КЛІНІКО-ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ОБГРУНТУВАННЯ ДІАГНОСТИКИ ПАСТЕРЕЛЬОЗУ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ І СВИНЕЙ : Клинико-экспериментальное обоснование ДИАГНОСТИКИ пастереллеза БОЛЬШОЙ рогатого скота и свиней

Краткое описание

НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ БІОРЕСУРСІВ І ПРИРОДОКОРИСТУВАННЯ УКРАЇНИ

На правах рукопису

ЯНЕНКО УЛЯНА МИКОЛАЇВНА

УДК 619 : 616.98:579.84:636.95 (078)
КЛІНІКО-ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ОБГРУНТУВАННЯ ДІАГНОСТИКИ ПАСТЕРЕЛЬОЗУ
ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ ХУДОБИ І СВИНЕЙ

16.00.03 ветеринарна мікробіологія та вірусологія

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук

Науковий керівник
Ушкалов Валерій Олександрович,
доктор ветеринарних наук,
старший науковий співробітник

Київ 2009

З М І С Т
ПЕРЕЛІК УМОВНИХ ПОЗНАЧЕНЬ, СИМВОЛІВ, ОДИНИЦЬ,
СКОРОЧЕНЬ І ТЕРМІНІВ 4

ВСТУП

5

Розділ 1 ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ

1. 1.

Сучасний стан вивчення пастерельозу сільськогосподарських
тварин (великої рогатої худоби та свиней)

11

1. 2.

Поширення пастерельозу

15

1. 3.

Нові тенденції перебігу пастерельозної інфекції серед
сільськогосподарських тварин

16

1. 4.

Діагностика пастерельозної інфекції

21

1. 5.

Профілактика пастерельозу сільськогосподарських тварин
(великої рогатої худоби і свиней)

26

1. 6.

Заключення

32

Розділ 2 МАТЕРІАЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕНЬ

34

2. 1.

Штами пастерел

35

2. 1. 1.

Методи відбору патологічного матеріалу

36

2. 1. 2.

Живильні середовища для культивування штамів пастерел

38

2. 1. 3.

Дослідження біохімічних властивостей штамів пастерел

39

2. 1. 4.

Типізація виділених штамів

40

2. 1. 5.

Визначення вірулентності дослідних штамів пастерел

42

2. 1. 6.

Визначення антилізоцимної активності пастерел

42

2. 2.

Дослідні тварини

45

2. 3.

Реакція аглютинації (РА)

45

2. 4.
2. 5.

Імуноферментний аналіз (ІФА)
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР)

46
47

2. 6.

Статистична обробка отриманих результатів

52

Розділ 3 РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ

3. 1.

Визначення специфічності та ефективності праймерів при виявлені ДНК Pasteurella multocida

53

3.1.1.

Визначення рівня гомології нуклеотидних послідовностей гена, що кодує рибосомальну ДНК Pasteurella multocida cероварів А(16-kDa), В (T7) та D (16 - cbF) і загальну нуклеотидну послідовність для P. multocida (КМТ-1)

53

3. 2.

Визначення ступеня чутливості полімеразної ланцюгової реакції

56

3. 3

Вивчення епізоотологічної ситуації господарств, які досліджувались під час виконання дисертаційної роботи

60

3. 3. 1.

3. 3. 2.

ВиявленняP.multocidaуВРХ,хвороїнаінфекційний
ринотрахеїт
Індикація Pasteurella multocida від свиней з ознаками інфекційного атрофічного риніту

60
62

3. 4.

Порівняння методів індикації P.multocida в патологічному ма-теріалі ВРХ та свиней

68

3.5

Вивчення морфологічних, культуральних, біохімічних, антигенних
та імуногенних властивостей пастерел, виділених з дослідного
матеріалу сільськогосподарських тварин (ВРХ і свиней)

75

3. 5. 1.

Використання сироватки крові великої рогатої худоби для культивування пастерел

81

3.6.

Застосування ПЛР для діагностики пастерельозної інфекції у сільськогосподарських тварин і порівняння її з іншими методами діагностики

83

3 .6. 1.

Застосування ПЛР аналізу для виявлення збудника пасте-рельозу від великої рогатої худоби

83

3. 6. 2.

Порівняння методу ПЛР з іншими методами діагностики при індикації збудника пастерельозу від великої рогатої худоби

85

3. 6. 3.

Застосування ПЛР для індикації збудника пастерельозу від свиней

88

3. 6. 4.

Порівняння методу ПЛР з іншими методами діагностики при індикації збудника пастерельозу свиней

90

3. 7
3. 8.

Виявлення тварин-пастерелоносіїв
Дослідження антилізоцимної активності Pasteurella multocida сероварів А, В і D, як одного із аспектів персистенції бактерій

96

98

3. 9.

Застосування методів індикації P. multocida з предметів довкілля, ґрунту, гною, кормів, продуктів боєнських відходів, стічних вод боєнь

103

Розділ 4 КОНТРОЛЬ ЕФЕКТИВНОСТІ ЛІКУВАЛЬНО-ОЗДОРОВ- ЧИХ ЗАХОДІВ ВІД ПАСТЕРЕЛЬОЗУ ВЕЛИКОЇ РОГАТОЇ
ХУДОБИ І СВИНЕЙ ЗА РЕЗУЛЬТАТАМИ ПЛР 111
Розділ 5 АНАЛІЗ ТА УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ 118

В И С Н О В К И

132

ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ

135

ДОДАТКИ

136

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ЛІТЕРАТУРНИХ ДЖЕРЕЛ

151

ПЕРЕЛІК УМОВНИХ ПОЗНАЧЕНЬ, СИМВОЛІВ, ОДИНИЦЬ,
СКОРОЧЕНЬ І ТЕРМІНІВ

Бак. Д. бактеріологічне дослідження
ВБ велика біла порода свиней
ВРХ велика рогата худоба
ВСЕ ветеринарна санітарна експертиза
ГОА гідроксидалюмінієва (вакцина)
ДНК дезоксирибонуклеїнова кислота
ЗАГ закрите акціонерне господарство
ІАР інфекційний атрофічний риніт
ІВМ інститут ветеринарної медицини
ІРТ інфекційний ринотрахеїт
ІФА імуноферментний аналіз
КСП колективне сільськогосподарське підприємство
МПА м’ясопептонний агар
МПБ м’ясопептонний бульйон
М.т./см мікробних тіл у 1 см
LD50 середня летальна доза
ПЛР полімеразна ланцюгова реакція
ПП приватне підприємство
РА реакція аглютинації
РДП реакція дифузної преципітації
P. multocida Pasteurella multocida
Тис. м. к. тисяч мікробних клітин
ТОВ товариство з обмеженою відповідальністю
УААН Українська академія аграрних наук

В С Т У П

Однією з основних умов успішного розвитку тваринництва є ефективна боротьба з інфекційними захворюваннями тварин і, зокрема, захист молодняка від респіраторних інфекційних хвороб [1, 2]. Серед інфекційних хвороб великої рогатої худоби та свиней, які завдають суттєвих економічних збитків, досить часто діагностується пастерельоз.
Недотримання санітарних умов утримання тварин і незбалансована та недостатня годівля спричиняють поширення пастерельозу серед здорового поголів’я в 3,9% випадків, а серед хворих із ураженням респіраторних органів у 6,7 % [3, 4].
Пастерели спричиняють виникнення низки асоційованих хвороб, які характеризуються нетиповим клінічним перебігом та патолого-анатомічними змінами [5, 6, 7]. Серед цих хвороб значного поширення набули респіраторні захворювання, етіологічна структура та специфічна профілактика яких потребують додаткових досліджень.
У зв’язку з цим вирішальне значення має своєчасна діагностика даного захворювання. Але саме діагностика пастерельозу, особливо легеневого прояву пастерельозної інфекції, становить виключну проблему для лабораторій ветеринарної медицини через те, що існуючі методи лабораторної діагностики застарілі, недосконалі та не відповідають сучасним вимогам.
Пастерельоз антропозоонозне захворювання, тому існує ризик інфікування персоналу, а робота з виділення збудника повинна проводитись у спеціальній лабораторії. Бактеріологічний метод трудомісткий і займає багато часу. У державних ветеринарних лабораторіях дослідження досить часто обмежуються тільки мікроскопією мазків-відбитків із дослідного патологічного матеріалу або від лабораторних тварин, на яких пасажувався збудник. Мікроскопічна діагностика в деякій мірі суб’єктивна, її результати залежать від якості виготовлених зразків. Культуральний і мікроскопічні методи дають можливість постановки лише групового діагнозу. Серологічні методи дослідження (РА, РДП, РНГА, ІФА, тощо) дають змогу отримання інди-відуального діагнозу, але вони не достатньо чутливі, бо потребують високої концентрації збудника в організмі та практично не ефективні на ранніх стадіях захворювання [8].
Отже, у нас час існує проблема пошуку альтернативних методів діагностики пастерельозу тварин, які б відповідали сучасним вимогам.
Актуальність теми. Однією з головних проблем промислового тваринництва є респіраторні хвороби молодняку великої рогатої худоби (ВРХ) та свиней інфекційної етіології, які характеризуються гострим або хронічним перебігом, розвитком катарального запального процесу в дихальних шляхах, різким зниженням продуктивності та значною смертністю. В країнах СНД протягом 19912003 рр. захворюваність тварин пневмоніями у господарствах становила 14,742,4 %, а смертність від них 6,713,9 % (Андросик Н. Н. та ін., 2003).
В останні роки легенева форма пастерельозу набула значного поширення в Україні, Росії, Білорусії, країнах західної Європи, і частіше реєструється як хронічна респіраторна патологія (Carty D. H., Porter D. B. et al., 1986; Литвин В. П., Олійник Л. В. та ін., 2000). Пастерельозна інфекція часто перебігає в асоціації з інфекційним ринотрахеїтом ВРХ, класичною чумою свиней, цирковірусною інфекцією другого типу (PRDC 2), репродуктивно-респіраторним синдромом свиней (PRRS), мікоплазмозами ВРХ і свиней. Хвороби змішаної етіології зумовлюють непередбачувану загибель сільськогосподарських тварин. Частота виділення пастерел від тварин, які мають клінічні ознаки пневмоній, досягає 7587 % (Thomson R., 1975; Verma N. D., Saxena C. S., 1987; Pijoan C., Fuentes M., 1987; Абрамов А., Пороло Л., 1996; Міланко О. Я., 1999; Заболотна В. П., 2002).
Аналіз вітчизняної літератури вказує на те, що єдиним поширеним методом лабораторної діагностики пастерельозу тварин є бактеріологічний метод. На жаль, усі ці дослідження досить громіздкі та тривалі (Leesley B. A., Cofner A. W., 1985; Москалюк В. І., Волинець Л. К., 1987; Foged N. T., 1992).
Лабораторна діагностика інфекційних захворювань сільськогосподарських тварин і людини поповнюється сучасними методами, такими як імуно-ферментний аналіз (ІФА) та полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) (Eamens G. J. et al., 1988), проте ці методи ще не набули широкого застосування в Україні.
А тому виникає необхідність у визначенні місця ПЛР у системі діагностики пастерельозної інфекції тварин. Необхідно враховувати, що головним аспектом серед заходів боротьби пастерельозу є своєчасна діагностика та виявлення тварин-пастерелоносіїв.
Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Дисер-таційну роботу виконано згідно з Державним планом науково-дослідних робіт Інституту ветеринарної медицини УААН інв. № 02.20 07 ”Розробити засоби діагностики, лікування та профілактики пастерельозу свиней”, державний реєстраційний номер 0197 U 012745.
Мета і завдання дослідження. Визначення місця ПЛР у системі діагностики пастерельозу; розробити ефективну схему оздоровчих заходів при пастерельозі ВРХ і свиней та впровадити її у ветеринарну практику.
Для досягнення цієї мети були поставленні такі завдання:
- провести порівняльний аналіз методів виявлення P. multocida у ВРХ і свиней;
- підтвердити етіологічне значення P. multocida при респіраторних захворюваннях ВРХ і свиней;
- вивчити морфологічні, культуральні, біохімічні та антигенні властивості штамів пастерел, виділених від ВРХ і свиней;
- одержати очищену сироватку крові ВРХ з метою використання її при культивуванні пастерел;
- дослідити рівень антилізоцимної активності P. multocida, як одного з критеріїв персистентності мікроорганізму;
- порівняти ефективність бактеріологічних досліджень і ПЛР при виявленні тварин-пастерелоносіїв;
- провести індикацію пастерел у кормах тваринного походження, ґрунті, гної, стічних водах боєнь і боєнських відходах з використанням різних методів досліджень;
- розробити схеми лікувально-оздоровчих заходів при пастерельозі сільськогосподарських тварин з контролем їх ефективності за допомогою ПЛР.
Об’єкт дослідження методи діагностики і профілактики пастере-льозної інфекції тварин.
Предмет дослідження: молекулярно-генетична тест-система для прижиттєвого виявлення P. multocida від ВРХ і свиней і з біологічного матеріалу.
Методи дослідження. У роботі використовували клініко-епізоото-логічні бактеріологічні, серологічні (РА та ІФА), молекулярно-генетичні (ПЛР) та статистичні методи (підрахунки середніх статистичних показників кількісних експериментальних даних, визначення рівня ймовірності отриманих результатів).
Наукова новизна одержаних результатів. Експериментально обґрунтовано і доведено ефективність застосування ПЛР для діагностики пастерельозу ВРХ і свиней. Підтверджена значна перевага ПЛР для індикації збудника хвороби порівняно із бактеріологічним методом лабораторної діагностики, вивчені біологічні властивості пастерел та іншої мікрофлори, виділеної з патологічного матеріалу від тварин, які загинули від ураження респіраторного тракту.
Визначено сероварну належність пастерел, які беруть участь в епізоотичному процесі легеневих форм пастерельозу ВРХ і свиней. Розроблено спосіб отримання очищеної сироватки крові ВРХ, як спеціаль-ного компонента при культивуванні пастерел.
Запропоновано спосіб визначення антилізоцимної активності Р. mul-tocida з використанням лісобакту (лізоциму хлориду).
Розроблено та відпрацьовано ефективні схеми лікувально-оздоровчих заходів при пастерельозі ВРХ і свиней, ефективність яких контролюється методом ПЛР.
Наукова новизна підтверджена деклараційними патентами № 21236 та № 14518/1
Практичне значення одержаних результатів. У практику роботи обласних, районних лабораторій державної ветеринарної медицини та в діяльність господарств впроваджені:
- методичні рекомендації Лабораторна діагностика пневмоній свиней” (затверджено науково-методичною радою Державного департаменту ветери-нарної медицини МінАПК України від 17. 12. 1999р., протокол № 2);
- Рекомендації з профілактики та оздоровлення свинарських господарств від пастерельозу” (затверджено науково-методичною радою Держав-ного департаменту ветеринарної медицини України від 17 грудня 1999 р., протокол № 17);
- Інструкція щодо контролю пастерельозу тварин” (затверджено науково-методичною радою Державного департаменту ветеринарної медицини МінАПК України, протокол № 4 від 2223 грудня 2004 р.);
- Настанова з лабораторної діагностики пастерельозу тварин та птиці” (затверджено науково-методичною радою Державного департаменту ветери-нарної медицини МінАПК України, протокол № 3 від 20. 12. 2006 р.);
- Спосіб отримання сироватки крові великої рогатої худоби для культивування пастерел” (деклараційний патент на корисну модель, затверд-жений 03. 10. 2006 р., № 21236);
- Спосіб визначення антилізоцимної активності бактерій P. multocida із використанням лісобакту (лізоциму хлориду)” (заявка на деклараційний патент корисної моделі, від 14. 10. 2008 р., № u 2008 09429 Вх. № 14518/1).
Особистий внесок здобувача. Здобувач особисто розробила напрями й схему експерименту, провела основні дослідження культурально-морфо-логічних, біохімічних і вірулентних властивостей виділених штамів. Розробку праймерів та діагностичні дослідження у ПЛР проводили спільно з науковим співробітником лабораторії молекулярної діагностики і ІФА ДНКІБШМ В.В.Кацимоном, співробітниками лабораторії бактеріології Національного науково-дослідного ветеринарного інституту (National Veterinary Research Institute) B.Borkowska-Opaska, I.Rukowska-Jurga (м. Пулави, Польща). Аналіз та узагальнення результатів, отриманих при виконанні експериментальної частини роботи, зроблені особисто. Самостійно здобувачем сформульовані основні положення та висновки дисертації.
Апробація результатів дисертації. Результати досліджень, за темою дисертаційної роботи, були заслухані та обговорені на засіданнях вченої ради та методичної комісії Інституту ветеринарної медицини УААН (19992003 рр.), на засіданні науково-методичної ради Державного комітету ветеринарної медицини України (17.12.99), на Міжнародній науково-практичній конфе-ренції „Розвиток ветеринарної науки в Україні: здобутки та проблеми” (м. Харків, 2426 вересня 1997 р.); Всеукраїнс

Список литературы

ВИСНОВКИ

Доведена ефективність застосування ПЛР для діагностики пастерельозу великої рогатої худоби та свиней. Експериментально обгрунтована домінуюча роль P. multocida в асоціаціях інфекційних агентів, які викликають респіраторні захворювання сільськогосподарських тварин і визначено їх сероварний склад. Вдосконалено методику прижит-тєвої діагностики пастерельозу. Запропоновано неспецифічні і специфічні засоби профілактики хвороби.
1. Експериментально доведено ефективність застосування ПЛР з метою виявлення пастерел в патологічному матеріалі від загиблих і вимушено забитих тварин. Так за допомогою ПЛР генетичний матеріалP. multocida виявляється від ВРХ (n =50) у 49 випадках (98,6 %), від свиней (n = 50) у 49 (99,4 %), тоді як за допомогою бактеріологічного методу у 41 (82,0 %) та у 44 (89,4 %) відповідно. Доведено доско-налість внутрішньовидової диференціації P. multocida за допомогою ПЛР. При дослідженні патологічного матеріалу сероварний склад був такий: серовар А 61,3 %, серовар D 38,7 %.
2. Ефективність ПЛР при індикації пастерел в пробах крові та слизу носової порожнини від хворих на бронхопневмонію телят становить 100,0 %, тоді як бактеріологічного методу 87,5 % (р ≥ 0,1). Ефективність застосування ПЛР при виявлені P. multocida із проб клінічного матеріалу від відлучених поросят з ознаками респіраторних захворювань становить 100,0 %, в той час як бактеріологічні дослідження були позитивними у 80,0 % випадків (р ≥ 0,1). Отримані дані дають підставу рекомендувати слиз носової порожнини тварин, як об`єкт прижиттєвої діагностики пастерельозу .
3. Основним бактеріальним агентом, який виявлявся при респіраторних захворюваннях у сільськогосподарських тварин, є P. multocida. Диференціація сероварів пастерел за допомогою праймерів ПЛР досить швидка (протягом 5 год.) та ефективна, тоді як серотипування на білих мишах тривале (до 5 діб) і трудомістке. При бронхопневмоніях телят переважають P. multocida серовари А (40,0 %) і D (60,0 %); у свиней А (55,0 %) та D (45,0 %) відповідно. P. multocida серовар В у дослідних зразках не виявлений.
4. Встановлено, що ІРТ ВРХ супроводжується бактеріальними асоціаціями такого складу: P. multocida (40,0 %), при внутрішньовидовій серотипізації значна частка належить серовару D (65,0 %); B. bronchiseptica (25,0 %); S. typhimurium (15,0 %); M. bovis (10,0 %); S. pyogenes (10,0 %). Від свиней з ознаками ІАР виділяється бактеріальна асоціація: P. multocida (57,0 %); B. bronchiseptica (35,0 %). При дослідженні 31 проби слизу носової порожнини свиней ПЛР у 83,87 % випадків виділено ДНК пастерел серовару А та у 90,32 % серовару D.
5. Встановлено, що пастерелам притаманна антилізоцимна актив-ність, що свідчить про потенційну можливість персистенції мікропор-ганізму. Найвищий рівень антилізоцимної активності (АЛА) P. multocida має серовар А 6 мкг/см3 референтного і 5 мкг/см3 епізоотичного штаму. АЛА P. multocida серовару D становить 6 мкг/см3, як референтного так і епізоотичного штаму, серовару В 3 мкг/см3.
6. При виявленні тварин-пастеролоносіїв доцільно використовувати ПЛР, так як за допомогою цього методу було виявлено 100,0 % прихо-ваних тварин-носіїв, в той час як за допомогою серологічних реакцій виявлено менше 50% випадків. Пастерелоносійство у 45,5 % випадків зумовлюють P. multocida сероварів А та D, які виявляються у клінічно здорових тварин.
7. Застосування ПЛР дозволяє виявити на 27,0 % більше контамінованих предметів довкілля (відвійок, ґрунту, гною, продуктів боєньких відходів, стічних вод боєнь), ніж бактеріологічними дослідженнями, що дає підстави використовувати ПЛР з метою виявлення можливих факторів передачі збудника.

8. Експериментально доведена можливість контролю впровад-жених лікувально-оздоровчих заходів при пастерельозі ВРХ і свиней за допомогою ПЛР. З цією метою індикацію збудника в біологічному матеріалі контрольо-ваних тварин проводять через 60 днів після впроваджених лікувально-оздоровчих заходів.

СПИСОК ВИКОРИСТАНИХ ЛІТЕРАТУРНИХ ДЖЕРЕЛ

1. Мазур Т.В.Вплив різних умов культивування на ріст вірулентних пастерел / Т. В.Мазур // Науковий вісник НАУ. 2001. № 3. С. 175-176.
2. Волинець Л. К. Поширення, економічні збитки та профілактика пастерельозу свиней / Л. К. Волинець, Т. В. Мазур, В. І. Москалюк // Вет. медицина України. 1997. № 8. С. 1617.
3. Факторні хвороби сільськогосподарських тварин / В. П. Литвин [та ін.] ; за ред. В. П. Литвина, Л. Є. Корнієнка. К.: Аграр. наука, 2002. С. 292 363.
4. МиланкоА. Я. Инфекционные пневмонии свиней (распространение, экономический ущерб, этиология, лабораторная диагностика, терапия, специфическая профилактика и меры борьбы) : автореф. дис. на соискание. научн. степени д-ра. вет. наук : спец. 16.00.03 «Ветеринарна мікробіологія та вірусологія» / А. Я. Миланко Полтава, 1999. 37 с.
5. Сорокин И. В. Экономический ущерб при пастереллёзе/ И. В. Сорокин, В. П. Зотов // Свиноводство. 1970. № 5. С. 34 38.
6. Абрамов А. В. Етіологічне значення асоціації пастерел, сальмонел, синьо-гнійної палички в інфекційній патології свиней // А. В. Абрамов, Л. Н. Пороло // Вет. медицина України. 1996. № 7. С. 30 - 31.
7. Андросик Н. Н. Этиологическая структура и специфическая профилактика респираторных болезней свиней // Н. Н. Андросик, Н. Д. Ан-дросик, Ю. Г. Лях // Науковий вісник НАУ. 2001. № 5. С. 65 - 67.
8. Павлов В. Н. Эпиозоотология пастереллёза свиней и меры борьбы с ним в условиях Иркутской области : автореф. дис. на соискание.научн. степени канд. вет. наук : спец. 16.00.03 Микробиология и вирусология” / В. Н. Павлов Новосибирск, 1977. 20 с.
9. Ilew T. Untersuchugen der Pasteurellen Danerauscheiding beim Goflugel/T. Ilew, R. Arcow, [et al.] // Acta Veter. Acad. setten hung. 1993. № 11. Р. 102.
10. Carty D. H. Preventing atrophic rhinitis, erysipelas and pasteurellosis in pigs / D. H. Carty, D. B.Porter,J. J Duglass, C. A. Slusser //Vet.Med. (Edwardville). 1986. Vol. 81, № 12. P. 1169 - 1174.
11. Thomson R. Investigation of Factors of Probabl signiticance in Patogenesis of Pneumonic Pasteurellosis in Catte / R. Thomson // Can. T. Comp. Mol. 1975. Vol. 39, № 2. P. 205 - 207.
12. Hamilton T. D. Effect of Ovalbumin Aerosol Exposure on Colonization of the Porcine upper Airway by Pasteurella multocida and Effect of Colonization on Subsequent Immune Function / T. D. Hamilton, J. M. Roe, C. M. Hayes and J. F Webster // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 1998. July. Vol. 5, № 4. P. 494 - 498.
13. Verma N. D. An outbreak of swift pasteurellosis on an organized farm of North-Eastern Hills Region / N. D. Verma, C. S. Saxena // Indian J. anim. Sc. 1987. Vol. 57, № 6. P. 528 - 532.
14. Мазур Т. В. Пастерельоз свиней. Розробка нових засобів діагностики і специфічної профілактики : автореф. дис. на здобуття наук. ступеня д-ра вет. наук : спец. 16.00.03 «Ветеринарна мікробіологія та вірусологія» / Т. В. Мазур. К., 2004. 38с.
15. Лях Ю. Г. Пастереллёз свиней в Белоруссии / Ю. Г. Лях. Минск: БИТ «Хата», 2002. 201 с.
16. Определитель бактерий Берджи: в 2х т. Т. 1 / под ред. Дж. Хоулта [и др.]. 9-е изд. М. : Мир, 1997. 432 с. Вergey S.V.
17. Шегидевич Э. А. Состояние и перспективы изучения пастереллёзов сельскохозяйственных животных / Э. А. Шегидевич // Сб. науч. тр. ВИЭВ «Актуальные проблемы ветеринарии в промышленном животноводстве». М, 1984. Т. 60. С. 58 - 63.
18. Пастереллёз свиней / В. И. Геведзе. Минск, 1979. С. 45.
19. Потоцький М. Патерельоз / М. Потоцький // Вет. медицина України. 1998. № 4. С. 24 25.
20. CarterG.R. Past.multocida et P.Haemolitica/ G. R. Carter // Advances in Veterinary Science. 1967. № 11. P. 371379.
21. Мазур Т. В. Деякі епізоотичні показники пастерельозу свиней та їх значення в проведенні оздоровчих заходів / Т. В. Мазур, В. І. Москалюк Л. К. Волинець // Матеріали міжнародної наук.-прак. конференції [Розвиток ветеринарної науки в Україна: здобутки і проблеми”], (Харків, 1987 р.) / Х, 1987. С. 125.
22. Головко А. Н. Борьба с болезнями молодняка приоритетное направ-ление ветеринарной науки / А. Н. Головко // Вет. медицина : міжвід. темат. наук. зб. Х., 1998. Вип. 75. С. 7378.
23. Gilmour N. J. Diagnosis of pasteurellosis in sheep / N. J Gilmour, J. S. Gil-mour // In. Pract. 1985. Vol. 7, № 5. P. 145 149.
24. Stein A. A. Pasteurella multocida Septicaemia / A. A. Stein, V. F. Blevins, D. I. Armstrong // Iama. 1983. Vol. 249, № 4. P. 508509.
25. Namioca S. Serological Studies on Past.multocida. IV Type Distribution of the organism on the bases of Their Capsule o Croups / S. Namioca, D. W. Bruner // Cornell Vet. 1963. Vol. 29, № 33. P. 41.
26. Мазур Т. В. Випадки пастерельозної пневмонії свиней в господ-дарствах Полісся / Т. В. Мазур // Вет. медицина України. 1998. № 10. С. 29 31.
27. Калпакчиева Й. Участие на пастьорели в респираторните инфекции / Й. Калпакчиева, С. Пушкарів // Ветер. сб. 1987. Т. 85. № 3. С. 3234.
28. Джупина С. И. Особенности течения пастереллёза у животных в Западной Сибири / С. И. Джупина, А. А. Колосов // Ветеринария. 1992. № 5. С. 37 40.
29. Martinez A. Reproduction experimental de pneumonia Past. multocida typo A en cardos / A. Martinez, O. Fuentes, C. Bulnes, V. Perdoso // Rev. Salud. anim. 1988. Vol. 10, № 2. P. 98 105.
30. Волинець Л. К. Пастерелоносійство у свиней / Л. К. Волинець, Т. В. Мазур, В. І. Москалюк, Т. В. Кузьменко, Т. В. Тарасюк // Зб. наук. праць за матеріалами конференції [Наукова спадщина Луї Пастера і ветеринарна медицина України (до 175-річчя від народження Луї Пастера)”]. Рівне,1998. С. 25 26.
31. Шапошникова Е. К. Пастереллёз в свиноводческом хозяйстве про-мышленного типа / Е. К. Шапошникова. // Ветеринария. 1989. № 9. С. 41.
32. Pijoan C. Severe pleuritis associated with certain strains of Past. multocida in swine / C. Pijoan, M. Fuentes // J. Am. Vet. Med. Assoc. 1987. Vol. 191, № 7. P. 823 826.
33. Neumann R. Experimentell Untersuchengen zur Wirkung liner chronischen Schadgasbelast ung Saugterkels mit Ammoniak unter schiedlicht konze-ntrationen. 1 Das klinische Bild № H3 exponieter Saugferkel unter den Bedin-gungen. 3 tellen P. multocida infection mit und ohne thermomotorische Belastung / R. Neu-mann, G. Mehlhorn, W. Leonhard // J. Vet. Med. Ser. B. 1987. Vol. № 5. § 3. Р. 183 196.
34. Leesley B. A. Saline extracted antigens of Past. multocida: separation by chromatofotusing, preliminary characterization and evaluation of immuno-geniticity / B. A. Leesley, A. W. Cofner,D. F.Vosier // Vet. Immunopathol. 1985. Vol. 7, № 23. P. 279 296.
35. Foged, N. T. Pasteurella multocida toxin. The characterization of the toxin and its significance in the diagnosis and prevention of progressive atrophic rhinitis in pigs / N. T. Foged // Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. 1992. № 100 (Suppl. 25). P. 1 56.
36. Borkowska-Opaska B. Determination of the serotypes of Pasteurella multocida strains isolated from rabbits / B. Borkowska-Opaska, I. Rukowska-Jurga, M. Truszczynski // Bull. Vet. Inst. Pulawy. 1995. № 3. P. 109 113.
37. Геведзе В. И. Влияние природно-климатических факторов на воз-никновение и распространение пастереллёза / В. И. Геведзе, Э. И. Вайсман // Вет. наука производству. Т. ХІІ. Минск, 1974. С. 62 67.
38. Душук Р. В. Иммуногенность вакцин против пастереллёза свиней / Р. В. Душук, З. П. Белкин, Г. П. Єгорова. и др. // Ветеринария. 1997. № 10. С. 18 20.
39. Phillips M. Protection by ribosomal vaccines from Past. multocida: dependants on homologous lipopolysaccharide / M. Phillips, R. Rimler // Am. Vet. Res. 1984. Vol. 45, № 5. P. 17851789.
40. Русалиев В. С. Бактериальные вакцины в свиноводстве / В. С. Ру-салиев, В. М. Гневашев, О. В. Грунтова // Ветеринария. 2001. № 6. С. 18.
41. Eamens G. J. Identification of oxygenic Past. multocida in atrophic rhinitis of pings by in vitro characterization / G. J. Eamens, P. D. Kirkland, V. J. Tur-ner // Austral. Veter. J. 1988. Vol. 65. P. 120 123.
42. Svarcova J. Microby agens pri respiracnim onemocueni / J. Svarcova // Veterinarstivi. 1984. Vol. 34, № 1. P. 30 31.
43. Rutter J.M. The ease and control of atrophic rhinitis in pigs / J. M. Rut-ter, N. M. Canter // Abstracts as World Vet. Corn. Montreal. 1987. Vol.60. P. 295.
44. Максимов Н. А. Этиологическое и эпизоотологическое значение пастерел при смешаных респираторных инфекциях крупного рогатого скота : автореф.дис. на соиск. науч. степени д-ра вет. наук : спец. 16. 00. 03. «Ветери-нарная микробиология и вирусология» / Н. А. Максимов. М., 1998. 42 с.
45. Ruschoff B. Distribution of a dermonecrotic crude toxin preparation from Past. multocida serotype D in rats / B. Ruschoff, W. Hartmans, K. Petzoldt // J. Vet. Med. Ser. B. 1987. Vol. 34, № 9. P. 691 700.
46. Кереселидзе М. Г. Эпизоотические особенности пастереллеза сви-ней в условиях Грузии и усовершенствование мер борьбы с ним. : автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. вет. наук : спец. 16.00.03 Мікробіологія і вірусологія” / М. Г. Кереселидзе Тбилиси, 1992. 13 с.
47. Экономически значимые болезни бактериальной этиологии, методы их диагностики и средства профилактики / А. А. Шевцов, В. С. Русалеев, Ф. А. Ширяев, А. В. Потехин // Ветеринария. 2004. № 9. С. 41
48. Притулин Н. И. Роль пастерел и бордетел в этиологии инфек-ционного атрофического ринита свиней / Н. И.Притулин, Л. И. Карелин // Ветеринария. № 12. 1967. 67 71.
49. Маммов Н. А. Пастереллёз животных: // Текст лекции / Моск. гос. акад. ветеринар. медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина. М.: МГАВМИБ, 1995. 25 с.
50. Лях Ю. Г. Эпизоотология и специфическая профилактика пасте-реллёза свиней, обусловленного Past. multocida сероварами A и D : автореф. дис. на соискание науч. степени доктора вет. наук : спец. 16.00.03. «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» / Ю. Г. Лях Минск, 2003. 36 с.
51. Мырзахметулы Намет Айдар Иммунопрофилактика пастереллеза лошадей : автореф. дис. на соискание науч. степени доктора вет. наук : спец. 16.00.03 «Ветеринарная микробиология и вирусология» / Намет Айдар Мырзахметулы. Алма-Аты, 2006. 30 с.
52. Москалюк В. І. Епізоотологічна діагностика та профілактика пасте-рельозу свиней : автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. вет. наук : спец. 16.00.03 Ветеринарна мікробіологія та вірусологія” / В. І. Москалюк. Київ, 2002. 12 с.
53. Міланко О. Я. Епізоотологічна та етіологічна структура респіраторних захворювань свиней / О. Я. Міланко, Н. А. Авраменко, О. О. Міланко // Вет. медицина України. 1999. № 7. С. 17 18.
54. Миланко А. Я. Инфекционные пневмонии свиней (распростра-ненность, экономический ущерб, этиология, лабораторная диагностика, терапия, специфическая профилактика и меры борьбы) : автореф. дис. на соискание науч. степени доктора вет. наук : спец. 16.00.03 Ветеринарная микробиология и вирусология” / А.Я. Миланко Полтава, 1990. 37 с.
55. Hellman E. Yur kultorellen und morphologieschen differeneyierung der P. multocida / E. Hellman // Yentrallblad fur Veter. Med. 1959. Vol. 6, № 8. S. 781 795.
56. Grehn Michael. The oxidase reaction of Pasteurella multocida strains cultured on MuellerHinton medium / Michael Grehn, Franco Müller // Journal of Microbiological Methods. 1989. Vol. 3, № 4. P. 333336.
57. GarciaV. F. Animal bites and Pasteurella infections / V. F. Garcia // Pediatr. Rev. 1997. № 18. Р. 127 130.
58. Куриленко А. Н. Бактериальные и вирусные болезни молодняка сельскохозяйственных животных : учебник / А. Н. Куриленко, В. Л. Кру-пальник, Н. В. Пименов. М. : Колос. 2006. 296 с.
59. Никифорова Н.М. Пастереллёзы / Н.М. Никифорова, А. В. Лукьян-ченко. Ветеринарные препараты. Учебн. пособие. Москва : Колос. 1981. С. 236 241.
60. Цион Р. А. Дифференционная диагностика болезней свиней / Р. А. Цион. Ленинград : Колос. 1970. 96 с.
61. Бакулов И. А. Руководство по общей эпизоотологии / И.А. Бакулов. М.: Колос, 1979. 424 с.
62. Lugtenberg B. Atrophic rhinitis in swine: Correlation of Pasteur.multocida pathogenenicity myth membrane protein and lipopolysacharide patterns / B. Lug-tenberg, R. van Boxtel, M. Jong // Im fest. immun. 1984. Vol. 46, № 1. P. 48 54.
63. Шапошникова Е. К. Пастереллёз в свиноводческом хозяйстве промышленного типа / Е. К. Шапошникова // Ветеринария. 1989. № 9. С. 41.
64. Лях Ю. Г. Клиническое и паталогоанатомическое проявление легочного пастереллеза свиней в хозяйствах Республики Беларусь / Ю.Г. Лях, Н. Н. Андросик // Тезисы научн. практ. конф., посвященной 45 - летию Гродне