Изучение рецептор-опосредуемого трансгенеза в клетки эмбрионов млекопитающих доимплантационных стадий развития и анализ ДНК трансгенных животных Иванова, Маргарита Михайловна

Краткое описание

Иванова,МаргаритаМихайловна.Изучениерецептор-опосредуемоготрансгенезавклеткиэмбрионовмлекопитающихдоимплантационныхстадийразвитияианализДНКтрансгенныхживотных: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.03. - Москва, 1998. - 121 с.больше
Цитаты из текста:

стр. 1
РОССИЙСКАЯ/КАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии на правах рукописиИВАНОВАМаргаритаМихайловнаИЗУЧЕНИЕРЕЦЕПТОР-ОПОСРЕДУЕМОГОТРАНСГЕНЕЗАвКЛЕТКИЭМБРИОНОВМЛЕКОПИТАЮЩИХДОИМПЛАНТАЦИОНЫХСТАДИЙРАЗВИТИЯИАНАЛИЗДНКТРАНСГЕННЫХЖИВОТНЫХ. (специальность 03. 00.

стр. 2
литературы 1.1 Краткое описание основных этапов эмбриогенезамлекопитающих1.1.1.Доимплантационныестадииразвития.. 1.1.2. Постимплантационныестадииразвития1.1.3. Происхождение различных тканей 1.1.4. Активация генома зародыша 1.2.Трансгенныеживотные1.2.1. Использованиетрансгенныхживотных1.2.2. Эффективность получениятрансгенныхживотных1.2.3. Методы получениятрансгенныхживотных...

стр. 4
исследований 3.1.Изучениетранспорта конструкций вэмбрионымлекопитающихнадоимплантационныхстадияхразвития3.1.1.Анализтранспорта конструкций вэмбрионыметодом видео-интенсификационной микроскопии 3.1.2. Выживаемостьэмбрионовдоимплантационныхстадийразвитияпосле культивирования с конструкцией 3.1.3.Анализтранспорта конструкции в процессе 46 48 48 51 51 51 54развитияэмбрионов...

Оглавление диссертациикандидат биологических наук Иванова, Маргарита Михайловна
Оглавление с.
Принятые сокращения
ВВЕДЕНИЕ
Глава I Обзор литературы
1.1 Краткое описание основных этапов эмбриогенеза
млекопитающих
1.1.1. Доимплантационные стадии развития

1.1.3. Происхождение различных тканей
1.1.4. Активация генома зародыша
1.2. Трансгенные животные
1.2.1. Использование трансгенных животных
1.2.2. Эффективность получения трансгенных животных
1.2.3. Методы получения трансгенных животных
1.2.3.1. Метод инфирования эмбрионов ретровирусами
1.2.3.2. Метод введения чужеродного гена в эмбрионы посредством микроинъекций
1.2.3.3. Использование эмбриональных стволовых клеток
1.2.3.4. Использование липосом
для получения трансгенных животных
1.2.3.5. Метод высокоскоростной механической инъекции
1.2.3.6. Сперматозоиды-как вектор для получения трансгенных животных
1.3. Транспорт ДНК в клетку с помощью
рецептор-опосредуемого эндоцитоза
1.3.1. Рецептор-опосредуемый эндоцитоз
1.3.2. Введение ДНК в клетки с помощью рецептор-опосредуемого эндоцитоза
1.3.3.Транспорт чужеродной ДНК методом рецептор-опосредуемого трансгенеза in vivo
Глава 2 Материалы и методы
2.1. Материалы
2.1.1. Лабораторные животные
2.1.2. Вирусы и бактериальные штаммы
2.1.3.Плазмидные вектора
2.1.4.Ферменты и другие реактивы
2.2. Методы
2.2.1. Синтез конструкций
2.2.2. Получение животных с датированным сроком беременности
2.2.3. Извлечение эмбрионов
2.2.4. Видео-интенсификационная микроскопия
2.2.5. Проведение трансфекции in vitro
2.2.6. Культивирование эмбрионов
2.2.7. Трансфекция эмбрионов кролика и овцы
2.2.8. Введение конструкций с помощью внутриматочного зонда
2.2.9. Введение конструкций с использованием полостной операции
2.2.10. Выделение ДНК из эмбрионов доимплантационных стадий развития
2.2.11. Выделение ДНК из эмбрионов постимплантационных стадий развития
2.2.12. Синтез и последовательность праймеров для ПЦР
з
2.2.13. Анализ ДНК методом ПЦР
2.2.14. Гибридизация синтезированных ПЦР продуктов
2.2.15. Блот-гибридизационный анализ
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Изучение транспорта конструкций в эмбрионы млекопитающих на доимплантационных стадиях развития
3.1.1. Анализ транспорта конструкций в эмбрионы методом видео-интенсификационной микроскопии
3.1.2. Выживаемость эмбрионов доимплантационных стадий развития после культивирования с конструкцией
3.1.3. Анализ транспорта конструкции в процессе развития эмбрионов доимлантационных стадий
3.1.3.1. Подбор оптимальных условий для анализа эмбрионов методом ПЦР
3.1.3.2. Анализ включения аденовируса в состав конструкций
3.1.3.3. Транспорта конструкции при
введении ДНК большого размера
3.1.3.4. Зависимость эффективности трансгенеза конструкции от
стадии развития
3.1.3.5. Введение чужеродного генетического материала в составе конструкции
в эмбрионы овцы
3.2. Рецептор-опосредуемый транспорт р01_2С/ в эмбрионы до имплантационных стадий развития
in vivo
3.2.1.Введение конструкции рС1_2С/-(инсулин-р1_)-(стрептавидин-р1_)- Ad5neo
3.2.2.Введение конструкции р01_2С/(5нМ)-(инсулин-р1_)-(стрептавидин-р1_)-СЕЮ
3.2.3.Введение конструкции pGL2CV(0,4HM)-(HHcynnH-pL)-(стрептавидин-рЦ-СЕЮ
3.3. Рецептор-опосредуемый транспорт pCMVLaLuc in vivo
3.3.1.Введение конструкции рСМ/1_а1_ис(2нМ)-(инсулин-р1-)-(стрептавидин-р1_)-СЕ1_0
3.3.2. Введение конструкции рСМ/1_а1_ис(0,66нМ)-(инсулин-р|_)-(стрептавидин-р|_)-СЕ1_0
3.3.3. Введение конструкции рСМ/1_а1_ис--(инсулин-р1_)-(стрептавидин-р1_)-Е0376
3.4. Введение конструкции с линейной формой плазмиды
3.5. Влияние введения конструкции in vivo на течение беременности
Глава 4. Обсуждение результатов
ВЫВОДЫ