Механизмы участия урокиназной системы в процессах роста и регенерации нервов Климович Полина Сергеевна

Короткий опис

Климович,ПолинаСергеевна.Механизмыучастияурокиназнойсистемывпроцессахростаирегенерациинервов: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.03.04 /КлимовичПолинаСергеевна; [Место защиты: ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»]. - Москва, 2020. - 131 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ имени М.В. ЛОМОНОСОВА ФАКУЛЬТЕТ ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ На правах рукописиКлимовичПолинаСергеевнаМЕХАНИЗМЫУЧАСТИЯУРОКИНАЗНОЙСИСТЕМЫВПРОЦЕССАХРОСТАИРЕГЕНЕРАЦИИНЕРВОВ03.03.04 - Клеточная биология, цитология, гистология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой

стр. 9
учавствующих врегенерации[15]. В этой связи изучение молекулярно-биологических, клеточных и биохимическихмеханизмовучастияурокиназнойсистемывпроцессахрегенерациипериферическихнервовпредставляет большой интерес как с точки зрения получения фундаментальных знаний, так и для решения практических задач

стр. 108
механизмыучастияурокиназнойсистемыв регуляции направленногоростаирегенерациинервов. ЗАКЛЮЧЕНИЕ В настоящей работе исследованымеханизмыучастияурокиназнойсистемыв формировании нейритов и врегенерациинервовпосле повреждения. При изучениирегенерациипериферическогонерваin vivo мы обнаружили,

Оглавление диссертациикандидат наук Климович Полина Сергеевна
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Краткий обзор строения периферического нерва
Общие механизмы регенерации периферических нервов
Структура урокиназной системы
Протеолитическая активность иРА/иРАЯ
Непротеолитические функции иРА/иРАЯ
Интерактом иРАЯ и его регуляция
Взаимодействие иРАЯ-витронектин
Взаимодействие иРАЯ-ЕРМ
Взаимодействие иРАЯ-ЬЯР
Взаимодействие иРАЯ-интегрины
Функциональная характеристика интегринов
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Антитела и реагенты
Животные
Модель повреждения периферического нерва
Оценка эффективности регенерации периферического нерва после травмы
Оценка функционального восстановления нерва
Получение криосрезов нервов
Иммунофлуоресцентное окрашивание
Конфокальная микроскопия
Выделение спинальных ганглиев мыши
Выделение первичной культуры нейронов из спинальных ганглиев мыши
Клеточные культуры
Подавление и гиперэкспрессия иРАЯ в клетках №иго2А
Получение клеток нейробластомы мыши К2Л с подавленной экспрессией иРЛЯ методом CRISPR/CAS9
Фракционирование клеточных лизатов
Метод Вестерн-блоттинга (иммуноблоттинга)
Получение лизатов клеток
Определение концентрации белка в лизатах клеток
Вестерн блоттинг
Эксперимент по разобщению взаимодействия иРЛЯ и а5р1 интегринов в культуре клеток №Л
Синтез пептидов
Реакция ко-иммунопреципитации
Статистический анализ
РЕЗУЛЬТАТЫ*
Ингибирование иРЛ и иРЛЯ снижает рост аксонов из эксплантов спинальных ганглиев в Матригель
Нокаут иРЛ приводит к увеличению площади, занимаемой отрастающими от спинальных ганглиев нейритами
Нокаут гена иРЛЯ приводит к задержке восстановления периферических нервов у мыши
У мышей, лишенных иРЛЯ, снижается количество регенерирующих аксонов в нерве
Нокаут гена иРЛЯ приводит к снижению пролиферации Швановских клеток в регенерирующем нерве
Уровень экспрессия а5р1-интегринов коррелирует с экспрессией иРЛЯ в интактных нервах
При регенерации нерва увеличивается экспрессия и солокализация иРЛЯ и а5р1-интегринов
Получение клеточной линии №Л с гиперэкспрессией и с подавленной экспрессией гена иРЛЯ
иРЛЯ индуцирует сборку комплекса а5р1-интегринов на плазматической мембране клеток №Л
иРЛЯ латерально взаимодействует с а5р1-интегринами в клетках №Л
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.................................................................................................l08
ВЫВОДЫ...........................................................................................................lll