Программируемая клеточная смерть Saccharomyces cerevisiae, вызванная феромоном Кнорре, Дмитрий Алексеевич

Короткий опис

Кнорре,ДмитрийАлексеевич.ПрограммируемаяклеточнаясмертьдрожжейSaccharomycescerevisiae,вызваннаяполовымферомоном: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.04. - Москва, 2005. - 157 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
Белозерского На правах рукописи УДК 577.23КНОРРЕДМИТРИЙАЛЕКСЕЕВИЧПРОГРАММИРУЕМАЯКЛЕТОЧНАЯСМЕРТЬДРОЖЖЕЙSaccharomycescerevisiae,ВЫЗВАННАЯПОЛОВЫМФЕРОМОНОМ(03.00.04-Биохимия) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Академик РАН, профессор В.П. Скулачев

стр. 26
что дифференциации, a также сопровождающая еепрограммируемаяувеличениемклеточнаясмерть, может бытьвызванаискусственным al., 2002). Одноклеточные автотрофыПрограммируемаяклеточнаясмертьбыла обнаружена в некоторых других группах одноклеточных организмов. У динофлагеллаты Peridinium gatunense

стр. 104
окраске метиленовым синим через 4 часа после добавления индуктора. 103 5 Индукцияпрограммируемойклеточнойсмертина промежуточных этапахПрограммируемаяклеточнаясмерть,вызваннаяполовымферомономчрезвычайно чувствительна к ингибиторам синтеза белка (Severin & Hyman, 2002), среде роста и ряду других

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Кнорре, Дмитрий Алексеевич
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1. Феномен программируемой клеточной смерти.
Характерные признаки апоптоза.
Функции апоптоза у многоклеточных.
Компоненты каскада самоубийства.
Роль митохондрий в апоптозе многоклеточных.
Терминология типов клеточной смерти.
Апоптотические домены и механизмы апоптоза в разных систематических группах.
Глава 2. Запрограммированная гибель одноклеточных организмов.
Инфузории.
Паразитиеские кинетопластиды.
Слизевики.
Одноклеточные автотрофы.
Архемонады.
Дрожжи.
Глава 3. Молекулярные механизмы программируемой клеточной смерти дрожжей.
Дрожжевая метакаспаза.
Протеаза От.
Роль митохондрий в программируемой клеточной смерти дрожжей.
Неспецифическая митохондриальная пора дрожжей.
Глава 4. Феромонный каскад дрожжей.
Биология дрожжей.
Клеточный ответ на половой феромон.л.
Гибель клеток Э. сегеу'мае, вызванная а-фактором.
Глава 5. Кальций в дрожжах.
Методы измерения внутриклеточного кальция в S. cerevisiae.
Поддержание кальциевого гомеостаза в S. cerevisiae.
Амиодарон.
Глава 6. Особенности митохондрий пекарских дрожжей.
Глава 7. Активные формы кислорода.
Особенности образования и детоксикации АФКу дрожжей S.cerevisiae.
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 1. Культивирование дрожжей.
Гэнотипы использованных штаммов дрожжей.
Приготовление среды для культивации.
Условия культивации.
Глава 2. Тесты на выживание дрожжей.
Индукция ПКС.
Оценка выживаемости по количеству КОЕ.
Микроскопические методы.
Глава 3. Синхронизация культуры дрожжей.
Глава 4. Методы флуоресцентной микроскопии.
Окрашивание клеток на АФК.
Окрашивание клеток на митохондрии.
Окрашивание клеток на Са2+.
Окрашивание клеток на ДНК+.
Определение репликативного возраста клеток.
Глава 5. Выделение митохондрий из Saccharomyces cerevisiae и измерение скорости поглощения кислорода.
Глава 6. Молекулярно биологические методы.
Выделение плазмидной ДНК из E.coli на колонках Qiagen miniprep kit.
Выделение геномной ДНК дрожжей.
Расщепление и лигирование ДНК дрожжей.
Аналитический электрофорез ДНК в агарозных гелях.
Трансформация клеток Е.соН методом электропорации.
Интегративная трансформация дрожжей.
Получение мутантных линий с полностью инактивированным геном.
Глава 7. Список использованных реактивов.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Глава 1. Исследование модели программируемой клеточной смерти дрожжей штамма W303-1B, вызванной избытком феромона.
Глава 2. Исследование ПКС, индуцированный высокой концентрацией феромона на линии клеток W303-1B cmd1-6.
Глава 3. Влияние ингибиторов и антиоксидантов на ПКС клеток W303
1В cmd1-6.
Глава 4. Скрининг генов, участвующих в регуляции программы самоубийства Saccharomyces cerevisiae, вызванного избытком фермона.
Описание скрининга.
Результаты скрининга.
Анализ мутантов на предмет устойчивости к ПКС, вызванной избытком феромона.
Глава 5 Индукция программируемой клеточной смерти на промежуточных этапах.
Индукция ПКС пекарских дрожжей перекисью водорода и менадионом.
Искусственное повышение концентрации цитоплазматического кальция.
А23187.
Амиодарон.
Глава 6. Характерные признаки апоптоза, наблюдаемые в клетках обработанных амиодароном.
Глава 7. Гиперполяризация митохондрий, вызванная амиодароном.
Изменения дыхания дрожжевых клеток, вызванные амиодароном.'¡'¡Б
Глава 8. Образование АФК клетками, вызванное амиодароном.
Глава 9. Фрагментация митохондрий.
Глава 10. Исследование функции гена УЭР1.
ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.