нейропротективное действие конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов при моделировании острого нарушения мозгового кровообращения

brief description

Министерство здравоохранения украины
Запорожский государственный медицинский университет

На правах рукописи

Галица
Вадим Вячеславович

УДК 615.31:547.873]:615.214.2.015.03]]:616.831 005.4

нейропротективное действие
конденсированных производных
[1,2,4]-триазинонов при моделировании
острого нарушения мозгового кровообращения

14.03.05 фармакология

Диссертация на соискание ученой степени
кандидата биологических наук

Научный руководитель:
доктор биологических наук, профессор
Беленичев И.Ф.

Запорожье 2009

содержание

Список условных сокращений 4
Введение 5
глава 1. Медикаментозная терапия ишемического инсульта. Современный взгляд на проблему.
(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1. Патогенез ишемического повреждения головного мозга 12
1.2. Характеристика и механизмы действия современных средств при лечении ишемических инсультов. Подходы к созданию нейропротективных средств при лечении ишемических инсультов. Создание высокоэффективных нейропротекторов 23
глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Объекты и модели исследования 45
2.2. Методы оценки антиоксидантной активности синтезированных соединений при инициировании свободнорадикальных процессов в исследованиях in vitro 52
2.3. Биохимические исследования 56
2.4. Морфологические методы исследования 73
2.5. Фармакологические и токсикологические методы исследования 76
2.6. Статистические методы исследования 80
глава 3. первичный скрининг Антиоксидантной, противогипоксической и антиамнестической активности среди конденсированных производных [1,2,4]-ТРИАЗИНОНоВ
3.1. Конденсированные производные [1,2,4]-триазинонов перспективные
нейропротекторы 81
3.2. Антиоксидантная активность конденсированных производных
[1,2,4]-триазинонов 85
3.3. Исследование противогипоксической активности среди
конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов 96
3.4. Исследование антиамнестической активности среди
конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов 100
глава 4. Изучение нейропротективного действия
бензилового эфира 2-(3,4-дигидро-3-оксо-2Н-[1,2,4]-
триазино[4,3-с]хиназолин-4-ил)Уксусной кислоты (КО-17)
4.1. Исследование острой токсичности КО-17 108
4.2. Исследование нейропротективного действия КО-17 при нарушении мозгового кровообращения, вызванного окклюзией сонных артерий 110
4.3. Изучение нейропротективного действия соединения КО-17 при моделировании внутримозгового кровоизлияния 136
4.4. Изучение нейропротективного действия соединения КО-17 при фотоиндуцированном тромбозе сосудов лобной коры головного мозга 154
Глава 5. Заключение и обсуждение полученных результатов 167
выводы 178
Литература 180

Список сокращений
АДФ аденозин-5-дифосфорная кислота
АМФ аденозин-5-монофосфорная кислота
АОА антиоксидантная активность
АРА антирадикальная активность
АТФ аденозин-5-трифосфорная кислота
АФГ альдегидфенилгидразон
АФК активные формы кислорода
ВК внутримозговое кровоизлияние
ГАМК g-аминомасляная кислота
ГДК глутаматдекарбоксилаза
ГОМК g-оксимасляная кислота
ГПР глутатионпероксидаза
ДК диеновые конъюгаты
КФГ карбоксилфенилгидразон
МДА малоновый диальдегид
НАД никотинамиддинуклеотид
НАДФ никотинамиддинуклеотидфосфат
ОМБ окислительная модификация белка
ОНМК острое нарушение мозгового кровообращения
ПОЛ перекисное окисление липидов
СДГ сукцинатдегидрогеназа
СРО свободнорадикальное окисление
СОД супероксиддисмутаза
ТК триенкетоны
УРПИ условная реакция пассивного избегания
ЦНС центральная нервная система

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Проблема ишемического инсульта в настоящее время становится все более актуальной. В индустриально развитых странах инсульт занимает 2-3-е место в структуре общей смертности населения и является основной причиной стойкой утраты трудоспособности [1-7]. Пусковым звеном ишемической гибели нейронов является энергетический дефицит, инициирующий глутамат-кальциевый каскад высвобождение возбуждающих аминоацидергических нейротрансмиттеров аспартата и глутамата и внутриклеточное накопление ионов Са2+ [1,2,5,8]. Процессы, начавшиеся в первые часы мозгового инсульта и лежащие в основе глутамат-кальциевого каскада (изменения метаболизма глутамата и кальция, оксидативный стресс, гиперпродукция NO·) индуцируют отдаленные последствия ишемии реакцию генома с включением генетически-запрограммированных молекулярных механизмов, дисфункцию астроцитарного и микроглиального пулов, развитие иммунных изменений и инициацию нейроапоптоза [2,9,10,11].
Концепция нейропротекции позволяет выделить два основных направления терапии мозгового инсульта. Первичная нейропротекция направлена на прерывание быстрых механизмов некротической смерти клеток реакций глутамат-кальциевого каскада (антагонисты NMDA и AMPA рецепторов и блокаторы кальциевых каналов ремацемид, релутек, нимотоп и т.д.) [1,12,13]. Вторичная нейропротекция направлена на уменьшение выраженности отдаленных последствий ишемии на блокаду провоспалительных цитокинов, молекул клеточной адгезии, торможение оксидативного стресса, нормализацию нейрометаболических процессов, ингибирование апоптоза (антиоксиданты, ноотропы, нейропептиды эмоксипин, тиотриазолин, глицин, пирацетам, тиоцетам, церебролизин, кортексин, цереброкурин и т.д.) [14-24].
Несмотря на определённые успехи, достигнутые в лечении мозговых инсультов эта проблема остаётся всё ещё достаточно актуальной. Современные нейропротекторы не всегда проявляют терапевтическую эффективность в условиях клиники, имеют ряд побочных эффектов при длительном применении, в связи с отсутствием достоверного лечебного действия их невозможно применить в острый период ОНМК [8,24-26]. В настоящее время ведется поиск более новых нейропротекторов среди различных азагетероциклических систем. Исследованиями, проведенными на протяжении последних 20 лет в Запорожском государственном медицинском университете, Институте фармакологии и токсикологии АМН Украины, Винницком национальном медицинском университете им. Н.И. Пирогова, Крымском государственном медицинском университете им. С.И. Георгиевского, установлено наличие высокой антиоксидантной, противоишемической и нейропротективной активности среди производных 4-аминохиназолина, 4-гидразинохиназолина, хиназолона-4 [27-37]. В связи с вышеизложенным, особый интерес в плане поиска высокоэффективных нейропротекторов представляют производные, полученные на основе 4-гидразинохиназолина [1,2,4]-триазиноны, что и определяет перспективность проведения исследований соединений этого ряда.
Связь работы с научными программами, планами, темами.
Диссертационная работа выполнена как фрагмент плановой научно-исследовательской работы кафедр фармакологии и фармацевтической химии Запорожского государственного медицинского университета: «Целенаправленный поиск биологически активных веществ в ряду пяти- и шестичленных азагетероциклов и создание на их основе лекарственных препаратов (номер гос. регистр. 0102 U 002863, шифр IH 15.00.02.01) и как фрагмент научно-исследовательской работы кафедры фармакологии «Изучение механизмов нейропротективной активности и ее взаимосвязи с параметрами молекулярного строения в ряду производных N- и S-замещенных азагетероциклов в опытах in vitro и в условиях моделирования ишемического повреждения головного мозга» (номер гос. регистрации 0107U005112, шифр ІН 14.03.05.04).
Цель работы на основании экспериментальных исследований новых конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов выделить наиболее активное соединение с нейропротективным действием.
Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:
1. Провести исследование антиоксидантной активности в опытах in vitro, противогипоксической и антиамнестической активности 23 конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов в опытах in vivo. Выявить закономерность «структура действие».
2. Вещество, обладающее высокой антиоксидантной активностью в опытах in vitro, противогипоксической и антиамнестической активностью в опытах in vivo и превосходящее по силе действия фармакологические стандарты (эмоксипин, тиотриазолин, пирацетам) изучить в условиях экспериментального нарушения мозгового кровообращения.
3. Установить действие наиболее активного соединения на степень неврологических (по шкале С.Р. McGrow) и когнитивных (в тесте УРПИ) нарушений в сравнении с эмоксипином, тиотриазолином и пирацетамом при двусторонней окклюзии общих сонных артерий, внутримозговом введении аутокрови и фототромбозе сосудов коры мозга.
4. Изучить действие наиболее активного соединения на некоторые показатели оксидативного стресса и антиоксидантной системы (активность СОД, содержание маркеров ОМБ, каталазы, ГПР, уровень МДА, концентрации стабильных метаболитов NO·, уровень активности NO-синтазы) и углеводно-энергетического обмена (содержание пирувата, малата, лактата, АТФ, АДФ, АМФ), активность ГАМК-эргической системы (ГАМК, глутамата, глутаматдекарбоксилазы) в сравнении с референс-препаратами при двусторонней окклюзии сонных артерий и внутримозговом введении аутокрови.
5. Изучить влияние наиболее активного соединения в сравнении с референс-препаратами на морфофункциональное состояние нейронов сенсомоторной зоны коры головного мозга, а также на экспрессию, в данной зоне, генов раннего реагирования c-fos при двусторонней окклюзии сонных артерий и внутримозговом введении аутокрови.
Объект исследования фармакологическая коррекция острого нарушения мозгового кровообращения.
Предмет исследования терапевтическая эффективность и механизм нейропротективного действия конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов в условиях экспериментального нарушения мозгового кровообращения.
Методы исследования. В работе использованы фармакологические, биохимические, токсикологические, цитологические, гистохимические и математические методы исследований.
Научная новизна полученных результатов. Впервые получены данные об антиоксидантной, противогипоксической и антиамнестической активности 23 соединений конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов. Установлено, что бензиловый эфир 2-(3,4-дигидро-3-оксо-2Н-[1,2,4]-триазино[4,3-с]хиназолин-4-ил)уксусной кислоты (КО-17) в опытах in vitro (неферментативное инициирование СРО, ингибирование супероксидрадикала, монооксида азота и торможение окислительной модификации белка) и in vivo (гипоксический тест, амнезия навыка) по выраженности терапевтического действия превосходит референс-препараты (тиотриазолин, эмоксипин, пирацетам).
Впервые на моделях нарушения мозгового кровообращения изучена нейропротективная активность соединения КО-17, указано его превосходство над тиотриазолином, эмоксипином, пирацетамом. Установлено, что в механизме нейропротективного действия КО-17 определенную роль играет его активирующее воздействие на супероксиддисмутазу, уменьшение гибели нейронов in vitro, вызванную токсическими концентрациями глутамата и NMDA и in vivo при экспериментальном нарушении мозгового кровообращения. Показано, что нейропротективное действие КО-17 направлено на экспрессию генов раннего реагирования c-fos в сенсомоторной зоне коры головного мозга и, тем самым, повышение компенсаторно-приспособительных возможностей нейронов в условиях ишемии.
Практическая ценность работы. На основании результатов исследований экспериментально обоснована целесообразность применения нового соединения бензилового эфира 2-(3,4-дигидро-3-оксо-2Н-[1,2,4]-триазино[4,3-с]хиназолин-4-ил)уксусной кислоты (КО-17) в качестве потенциального нейропротективного средства, а также определена перспективность поиска новых нейропротекторов в ряду производных [1,2,4]-триазинонов.
Результаты диссертационной работы внедрены в научный и учебный процесс на кафедрах фармакологии Запорожского государственного медицинского университета, Днепропетровской государственной медицинской академии, Харьковского государственного медицинского университета, Крымского государственного медицинского университета им. С.И. Георгиевского и научно-исследовательскую работу отдела фармакологии Новосибирского института органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН.
Личный вклад соискателя. Работа выполнена на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории Запорожского государственного медицинского университета (заведующий д.мед.н., профессор А.В. Абрамов) и на кафедре фармакологии и медицинской рецептуры (заведующий д.б.н., профессор И.Ф. Беленичев). Автором лично проведен патентно-информационный поиск, анализ научной литературы по данной тематике, определены цель и задачи исследования, освоены и воспроизведены модели острого нарушения мозгового кровообращения. Самостоятельно проведен поиск соединений с антиоксидантной активностью в опытах in vitro, противогипоксической и антиамнестической активностью в опытах in vivo среди 23 конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов, синтезированных на кафедре фармацевтической химии Запорожского государственного медицинского университета. Автором лично проведены все биохимические исследования по определению маркеров оксидативного стресса, антиоксидантной системы и энергетического обмена головного мозга. Самостоятельно проведены гистоиммунохимические и морфологические исследования нейронов сенсомоторной зоны коры головного мозга, статистическая обработка, анализ и обобщения результатов исследования, сформулированы основные положения и выводы диссертационной работы.
Апробация результатов диссертации. Основные фрагменты результатов диссертационной работы докладывались и обсуждались на Международной научно-практической конференции «Биологическое окисление в норме и патологии» (г. Тернополь, 2006), ІІІ Национальном съезде фармакологов Украины «Фармакологія 2006 крок у майбутнє» (г. Одесса, 2006), 4-ой международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (г. Москва, 2006), ІІІ съезде фармакологов России «Фармакология практическому здравоохранению» (г. Санкт-Петербург, 2007), ІІ Международной научно-практической конференции «Створення, виробництво, стандартизація, фармакоекономічні дослідження лікарських засобів та біологічно активних добавок» (г. Харьков 2007), научно-практической конференции «Активные формы кислорода, оксида азота, антиоксиданты и здоровье человека» (г. Смоленск, 2007), 2-ой Международной пироговской студенческой научной медицинской конференции (г. Москва, 2007), XV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва, 2008).
Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 14 работ, в полной мере отображающие ее содержание, из них 8 статей, 6 тезисов в материалах съездов, конгрессов, научно-практических конференций разных уровней.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 209 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, двух разделов собственных исследований, анализа и обобщений результатов исследований, выводов и списка литературы, который содержит 264 литературных источников, из которых 111 отечественных и 153 иностранных авторов. Работа проиллюстрирована 48 таблицами, 1 рисунком, 5 фотографиями.

bibliography

ВЫВОДЫ:
В работе, посвященной актуальной проблеме современной фармакологии поиску эффективных средств терапии мозговых инсультов среди новых конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов, на основе экспериментальных исследований in vitro и in vivo установлена целесообразность применения бензилового эфира 2-(3,4-дигидро-3-оксо-2Н-[1,2,4]-триазино[4,3-с]хиназолин-4-ил)уксусной кислоты (соединение КО-17) как потенциального нейропротективного средства.
1. В скрининговых исследованиях in vitro и in vivo среди 23 конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов выделено соединение бензиловый эфир 2-(3,4-дигидро-3-оксо-2Н-[1,2,4]-триазино[4,3-с]хиназолин-4-ил)уксусной кислоты (КО-17), которое по силе антиоксидантного действия превосходит референтные препараты тиотриазолин и эмоксипин, а по степени выраженности противогипоксической и антиамнестической активности пирацетам и эмоксипин.
2. Анализ взаимосвязи «структура действие» среди 23 конденсированных производных [1,2,4]-триазинонов показал, что наличие и сила антиоксидантной, противогипоксической и антиамнестической активности зависит от характера заместителя в триазиновом фрагменте молекулы. Так, введение в положение 4 молекулы [1,2,4]триазино[4,3-с] хиназолил-3-она бензилоксикарбонилметильного радикала приводит к усилению активности.
3. Пероральное введение КО-17 (в дозе 10 мг/кг) в течение 4 суток крысам с двусторонней окклюзией сонных артерий и внутримозговым кровоизлиянием приводило к достоверному снижению (p<0,05) уровня МДА (54%-60%), АФГ (42,3%-70%), КФГ (40%-82%), нитрит-аниона (53,6%-44%), значительному повышению активности СОД (в 2,5 раза), каталазы (200%-112%) и глутатионпероксидазы (124%-56,6%) в головном мозге.
4. Введение КО-17 (в дозе 10 мг/кг) в течение 18 суток крысам с двусторонней окклюзией сонных артерий, внутримозговым кровоизлиянием и в течение 9 суток крысам с фотоиндуцированным тромбозом сосудов лобной коры головного мозга приводило к достоверному снижению летальности животных на 30%-50%, уменьшению неврологического дефицита (на 4-12 баллов по шкале С.P. McGrow), уменьшению количества апоптически и некротически измененных нейронов (в 2,33 и 1,67 раза) в сенсомоторной зоне коры головного мозга, повышению количество (p<0,05) c-fos-позитивных клеток (в 3,5-2,4 раза).
5. Введение КО-17 (10 мг/кг) в течение 4 суток гербилам с односторонней перевязкой общей сонной артерии и крысам с внутримозговым кровоизлиянием приводило к увеличению (p<0,05) окислительной продукции АТФ (на 53,3%-47%), содержания малата (на 100%-80%), СДГ (132%-80%), активности цитохром-С-оксидазы (26%-32%), ГАМК (160%-62%) в головном мозге.
6. По силе нейропротективной активности соединение КО-17 в условиях моделирования нарушения мозгового кровообращения достоверно превосходит тиотриазолин и пирацетам по таким показателям, как снижение неврологических нарушений, эмоксипин по снижению нитрит-аниона, а по таким показателям, как снижение гибели нейронов, повышение активности СОД и снижение маркеров ОМБ превосходит эмоксипин, тиотриазолин и пирацетам (p<0,05).
7. Механизм нейропротективного действия бензилового эфира 2-(3,4-дигидро-3-оксо-2Н-[1,2,4]-триазино[4,3-с]хиназолин-4-ил)уксусной кислоты (КО-17) при экспериметальном нарушении мозгового кровообращения, по всей видимости, обусловлен способностью ингибировать АФК, повышать активность СОД, снижать гибель нейронов сенсомоторной зоны коры и уменьшать проявления неврологических расстройств.

ЛИТЕРАТУРА

1. Гусев Е.И. Ишемия головного мозга / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова М.: «Медицина», 2001. 328 с.
2. Гусев Е.И. Церебральный инсульт: проблемы и решения / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова, М. Ю. Мартынов // Вестник РАМН. 2003. №11. С. 44-48.
3. Chapman C.A. Neuroprotective approaches to the treatment of neurodegenerative disorders / C.A. Chapman, C.W. Olanov London: Academic Press Limited, 2002. 360 p.
4. Hallström B. Stroke incidence and survival in the beginning of the 21st century in Southern Sweden: comparisons with the late 20th century and projections into the future / B. Hallström, А. Jönsson, С. Nerbrand et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 10-15.
5. Carmichael S. T. Themes and strategies for studying the biology of stroke recovery in the Poststroke Epoch / S. T. Carmichael // Stroke. 2008. N39. Р. 1380-1388.
6. Gupta R. Epidemiology and causation of coronary heart disease and stroke in India / R. Gupta, P. Joshi, V. Mohan, K.S. Reddy // Heart. 2008. N94. Р. 16-26.
7. Joubert J. Stroke in rural areas and small communities / J. Joubert, L.F. Prentice, T. Moulin, S.-T. Liaw et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 1920-1928.
8. Гусев Е.И. Проблема инсульта в России / Е.И. Гусев // Инсульт. 2003. №9. С. 3-7.
9. Martin L.J. Molecular regulation of DNA damage-induced apoptosis in neurons of cerebral cortex / L.J. Martin, Z. Liu, J. Pipino, B. Chestnut, М.A. Landek // Cereb. Cortex. 2008. N10. Р. 1093.
10. Турпаев К.Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов / К.Т. Турпаев, И.Ш. Веселинский, А.В. Сонник и др. // Биохимия. 2002. Т.67, №3. С. 339-352.
11. Болдырев А.А. Свободные радикалы в нормальном и ишемизированном мозге / А.А. Болдырев, М.Л. Куклей // Нейрохимия. 1996. Т.13. С. 271-278.
12. Беленичев И.Ф. Классификация, механизмы действия и перспективы создания антиоксидантных средств / И.Ф. Беленичев, С.И. Коваленко, И.А. Мазур и др. // Акт. питання фармац. та мед. науки і практ. Запоріжжя. 1999. Вип. 4. С. 61-75.
13. Ярош О.К. Комбінована дія аміналону та пірацетаму на процеси пам’яті й інші функції ЦНС / О.К. Ярош, О.Т. Дудко // Ліки. 2003. №1-2. С. 59-65.
14. Кригер Д. Неотложная терапия тяжелых полушарных ишемических инсультов / Д. Кригер // Неврол. журн. 1998. Т.3, №4. С. 40-44.
15. Беленичев И.Ф. Влияние тиотриазолина на развитие нейроиммуноэндокринных нарушений, вызванных гиперпродукцией активных форм кислорода при ишемии головного мозга / И.Ф. Беленичев, И.А. Мазур, И.С. Чекман // Аллерг. и иммунол. 2006. Т.7, №33. С. 272-274.
16. Мазур И.А. Тиотриазолин фармакологические аспекты и клиническое применение / И.А. Мазур, Н.А. Волошин, И.С. Чекман, Б.С. Зименковский, В.Р. Стец Запорожье, Львов, 2005. 145 с.
17. Скворцова В.И. Механизмы повреждающего действия церебральной ишемии и нейропротекция / В.И. Скворцова // Вест. РАМН. 2003. №11. С. 74-81.
18. Ярош А.К. Современные ноотропные средства и особенности их клинической фармакологии / А.К. Ярош // Вісн. фармакол. та фармац. 2002. №12. С. 7-18.
19. Сергиенко А.Н. Применение препарата «Цереброкурин®» при лечении дегенеративно-дистрофических заболеваний сетчатки / А.Н. Сергиенко // Нов. мед. и фарм. 2001. №12(97). С. 8.
20. Сиротюк М.В. Цереброкурин® и гипербарическая оксигенация в лечении детского церебрального паралича / М.В. Сиротюк // Нов. мед. и фарм. 2004. №18(158). С. 13.
21. Беленичев И.Ф. Терапевтическая эффективность нового церебропротективного и ноотропного препарата тиоцетам в остром периоде тяжёлой ЧМТ / И.Ф. Беленичев, Д.А. Середа, Ю.К. Дейниченко, И.А. Мазур // Медиц. неотложн. сост. 2006. Т.3, №2. С. 87-90.
22. Виленский Б.С. Применение церебролизина при ишемическом инсульте / Б.С. Виленский, Г.М. Семенова, Е.А. Широков // Журн. невролог. и психиатр. 1999. Т.99, №.4. С. 65-69.
23. Hutter-Paier B. Cerebrolysin protects isolated cortical neurons from neurodegeneration after brief histotoxic hypoxia / B. Hutter-Paier, E. Steiner, M. Windisch // J. Neural. Transm. 1998. Vol.53. P. 351-361.
24. Суслина З.А. Антиоксидантная терапия при ишемическом инсульте / З.А. Суслина, Т.Н. Федорова, М.Ю. Максимова // Журн. неврол. и псих. 2000. Т.100, №10. С. 34-38.
25. Röther J. Neuroprotection does not work! / J. Röther // Stroke. 2008. N39. Р. 523-524.
26. Degos V. Neuroprotective strategies for the neonatal brain / V. Degos, G. Loron, J. Mantz, Р. Gressens // Anesth. Analg. 2008. N106. Р. 1670-1680.
27. Бєленічев І.Ф. Дослідження антиоксидантної та протиішемичної активності похідних 1-алкіл-(карбоксиалкіл)-4-бензиліденаміно-1,2,4-триазолію броміду в умовах експериментальної ішемії головного мозку / І.Ф. Бєленічев // Вісн. Запор. держ. ун-ту. 2002. № 3. С. 88-94.
28. Бєленичев І.Ф. Ноотропна активність похідних 4-гідразинохіназоліну при судомних та гіпоксичних ушкодженнях головного мозку / І.Ф. Бєленичев, І.В. Сидорова, Н.О. Нестерова, С.І. Коваленко // Клін. фарм. 2005. Т.9, №1. С. 35-40.
29. Беленичев И.Ф. Фармакокоррекция патобиохимических нарушений мозговой ткани в период моделирования острой ишемии и реперфузии мозговой ткани некоторыми производными 1,2,4-триазола / И.Ф. Беленичев // Акт. питання фармац. та мед. науки і практ. Запоріжжя. 1998. Вип. 2. Т.ІІ. С. 10-16.
30. Бухтіярова Н.В. Пошук речовин з антирадикальною і антиперекисною активністю серед похідних хіназолону-4 та 4-амінохіназоліну: Автореф. дис... канд. мед. наук: 14.03.05. Ін-т фарм. та токсикол. / Н.В. Бухтіярова Київ, 2004. 26 с.
31. Нестерова Н.О. Формування комбінаторної бібліотеки хіназоліл-4-іл-гідразонів з антиоксидантною активністю / Н.О. Нестерова, С.І. Коваленко, І.Ф. Бєленічев // Мед. хімія. 2004. Т.6, №3. С. 68-73.
32. Сидорова І.В. Дослідження антиоксидантної і церебропротективної активності похідних 4-гідразинохіназоліну в дослідах in vitro та за умов модельних судом / І.В. Сидорова, Н.О. Нестерова, І.Ф. Бєленічев та ін. // Експерим. та клініч. фізіол. та біохімія. 2004. №3. С. 44-51.
33. Нікітін В.О. Синтез, фізико-хімічні та біологічні властивості 2-(2-R-хіназолін-4-ілто)-1-R1-етанонів та пропан-1-онів / В.О. Нікітін, С.І. Коваленко, І.Ф. Бєленічев, Ю.М. Максимов, Н.О. Вринчану // Фармаком. 2006. №1-2. С. 122-129.
34. Бєленічев І.Ф. Дослідження антиоксидантної дії хіназоліл-4-(хіноліл-4)-тіо-a(b)-карбонових кислот та їх похідних в умовах ініціювання вільно-радикальних процесів in vitro та моделюванні ішемії головного мозку / І.Ф. Бєленічев, С.І. Коваленко, О.А. Бражко та ін. // Ліки. 2001. №5-6. С. 28-33.
35. Коваленко С.І. Дослідження антирадикальних властивостей S-карбокс-алкільних похідних 4-тіохіназоліну в дослідах in vitro у системі утворення оксиду азоту / С.І. Коваленко, І.Ф. Бєленічев, О.В. Карпенко та ін. // Ліки. 2003. №1-2. С. 68-72.
36. Нестерова Н.О. Нейропротективні ефекти 4-іліденгідразинохіназолінів в умовах моделювання судом та амнезії / Н.О. Нестерова, І.Ф. Бєленічев, С.І. Коваленко та ін. // Ліки. 2004. №1-2. С. 65-69.
37. Беленичев И.Ф. Комплексная оценка антиоксидантной активности in vitro производных (3,4-дигидрохиназолон-4-ил-3)-a,b-карбоновых кислот / И.Ф. Беленичев, С.И. Коваленко, И.А. Мазур и др. // Фармаком. 1995. №5-6. С. 40-43.
38. Александрин В.В. Изменение локального мозгового кровотока при глобальной преходящей ишемии мозга у крыс / В.В. Александрин, Е.В. Луньшина, Р.С. Мирзоян // Методология флоуметрии. 2002. №6. С. 143-149.
39. Gauthier L.V. Remodeling the brain: plastic structural brain changes produced by different motor therapies after stroke / L. V. Gauthier, E. Taub, C. Perkins et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 1520-1525.
40. Скворцова В.И. Ишемический инсульт, патогенез ишемии, терапевтические подходы / В.И. Скворцова // Неврол. журн. 2001. Т.6, №3. С. 4-9.
41. Измайлов И.А. Этиология, патогенез, клиническая диагностика, дифференциальная диагностика и лечение острых нарушений мозгового кровообращения / И.А. Измайлов, А.В. Иванова, И.Т. Косарева и др. // Рос. мед. журн. 2003. Т.11, №10. С. 28-34.
42. Funahashi T. Age effect on brain pH during ischemia/reperfusion and pH influence on peroxidation / T. Funahashi, R. Floyd // Neurobiol. Aging. 2004. Vol.15, N1. P. 161-167.
43. Болгов Д.М. Вплив тіотріазоліну на перебіг вільнорадикальних реакцій у структурах мозку щурів з компресійною травмою / Д.М. Болгов, Л.В. Савченкова // Ліки. 2001. №5-6. С. 18-24.
44. Witko-Sarsat V. Advanced oxidation protein products as a novel markers of oxidative stress in ischemia / V. Witko-Sarsat, M. Friedlander // J. Neurochem. 2000. Vol.22, N6. P. 342-350.
45. Lipton P. Ischemic cell death in brain neurons / P. Lipton // Physiol. Rev. 1999. Vol.79, N4. P. 1431-1568.
46. Fieschi C. Prevention of ischemic stroke / C. Fieschi, M. Fischer // Martin. Dunitz. Ltd. 2000. 290 р.
47. Noraberg J., Kristensen B.W., Zimmer J. Markers for neuronal degeneration in organotypic cultures // Brain Research Protocols. 1999. Vol.3. P. 278-290.
48. Сергеев В.П. Рецепторы физиологически активных веществ / В.П. Сергеев, Н.Л. Шимановский, В.И. Петров Волгоград, «Семь Ветров», 1999. 640 с.
49. Yin W. Rapidly Increased neuronal mitochondrial biogenesis after hypoxic-ischemic brain injury / W. Yin, A.P. Signore, M. Iwai et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 3057-3063.
50. Zhang W. Nortriptyline protects mitochondria and reduces cerebral ischemia/hypoxia injury / W. Zhang, H. Wang, X. Wang et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 455-462.
51. Gonzalvez F. Cardiolipin provides an essential activating platform for caspase-8 on mitochondria / F. Gonzalvez, Z.T. Schug, R.H. Houtkooper et al. // J. Cell Biol. 2008. N183. P. 681-696.
52. Secchiero P. Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand promotes migration of human bone marrow multipotent stromal cells / P. Secchiero, E. Melloni, F. Corallini et al. // Stem Cells. 2008. N26. P. 2955-2963.
53. Harada C. Role of apoptosis signal-regulating kinase 1 in stress-induced neural cell apoptosis in vivo / C. Harada, K. Nakamura, K. Namekata et al. // Am. J. Pathol. 2006. N168. Р. 261-269.
54. Акмаев И.Г. От нейроэндокринологии к нейроиммуноэндокринологии / И.Г. Акмаев, В.В. Гриневич, В.Ю. Григорьев и др. // Бюл. экспер. биол. и мед. 2001. Т.131, №1. С. 22-32.
55. Губський Ю.І. Основні шляхи утворення активних форм кисню в нормі та при ішемічних патологіях / Ю.І. Губський, І.Ф. Бєленічев, С.І. Коваленко та ін. // Совр. пробл. токсикол. 2004. №2. С. 8-16.
56. Liang L.-P. Chelation of mitochondrial iron prevents seizure-induced mitochondrial dysfunction and neuronal injury / L.-P. Liang, S.G. Jarrett, M. Patel // J. Neurosci. 2008. N28. P. 11550-11556.
57. Cao G. Critical role of calpain I in mitochondrial release of apoptosis-inducing factor in ischemic neuronal injury / G. Cao, J. Xing, X. Xiao et al. // J. Neurosci. 2007. N27. Р. 9278-9293.
58. Гомазков О.А. Молекулярные механизмы регуляции нейрохимических процессов / О.А. Гомазков // Усп. физиол. науки. 2003. Т.34, №3. С. 42-54.
59. Zhang T.-J. Hippocampus bcl-2 and bax expression and neuronal apoptosis after moderate hypothermic cardiopulmonary bypass in rats / T.-J. Zhang, J. Hang, D. Wen et al. // Anesth. Analg. 2006. N102. Р. 1018-1025.
60. Shawgo M.E. Caspase-mediated Bak activation and cytochrome C release during intrinsic apoptotic cell death in Jurkat cells / M.E. Shawgo, S.N. Shelton, J.D. Robertson // J. Biol. Chem. 2008. Р. 1074.
61. Elmore S. Apoptosis: a review of programmed cell death / S. Elmore // Toxicol. Pathol. 2007. N35. Р. 495-516.
62. Болдырев А.А. Функциональные взаимодействия между глутаматными рецепторами разных классов / А.А. Болдырев // Бюл. экспер. биол. и мед. 2000. Т.130, №9. С. 244-251.
63. Макарова Л.М. Изучение нейропротекторного действия производного аспарагиновой кислоты при реперфузионных повреждениях мозга / Л.М. Макарова, В.Е. Погорелый // Экспер. и клин. фармакол. 2004. Т.67, №5. С. 13-16.
64. Xu J. Neuroprotection of GluR5-containing kainate receptor activation against ischemic brain injury through decreasing tyrosine phosphorylation of N-methyl-D-aspartate receptors mediated by src kinase / J. Xu, Y. Liu G.-Y. Zhang // J. Biol. Chem. 2008. N283. Р. 29355-29366.
65. Горбунов Н.В. Активация образования окиси азота, опосредованная метаболитотропными глутаматными рецепторами в первичных культурах клеток зёрен мозжечка / Н.В. Горбунов // Бюл. экспер. биол. и мед. 1995. №7. С. 40-48.
66. Mattson M.P. Energetic and oxidative stress in synaptic plasticity and neurodegenerative disorders / M.P. Mattson, D. Liu // Neuromolec. Medicine. 2002. Vol.2, N2. P. 215-231.
67. Chen M. Differential roles of NMDA receptor subtypes in ischemic neuronal cell death and ischemic tolerance / M. Chen, T.-J. Lu, X.-J. Chen et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 3042-3048.
68. Dravid S.M. Activation of recombinant NR1/NR2C NMDA receptors / S.M. Dravid, A. Prakash, S.F. Traynelis // J. Physiol. 2008 N586. Р. 4425-4439.
69. Воронина Т.А. Гипоксия и память. Особенности эффектов и применения ноотропных препаратов / Т.А. Воронина // Вестн. РАМН. 2000. №9. С. 27-33.
70. Torp R. Differential expression of two glial glutamate transporters in the rat brain / R. Torp // Eur. J. Neurosci. 2000. Vol.6, N1. P. 936-942.
71. Khosravani H. Prion protein attenuates excitotoxicity by inhibiting NMDA receptors / H. Khosravani, Y. Zhang, S. Tsutsui et al. // J. Cell Biol. 2008. N181. Р. 551-565.
72. Ohtsuka N. Functional disturbances in the striatum by region-specific ablation of NMDA receptors / N. Ohtsuka, M.F. Tansky, H. Kuang et al. // PNAS. 2008. N105. Р. 12961-12966.
73. Kobayashi T. Ca2+-channel antagonists and neuroprotection from cerebral ischemia / T. Kobayashi, J. Mory // Eur. J. Pharmacol. 1998. Vol.363. Р. 1-15.
74. Murphy T.H. Two-photon imaging of stroke onset in vivo reveals that NMDA-receptor independent ischemic depolarization is the major cause of rapid reversible damage to dendrites and depines / T.H. Murphy, P. Li, K. Betts, R. Liu // J. Neurosci. 2008. N28. Р. 1756-1772.
75. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов / М.В. Биленко М.: «Медицина», 1989. 368 с.
76. Бєленічев І.Ф. Антиоксиданти: сучасне уявлення, перспективи створення / І.Ф. Бєленічев, С.І. Коваленко, В.В. Дунаєв // Ліки. 2002. №1. С. 25-29.
77. Grossman Е. Does increased oxidative stress cause hypertension? / E. Grossman // Diabetes Care. 2008. N31. P. 185-189.
78. Kellogg D.L. Neuronal nitric oxide synthase control mechanisms in the cutaneous vasculature of humans in vivo / D.L. Kellogg, J.L. Zhao, Y. Wu // J. Physiol. 2008. N586. Р. 847-857.
79. Раевский К.С. Оксид азота новый физиологический мессенджер: возможная роль при патологии центральной нервной системы / К.С. Раевский // Бюл. экспер. биол. и мед. 1997. Т.123, №5. С. 484-490.
80. Sarnowska A. Application of organotypic hyppocampal culture for study of selective neuronal death / A. Sarnowska // Folia Neuropathol. 2002. Vol.40, N2. P. 101-106.
81. Nijboer C.H. A dual role of the NF-kB pathway in neonatal hypoxic-ischemic brain damage / C.H. Nijboer, C.J. Heijnen, F. Groenendaal et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 2578-2586.
82. Nijboer C.H. Strong neuroprotection by inhibition of NF-kB after neonatal hypoxia-ischemia involves apoptotic mechanisms but is independent of Cytokines / C.H. Nijboer, C.J. Heijnen, F. Groenendaal et al. // Stroke. 2008. N39. Р. 2129-2137.
83. Husain M. Nitric oxide evokes an adaptive response to oxidative stress by arresting respiration / M. Husain, T.J. Bourret, B.D. McCollister et al. // J. Biol. Chem. 2008. N283. Р. 7682-7689.
84. Kadhim H.J. Cytokines and brain injury: invited review / H.J. Kadhim, J. Duchateau, G. Sébire // J. Intensive Care Med. 2008. N23. Р. 236-249.
85. Webb A.J. Mechanisms underlying erythrocyte and endothelial nitrite reduction to nitric oxide in hypoxia: role for xanthine oxidoreductase and endothelial nitric oxide synthase / A.J. Webb, A.B. Milsom, K.S. Rathod et al. // Circ. Res. 2008. N103. Р. 957-964.
86. Бєленічев І.Ф. Продукти вільнорадикального перекисного окиснення та методи їх ідентифікації / І.Ф. Бєленічев, Є.Л. Левицький, Ю.І. Губський та ін. // Совр. пробл. токсикол. 2002. №4. С. 9-14.
87. Губский Ю.И. Токсикологические последствия окислительной модификации белка / Ю.И. Губский, И.Ф. Беленичев, Е.Л. Левицкий // Совр. пробл. токсик. 2005. №3. С. 4-20.
88. Seddon M.D. Neuronal nitric oxide synthase regulates basal microvascular tone in humans in vivo / M.D. Seddon, P.J. Chowienczyk, S.E. Brett et al. // Circ. 2008. N117. Р. 1991-1996.
89. Левицкий Е.Л. Роль гена раннего реагирования c-fos в норме и в токсической нейродеструктивной патологии. Возможности фармакокоррекции нейропептидными лекарственными средствами / Е.Л. Левицкий, И.Ф. Беленичев, Н.В. Бухтиярова и др. // Совр. пробл. токсикол. 2008. №1. С. 11-17.
90. Granja A.G. A238L Inhibits NF-ATc2, NF-kB, and c-Jun activation through a novel mechanism involving protein kinase C-q-mediated up-regulation of the amino-terminal transactivation domain of p300 / A.G. Granja, N.D. Perkins, Y. Revilla // J. Immunol. 2008. N180. Р. 2429-2442.
91. Garaude J. Sumoylation regulates the transcriptional activity of JunB in T lymphocytes / J. Garaude, R. Farrás, G. Bossis et al. // J. Immunol. 2008. N180. Р. 5983-5990.
92. Левицкий Е.Л. Роль активных форм кислорода в функциональной активности МАР-киназного каскада, глобальных факторов транскрипции и развитии апоптоза / Е.Л. Левицкий, И.Ф. Беленичев, Ю.И. Губский и др. // Журн. академ. мед. наук України. 2008. Т.14., №2. С. 203-218.
93. Martin D.S.D. Apoptotic changes in the aged brain are triggered by interleukin-1β-induced activation of p38 and reversed by treatment with eicosapantaenoic acid / D.S.D. Martin, P.E. Lonergan, B. Boland // J. Biol. Chem. 2002. Vol.277, N37. P. 34239-34246.
94. Kumar A. Free radical injury and blood-brain barrier permeability in hypoxic-ischemic encephalopathy / A. Kumar, R. Mittal, H.D. Khanna et al. // Pediatrics. 2008. N122. Р. 722-727.
95. Levonen A.-L. Antioxidant gene therapy for cardiovascular disease: current status and future perspectives / A.-L. Levonen, E. Vähäkangas, J.K. Koponen et al. // Circ. 2008. N117. Р. 2142-2150.
96. Li J.-M. Temporary pretreatment with the angiotensin