Тканеспецифические матриксы из децеллюляризованных фрагментов печени и суставного хряща для тканевой инженерии Кириллова Александра Дмитриевна

Короткий опис

ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИкандидат наук Кириллова Александра Дмитриевна
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Матриксы для клеточно-инженерных конструкций
1.1.1 Матриксы из материалов биологического происхождения
1.1.2 Тканеспецифические матриксы на основе
децеллюляризованных тканей
1.2 Способы децеллюляризации
1.2.1 Химические методы децеллюляризации
1.2.2 Физические методы децеллюляризации
1.2.3 Ферментативные методы децеллюляризации
1.3 Клиническое применение тканеспецифических матриксов
1.4 Примеры децеллюляризации тканей
1.4.1 Децеллюляризация печени
1.4.2 Децеллюляризация суставного хряща
1.5 Основные критерии полноты децеллюляризации
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Объекты исследования
2.2 Метод криопомола для получения микрочастиц свиного хряща
2.3 Методы децеллюляризации
2.3.1 Обработка растворами поверхностно-активных веществ
2.3.2 Низкая и высокая ионная сила децеллюляризующего раствора (осмотический шок) в сочетании с поверхностно-активными
веществами
2.3.3 Циклическое замораживание/оттаивание
2.3.4 Обработка в среде сверхкритического СO2
2.3.5 Обработка ДНКазой
2.4 Метод лазерного дифракционного анализа для определения размеров микрочастиц суставного хряща
2.5 Методы гистологического анализа образцов
2.6 Метод флуоресцентной микроскопии с использованием красителя DAPI для оценки полноты удаления ДНК
2.7 Биохимическое исследование тканеспецифических матриксов
2.7.1 Метод определения количества ДНК
2.7.2 Метод определения количества гликозаминогликанов
2.8 Метод определения in vitro цитотоксичности
2.9 Метод испытаний in vitro гемолитической активности
2.10 Имплантационный тест для оценки in vivo биологической безопасности тканеспецифических матриксов
2.11 Исследование функциональной эффективности тканеспецифических матриксов на культурах клеток
2.12 Методы статистического анализа полученных данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Децеллюляризация печени
3.1.1 Децеллюляризация фрагментов печени крысы
3.1.1.1 Влияния режима децеллюляризации на морфологию ткани
и полноту удаления ДНК
3.1.1.2 Сравнительный анализ влияния способа децеллюляризации на содержание гликозаминогликанов
3.1.2 Децеллюляризация фрагментов печени свиньи
3.1.2.1 Влияния режима децеллюляризации на морфологию ткани
и полноту удаления ДНК
3.1.2.2 Сравнительный анализ влияния способа децеллюляризации на содержание гликозаминогликанов
3.2 Децеллюляризация микрочастиц суставного хряща свиньи
3.2.1 Влияние режима криопомола на размер микрочастиц
суставного хряща
3.2.2 Влияние количества циклов замораживания/оттаивания на эффективность децеллюляризации
3.2.3 Влияние обработки в среде сверхкритического СО2 микрочастиц суставного хряща на эффективность децеллюляризации
3.2.4 Влияния режима децеллюляризации на морфологию ткани и полноту удаления ДНК
3.2.5 Сравнительный анализ влияния способа децеллюляризации на
содержание гликозаминогликанов
3.3 Биологические и функциональные свойства тканеспецифических
матриксов из децеллюляризованных тканей печени и суставного
хряща свиньи
3.3.1 Цитотоксичность in vitro
3.3.2 Гемолитическая активность in vitro
3.3.3 Биологическая безопасность in vivo (имплантационный тест)
3.3.4 Функциональная эффективность
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Приложение А
Приложение Б
ВВЕДЕНИЕ