Исследование ренатурации рекомбинантных белков: На примере человеческих α-фактора некроза опухолей, Υ-интерферона, интерлейкина-3 и биотехнологических предшественников инсулина Тихонов, Роман Владимирович

Краткое описание

Тихонов, Роман Владимирович.
Исследование ренатурации рекомбинантных белков : На примере человеческих α-фактора некроза опухолей, Υ-интерферона, интерлейкина-3 и биотехнологических предшественников инсулина : диссертация ... кандидата химических наук : 02.00.10. - Москва, 2001. - 117 с.
Оглавление диссертациикандидат химических наук Тихонов, Роман Владимирович
Введение.
1. Ренатурация белков в биотехнологии (Обзор литературы).
1.1. Ренатурация белков in vivo в Е. coli.
1.2. Ренатурация белков in vitro.
1.3. Структура и биологическое действие а-ФНО, ИЛ-3,7-ИФН и инсулина.
2. Обсуждение результатов.
2.1. Факторы, влияющие на ренатурацию белка in vitro.
2.2. Разработка методов выделения рекомбинантных белков из биомассы трансформированных клеток Е. coli.
2.2.1. Выделение и очистка а-ФНО дикого и мутантного типов.
2.2.2. Выделение у-ИФН и ИЛ-3. 48 2.2.3 Выделение ГБ-предшественников инсулина в виде S-сульфонатных производных.
2.3. Влияние внутримолекулярных факторов.
2.4. Влияние параметров реакционной среды.
2.4.1. Условия образования дисульфидной связи.
2.4.2. Концентрация белка и температура реакции.
2.4.3. рН среды.
2.4.4. Природа реакционной среды.
2.5. Результаты оптимизации ренатурации.
2.6. Разработка схем получения рекомбинантных белков.
3. Экспериментальная часть.
3.1. Материалы.
3.2. Оборудование.
3.3. Методы.
3.3.1. Общие методы.
3.3.2. Получение ос-ФНО.
3.3.3. Получение ИЛ-3.
3.3.4. Получение у-ИФН.
3.3.5. Получение ГБ - предшественников инсулина.
4. Выводы.