Разработка тест-систем и технических средств ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля Светличкин, Вячеслав Владимирович

Короткий опис

Светличкин, Вячеслав Владимирович.
Разработка тест-систем и технических средств ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля : диссертация ... доктора биологических наук : 16.00.06. - Москва, 2002. - 350 с. : ил.
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИдоктор биологических наук Светличкин, Вячеслав Владимирович
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
EJIABA 1. Современное состояние оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля
1.1. Критерии и методы оценки безопасности и качества животноводческих производств и продукции.
1.1.1. Микробные контаминации и их оценка.
1.1.2. Идентификация продукции и определение фальсифицирующих примесей.
1.2. Методы генной диагностики и их роль в оценке безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля.
1.3. Автоматизированные системы и приборы контроля качества и безопасности.
1.4. ДНК-микрочиповая технология.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
ЕЛАВА 2. Материалы и методы исследований.
2.1. Микробиологические методы исследований.
2.1.1. Методы бактериологического анализа эшерихий, сальмонелл, стафилококков.
2.1.2. Определение чувствительности бактерий к действию антибиотиков.
2.1.3. Метод выращивания бактерий в полужидком агаре на мембранных фильтрах.
2.1.4. Получение и определение L-форм бактерий.
2.2. Электронномикроскопические исследования. ПО
2.3. Методы ДНК-диагностики. 1 i i
2.3.1. Выделение и очистка ДНК бактерий.
2.3.2. Выделение и очистка ДНК из тканей животных.
2.3.3. Включение тритиевой метки в ДНК методом ник-трансляции
2.3.4. Включение биотиновой метки в ДНК методом ник-трансляции
2.3.5. Включение метки в ДНК методов «рассеяной» затравки.
2.3.6. Получение меченых ДНК-зондов с помощью полимеразной цепной реакции.
2.3.7. Точечная ДНК-гибридизация с биотиновой меткой.
2.3.8. Гибридизация ДНК с тритиевой меткой.
2.3.9. ДНК-гибридизация с использованием тест-набора с ДНК-зондами меченными биотином.
2.3.10. Методика гибридизации колоний.
2.3.11. Методика полимеразной цепной реакции.
2.4. Методика иммудиффузии в геле.
2.5. Статистическая обработка результатов.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
ГЛАВА 3. Разработка методов и тест-систем индикации и идентификации микроорганизмов в объектах ветеринарно-санитарного контроля на основе ДНК-диагностики.
3.1. Идентификация бактерий в объектах ветеринарно-санитарного и экологического контроля на основе гомологии нуклеиновых кислот методом гибридизации колоний.
3.2. Разработка модификации метода ускоренной идентификации бактерий на основе гомологии ДНК меченной биотином.
3.3. Разработка тест-систем индикации бактерий с использованием генных зондов.
3.4. Разработка метода дифференциального определения вегетативных и L-форм бактерий в объектах ветеринарно-санитарного контроля с использованием ДНК-гибридизации на мембранных фильтрах.
Индикация бактерий в объектах ветеринарно-санитарного контроля на основе ПЦР с меченными дезоксинуклеозидтрифосфатами.
ГЛАВА 4. Разработка методов и тест-систем идентификации видовой принадлежности мяса и мясопродуктов.
Разработка методов и тест-систем идентификации говядины на основе ДНК-диагностики
Разработка тест-системы определения видовой принадлежности мяса и субпродуктов на основе иммунодиффузии в геле
ГЛАВА 5. Приборная реализация ускоренных методов оценки безопасности качества.
Разработка автоматизированных систем на основе ДНКдиагностики
Разработка тест-систем и технических средств для проведения анализа в нестационарных условиях.
ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ.