ДИСФУНКЦИЯ ТИМУСА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ И В УСЛОВИЯХ НАРУШЕННОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ К ГЛЮКОЗЕ

Краткое описание

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ
ЗАПОРОЖСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ
УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

Камышный Александр Михайлович

УДК: 616.379-008.64-092.9:616.438-08

ДИСФУНКЦИЯ ТИМУСА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ
САХАРНОМ ДИАБЕТЕ И В УСЛОВИЯХ НАРУШЕННОЙ
ТОЛЕРАНТНОСТИ К ГЛЮКОЗЕ

14.03.04 - патологическая физиология

Диссертация на соискание научной степени
доктора медицинских наук

Научный консультант:
Колесник Юрий Михайлович
доктор медицинских наук, профессор

Примірник ідентичний всім існуючим.
Вчений секретар
спеціалізованої вченої ради Д 26.198.01 д. б. н.. З.О. Сорокіна-Маріна

Запорожье, 2009

содержание

Введение...............................................................................

8

Глава 1.

Современные представления о роли нарушений морфофункционального состояния тимуса в развитии сахарного диабета................................................................

23

Глава 2.

Материалы и методы исследования....................................

63

2.1

Экспериментальные животные............................................

63

2.2.

Серии экспериментальных исследований...........................

63

2.3.

Экспериментальные модели................................................

65

2.3.1.

Моделирование сахарного диабета.....................................

65

2.3.2.

Методика введений прекурсоров NO и блокаторов NO-синтазы.................................................................................

69

2.3.3.

Моделирование экспериментального гестационного диабета.................................................................................

70

2.4.

Методы исследования клеточных субпопуляций тимуса..

72

2.4.1.

Изучение морфометрических и денситометрических характеристик клеток тимуса.............................................

73

2.4.2.

Изучение CD4 и CD8 поверхностных антигенных детерминант лимфоцитов тимуса.......................................

75

2.4.3.

Изучение пролиферативной активности лимфоцитов тимуса...................................................................................

78

2.4.4.

Исследование антиген-представляющих клеток тимуса....

79

2.4.5.

Исследование эпителиального компартмента тимуса.......

80

2.4.6.

Изучение особенностей экспрессии тимического инсулина...............................................................................

81

2.4.7.

Изучение особенностей тимической экспрессии аутоиммунного регулятора AIRE.......................................

83

2.4.8.

Изучение особенностей тимической экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2.......................................

84

2.4.9.

Изучение особенностей тимической экспрессии проапоптотического белка р53...........................................

86

2.4.10

Изучение особенностей тимической экспрессии белков раннего ответа с-Fos ...........................................................

87

2.4.11

Изучение особенностей тимической экспрессии индуцибельной NO-синтазы................................................

89

2.4.12

Исследование особенностей процессов дифференцировки натуральных иммунорегуляторных Т-лимфоцитов тимуса.............................................................

90

2.4.13

Изучение особенностей тимической экспрессии белков теплового шока HSP 70.......................................................

91

2.4.14

Изучение особенностей тимической экспрессии иммунной субъединицы протеасомы LMP-2.....................

93

2.5.

Методы статистического анализа........................................

94

Глава 3.

Структурно-функциональная организация лимфоидной популяции и характеристика процессов дифференцировки CD4+ и CD8+ -лимфоцитов тимуса в норме и у экспериментальных животных...........................

95

3.1.

Особенности структурно-функциональной организации лимфоидной популяции тимуса у крыс со спонтанной
гипертензией (SHR) и у потомства крыс с
экспериментальным гестационным диабетом (ЭГД).........

95

3.2.

Характеристика процессов дифференцировки CD4+ -лимфоцитов коркового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД

106

3.3.

Характеристика процессов дифференцировки CD4+ -лимфоцитов мозгового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД

116

3.4.

Характеристика процессов дифференцировки CD8+ -лимфоцитов коркового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД

124

3.5.

Характеристика процессов дифференцировки CD8+ -лимфоцитов мозгового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД ..............................................................................................

132

Глава 4.

Характеристика тимической экспрессии инсулина и аутоиммунного регулятора AIRE в норме и у экспериментальных животных............................................

141

4.1.

Особенности экспрессии тимического инсулина в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

141

4.2.

Особенности экспрессии тимического инсулина в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

146

4.3.

Характеристика экспрессии аутоиммунного регулятора AIRE в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

148

4.4.

Характеристика экспрессии аутоиммунного регулятора AIRE в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

155

Глава 5.

Характеристика эпителиального компартмента и антиген-представляющих клеток тимуса в норме и у экспериментальных животных............................................

161

5.1.

Морфофункциональное состояние эпителиоретикулоцитов (ЭРЦ) коркового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........................................................

161

5.2.

Морфофункциональное состояние ЭРЦ мозгового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД...................................

170

5.3.

Морфофункциональное состояние антиген-представляющих клеток коркового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........................................................

177

5.4.

Морфофункциональное состояние антиген-представляющих клеток мозгового вещества тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........................................................

186

Глава 6.

Характеристика тимической экспрессии анти- и проапоптотических белков Bcl-2 и р53 в норме и у экспериментальных животных............................................

196

6.1.

Особенности экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2 в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

196

6.2.

Особенности экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2 в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

207

6.3.

Особенности экспрессии проапоптотического белка р53 в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

215

6.4.

Особенности экспрессии проапоптотического белка р53 в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

225

Глава 7.

Характеристика тимической экспрессии индуцибельной NO-синтазы и белка раннего ответа с-Fos в норме и у экспериментальных животных............................................

234

7.1.

Особенности экспрессии индуцибельной NO-синтазы в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

234

7.2.

Особенности экспрессии индуцибельной NO-синтазы в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

244

7.3.

Особенности экспрессии белка раннего ответа с-Fos в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

249

7.4.

Особенности экспрессии белка раннего ответа с-Fos в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

260

Глава 8.

Изучение особенностей процессинга антигенов в тимусе, дифференцировки натуральных иммунорегуляторных Т-лимфоцитов (Treg) и пролиферативной активности тимоцитов в норме и у экспериментальных животных.....

269

8.1.

Характеристика экспрессии иммунной субъединицы протеасомы LMP-2 в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.......................................................................................

269

8.2.

Характеристика экспрессии иммунной субъединицы протеасомы LMP-2 в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.......................................................................................

277

8.3.

Изучение особенностей экспрессии белков теплового шока Hsp70 в гомогенатах тимуса, селезенки и головного мозга у крыс линии Wistar в норме, при ЭСД и после введений Lа и NnLa диабетическим животным.......

281

8.4.

Характеристика процессов дифференцировки Тreg клеток в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

283

8.5.

Характеристика процессов дифференцировки Тreg клеток в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД.........

293

8.6.

Характеристика пролиферативной активности лимфоцитов в корковом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД

300

8.7.

Характеристика пролиферативной активности лимфоцитов в мозговом веществе тимуса у крыс линии Wistar и SHR в норме, при ЭСД, после введений Lа и NnLa диабетическим животным, у потомства крыс с ЭГД

308

Анализ и обсуждение результатов.....................................................

316

Выводы................................................................................................

370

Список использованной литературы..................................................

373

Список использованных сокращений

АПК антиген-представляющие клетки
МКАТ моноклональные антитела
НТГ нарушение толерантности к глюкозе
с-Fos - белок раннего ответа
ЭГД экспериментальный гестационный диабет
ЭРЦ эпителиоретикулоциты
ЭСД экспериментальный сахарный диабет
AIRE autoimmune regulator (аутоиммунный регулятор)
APS, APECED - autoimmune polyendocrine/polyglandular syndromes (аутоиммунный полигландулярный синдром)
CTLA-4 - сytotoxic T lymphocyte antigen 4 (цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген)
FITC флуоресцеина изотиоционат
Hsp heat shock protein (белки теплового шока)
iNOS - индуцибельная NO-синтаза
LMP-2 low mass protein 2 (иммунная субъединица протеасомы 2)
Lа L-аргинин
MAPC monoclonal anty-pan cytokeratin (моноклональные анти-пан-цитокератины)
MHC I (II) молекулы главного комплекса гистосовместимости
NnLa N-нитро-L-аргинин
PCNA - ядерный антиген пролиферирующих клеток
PTSAs - peripheral tissue-specific antigens (периферические тканеспецифические антигены)
SHR крысы со спонтанной гипертензией
STZ - стрептозотоцин
TGFβ трансформирующий фактор роста β
Treg натуральные иммунорегуляторные клетки тимуса
LB лимфобласт, Lb- большой лимфоцит, Lm средний лимфоцит, Ls малый лимфоцит

ВВЕДЕНИЕ

В последние годы большое внимание уделяется роли иммунных нарушений в патогенезе развития различных заболеваний [7,39,54,105]. Картина патогенеза сахарного диабета, которая существенно дополнена за последнее десятилетие, свидетельствует про широкое участие центральных нейро-имунно-эндокринных механизмов в регуляции эндокринной функции панкреатических островков [2, 537]. Вместе с тем, основным звеном патогенеза сахарного диабета 1 типа (СД 1 типа) у людей и экспериментального стрептозотоцинового диабета у животных является деструкция β-клеток панкреатических островков, индуцируемая активированными Тлимфоцитами-киллерами, продиабетогенными популяциями Т-хелперов Th1 и Th17, макрофагами, что приводит к абсолютной инсулиновой недостаточности и, как следствие, к гипергликемии [42]. Феноменология механизмов деструкции β- клеток поджелудочной железы широко освещена в литературе последних лет [20-22]. В тоже время, пусковые механизмы аутоиммуноагрессии и причины возникающих нарушений при СД 1-го типа остаются предметом дискуссии [16,27]. Вовлечение тимуса в патологический процесс при СД 1 типа несомненно. Это следует из самого характера иммунных нарушений с дисфункцией Т-системы иммунитета и подтверждается обнаружением различных патологичесних изменений тимуса у больных диабетом [6,14]. Они касаются ингибиции пролиферативного ответа тимоцитов на антигены и митогены, ненормально высокого числа незрелых тимоцитов, нарушения архитектоники тимусного матрикса, подавления синтеза тимических гормонов и уменьшения экспрессии молекул HLA 2 класса и др.[11,13,18].
Однако, главные вопросы остаются нерешенными. В чем сущность патологии тимуса при СД 1 типа? Поражение тимуса - причина или следствие аутоиммуного заболевания? Каковы механизмы участия дисфункции тимуса в патогенезе данного заболевания? СД 1 типа болезнь тимуса?
В качестве ответа на эти вопросы было предложено много концепций, основным недостатком которых является неправильная трактовка морфофункциональных изменений в тимусе или даже неверное понимание роли тимуса в патогенезе аутоиммунных заболеваний. Представления о роли поражения тимуса при СД 1 типа и при различных аутоиммунных заболеваниях имеют свои особенности, но можно выделить несколько различных научных концепций и предположений, часть которых имеют уже только историческое значение: 1) дисфункция тимуса причина или условие развития аутоиммунного заболевания вследствие нарушения дифференцировки тимоцитов; 2) тимус первая мишень аутоагрессии, в последующем происходит генерализация аутоиммунного процесса; 3) поражение тимуса сочетанное или сопутствующее (вторичное) и не имеет важного патогенетического значения [6,14,28,35,137].
За последнее десятилетие были достигнуты огромные успехи в области иммунологии СД 1 типа, предложены новые методы выявления аутоантител к различным островковым антигенам, что дало возможность диагностировать СД 1 типа еще до появления его клинических признаков. Однако, до настоящего времени отсутствует четкая и фундаментальная концепция о роли дисфункции тимуса в механизмах развития СД 1 типа, которая базировалась бы на всестороннем изучении морфофункционального состояния тимуса, его клеточных субпопуляций, особенностях течения селекции и апоптоза тимоцитов, внутритимической экспрессии панкреатических антигенов.
Актуальность темы. Сахарный диабет в настоящее время является важной медицинской и экономической проблемой во всех странах мира. По данным ВОЗ, 150 миллионов людей в мире сейчас болеют сахарным диабетом, а до 2025 года эта цифра должна удвоиться, сахарный диабет называют "неинфекционной эпидемией XXI века" (WHO Fact Sheet

Список литературы

ВЫВОДЫ

В диссертации приведено теоретическое и экспериментальное решение важной научной проблемы выяснение роли дисфункции тимуса в патогенезе экспериментального сахарного диабета. В результате выделены ключевые дефекты функционального состояния тимуса при диабете и в условиях нарушенной толерантности к глюкозе: дефект апоптоза тимоцитов, дефект презентации периферических тканеспецифических антигенов, дефект Т-регуляторного звена, дефект процессинга антигенов, дефект дифференцировки и пролиферации тимоцитов. Научно обоснована гипотеза о роли нарушений морфогенеза и функционального состояния лимфоидного и эпителиального компартментов тимуса в механизмах развития аутоиммунной и эндокринной патологии у потомков, определены иммунные факторы риска развития сахарного диабета при нарушенной толерантности к глюкозе.
1. Нарушение толерантности к глюкозе у половозрелых крыс линии SHR и потомков крыс с гестационным диабетом приводит к изменению цитоархитектоники тимуса, что проявляется снижением количества пролиферирующих лимфоцитов, Тreg-клеток, инсулин-иммунопозитивных, антиген-представляющих и клеток экспрессирующих иммунную субъединицу протеасомы LMP-2. Данные нарушения сопровождаются увеличением количества цитотоксических CD8+-лимфоцитов и Bcl-2+-клеток и измененением уровня тимической экспрессии таких регуляторов апоптоза как белки р53, транскрипционный фактор с-Fos, индуцибельная NO-синтаза.
2. Развитие диабета сопровождается снижением количества пролиферирующих лимфоцитов в тимусе у крыс линии Wistar и не влияет на плотность популяции PCNA+ лимфоцитов у крыс линии SHR, при однонаправленной тенденции к снижению количества Тreg-клеток и CD4+ лимфоцитов, уменьшению плотности CD4‑рецепторов у животных обеих линий, увеличению количества CD8+ лимфоцитов, формированию дисбаланса CD25+-лимфоцитов отдельных классов.
3. Развитие диабета у крыс линий Wistar и SHR сопровождается снижением количества инсулин-экспрессирующих клеток в тимусе при увеличении в них концентрации инсулина, приводит к уменьшению количества AIRE+-клеток в мозговом веществе тимуса у крыс линий Wistar и в обеих изученных зонах тимуса крыс SHR, а также к преимущественному снижению концентрации белка AIRE.
4. Развити диабета приводит к изменению морфофункционального состояния эпителиального компартмента тимуса, что проявляется снижением количества и изменением соотношения отдельных типов эпителиоретикулоцитов в обеих изученных зонах тимуса крыс линии Wistar и в корковом веществе тимуса крыс линии SHR. Эти изменения сопровождаются снижением количества антиген-представляющих клеток тимуса и плотности их MHC-II‑рецепторов у крыс линии Wistar и разнонаправленными изменениями этих показателей у крыс линии SHR, а также нарушает соотношение отдельных типов MHC-II+‑клеток.
5. Развитие диабета сопровождается увеличением количества Bcl-2+-клеток и повышении концентрации белка Bcl-2 в тимусе у крыс линий Wistar и SHR, тогда как в изменениях числа р53+-клеток и концентрации белка р53 обнаруживаются линейные различия увеличение данных показателей в коре тимуса у животных линии Wistar и снижение в корковом и мозговом веществе тимуса у крыс линии SHR в сочетании с нарушением соотношения отдельных классов Bcl-2+ и р53+-лимфоцитов.
6. При диабете уменьшается количество c-Fos+-клеток в тимусе и нарушается соотношение отдельных классов c-Fos+-лимфоцитов, при этом концентрация белков раннего ответа c-Fos изменяется разнонаправлено снижается в тимусе у крыс линии Wistar и возрастает у крыс линии SHR. Эти изменения сочетаются с увеличением количества iNOS+-клеток исключительно в корковом веществе тимуса, при этом концентрация белка iNOS в гомогенатах тимуса у крыс линии Wistar возрастает в 4 раза.
7. Развитие диабета сопровождается увеличением в 2,5 раза концентрации белков теплового шока Hsp70 в тимусе у крыс линии Wistar и формированием иммунопротеасомного дефекта вследствие снижения экспрессии иммунной субъединицы протеасомы LMP-2 в обеих изученных зонах тимуса у крыс линии Wistar и в мозговом веществе у крыс линии SHR, что влечет за собой дефект генерации эндогенных пептидов для негативной селекции тимоцитов.
8. Введения блокатора NO-синтаз N-нитро-L-аргинина у крыс линий Wistar и SHR изменяют цитоархитектонику тимуса за счет снижения числа цитотоксических CD8+ -лимфоцитов и увеличения количества CD4+ лимфоцитов и Тreg-клеток. При этом введения N-нитро-L-аргинина усиливают пролиферативную активность тимоцитов, увеличивают количество эпителиоретикулоцитов и MHCII+-клеток тимуса, приводят к изменениям уровня экспрессии белков-регуляторов апоптоза тимоцитов, концентрации тимического инсулина и аутоиммунного регулятора AIRE. Результаты исследований демонстрируют свойство блокаторов NO-синтаз оказывать выраженные эффекты на функциональное состояние тимуса при диабете, что является актуальным для практического их применения в клинической эндокринологии и диабетологии для коррекции дисфункции тимуса при сахарном диабете.
9. Проведенные исследования представляют практический интерес для современной диабетологии, эндокринологии, иммунологии и доказывают то, что нарушения функционирования центрального органа иммуногенеза - тимуса - играют важную роль в иммунопатогенетических механизмах развития сахарного диабета. Полученные данные свидетельствуют о важной роли нарушения морфогенеза тимуса в механизмах развития эндокринной и аутоиммунной патологии у потомков крыс с гестационным диабетом, а оценка функционального состояния тимуса у потомства может являться одним из критериев степени риска развития диабета.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абрамова Е. Б. Изменение активности и состава протеасом в постнатальном развитии крысы / Е. Б. Абрамова, Т. М. Астахова, Н. П. Шарова // Онтогенез. - 2005. Т. 36, № 3. С. 205210.
2. Акмаев И. Г. Современные представления о взаимодействии регулирующих систем: нервной, эндокринной и иммунной / И. Г. Акмаев // Успехи физиол. наук. - 1996. - Т. 27, № 1. - С. 319.
3. Алгоритм автоматичного аналізу лімфоїдної популяції тимуса / А. В. Абрамов, Ю. М. Колесник, В. А. Любомирська, О. М. Камишний // Вісник морфології. - 2002. № 2. - С. 261262.
4. Астахова Т. М. Исключение иммунных протеасом из клеток асцитной карциномы Krebs-II / Т. М. Астахова, Н. П. Шарова // Известия РАН. Сер. Биологическая. - 2006. № 3. С. 275283.
5. Барышников А. Ю. Иммунологические проблемы апоптоза / А. Ю.Барышников, Ю. В.Шишкин - М.: Эдиториал УРСС, 2002. 320 с.
6. Болезни вилочковой железы / В. П. Харченко, Д.С.Саркисов, П.С. Ветшев. [и др.]. - М.: Медицина, 1998. - 346 с.
7. Бутенко Г.М. Морфо-функциональные изменения тимуса у крыс разного возраста после пинеалэктомии / Г.М Бутенко., Т.Ю. Квитницкая-Рыжова, С.П. Малышева // Журн. Акад. мед. наук України. — 2005. — 11, № 4. — С. 797-807.
8. Вплив L-аргініну на функціональну активність ендотелію за умов експериментального цукрового діабету / В. Ф.Сагач, О. Д. Присяжна, М. М.Ткаченко, А. В. Коцюруба // Фізіол. журн. - 2005. Т. 51, № 2. - С. 37.
9. Галил-Оглы А. Сравнительная ультраструктурная характеристика эпителиальных клеток паренхимы вилочковой железы тимом / А.Галил-Оглы, Я. Х.Ингберман, А. М.Берщанская // Арх. патологии. - 1988. - Т. 50, № 9. - С. 5160.
10.Гриневич Ю. А. Иммунобиология гормонов тимуса / Ю. А.Гриневич, В. Ф.Чеботарев. К., 1989. - 152 с.
11.Дедов И. И. Сахарный диабет у детей и подростков / И. И. Дедов, Т. Л. Кураева. М.: Изд-во ГЭОТАР-МЕД, 2007. - 161 с.
12.Дисфункция β - клеток панкреатических островков у мужского потомства самок крыс с экспериментальным гестационным диабетом / Ю. М. Колесник, О. В.,Ганчева, А. В.Абрамов, А. М. Камышный // Запорож. мед. журн. - 2007. - № 2. - С. 510.
13.Дорошенко Е. О. Функциональное состояние тимуса и его коррекция в комплексном лечении сахарного диабета 1 типа у детей / Е. О. Дорошенко, М. И.Мартынова, В. Я. Арион // Medic. - 2002. - № 6. - С. 127129.
14.Зайратьянц О. В. Патология вилочковой железы и аутоиммунные болезни : автореф. дис. д. мед. наук / О. В. Зайратьянц. - М., 1992. - 34 с.
15.Зак К. П. Динаміка показників гуморального імунітету у дітей з вперше виявленим цукровим діабетом 1 типу / К. П. Зак, Т. Н. Малиновська // Педіатрія, акушерство та гінекологія. - 2001. - № 1. - С. 2931.
16.Зак К. П. Иммунитет у детей, больных сахарным диабетом / К. П. Зак, Т. Н. Малиновская, Н. Д. Тронько - К.: Книга плюс, 2001.- 112 с.
17.Зак К. П. Імунофенотип лімфоцитів крові дітей з цукровим діабетом 1 типу в динаміці тривалої інсулінотерапії / К. П. Зак, Т. Н. Малиновська, М. А. Грузов // Лікарська справа. - 2001. - № 3. - С. 4447.
18.Зак К. П. Состояние иммунной системы у детей, больных сахарным диабетом 1 типа / К. П. Зак, Т.Н. Малиновская, Е. В. Большакова-Зубковская // Эндокринология. - 2001. - Т. 6, № 2. - С. 191203.
19.Камышный А. М. Изучение процессов дифференцировки лимфоцитов тимуса и выраженности инсулита у крыс с экспериментальным сахарным диабетом / А. М. Камышный // Вісник проблем біології і медицини. - 2006. - № 2. - C. 99101.
20.Колесник Ю. М. Изменения эндокринной части поджелудочной железы белых лабораторных крыс при сахарном диабете, адаптации к гипоксии и их сочетании (иммуноцитохимическое исследование) / Ю. М.Колесник, А. В.Абрамов, Г. В. Василенко // Морфология. - 1996. - № 1. - С. 9194.
21.Колесник Ю. М. Современные представления об анатомо-физиологических особенностях островков Лангерганса и механизмах их деструкции при сахарном диабете 1 типа / Ю. М. Колесник, М. А Орловский // Запорож. мед. журн. - 2000. - № 3. - С. 311.
22.Колесник Ю. М. Состояние островкового аппарата поджелудочной железы при экспериментальном сахарном диабете различной степени тяжести / Ю. М. Колесник, А. В. Абрамов, Г. В. Василенко // Арх. патологии. - 1992. - Т. 54, № 12. - С. 2427.
23.Колесник Ю. М. Эффекты NO в иммунной системе: NO и тимус / Ю.М. Колесник, А. М. Камышный, А. В. Абрамов // Запорож. мед. журн. - 2006. - № 2. - С. 511.
24.Крутецкая З. И. Механизмы внутриклеточной сигнализации / З. И. Крутецкая, О. Е. Лебедев, Л. С. Курилова. СПб. : Изд-во СПб. ун-та, 2003. - 208 с.
25.Крысы линии SHR со спонтанной гипертензией как модель для изучения метаболических нарушений / Ю. М. Колесник, О. В. Ганчева, А. В. Абрамов, А. М. Камышный // Запорож. мед. журн. - 2007. - № 1. - С. 510.
26.Ломакин М. С. Гормоны и другие биологические вещества тимуса: структуры и функции / М. С. Ломакин, Н. Г. Арцимович // Иммунология. - 1991. - № 1. С. 1015.
27.Любомирская В. А. Динамика лимфоидной популяции тимуса при экспериментальном сахарном диабете у крыс / В. А. Любомирская // Укр. мед. альманах. 2002. - № 3. С. 8082.
28.Лямперт И. М. Иммунопатологические механизмы, имеющие значение при возникновении аутоиммунного процесса / И. М. Лямперт // Вестн. АМН СССР. -1988. - № 5. - С. 1219.
29.Множественность форм протеасомы и некоторые подходы к их разделению / Е. Б. Абрамова, Т. М. Астахова, П. А. Ерохов, Н. П. Шарова // Известия РАН. Сер. биологическая. - 2004. № 2. С. 150156.
30.Новиков В. И. Влияние Т-активина на показатели клеточного звена иммунитета у больных с впервые выявленным сахарным диабетом 1 типа / В. И. Новиков // Сахарный диабет. - 1999. - № 4. - С. 2933.
31.Орловский М. А. Экспериментальные исследования сахарного диабета 1 типа: причины меж- и внутривидовых различий в резистентности к диабетогенным факторам (обзор литературы и собственных исследований) / М. А. Орловский // Журн. АМН Украины. - 2006. - Т. 12, № 2. - С. 255269.
32.Особенности иммунитета у детей и подpостков с pазной пpодолжительностью сахаpного диабета типа 1 / Е. В. Кpюкова, А. А. Савченко, В. Т. Манчук, И. В. Осокина // Пробл. эндокринологии. - 2000. - № 3. - С. 3539.
33.Особенности формирования пулов протеасом в селезенке и печени крысы в постнатальном развитии / Н. П. Шарова, Т. М. Астахова, Л. А. Бондарева [и др.] // Биохимия. - 2006. Т. 71, вып. 9. С. 12781286.
34.Пат. на корисну модель Україна, МПКG09B 23/28 (2006/01). Спосіб моделювання гестаційного діабету у щурів лінії Вістар для вивчення його наслідків для нащадків / Ю. М. Колесник, А. В. Абрамов, І. Ф. Бєленічев [та ін.]. - № 17281; заявл. 31.03.06; опубл. 15.09.06, Бюл. № 9.
35.Патология тимуса у детей / Т. Е. Ивановская, О. В. Зайратьянц, Л. В. Леонова [и др.]. СПб. : Сотис, 1996. - 272 с.
36. Перепрограммирование ядерных протеасом при индукции апоптоза в клетках К562. I. Воздействие глутатионистощающего агента диэтилмалеата / А. Цимоха, А. Миттенберг, В. Куличкова [и др.] // Цитология. 2007. Т. 49, № 6. - С. 451459.
37.Полторак В. В. Аутоиммунный генез инсулинзависимого сахарного диабета на модели крыс ВВ / В. В. Полторак, К. О. Блох // Иммунология. 1999. - № 1. - С. 5 12
38.Полторак В. В. Стрептозотоциновый и вирусный инсулин-зависимый сахарный диабет (аутоиммунные аспекты) / В. В. Полторак, К. О. Блох // Пробл. эндокринологии. - 1989. - Т. 35, № 3. - С. 8188.
39.Резніков О. Г. Превентивна нейроендокринологія: час збирати каміння / О. Г. Резніков // Вісн. НАН України. — 2003. — N 5. — С. 15-22.
40.Роль оксиду азоту у підвищеній чутливості відкриття мітохондріальної пори в серці щурів при старінні / В. Ф. Сагач, Г. Л. Вавілова, О. В. Рудик, С. В. Тімощук // Фізіол. журн. - 2006. Т. 52, № 2. - С. 181182.
41.Сапин М. Р. Иммунная система человека / Сапин М. Р., Этинген Л. Е. - М.: Медицина, 1996. - 304 с.
42.Сахарный диабет: патогенез, классификация, диагностика и лечение: пособие для врачей / И. И. Дедов, М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова [и др.]. М., 2003. - 171 с.
43.Старіння підвищує чутливість до індукторів мітохондріальної пори в серці щурів / В. Ф. Сагач, Г. Л. Вавілова, Н. А. Струтинська, О. В. Рудик // Фізіол. журн. 2004. Т. 50, № 2. - С. 4963.
44.Структурно-функциональна организация лимфоидной популяции тимуса: опыт применения математического классификационного анализа / А. В. Абрамов, А. М. Камышный, Ю. М. Колесник, В. А. Любомирская // Клінічна та експериментальна патологія. - 2002. - № 1.- С. 59.
45.Торбек В. Э. Морфогенез тимуса / В. Э. Торбек. - М.: Изд-во РУДН, 1995. - 116 с.
46.Торбек В. Э. Ультраструктура эпителиоцитов тимуса / В. Э. Торбек, Н. А. Юрина // Вестн. РУДН. Сер. Медицина. - 2000. - № 2. - C. 4549.
47.Фильченков А. А. Апоптоз и рак / А. А. Фильченков, Р. С. Стойка - М.: Морион, 1999. 184 с.
48.Фрейдлин И. С. Регуляторные Т-клетки: происхождение и функция / И. С. Фрейдлин // Мед. иммунология. - 2005. - Т. 7, № 4. - С. 347354.
49.Фундаментальні механізми дії оксиду азоту на серцево-судинну систему як основи патогенетичного лікування її захворювань / О. О. Мойбенко, В. Ф. Сагач, М. М Ткаченко [и др.] // Фізіол. журн. - 2004. Т. 50, № 1. - С. 1130.
50.Характеристика процессов дифференцировки лимфоцитов в вилочковой железе у крыс: светооптическое и иммуноцитохимическое исследование / А. В. Абрамов, Ю. М. Колесник., В. А. Любомирская, А. М. Камышный // Запорож. мед. журн. - 2002. - № 4. - С. 1013.
51.Чумаков П. М. Белок р53 и его универсальные функции в многоклеточном организме / П. М. Чумаков // Успехи биологич. химии. - 2007. - Т. 47, № 1. - С. 352.
52.Ярилин А. А. Апоптоз и его место в иммунных процессах / А. А. Ярилин // Иммунология. - 1996. - № 6. - С. 1022.
53.Ярилин А. А. Апоптоз: природа феномена и его роль в норме и при патологии / А. А. Ярилин // Актуальные проблемы патофизиологии. - М.: Медицина, 2001. - С. 1356.
54.Ярилин А. А. Регуляторные Fохр3+ Т-клетки и их роль при аллергии / А.А. Ярилин, А. Д. Донецкова // Рос. аллергологич. журн. - 2005. - № 2. - С. 2226.
55.Ярилин А. А. Структура тимуса и дифференцировка Т-лимфоцитов / А.А. Ярилин, В. Г. Пинчук, Ю. А. Гриневич К: Наука, 1991. - 248 с.
56.Ярилин А. А. Тимус как орган эндокринной системы / А. А. Ярилин, И.М. Беляков // Иммунология. - 1996. - № 1.- С. 410.
57.A defect of regulatory T cells in patients with autoimmune polyendocrinopathy-candidiasis-ectodermal dystrophy / E. Kekalainen, H. Tuovinen, J. Joensuu [et al.] // J. Immunol. - 2007. - Vol. 178. - P. 12081215.
58.A M55V polymorphism in a novel SUMO gene (SUMO-4) differentially activates heat shock transcription factors and is associated with susceptibility to type I diabetes mellitus / K. Bohren, V. Nadkarni, J. Song [et al.] // J. Biol. Chem. - 2004. - Vol. 279. - P. 2723327238.
59.A novel succinic acid derivative phensuccinal prevents the neonatal streptozotocin diabetes development / V. Poltorack, V. Natarov, N. Gorbenko [et al.] // Diabetologia. - 1995. - Vol. 38, № 1. - P. A97.
60.Acceleration of type 1 diabetes mellitus in proinsulin 2-deficient NOD mice / Thebault- K. Baumont, D. Debois-Laforgue, P. Krief [et al.] // J. Clin. Invest. 2003. Vol. 111. P. 851857.
61.Achanta G. Role of p53 in sensing oxidative DNA damage in response to reactive oxygen species-generating agents / G. Achanta, P. Huang // Cancer Res. - 2004. - Vol. 64. - P. 62336239.
62.Activated CD4+CD25+ T cells suppress antigen-specific CD4+ and CD8+ T cells but induce a suppressive phenotype only in CD4+T cells / D. Dieckmann, H. Plottner, S. Dotterweich, G. Schuler // Immunology. - 2005. - Vol. 115. - P. 305314.
63.Activation of the cell death program by nitric oxide involves inhibition of the proteasome / S. Glockzin, A. von Knethen, M. Scheffner, B. Brune // J. Biol. Chem. - 1999. - Vol. 274. - P. 1958119586.
64.Activation of tumor necrosis factor-αconverting enzymemediated ectodomain shedding by nitric oxide / Z. Zhang, J. Kolls, P. Oliver [et al.] // J. Biol. Chem. - 2000. - Vol. 275. - Р. 1583915844.
65.Adams J. The proteasome: structure, function, and role in the cell / J. Adams // Cancer Treat. Rev. - 2003. - № 1. - P. 39.
66.Adimoolam S. p53 and DNA damage-inducible expression of the xeroderma pigmentosum group C gene / Adimoolam S., Ford J. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2002. - Vol. 99. - P. 1298512990.
67.Adult bone marrow-derived cells trans-differentiating into insulin-producing cells for the treatment of type I diabetes / S. Oh., T. Muzzonigro, S. Bae [et al.] // Lab. Invest. 2004. Vol. 84. P. 607617.
68.Advances in type I diabetes associated tolerance mechanisms / A. Chentoufi, N. Binder, N. Berka [et al.] // Scandinavian J. of Immunology. - 2008. - Vol. 68. - P. 111.
69.Agrawal S. Cutting edge: different toll-like receptor agonists instruct dendritic cells to induce distinct Th responses via differential modulation of extracellular signal-regulated kinase-mitogen-activated protein kinase and c-Fos / S. Agrawal, A. Agrawal, J. Blenis // J. Immunol. - 2003. - Vol. 171. - P. 49844989.
70.AIRE deficient mice develop multiple features of APECED phenotype and show altered immune response / C. Ramsey, О. Winqvist, L. Puhakka [et al.] // Hum. Mol. Genet. - 2002. - Vol. 11. - P. 397409.
71.АIRE deficiency causes increased susceptibility to streptozotocin-induced murine type 1 diabetes / S. Hässler, L. Peltonen, S. Sandler, O. Winqvist // Scand. J. Immunol. - 2008. - Vol. 67. - P. 569580.
72.AIRE functions as an E3 ubiquitin ligase / D. Uchida, S. Hatakeyama, А. Matsushima [et al.] // J. Exp. Med. - 2004. - Vol. 199. - P. 167172.
73.AIRE recruits P-TEFb for transcriptional elongation of target genes in medullary thymic epithelial cells / I. Oven, N. Brdicková, J. Kohoutek [et al.] // Mol. Cell. Biol. -2007. - Vol. 27. - P. 88158823.
74.AIRE regulates negative selection of organ-specific T cells / Liston A., Lesage S., Wilson J. [et al.] // Nature Immunol. - 2003. - Vol. 4. - P. 350354.
75.Aire-dependent alterations in medullary thymic epithelium indicate a role for Aire in thymic epithelial differentiation / G. Gillard, J. Dooley, M. Erickson [et al.] // J. Immunol. - 2007. - Vol. 178. - P. 30073015.
76.Alberola J. Selective requirement for MAP kinase activation in thymocyte differentiation / J. Alberola, K. Forbush, R. Perlmutter // Nature. - 1995. - Vol. 373. - P. 620623.
77.Alonso D. Nitric oxide, platelet function, myocardial infarction and reperfusion therapies / D. Alonso, M. Radomski // Heart Fail. Rev. - 2003. - Vol. 8. - P. 4754.
78.Alonso D. The nitric oxide-endothelin-1 connection / D. Alonso, M. Radomski // Heart Fail. Rev. - 2003. - Vol. 8. - P. 107115.
79.Ameyar M. A role for AP-1 in apoptosis: the case for and against / М. Ameyar, М. Wisniewska, J. Weitzman // J. Biochimie. - 2003. - Vol. 85. - P. 747752.
80.An altered T cell repertoire in MECL-1-deficient mice / M. Basler, J. Moebius, L. Elenich [et al.] // J. Immunol. - 2006. - Vol. 176. - P. 66656672.
81.An autoimmune disease, APECED, caused by mutations in a novel gene featuring two PHD-type zinc-finger domains / Finnish-German APECED Consortium // Nature Genet. - 1997. - Vol. 17. - P. 399403.
82.An unexpected role for FosB in activation-induced cell death of T cells / S. Baumann, J. Hess, S. Eichhorst, S. Kirchhoff // Oncogene. - 2003. - Vol. 22. - P. 13331339.
83.Analysis of FOXP3 protein expression in human CD4+CD25+ regulatory Т cells at the single-cell level / G. Roncador, P. J. Brown, L. Maestre [et al.] // Eur. J. Immunol. - 2005. - Vol. 35. - P. 16811691.
84.Analysis of the foxp3/scurfin gene in Crohn's disease / O. Park, I. Grishina, P. Leung [et al.] // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 2005. - Vol. 1051. - P. 218228.
85.Anderson G. Generating intrathymic microenvironments to establish T-cell tolerance / G. Anderson, P. Lane, E. Jenkinson // Nature Rev. Immunol. - 2007. - Vol. 7. - P. 954963/
86. Anderson G. Lymphostromal interactions in thymus development and function / G. Anderson, E. Jenkinson // Nat. Rev. Immunol. - 2001. - Vol. 1. - P. 3140.
87.Anderson T. Nitric oxide, atherosclerosis and the clinical relevance of endothelial dysfunction / T. Anderson // Heart Fail. Rev. - 2003. - Vol. 1. - P. 7186.
88.Ando K. Oxidative stress / K. Ando // Nippon Rinsho. - 2003. - Vol. 61. - Р. 11301137.
89.Angel P. The role of Jun, FOS and the AP-1 complex in cell-proliferation and transformation / P. Angel, M. Karin // J. Biochim. Biophys. Acta. 1991. - Vol. 107. - P. 129134.
90.Angiotensin II AT1 receptor blockade abolishes brain microvascular inflammation and heat shock protein responses in hypertensive rats / J. Zhou, H. Ando, M. Macova [et al.] // J. Cereb. Blood Flow Metab. 2005. - Vol. 25. - P. 878886.
91.Antony P. CD4+CD25+ Т regulatory cells, immunotherapy of cancer, and interleukin-2 / P. Antony, N. Restifo // J. Immunother. - 2005. - Vol. 28. - P. 120128.
92.AP-1 mediated retinal photoreceptor apoptosis is independent of N-terminal phosphorylation of c-Jun / C. Grimm, A. Wenzel, A. Behrens [et al.] // Cell Death Differ. - 2001. - Vol. 8. - P. 859867.
93.Aria R. Heat shock genes integrating cell survival and death / R. Aria, M. Mallik, S. Lakhotia // J. Biosci. - 2007. - Vol. 32. - P. 595610.
94.Arulmozhi D. Neonatal streptozotocin-induced rat model of type 2 diabetes mellitus / D. Arulmozhi, S. Veeranjaneyulu, S. Bodhankar // Ind. J. of Pharmacology. - 2004. - Vol. 36. - P. 217221.
95.Asea A. Chaperokine-induced signal transduction pathways / A. Asea // Exerc. Immunol. - 2003. - Vol. 9. - P. 2533.
96.Asea A. Heat shock proteins and toll-like receptors / A. Asea // Handb. Exp. Pharmacol. - 2008. - Vol. 183. - P. 11127.
97.Asea A. Mechanisms of HSP 72 release / A. Asea // J. Biosci. - 2007. - Vol. 32. - P. 579584.
98.Aself-hsp60 peptide acts as a partial agonist inducing expression of B7-2 on mycobacterial hsp60-specific T cells: a possible mechanism for inhibitory T cell regulation of adjuvant arthritis? / A. Paul, R. van der Zee, L. Taams, W. van Eden // Int. Immunol. - 2000. - Vol. 12. - P. 10411050.
99.Asher G. 20S proteasomes and protein degradation by default” / G. Asher, N. Reuven, Y. Shaul // Bioessays. - 2006. - Vol. 28. - P. 844849.
100. Asher G. p53 proteasomal degradation: poly-ubiquitination is not the whole story / G. Asher, Y. Shaul // Cell Cycle. - 2005. - Vol. 4. - P. 10151018.
101. Assche F. Long-term consequences for offspring of diabetes during pregnancy / F. Assche, K. Holemans, L. Aerts // Вrit. Med. Bull. - 2001. - Vol. 60. - Р. 173182.
102. Association of CD4+ CD25+ T cells with prevention of severe destructive arthritis in Borrelia burgdorferi-vaccinated and challenged gamma interferon-deficient mice treated with antiinterleukin-17 antibody / D. Nardelli, M. Burchill, D. England [et al.] // Clin. Diagn. Lab. Immunol. - 2004. - Vol. 11. - P. 10751084.
103. Аutoimmune regulator (AIRE) gene is expressed in human activated CD4+ T-cells and regulated by mitogen-activated protein kinase pathwaу / S. Nagafuchi, H. Katsuta, R. Koyanagi-Katsuta [et al.] // Microbiol Immunol. - 2006. - Vol. 50. - P. 979987.
104. Ba D. Restoration of T-cell depression and supression of blood pressure in spontaneously hypertensive rats by thymus grafts or thymus extracts / D. Ba, N. Takeichi // J. Immunol. - 1989. - Vol. 128. - P. 12111216.
105. Bach J. Immunotherapy of type 1 diabetes: lessons for other autoimmune diseases / J. Bach // Arthritis Research. - 2002. - Vol. 4. - P. 315.
106. Baecher-Allan C. Functional analysis of highly defined, FACS-isolated populations of human regulatory CD4+CD25+ Т cells / C. Baecher-Allan, E. Wolf, D. Hafler // Clin. Immunol. - 2005. - Vol. 115. - P. 1018.
107. Baecher-Allan C. Human CD4+CD25+regulatory Т cells / C. Baecher-Allan, V. Viglietta, D. Hafler // Semin. Immunol. - 2004. - Vol. 16. - P. 8997.
108. Bansal V. Arginine availability, arginase, and the immune response / V. Bansal, J. Ochoa // Curr. Clin. Nutr. Metab. Care. - 2003. - Vol. 6. - Р. 223228.
109. Bauer H. Nitric oxide inhibits the secretion of T-helper 1 and T-helper 2associated cytokines in activated human T cells / H. Bauer // Immunology. - 1997. - Vol. 90. - Р. 205211.
110. Bcl-2 and Fas/APO-1 regulate distinct pathways to lymphocyte apoptosis / A. Strasser, A. Harris, D. Huang [et al.] // Eur. Mol. Biol. Organ. J. 1995. - Vol.14. P. 61366147.
111. Beauvais F. The nitric oxide donors, azide and hydroxylamine, inhibit the programmed cell death of cytokine-deprived human eosinophils / F. Beauvais, L. Michel, L. Dubertret // FEBS Lett. - 1995. - Vol. 361. - Р. 229232.
112. Beere H. The stress of dying: the role of heat shock proteins in the regulations of apoptosis / H. Beere // J. of Cell Science. - 2004. - Vol. 117. - P. 26412651.
113. Bell G. A p