ушкалов, О.В. Волосянко // Сучасні проблеми ветеринарної медицини: Українська конф. молод. вчених. Київ, 1994. С. 35.
42. Використання ад’ювантів різного походження при приготуванні гіперімунних сироваток проти чуми м’ясоїдних та їх реактогенність / Л.М. Корнієнко, Б.М. Ярчук, Л.Є. Корнієнко, В.В. Власенко // Актуальні питання вет. патології: Матер. І-ї Всеукр. наук.-виробн. конф. К., 1996. С. 283284.
43. Використання реакції радіальної імунодифузії для посмертної діагностики чуми м’ясоїдних / Л.М. Корнієнко, Б.М. Ярчук, Л.Є. Корнієнко, В.В. Власенко // Актуальні питання вет. патології: Матер. І-ї Всеукр. наук.-виробн. конф. К., 1996. С. 128129.
44. Використання різних донорів і ад’ювантів для отримання гіперімунних сироваток проти вірусу чуми м’ясоїдних / В.В. Власенко, Б.М. Ярчук, Л.Є. Корнієнко, Л.М. Корнієнко // Вісник Білоцерків. держ. аграр. ун-ту. Вип. 1. Біла Церква, 1996. С. 810.
45. Випробування експериментальних серій інактивованої вакцини проти інфекційного бронхіту курей та синдрому зниження несучості / І.М. Сахацький, І.Ю. Безрукава, Л.І. Наливайко та ін. // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: 80 років ІЕКВМ. Вип. 80. Харків: ІЕКВМ, 2002. С. 666668.
46. Випробування лікувально-профілактичної ефективності сироватки антитоксичної і антиадгезивної проти сальмонельозу та ешерихіозу тварин / В.О. Ушкалов, А.М. Головко, Ю.В. Дідок, М.Є. Романько // Науковий вісник НАУ. Вип. 36. К., 2001. С. 154157.
47. Вірус чуми м’ясоїдних для приготування лікувальних препаратів / Б. Ярчук, Л. Корнієнко, Л. Корнієнко та ін. // Тваринництво України. 1997. № 11. С. 17.
48. Вірусна геморагічна хвороба кролів / В.М. Малинівський, І.К. Авдосьєва, І.Л. Мельничук, В.В. Регенчук // Проблеми вет. обслуговування дрібних домашніх тварин: Зб. Матеріалів V-ї Міжнар. наук.-практ. конф. К., 2000. С. 5758.
49. Вируснейтрализирующие антитела в сыворотках морских свинок, иммунизированных вирусом Эбола (штам Заир) / С.С. Новожилов, А.М. Титенко, Т.И. Борисова и др. // Москва: Деп. В ВИНИТИ 22.05.92. № 1699. В92. 13 с.
50. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина. М.: ВНИТИБП, 1998. 928 с.
51. Влияние адъювантов на характеристики сывороток для лабораторной диагностики болезней с везикулярным синдромом / Ж.А. Шажко, Н.С. Маслова, Л.Ф. Шажко и др. // Разработка и использование новых адъювантов для биотехнологических целей: Материалы семинара специалистов стран-членов СЭВ. Владимир, 1990. С. 3839.
52. Воробьев А.А. Идеи Луи Пастера и их развитие в области инфектологии и иммунологии // Вестник РАМН. 1996. № 5. С. 611.
53. Воробьев А.А. Взгляды на развитие иммунологии в первой половине XXI века // Вестник РАМН. 1999. № 5. С. 4852.
54. Воробьев А.А. Принципы классификации и стратегия применения иммуномодуляторов в медицине // Журнал микробиол, эпидемиол. и иммунобиол. 2002. № 4. С. 9398.
55. Выявление антигенов бруцелл методом ДОТ-иммуноанализа с использованием специфических антител, меченных частицами коллоидного золота / Т.Ю. Загоскина, А.И. Кальновский, Е.Ю. Марков и др. // Молекуляр. генетика, микробиология и вирусология. 1999. № 3. С. 2629.
56. Выявление ДНК вируса болезни Ауески гибридизацией с биотинилированными зондами / А.Г. Глотов, С.Ф. Орешкина, В.Н. Кувшинов, А.А. Ильичев // Ветеринария. 2001. № 2. С. 2124.
57. Герман І., Герман Є., Морозова І. Інфекційна анемія курчат // Вет. медицина України. 2001. № 3. С. 1617.
58. Герпесвирусные инфекции / О.И. Киселев, Г.Р. Виноградская, М.А. Сбукова, В.И. Руденко // Лекарственные препараты и ПЦР-мониторинг терапии. С.-Петербург: РИФ Роза мира”, 1999. 79 с.
59. Гизатуллин Х.Г., Ильясова Г.Х., Юсупов Р.Х. Возможность получения гипериммунной сыворотки на белых крысах для диагностики болезни Ауески // Учен. зап. Казанского. вет. ин-та. 1974. Т. 115. С. 8184.
60. Гіперімунні сироватки проти вірусу чуми м’ясоїдних / Б. Ярчук, Л. Корнієнко, Л. Корнієнко та ін. // Тваринництво України. 1997. № 3. С. 2021.
61. Головко А.М., Ушкалов В.О., Фукс П.П. Сироватка проти колібактеріозу молодняку сільськогосподарських тварин // Аграрна наука виробництву: Наук. інф. бюл. завершених наук. розробок. 1999. № 4. С. 24.
62. Голуб Ю.С. Каталог средств защиты животных. Киев: Асоциация Украгробиовет”, 2002. Вып. 1. 76 с.
63. Голуб Ю.С., Стеценко В.І. Пневмоентерити телят: високоефективна сироватка крові реконвалесцентів ефективний засіб для впливу на третю ланку епізоотичного ланцюга // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: Ветеринарна наука на порозі ХХІ віку. Вип. 78, т 1. Харків:ІЕКВМ, 2000. С. 6569.
64. Гонтарь А.М. Розробка експрес-методу індикації мікоплазм великої рогатої худоби: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / ІЕКВМ. Харків, 1997. 13 с.
65. Гогиташвили Г.С. Изменения состояния организма рогатого скота в процессе гипериммунизации специфическим пастереллезным антигеном: Автореф. дис. ...канд. вет. наук. / Грузинский зоотехническо-ветеринарный учебный институт. Тбилиси, 1967. 22 с.
66. Грачев В.Н., Клепцов Я.С. Освоение производства сыворотки против болезни Ауески // Труды научно-контрольного института вет. препаратов. 1953. Т. 4. С. 156.
67. Груздев К.Н., Селиванов А.В. Чума плотоядных. М.: Агропром-
издат, 1985. 80 с.
68. Гусаков В.В. Вдосконалення лабораторної діагностики грипу коней в реакції гальмування гемаглютинації: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / НАУ. Київ, 2000. 17 с.
69. Гутковський А.А., Андросик Л.Д. Антиентеротоксична гіперімунна сироватка проти колібактеріозу телят // Біотехнологія ветеринарних препаратів: Матер. наук.-практ. конф. Харків, 1993. С. 8687.
70. Гюллинг Э.В., Дюговская Л.А. Современные подходы к проблеме коррекции гипер-IgE антителогенеза // Физиол. журнал. 1982. № 4. С. 491495.
71. Давыдов О.В., Воронцова Т.В. Способ получения асцитических жидкостей // Открытия и изобретения. 1975. № 23. С. 3.
72. Деклараційний пат. 99042052 Україна, МПК 6 А61К39/085. Спосіб одержання антиадгезивної та антитоксичної сироватки проти сальмонельозів та ешерихіозів тварин / В.О. Ушкалов, А.М. Головко, Ю.В. Дідок (Україна)/ ІЕКВМ УААН. № 32341 А; Заявл. 13.04.99; Опубл. 15.12.2000; Бюл. № 7. 11. 2 с.
73. Дерев’янко С.В. Антигенні властивості ентеровірусів свиней: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 03.00.06 / ІМіВ ім. Д.К. Заболотного. Київ, 2001. 20 с.
74. Дерев’янко С.В. Одержання гіперімунних сироваток крові до ентеровірусів свиней, звільнених від культурального антигену // Наукові досягнення в галузі ветеринарної медицини: Матер. Міжнар. наук.-практ. конф. мол. вчених. Харків, 1997. С. 2122.
75. Депонування і паспортизація штаму вірусної геморагічної хвороби кролів / В. Прискока, Д. Котляр, Н. Палійчук та ін. // Вет. медицина України. 2000. № 8. С. 1819.
76. Деякі аспекти профілактики чуми м’ясоїдних у собак / Л. Корнієнко, Л. Корнієнко, В. Власенко та ін. // Вет. медицина України. 2000. № 10. С. 2021.
77. Диагностика и мониторинг губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота / С.С. Рыбаков, А.А. Рябоконь, А.А. Егоров и др. // Ветеринария. 2001. № 2. С. 1720.
78. Диагностика хламидийной инфекции сельскохозяйственных животных / А.Я. Самуйленко, С.С. Ямникова, Э.Ф. Токарик и др. // Науковий вісник НАУ. 2001. Вип. 36. С. 180184.
79. Диагностический препарат для иммуноферментного анализа антигена вируса бешенства / Н.А. Хисматуллина, М.Я. Зуева, И.Ф. Бусыгин и др. // Актуальные проблемы мед. вирусологии. М. 1985. С. 174.
80. Дибиров Ш.С., Карпов Г.М., Вишняков И.Ф. Получение сывороток свиней против вируса чумы плотоядных и их использование в диагностике данной болезни // Вирусные болезни сельскохозяйственных животных: Тезисы докл. Всеросс. науч.-практ. конф. Владимир, 1995. С. 62.
81. Дідок Ю.В. Фімбріальні адгезини та їх використання при конструюванні засобів специфічної профілактики сальмонельозу тварин: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / ІЕКВМ. Харків, 2001. 20 с.
82. Динамика образования антител к возбудителю ИРТ КРС при введении его кроликам / С.В. Кузнецова, А.А. Бойко, В.С. Иванов, П.П. Кузнецов // Ветеринария. 1988. № 4. С. 3536.
83. Дранник Г.Н., Гриневич Ю.А., Дизик Г.М. Иммунотропные препараты. Киев: Здоров’я, 1994. 286 с.
84. Дудников А.И. Перспективы использования адъювантов в противоящурных вакцинах // Разработка и использование новых адъювантов для биотехнологических целей: Материалы семинара спец. стран-членов СЭВ. Владимир, 1990. С. 36.
85. Дудников А.И., Захаров В.М., Дудников С.А. Основные факторы искоренения ящура // Ветеринарна медицина: Міжвідомч. темат. наук. зб. з матер. Міжнар. наук.-практ. конф.: 80 років ІЕКВМ. Вип. 80. Харків: ІЕКВМ, 2002. С. 215220.
86. Дудников А.И., Михалишин В.В., Дудников С.А. Факторы, обеспечивающие создание высокоэффективных противоящурных вакцин // Забезпечення вет. сан. благополуччя тваринництва, якості і безпеки продукції: Зб. матеріалів Міжнар. наук.-практ. конф. Одеса, 2004. Ч. 1. С. 5055.
87. Дудников Л.А. Разработка вакцины для ранней защиты сельскохозяйственных животных против ящура типов О, А, С и Азия-1: Автореф. дис... .канд. вет. наук: 16.00.03 / ВНИЯИ. Владимир, 1992. 26 с.
88. Душук Р.В., Азарян Л.С. Усовершенствованный стимулятор иммуногенеза // Информационный бюллетень ИЭКВМ. Харьков, 1995. С. 56.
89. Дяченко Н.С. Некоторые закономерности молекулярной биологии аденовирусов // Мікробіологічний журнал. 1999. Т. 61, № 1. С. 331.
90. Дяченко С.С., Синяк К.М., Дяченко Н.С. Патогенные вирусы человека. К.: Здоров’я, 1980. 445 с.
91. Еверт В. Порівняння методів одержання сироваток групових аглютинувальних лептоспірозних // Вет. медицина України. 2002. № 7. С. 45.
92. Експериментальна інфекція у цуценят, заражених вірусом чуми м’ясоїдних / В.В. Власенко, Л.М. Корнієнко, Л.Є. Корнієнко, Б.М. Ярчук // Розвиток вет. науки в Україні: здобутки та проблеми: Зб. матер. Міжнар. наук.-практ. конф. Харків: ІЕКВМ, 1997. С. 166.
93. Ерж Н.И. Иммунологические и стимулирующие свойства иммуноглобулинов // Повышение продуктивности с/х животных и совершенствование мер борьбы с болезнями в условиях интенсивного ведения животноводства и создания фермерских хозяйств: Тез. докл. Всесоюзн. научн. конф. Харьков, 1991. С. 118.
94. Ефективність гіперімунної сироватки при чумі м’ясоїдних у собак / В. Головаха, Л. Корнієнко, О. Дикий та ін. // Вет. медицина України. 1999. № 3. С. 18.
95. Ефективність гіперімунних сироваток при лікуванні чуми м’ясоїдних у собак / Б.М. Ярчук, Л.Є. Корнієнко, Л.М. Корнієнко, В.В. Власенко // Общая эпизоотология: иммунол., эколог. и методол. пробл.: Материалы Междунар. науч. конф. Харьков: ИЭКВМ, 1995. С. 648.
96. Ефективність вірус-вакцини Nobi-vac Puppi DP”(Нідерланди) для первинної вакцинації проти чуми / М.В. Косенко, І.К. Авдосьева, І.Л. Мельничук та ін. // Пробл. вет. обслуговування дрібних домашніх тварин: Зб. матер. 4-ї Міжнар. наук.-практ. конф. К., 1999.С. 9193.
97. Ефективнісь імунізації кролів проти вірусної геморагічної хвороби / Л.Є. Корнієнко, М.В. Сімоненко, Л.М. Корнієнко та ін. // Аграрні вісті. 2003. № 4. С. 1415.
98. Жансеркенова О.О. Реактогенные и антигенные свойства вакцин против кампилобактериоза крупного рогатого скота, приготовленной с различными адъювантами: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / ВИЭВ. М., 1992. 24 с.
99. Жансеркенова О.О., Трубицкий А.Н., Иренков И.П. Влияние различных адъювантов на антигенную активность и реактогенные свойства противокампилобактериозной вакцины // Бюл. ВНИИЭВ. 1991. Вып. 78. С. 1718.
100. Заболотня В.П. Біологічні властивості та клініко-епізоотологічне значення P.multocida в респіраторній патології телят: Автореф. дис. ...канд. вет. наук: 16.00.03 / ІЕКВМ. Харків, 2002. 19 с.
101. Заболотняя В.П. Изучение антигенных и вирулентных свойств полевых изолятов P.multocida // Науковий вісник НАУ. К., 2001. Вип. 38. С. 131134.
102. Законодавство України про ветеринарну медицину / За ред. П.П. Достоєвського та В.І. Хоменка. К.: Урожай, 1999. 592 с.
103. Зароза В.Г. Профилактика и лечение желудочно-кишечных болезней новорожденных телят. М.: ВНИИТЭИ, 1989. 57 с.
104. Застосування РЗК для індикації вірусу хвороби Ауєскі / В.С. Білокінь, В.О. Міщенко, Л.М. Корнієнко та ін. // Вісник аграрної науки. 1995. № 7. С. 8085.
105. Зелютков Ю.Г., Машеро В.А., Зайцев В.В. Коррекция иммунных процессов у новорожденных телят с инфекционным энтеритом гипериммунной сывороткой // Ученые записки Витебской ГАВМ: Матер. III Междунар. научн.-практ. конф. 1999. Т. 35, ч. 1. С. 5659.
106. Идентификация эпизоотических штаммов вируса ящура иммунными асцитическими жидкостями / А.З. Равилов, Ю.А. Черняев, Л.Н. Соколов, Н.С. Маслова // Ученые записки Казанского вет. института. 1974. Т. 115. С. 7276.
107. Изготовление бивалентной противоящурной сыворотки / В.И. Киндяков, А.Н. Баядинов, С.М. Филиппович, О.С. Никонова // Труды Алма-Атинского института ветеринарии. Алма-Ата, 1954. Т. 6. С. 205206.
108. Изготовление стабильных эритроцитарных диагностикумов из иммунных асцитических жидкостей и сывороток крови