Чепанов Сергей Владимирович. Клинико-лабораторная оценка эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при акушерской патологии

Короткий опис

Чепанов Сергей Владимирович. Клинико-лабораторная оценка эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при акушерской патологии: диссертация ... кандидата Медицинских наук: 14.03.10 / Чепанов Сергей Владимирович;[Место защиты: ФГБУ Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины имени A.M. Никифорова Министерства Российской Федерации по делам гражданской обороны, чрезвычайным ситуациям и ликвидации последствий стихийных бедств (...)], 2017

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт акушерства гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
На правах рукописи
ЧЕПАНОВ СЕРГЕЙ ВЛАДИМИРОВИЧ
КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ОЦЕНКА ЭНДОТЕЛИОПРОТЕКТИВНОГО ЭФФЕКТА ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ДЛЯ ВНУТРИВЕННОГО ВВЕДЕНИЯ
ПРИ АКУШЕРСКОЙ ПАТОЛОГИИ
14.03.10-клиническая лабораторная диагностика
ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Сельков Сергей Алексеевич
Санкт-Петербург 2017
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 11
Эндотелий общая характеристика, морфология, развитие, функции 11
1.2 Эндотелиальная дисфункция 12
1.3 Антифосфолипидный синдром в акушерско-гинекологической практике 14
1.4 Патофизиологические механизмы клинических проявлений АФС 17
1.5 Эндотелиальная дисфункция при антифосфолипидном синдроме 19
1.6 Антифосфолипидные антитела. Трудности лабораторной диагностики 21
1.7 Подходы к терапии АФС 26
1.8 Применение иммуноглобулинов для внутривенного введения при антифосфолипидном синдроме, механизмы протективного действия 29
1.8.1 ВВИГ: характеристика препаратов 29
1.8.2 Показания к применению ВВИГ 30
1.8.3 Механизмы иммуномодулирующего и цитопротективного действия ВВИГ 32 Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 37
2.2 Культура клеток 38
2.3 Исследование содержания аутоантител и маркеров эндотелиальной дисфункции в сыворотке периферической крови 39
2.4 Определение агрегационной активности тромбоцитов 40
2.5 Оценка цитопатического эффекта сывороток периферической крови женщин в отношении эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 41
2.6 Влияние ВВИГ на изменение чувствительности эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 к цитопатическому эффекту сыворотки крови 42
2.6.1 Определение минимальной токсической дозы препарата иммуноглобулинов для внутривенного введения 43
2.6.2 Оценка цитопротективного эффекта препарата ВВИГ в отношении эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 43
2.7 Оценка связывания иммуноглобулинов класса G, входящих в препарат ВВИГ, с эндотелиальными клетками линии EA.Hy926 44 
2.8 Статистический анализ
45
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 47
3.1 Содержание аутоантител к кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу, фосфатидиловой кислоте, р2-гликопротеину-1, аннексину 5, протромбину у женщин с физиологически протекающей беременностью и женщин с привычным невынашиванием беременности 47
3.2 Результаты сравнительного анализа метода ИФА и иммуноблота для выявления аутоантител, ассоциированных с АФС 49
3.3 Оценка показателей тромбоцитарного гемостаза 50
3.4 Содержание маркеров эндотелиальной дисфункции sICAM-I, эндотелина-1, тромбомодулина, сывороточного аннексина 5 и фактора Виллебранда в сыворотке периферической крови женщин с физиологически протекающей беременностью и женщин с привычным невынашиванием беременности 51
3.5 Цитопатический эффект нативной сыворотки периферической крови женщин с физиологически протекающей беременностью и женщин с привычным невынашиванием беременности в отношении эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 54
3.6 Цитопатический эффект инактивированной сыворотки периферической крови женщин с привычным невынашиванием беременности в отношении эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 56
3.7 Разработка метода оценки эндотелиопротективного эффекта препарата
иммуноглобулинов для внутривенного ведения 59
ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ИССЛЕДОВАНИЯ 68
ВЫВОДЫ 80
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 82
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ 82
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 83
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 84 
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования. Повреждение эндотелия является основой целого ряда аутоиммунных патологий, некоторые из которых имеют большое значение в развитии осложнений беременности. Среди аутоиммунных нарушений, приводящих к потере беременности, ведущее место занимает антифосфолипидный синдром (АФС) [3, 17, 22]. К настоящему времени хорошо изучены проявления антифосфолипидного синдрома при беременности. Показана важная роль органонеспецифических аутоантител, направленных против плазменных протеинов, способных связываться с отрицательно заряженными фосфолипидами клеточных мембран тромбоцитов и клеток эндотелия в развитии тромбофилических осложнений, нередко заканчивающихся преждевременными родами и выкидышами [2, 22]. Разработаны критерии постановки диагноза АФС. Это клинические критерии, включающие сосудистые тромбозы и акушерскую патологию и лабораторные критерии: определение антител к кардиолипину, р2- гликопротеину-I и выявление «волчаночного антикоагулянта» [106].
В патогенезе антифосфолипидного синдрома большое значение придаётся развитию эндотелиальной дисфункции [10]. Эндотелий является источником целого ряда медиаторов, участвующих в регуляции сосудистого тонуса, свертывания крови, миграции лейкоцитов [9]. Занимая уникальное положение на границе между циркулирующей кровью и тканями, эндотелий находится под постоянным воздействием агрессивных факторов системного кровотока (антифосфолипидные антитела (АФА), гипоксия, компоненты комплемента и др.), что приводит к развитию его дисфункции. Именно на поверхности эндотелия развиваются наиболее драматические события, приводящие к активации коагуляционного каскада, нарушению микроциркуляции, итогом которых являются патологические процессы, вызывающие органные нарушения, а в случае беременности - к её прерыванию. Проявлениями дисфункции эндотелия являются дисбаланс между различными эндотелиальными медиаторами (вазодилататоры - вазоконстрикторы, анти- и прокоагуянты), гиперэкспрессия клеточных молекул адгезии ICAM [126], увеличенный выброс вазоконстрикторных субстанций, повышающих сосудистый тонус, агрегацию тромбоцитов и свертывание крови, таких как эндотелин-1, тромбоксан [101]. Это приводит к усиленной адгезии и агрегации тромбоцитов, внутрисосудистому тромбозу в маточно-плацентарном комплексе и развитию клинических проявлений антифосфолипидного синдрома [150]. На сегодняшний день не существует прямых лабораторных методов оценки развития дисфункции эндотелия. Судить о данном состоянии возможно только косвенно, по оценке маркеров, выделяемых эндотелием при его повреждении. Актуальным является разработка прямых методов диагностики дисфункции эндотелия.
Оптимальным для профилактики повторных потерь плода, а также венозных и артериальных тромбозов считается сочетанное применение низких доз ацетилсалициловой кислоты и низкомолекулярных гепаринов [42]. Но, даже при проведении такой терапии, неблагоприятные исходы беременности у женщин с АФС до сих пор варьируют в пределах 20-30% случаев [59]. Наиболее эффективным методом терапии антифосфолипидного синдрома при беременности является использование иммуноглобулинов для внутривенного введения (ВВИГ) [67, 141], поскольку использование других препаратов, в частности, подавляющих синтез аутоантител, при беременности, ограничено. Антифосфолипидный синдром на сегодняшний день не включен в список показаний к применению иммуноглобулинов для внутривенного введения, их использование при данной нозологии находится за пределами инструкций («off-label») [27], так как имеющиеся данные пока еще не дают однозначного ответа на вопрос об использовании этих препаратов при данном виде патологии [52, 85].
Использование ВВИГ на сегодняшний день при АФС носит рекомендательный характер (информационное письмо НЦ АГиП им. В.И. Кулакова Минздравсоцразвития РФ «Применение иммуноглобулинов для внутривенного введения в акушерской практике» [22]. Поэтому актуальным является проведение дополнительных исследований для обоснования использования ВВИГ при АФС.
Одним из механизмов действия иммуноглобулинов для внутривенного введения является их модулирующее влияние на иммунокомпетентные клетки, в частности Т-регуляторные лимфоциты, индукцию толерантности к аллоантигенам плода, снижение пролиферации В-лимфоцитов и цитотоксических Т-лимфоцитов [30]. Одним из важных свойств ВВИГ является защита эндотелия сосудов от повреждающего действия различных факторов системного кровотока. Иммуноглобулины для внутривенного введения за счёт своих достаточно крупных размеров и конфигурации способны «прикрывать» отрицательно заряженные фосфолипиды мембран клеток («зонтичное» прикрытие), препятствуя связыванию антифосфолипидных антител с протеин-фосфолипидными комплексами, предупреждая повреждение эндотелия [39].
Учитывая разноречивые данные об эффективности ВВИГ при терапии АФС [145], актуальным является создание лабораторной модели, позволяющей прогнозировать эффективность действия препарата, для принятия решения о целесообразности его использования у конкретного пациента, как при терапии женщин с привычным невынашиванием беременности и диагностированным антифосфолипидным синдромом, так и при терапии других заболеваний, связанных с повреждением эндотелия и формированием эндотелиальной дисфункции.
Степень разработанности темы. К настоящему времени хорошо изучены проявления антифосфолипидного синдрома при беременности. [16;22]. Развитию и коррекции тромбофилических состояний, связанных с активацией тромбоцитарного звена гемостаза при АФС посвящено много работ, а развитию эндотелиальной дисфункции, играющей важную роль в патогенезе антифосфолипидного синдрома, уделяется мало внимания. При использовании стандартных методов терапии АФС наблюдается высокий процент неблагоприятных исходов беременности [59]. Одним из эффективных и наиболее обсуждаемых методов терапии АФС является использование иммуноглобулинов для внутривенного введения [27].
Целью работы явилась оценка лабораторных критериев эндотелиальной дисфункции и разработка метода прогнозирования эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения у женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС.
Задачи исследования:
1. Определить спектр антифосфолипидных антител, у женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС.
2. Оценить содержание маркеров эндотелиальной дисфункции в сыворотке крови женщин с физиологически протекающей беременностью и женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС.
3. Охарактеризовать цитопатическое действие сывороток крови женщин с физиологически протекающей беременностью и женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС на эндотелиальные клетки линии EA.Hy926.
4. Оценить влияние ВВИГ на изменение чувствительности эндотелиальных клеток линии EA.Hy926 к цитотопатическому эффекту сывороток крови женщин с физиологически протекающей беременностью и женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС.
5. Разработать метод лабораторной оценки дисфункции эндотелия для определения показаний к использованию ВВИГ. Оценить клиническую эффективность данного метода у женщин с привычным невынашиванием беременности для профилактики преждевременного прерывания беременности.
Научная новизна исследования. Впервые получены данные о защитном влиянии иммуноглобулинов для внутривенного введения при воздействии на эндотелиальные клетки сывороток крови беременных женщин с привычным невынашиванием, в том числе с повышенным титром антифосфолипидных антител.
Разработан метод прогнозирования эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при терапии женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС (патент на изобретение №2548754 зарегистрирован в Государственном реестре изобретений Российской Федерации от 24 марта 2015 г.).
Теоретическая и практическая значимость. В результате проведенных исследований показано прямое цитопатическое действие сывороток крови женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС в отношении эндотелиальных клеток.
Разработанный лабораторный метод позволяет обеспечить индивидуальный терапевтический подход к пациенту и принять решение о целесообразности использования препарата ВВИГ при терапии женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС. Разработанные критерии прогнозирования цитопротективного эффекта ВВИГ могут быть использованы и при терапии других заболеваний, связанных с повреждением эндотелия и формированием эндотелиальной дисфункции.
Методология и методы исследования. Диссертационная работа основана на обследовании 561 женщины репродуктивного возраста. Для реализации цели исследования были использованы культуральный, иммуноферментный метод и метод проточной цитофлюорометрии, проведен статистический анализ результатов исследования.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
1. Привычное невынашивание беременности, ассоциированное с АФС, характеризуется увеличением частоты аутоантител к кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу, фосфатидиловой кислоте, Р2- гликопротеину-I, аннексину 5, протромбину. С высокой частотой у женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС выявляются маркеры
дисфункции эндотелия: тромбомодулин, растворимая форма молекулы
межклеточной адгезии (sICAM-I), аннексин 5, фактор Виллебранда.
2. Сыворотки периферической крови женщин с привычным невынашиванием беременности оказывают цитопатическое влияние на клети эндотелия, что может приводить к его повреждению и формированию прокоагулянтной активности, повышению риска развития тромбообразования и в итоге - к прерыванию беременности.
3. Иммуноглобулины для внутривенного введения защищают эндотелиальные клетки от цитопатического действия сывороток крови женщин с привычным невынашиванием беременности, в том числе на фоне АФС.
4. Разработанный метод оценки эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при воздействии сывороток крови женщин с привычным невынашиванием беременности позволяет прогнозировать клиническую эффективность ВВИГ при лечении заболеваний, связанных с эндотелиальной дисфункцией.
Степень достоверности и апробация результатов исследования.
Достоверность полученных результатов подтверждается достаточным объемом материала, использованием современных методов исследования и оборудования.
Материалы диссертационной работы представлены на III ежегодной научной конференции молодых ученых и специалистов «Репродуктивная медицина: взгляд молодых - 2012» (Санкт-Петербург 2012 год), XIII-ом Всероссийском научном форуме «Мать и дитя» (Москва 2012 год), Всероссийской научной конференции «Лабораторная диагностика в фундаментальной и клинической медицине», посвященная 175-летию со дня рождения А.Я. Данилевского (Санкт-Петербург 2013 год), IV-ой ежегодной научной конференции молодых ученых и специалистов «Репродуктивная медицина: взгляд молодых-2013» (Санкт-
Петербург 2013 год), II-ом национальном конгрессе «Дискуссионные вопросы современного акушерства» (Санкт-Петербург 2013 год), на IV-ом национальном конгрессе «Дискуссионные вопросы современного акушерства» (Санкт-Петербург
2015 год).
Работа поддержана грантом правительства Санкт-Петербурга для молодых ученых, молодых кандидатов наук вузов, отраслевых и академических институтов, расположенных на территории Санкт-Петербурга - 2015 год.
Разработанный метод «Оценка протективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения» внедрен в диагностическую работу лаборатории клинической иммунологии и работу дородового отделения ФГБНУ «НИИАГиР им. Д.О. Отта»
По теме диссертационной работы опубликовано 15 научных работ, 9 из которых в изданиях, определенных ВАК для опубликования основных научных результатов диссертации.
Личный вклад автора в исследование. Автором самостоятельно выполнены все экспериментальные исследования, проведен анализ полученных результатов. В ходе выполнения работы проведен обзор современной отечественной и зарубежной литературы, выполнена статистическая обработка и анализ полученных данных, сформулированы выводы.
Структура и объем диссертации. Материалы диссертации включают введение, обзор литературы, описание материалов и методов, полученные результаты, обсуждение, общее заключение, выводы, список сокращений и список литературы. Текст диссертации изложен на 100 страницах, содержит 10 таблиц и 6 рисунков. Список литературы состоит из 159 работ. Работа выполнялась в соответствии с планом научно-исследовательской работы ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»

Список літератури

ВЫВОДЫ
1. У женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС выявлялись антитела к р2-гликопротеину-! в 37,1% случаев, антитела к кардиолипину - в 14,3% случаев, антитела к фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу и фосфатидиловой кислоте - в 7,1% случаев, антитела к аннексину 5 - в 29,9% случаев, антитела к протромбину - в 2,6% случаев, волчаночный антикоагулянт определялся в 42,8% случаях.
2. В сыворотке периферической крови женщин с привычным невынашиванием беременности уровень маркеров эндотелиальной дисфункции тромбомодулина, фактора Виллебранда, растворимой формы молекулы межклеточной адгезии (sICAM-I) и сывороточного аннексина 5 был выше, чем у женщин с физиологическим течением беременности (p<0,001). Уровень тромбомодулина и фактора Виллебранда был выше у женщин с ПНБ с АФС по сравнению с уровнем этих же маркеров у женщин с ПНБ без АФС (p<0,05).
3. Цитопатический эффект сывороток крови наиболее выражен у женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС 54,2% {44,5;66,3}, по сравнению с цитопатическим эффектом сывороток крови женщин без АФС 40,2% {34,5;52,3}, p<0,001 и сывороток крови женщин с физиологическим течением беременности 13,5% {3,9;22,6}, p<0,001.
4. Иммуноглобулины для внутривенного введения оказывали эндотелиопротективный эффект, характеризовавшийся снижением цитопатического влияния сывороток периферической крови в отношении эндотелиальных клеток после обработки их препаратом ВВИГ: у женщин с привычным невынашиванием беременности без АФС на 71,5% {57,4;84,2}, у женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС на 70,1% {50,0;82,4}.
5. Разработанный метод лабораторной оценки эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения с определением цитопротективного коэффициента, позволяет прогнозировать клиническую эффективность их применения у женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС.
6. Терапия женщин с привычным невынашиванием беременности и АФС препаратами иммуноглобулинов для внутривенного введения приводила к снижению числа преждевременных родов на 36%.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Женщинам с привычным невынашиванием в период планирования беременности необходимо определять аутоантитела к кардиолипину, 02- гликопротеину-I, волчаночный антикоагулянт и антитела к аннексину 5.
2. При наступлении беременности, для диагностики развития дисфункции эндотелия у женщин с привычным невынашиванием и АФС, рекомендуется определение маркеров эндотелиальной дисфункции, таких как тромбомодулин, фактор Виллебранда, sICAM-I и сывороточный аннексин 5.
3. До назначения иммунотерапии препаратом ВВИГ следует провести лабораторную оценку протективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения. Результат тестирования оценивается в виде цитопротективного коэффициента (ЦК). Если ЦК >55%, то у таких пациентов использование ВВИГ прогнозируется как высокоэффективное. Если ЦК <55%, то у таких пациентов использование ВВИГ прогнозируется как малоэффективное.
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ
Дальнейшее изучение темы является перспективным направлением для оценки механизмов эндотелиопатического эффекта сывороток крови, оценки связывания ВВИГ с эндотелиальными клетками и оценки механизмов цитопротективного действия ВВИГ.
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АФА - антифосфолипидные антитела АФС - антифосфолипидный синдром
АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время
ВВИГ - иммуноглобулины для внутривенного введения
ПНБ - привычное невынашивание беременности
TNF-a - фактор некроза опухоли альфа
IFN-Y - интерферон гамма
IL - интерлейкин
SICAM-I - растворимая форма молекулы межклеточной адгезии-1
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Агаджанова А.А. Основные подходы к комплексной терапии АФС в клинике невынашивания беременности / А.А. Агаджанова // Акушерство и гинекология. - 1999. - №3. - C. 6-8.
2. Аржанова О.Н. Роль антифосфолипидных антител (АФА) в патогенезе невынашивания беременности / О.Н.Аржанова, Т.Н. Шляхтенко, С.А Сельков // Журнал акушерства и женских болезней. - 2002. - Т. 2. - С. 18-22.
3. Бицадзе В.О. Антифосфолипидные антитела, их патогенетическое и диагностическое значение при акушерской патологии / В.О. Бицадзе, Д.Х. Хизроева, Н.А.Макацария, Е.С. Егорова // Акушерство гинекология репродукция. - 2014. - Т. 8. - № 2. - С. 39-60.
4. Волкова М.В. Антифосфолипидные антитела: современные представления о патогенетическом действии / М.В. Волкова, Е.В. Куднер, И.И. Генералов, Д. Роггенбук // Вестник ВГМУ. - 2015. - Т.14. - № 3. - С. 6-15.
5. Долгов В.В. Лабораторная диагностика нарушений гемостаза / В.В. Долгов, П.В. Свирин. - Москва: Книжный мир. 2005. -227 с.
6. Донюш Е.К. Использование внутривенных иммуноглобулинов в клинической практике / Е.К. Донюш // Вопросы современной педиатрии. - 2011. - Т. 10. - № 2. - С. 49-63.
7. Зайнулина М.С. Маркеры дисфункции эндотелия и тромбофилии в диагностике преждевременной отслойки нормально расположенной плаценты / М.С. Зайнулина // Журнал акушерства и женских болезней. - 2005. - Т. 44. - С. 9-16.
8. Иванова Р.П. Способы получения иммуноглобулинов и их клиническое применение / Р.П. Иванова, И.С. Голованова // Трансфузиология. - 2008. - Т. 9. - № 1. - С. 4-12.
9. Каде А.Х. Физиологические функции сосудистого эндотелия / А.Х.Каде, С.А. Занин, Е.А. Губарева // Фундаментальные исследования. - 2011. - Т. 11. - С. 611¬617.
10. Калинина Н.М. Аутоиммунная патология эндотелия / Н.М. Калинина, Л.Б. Дрыгина // Медицинская иммунология. - 2004. - Т. 6. - № 1-2. - С. 25-36.
11. Кондратенко И.В. Внутривенные иммуноглобулины: что и когда? / И.В. Кондратенко, А.Л. Заплатников // В помощь практическому врачу. - 2010. - Т. 4. - С. 56-60.
12. Кореньков Д.А. Роль микрочастиц в межклеточной коммуникации /Д.А. Кореньков, О.М. Овчинникова, С.А. Сельков // Цитология. - 2014. - Т. 56. - № 7. - С. 480-488.
13. Лапин С.В. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний / С.В. Лапин, А.А. Тотолян. - Санкт-Петербург: Издательство "Человек", 2010. - 272 с.
14. Латышева И.А. Применение внутривенных иммуноглобулинов в клинической практике / И.А. Латышева, Е.А. Латышева // Педиатрическая фармакология. - 2013. - Т. 10. - № 1. - С. 26-30.
15. Латышева Т.В. Место иммуноглобулинов для внутривенного введения в современной клинической практике: Привиджен — новый 10% иммуноглобулин / Т.В. Латышева, Е.А. Латышева // Терапевтический архив. - 2016. - Т. 88. - № 4. - С. 82-87.
16. Макацария А.Д. Патогенетическое значение антифосфолипидных антител /
А.Д. Макацария, В.О. Бицадзе, Д.Х. Хизроева, Н.А. Макацария // Практическая медицина. -2012. - Т. 5. - № 60. - С. 9-21.
17. Насонов Е.Л. Антифосфолипидный синдром / Е.Л. Насонов. Москва: Литтерра, 2006. - 440 с.
18. Невзорова И. А. Маркеры повреждения эндотелия при беременности с угрозой самопроизвольного аборта / И.А. Невзорова, А.И. Пашов // Гинекология. - 2014. - Т. 8. - № 96. - С. 23-27.
19. Решетняк Т.М. Новые возможности в лечении антифосфолипидного синдрома / Т.М. Решетняк // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2013. - Т. 2. - С. 33-41.
20. Румянцев А.Г. Основные свойства внутривенных иммуноглобулинов и показания к их применению / А.Г. Румянцев // Вопросы онкологии/гематологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2011. - Т.10. - № 2. - С. 39-50.
21. Сельков С.А. Клинико-иммунологическое обоснование использования иммуноглобулинов для внутривенного введения в лечении антифосфолипидного синдрома при беременности / С.А. Сельков, М.С. Зайнулина, А.А. Чугунова, А.В. Селютин, В.А. Михайлова // Журнал акушерства и женских болезней. - 2012. - Т. LXI. - № 2. - С. 5-11.
22. Сидельникова В.М. Подготовка и ведение беременности у женщин с привычным невынашиванием / В.М. Сидельникова. - Москва: МЕДпрессинформ,
2013. - 224 с.
23. Соколов Д.И. Иммунологический контроль формирования сосудистой сети плаценты / Д.И. Соколов, С.А. Сельков. - Санкт-Петербург: Н.-Л., 2012. - 206 с.
24. Степанова О.И. Влияние растворимых продуктов ткани плаценты на экспрессию адгезионных молекул эндотелиальными клетками EA.Hy926 / О.И. Степанова, Т.Ю. Львова // Медицинская иммунология. - 2011. - № 812. - С. 589¬596.
25. Ткаченко Т.Ю. Сравнительный анализ информативности тест-систем разных производителей для определения антифосфолипидных антител для диагностики антифосфолипидного синдрома / Т.Ю. Ткаченко, С.В. Лапин, Н.М. Лазарева // Медицинская иммунология. - 2015. - Т. 17. - № 5. - С. 145.
26. Улумбеков Э.Г. Гистология / Э.Г. Улумбеков, А.Ю. Челышев. - Москва, 2001. - 694 с.
27. Ушкалова Е.А. Проблема нерегламенти-рованного применения иммуноглобулина для внутривенного введения в акушерстве / Е.А. Ушкалова, Е.М. Шифман // Акушерство и Гинекология. - 2011. - Т. 3. - С. 6-11.
28. Чепанов С.В. Экспериментальное обоснование эндотелиопротективного эффекта иммуноглобулинов для внутривенного введения при акушерской патологии / С.В. Чепанов, Д.И. Соколов, Т.Н. Шляхтенко // Акушерство и Гинекология. - 2016. - Т. 5. - С. 82-89.