Характеристика новых генов Schizosaccharomyces pombe dds20+ и rlp1+, участвующих в клеточном ответе на повреждения ДНК Салахова, Альбина Фаатовна

Краткое описание

Салахова,АльбинаФаатовна.ХарактеристикановыхгеновSchizosaccharomycespombedds20+иrlp1+,участвующихвклеточномответенаповрежденияДНК: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.26. - Москва, 2005. - 126 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
U ' . 05-Ъ1 9£.Ъ ИНСТИТУТ БИОЛОГИИ РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУКГЕНАНа нравах рукописи УДК 575.1:579.852.11СалаховаАльбинаФаатовнаХАРАКТЕРИСТИКАНОВЫХГЕНОВSCHIZOSACCHAROMYCESРОМВЕdds20^ и г1р1УЧАСТВУЮЩИХВКЛЕТОЧНОМОТВЕТЕНАПОВРЕЖДЕНИЯДНК. Специальность 03.00.26 — «молекулярная генетика» Диссертация

стр. 4
отличие от рекомбипационной репарации два последних механизма репарацщ! двуцепочечных разрывовДНКявляются потенциально мутагенными, поскольку они сопровождаются делениямиДНКв местах разрывов. ВответнаповреждениеДНКпроисходит остановкаклеточногоцикла, индуцируется транскрипция репарационныхгенов, и включаются различные пут репарацииДНК. Эти процессы контролируются механизмами контроляклеточногоцикла, предотвращая...

стр. 106
спонтанныхповрежденийДНК за пределами S-фазы. 106 выводы 1. Идентифицированы двановыхгенаделящихся дрожжейSchizosaccharomycespomhe:dds20'^ и rip]*,участвующиев механизме репарации двуцепочечных разрывов ДНК. 2. Показано, чтогенdds20* является высококопийным супрессором чувствительности к

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Салахова, Альбина Фаатовна
ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1. Делящиеся дрожжи Schizosaccharomyces pombe как модельный объект в молекулярно- генетических исследованиях.
2.2. Рекомбинационная репарация как основной механизм исправления двуцепочечных разрывов ДНК в эукариотических клетках.
2.3. Характеристика генов, участвующих в механизме рекомбинационной репарации.
ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
3.1. Штаммы, использованные в работе.
3.2. Ростовые среды.
3.3. Генетические скрещивания.
3.4. Выделение плазмидной ДНК из клеток E.coli.
3.5. Электрофорез ДНК в агарозном геле.
3.6. Трансформация клеток штамма E.coli DH5a.
3.7. Трансформация клеток S. pombe.
3.8. Выделение ДНК из агарозного геля.
3.9. Тесты на клеточный ответ на генотоксический стресс.
3.10. Полимеразная цепная реакция.
3.11. Конструирование делеционного мутанта dds20::arg3+.
3.12. Выделение белка Dds20 из клеток S.pombe.
3.13. Электрофорез белков в полиакриламидном геле.
3.14. Тест на эффективность мейотической внутригенной рекомбинации.
3.15. Тест на эффективность мейотической межгенной рекомбинации.
3.16. Определение выживаемости спор.
3.17. Определение эффективности споруляции.
3.18. Тесты на белок-белковые взаимодействия.
3.19. Манипуляции с ДНК.
3.20. Иммунофлуоресцентная микроскопия.
ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЯ.
4.1. Dds20 - высококопийный супрессор нарушения репарации клеток, лишенных
S. pombe Rad51 паралогов Rhp55 (Rad55Sp) и Rhp57 (Rad57Sp).
4.2. Конструирование делеционного мутанта dds20::arg3+.
4.3. Чувствительность мутантных клеток dds20A к генотоксическому стрессу.
4.4. dds20+ эпистатичен radl8 и rad60, и является высококопийным супрессором репликационных и репарационных дефектов мутанта rad60.
4.5. Dds20 не играет существенной роли в возобновлении остановленной репликации и в переключении типа спаривания.
4.6. Dds20 участвует в Cdsl-независимом механизме толерантности УФ повреждений ДНК.
4.7. Уровень потери хромосомы и митотической рекомбинации не изменен в мутанте dds2 0.
4.8. Мейотическая рекомбинация снижена в мутанте dds20A.
4.9. Dds20 является ядерным белком, взаимодействующим с Rhp51 (Rad51Sp).
4.10. Повторы PDA необходимы для функции белка Dds20.
4.11. Ген rlpl+ кодирует новый RecA-подобный белок S. pombe с высокой гомологией к белку человека XRCC2.
4.12. Конструирование делеционного штамма rlpl.
4ЛЗ. rlpl+ является ДНК репарационным геном, действующим в одном пути репарации с rhp51+, rhp54+ и rhp55+.
4.14. Rlplp не играет существенной роли в репарации повреждений ДНК, вызванных действием УФ света и в клеточном ответе при повреждениях репликационных вилок.
4.15. Спонтанная митотическая внутрихромосомная рекомбинация в мутанте rlpl.
4.16. Мейоз и переключение типа спаривания в мутанте rlpl.
4.17. Дрожжевой двугибридный анализ взаимодействия Rlpl с другими белками рекомбинационной репарации.
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
5.1. Rad51 -зависимые механизмы рекомбинационной репарации.
5.2. Dds20 и толерантность к повреждений ДНК, вызванных действием УФ света.
5.3. Повторы PDA и возможная роль белка Dds20 в репарации двуцепочечных разрывов ДНК.
5.4. Rlpl является новым паралогом Rad51 в делящихся дрожжах.
ВЫВОДЫ.