Иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина Караев, Ян Михайлович

brief description

Караев Ян Михайлович. Иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина : диссертация ... кандидата ветеринарных наук : 16.00.03 / Караев Ян Михайлович; [Место защиты: Кубан. гос. аграр. ун-т].- Краснодар, 2008.- 128 с.: ил. РГБ ОД, 61 09-16/40
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИкандидат ветеринарных наук Караев, Ян Михайлович
Введение.'.'.
1. Обзор литературы.
1.1. Этиология и распространение эшерихиоза.
1.2. Факторы патогенности эшерихий.
1.3. Токсины Е. coli.
1.4. Адгезивные антигены.
1.5. Специфическая профилактика.
2. Материалы и методы исследований.
3. Результаты исследований.
3.1. Получение эшерихиозного анатоксина.
3.1.1. Характеристика штаммов-продуцентов.
3.1.2. Подбор оптимальной среды и режима культивирования для продукции эшерихиями экзотоксинов.
3.1.3. Получение анатоксина.
3.2. Разработка эритроцитарного диагностикума.
3.3. Влияние эшерихиозного анатоксина на иммуно-биологическую реактивность лабораторных животных.
3.3.1. Влияние эшерихиозного анатоксина на картину крови.
3.3.2. Влияние эшерихиозного анатоксина на систему фагоцитоза.
3.3.2.1. Влияние эшерихиозного анатоксина на захватывающую и переваривающую способность нейтрофильных гранулоцитов.
3.3.2.2. Влияние эшерихиозного анатоксина на микробицидные свойства Нейтрофильных гранулоцитов.
3.3.3. Влияние эшерихиозного анатоксина на гуморальное звено иммунитета.
3.3.3.1. Иммуногенные свойства анатоксина.
3.3.3.2. Протективные свойства зшерихиозного анатоксина.
4. Обсуждение результатов исследования.
Выводы.
Практические предложения.

bibliography

Введение к работе
Актуальность работы.Согласно данным отечественных ученых желудочно-кишечные болезни являются основной причиной гибели молодняка сельскохозяйственных животных (Коробов А.В. и др., 2001; Субботин В.В. и др., 2001; Мищенко В.А. и др., 2002; Белов Л.Г. и др., 2002; Щербаков П.Н. и др., 2002; Хитрова А.Е. и др., 2006). Особое место в ряду болезней сопровождающихся поражением пищеварительного тракта, занимает эше-рихиоз, поскольку им могут поражаться до 50-100% новорожденных телят и поросят, при этом летальность доходит до 30-50% (Жосан Н.Н., 1989; Беднягин В.Е., 2000; Ковальчук Н.М. и др., 2000).
Предрасполагающими факторами появления и распространения эше-рихиоза служат не только нарушения ветеринарно-санитарных правил и зоогигиенических режимов содержания животных, но и биологические свойства возбудителя болезни - Escherichia coli. Являясь постоянным обитателем кишечника животных и человека, данный микроорганизм составляет его микробиоценоз. В норме кишечная палочка выполняет ряд полезных для хозяина функций - синтез витаминов и аминокислот, поддерживает колонизационную резистентность кишечника и обеспечивает антигенную стимуляцию местного иммунитета (Земсков В.М., 1984; Медицинская микробиология, 1999). Между тем, при нарушениях микроэкологического характера, Е. coli способна резко наращивать не только свое количественное присутствие, но и проявлять патогенные свойства. Постоянный антигенный дрейф, наличие или приобретение различных факторов патогенносте (экзотоксины, гемолизины, некротизирующий и гемолитический фактор, сидерофоры) затрудняют проведение эффективной специфической профилактики эшерихиоза, что побуждает не только постоянно осуществлять эпизоотологический мониторинг данной инфекции, но изучать и контролировать биологические свойства возбудителя (прежде всего его анти-биотикорезистентность и наличие различных маркеров патогенности).
За более чем вековой промежуток времени со дня открытия кишечной палочки и установления ее этиологической роли в развитии диарей у человека и животных подходы к разработке специфических средств профилактики эшерихиоза длительное время базировались исключительно на использовании соматических О-антигенов. Однако после установления отсутствия коррелятивной связи между О-антигенным профилем Е. coli и ее па-тогенностью, и, напротив, присутствием таковой между наличием специфических адгезинов и способностью вырабатывать экзотоксины, как в нашей стране, так и за рубежом стали создавать компонентные вакцины, в состав которых помимо О-антигена, входят пилевый и токсоидный антигены (Иманалиев М., 1990; Девришов Д.А и др., 1998; Волков И.А., 2008;. Ikemori Y et al., 1993,. Alexa P et al., 1995). Между тем, ряд отечественных и зарубежных исследователей считает, что все же основополагающая роль в патогенезе эшерихиоза принадлежит экзотоксинам, а поэтому их инактивирован-ные формы, прежде всего, нужно использовать в качестве средств специ-
фической профилактики ( Емельяненко П.А. и др., 2000; Романов Е.А. и др., 2000; Бондаренко В.М., 2002; Фокин А. А, 2005; Панькова СЮ. и др., 2005; Dean-Nystrom Е.А. et al, 1993; Said A.M. et al, 1994 ; Alexa P. Et al, 1998).
В связи с этим получение специфического биопрепарата на основе токсинов Е. соН и изучение его влияния на организм животных является актуальным направлением ветеринарной медицины, так как может способствовать повышению эффективности профилактики эшерихиоза.
Цель и задачи исследований.Основной целью работы было получение эшерихиозного анатоксина и изучение его иммунногенных и протек-тивных свойств.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
разработать питательную среду и определить оптимальную продолжительность культивирования токсигенных штаммов Е. соН;
изготовить эритроцитарный диагностикум для выявления антитоксических антител в сыворотке крови животных после иммунизации их эше-рихиозным анатоксином;
изучить влияние эшерихиозного анатоксина на иммунобиологическую реактивность лабораторных животных;
изучить протективные свойства эшерихиозного анатоксина.
Научная новизна.Были установлены оптимальные условия культивирования токсигенных штаммов Е. соН, при которых происходит максимальное накопление термолабильного, термостабильного и шигаподобно-го токсинов. Разработан эритроцитарный диагностикум для выявления специфических (антитоксических) антител в сыворотке крови животных после иммунизации эшерихиозным анатоксином. Установлены особенности изменения гематологических показателей, функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов и образования специфических антител в ответ на введение животным различных доз эшерихиозного анатоксина. Выявлено влияние гидроокись алюминия и полиакриловой кислоты на иммунногенные свойства эшерихиозного анатоксина. Изучена протектив-ная активность эшерихиозного анатоксина при экспериментальной коли-энтеротоксимии.
Научная новизна работы подтверждена положительным решением на выдачу патента на изобретение по заявке № 2007112764/13(013860).
Теоретическая и практическая значимость.Результаты проведенных исследований позволили установить оптимальные условия культивирования экзотоксинпродуцирующих штаммов кишечной палочки. В ходе выполнения работы был разработан эритроцитарный диагностикум для выявления антитоксических антител в сыворотке крови у иммунизированных животных. Полученные данные позволили выявить особенность реагирования организма животных в ответ на введение инактивированных токсинов Е. соН, а также установить протективную активность полученного эшерихиозного анатоксина.
Апробация работы.Результаты исследований были доложены на научных конференциях сотрудников факультета ветеринарной медицины Ку-
банского ГАУ (Краснодар, 2006, 2007, 2008); 1-ой Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых (Краснодар, 2007). Результаты работы были отмечены дипломом 2-й степени.
Публикации.По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, в т. ч. в рецензируемом журнале рекомендованном ВАК.
Структура и объем работы.Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов исследования, выводов, предложений и списка использованной литературы. Работа включает 32 таблицы и 11 рисунков. Список литературы содержит 186 источников, из числа которых 78 иностранных.