Дизайн системы векторов для экспрессии каталитических антител Демин, Александр Викторович

Краткое описание

Демин,АлександрВикторович.Дизайнсистемывекторовдляэкспрессиикаталитическихантител: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 1999. - 107 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ ГЕНА На правах рукописи УДК 577.123ДЕМИНАлександрВикторовичДИЗАЙНСИСТЕМЫВЕКТОРОВДЛЯЭКСПРЕССИИКАТАЛИТИЧЕСКИХАНТИТЕЛ(03.00.03 - молекулярная биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научные руководители: чл-корр. РАН, д.б.н., проф. Н.В. Гнучев Д.Х.Н., проф. А.Г. Габибов Москва, 1999 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ 4 ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1....

стр. 4
распространенной и развитой на сегодняшний деньсистемойэкспрессииантителявляется насистемаклонирования и Ноэкспрессииприменение одноцепочечныхантителосновевекторарСАКТАВ. одноцепочечныхантителимеет много недостатков, одним из которых является возможность потерикаталитическойактивности

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Демин, Александр Викторович
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Экспрессия антител
1.1.1. Рекомбинантные антитела
1.1.2.Экспрессия антител в Escherichia coli
1.1.3. Экспрессия атител в дрожжах
1.1.4. Экспрессия антител в клетках насекомых
1.1.5. Экспрессия антител в клетках млекопитающих
1.2. Каталитические антитела
1.2.1. Гидролитические антитела, полученные иммунизацией аналогами переходных состояний
1.2.2. Природные каталитические антитела
ГЛАВА 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Конструирование векторов
2.2.2. Экспрессия фрагментов антител
2.2.3. Получение периплазматического экстракта
2.2.4. Очистка экспрессированного продукта
2.2.5. Денатурирующий электрофорез в полиакриламидном геле и окрашивание полиакриламидных гелей
2.2.6. Иммуноблот
2.2.7. Реакция релаксации суперскрученной плазмидной ДНК
2.2.8. Выделение плазмидной ДНК
2.2.9. Электрофорез в агарозном геле
2.2.10. Анализ ассоциированности ДНК-гидролизующей
активности с антителами методом аффинной сорбции
2.2.11. Определение активности Fab фрагмента антитела 1F5
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Разработка системы экспрессии для протеолитической легкой цепи
3.2. Клонирование эстеролитического антитела 1F5
3.3. Экспрессия Fab-фрагмента эстеролитического антитела 1F5
3.4. Моделирование Fab-фрагмента и анализ вероятного
активного центра эстеролитического антитела 1F5
3.5. Моделирование Fab-фрагмента и анализ вероятного активного центра ДНК-связывающего антитела MRL4. Экспрессия Fab-фрагмента ДНК-связывающего антитела MRL4
ГЛАВА 4. ВЫВОДЫ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК