Разработка экспериментального образца иммунохроматографической тест-системы для выявления белка патогенности CagA Helicobacter pylori Смирнова Дарья Николаевна

Краткое описание

Смирнова,ДарьяНиколаевна.Разработкаэкспериментальногообразцаиммунохроматографическойтест-системыдлявыявлениябелкапатогенностиCagAHelicobacterpylori: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.02.03 /СмирноваДарьяНиколаевна; [Место защиты: ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии»]. - Киров, 2020. - 137 с. : ил.больше
Цитаты из текста:

стр. 4
79 4.7 Характеристика созданногоэкспериментальногообразцатест-системыдлявыявлениябелкаCagAHelicobacterpylori................................................................. 80 ГЛАВА 5. ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙТЕСТ-СИСТЕМЫДЛЯДЕТЕКЦИИ ВЫСОКОПАТОГЕННЫХ ШТАММОВ H.pylori..................................................... 83 5.1 Оценка...

стр. 9
получения кондиционного препарата наночастиц коллоидного золота с диаметром 25-30 нм. 3. Создатьэкспериментальныйобразециммунохроматографическойтест-системыдлявыявлениябелкапатогенностиCagAH.pylori. 4. Разработать методику повышения чувствительностииммунохроматографическойтест-системыс применением лактата серебра и гидрохинона. 5. Сравнить результатывыявленияCagA+...

стр. 80
экспериментальногообразцатест-системыдлявыявлениябелкаCagAHelicobacterpyloriПо результатам работы созданэкспериментальныйобразециммунохроматографическойтест-системыдлядетекциибелкаCagAH.pylori, состав мультимембранного композита и основные компоненты которого представлены на рисунке 11 [113].

Оглавление диссертациикандидат наук Смирнова Дарья Николаевна
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Helicobacter pylori как этиологический агент заболеваний желудочно-кишечного тракта
1.2 Микробиологическая характеристика Helicobacter pylori
1.3 Факторы патогенности Helicobacter pylori, способствующие развитию заболеваний желудочно-кишечного тракта
1.4 Методы диагностики хеликобактериоза
1.5 Основные компоненты иммунохроматографических тест- систем
1.6 Пути повышения специфичности и чувствительности иммунохроматографических тест-систем
1.6.1 Выбор оптимального размера наночастиц коллоидного золота
1.6.2 Использование приемов усиления оптического сигнала в тестовой зоне тест-системы
1.6.3 Определение концентраций специфических иммунохимических компонентов
1.6.4 Выбор состава и комбинаций буферных растворов
1.6.5 Определение состава мультимембранного композита
1.7 Актуальность разработки иммунохроматографической тест-системы для
выявления Helicobacter pylori
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ, РЕАГЕНТЫ, ОБОРУДОВАНИЕ, МЕТОДЫ
2.1 Материал
2.1.1 Биологический материал для исследования
2.1.2 Материал для разработки иммунохроматографической тест-системы
2.2 Реактивы
2.3 Питательные среды
2.4 Тест-системы
2.5 Лабораторная посуда
2.6 Оборудование
2.7 Методы
2.7.1 Приготовление растворов
2.7.2 Приготовление питательной среды
2.7.3 Забор и подготовка биологического материала к посеву
2.7.4 Микробиологические методы
2.7.5 Молекулярно-генетическая идентификация
2.7.6 Методика тестирования сыворотки крови на наличие антител к белку CagA Helicobacter pylori
2.7.7 Статистические методы
ГЛАВА 3. ВЫДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ШТАММОВ Helicobacter pylori
3.1 Выделение культур Helicobacter pylori из биологического материала добровольцев
3.2 Идентификация штаммов Helicobacter pylori
3.2.1 Микробиологическая идентификация
3.2.2 Молекулярно-генетическая идентификация штаммов Helicobacter pylori
3.2.3 Идентификация штаммов Helicobacter pylori с использованием
иммунохроматографического анализа
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ОБРАЗЦА ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКА CagA Helicobacter pylori
4.1 Получение наночастиц коллоидного золота
4.2 Выбор оптимальной концентраций антител для сорбции на наночастицах коллоидного золота
4.3 Выбор оптимальной комбинации моноклональных антител в конъюгате и в тестовой зоне
4.4 Сравнительный анализ комбинаций буферных растворов, используемых на различных этапах создания тест-системы
4.5 Определение оптимальной концентрации моноклональных антител в тестовой зоне
4.6 Определение зависимости качества иммунохроматографической тест-системы от вариантов использования мембран в мультимембранном композите
4.7 Характеристика созданного экспериментального образца тест-системы для
выявления белка CagA Helicobacter pylori
ГЛАВА 5. ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ
ВЫСОКОПАТОГЕННЫХ ШТАММОВ H. pylori
5.1 Оценка специфичности и чувствительности экспериментального образца
иммунохроматографической тест-системы
5.2. Оценка возможности использования лактата серебра для повышения чувствительности иммунохроматографической тест-системы
5.3 Скрининг пациентов на наличие хеликобактериоза для отбора в тестирование разработанного образца иммунохроматографической тест- системы
5.4 Сравнительный анализ выделения чистой культуры H. pylori бактериологическим методом, выявления гена cagA молекулярно-генетическим
методом и белка CagA иммунохроматографическим методом
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ РЕЗУЛЬТАТОВ РАБОТЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ АВТОРА
Приложение А Результаты микробиологической и биохимической идентификации культур, полученные при первичном посеве биологического материала из
зубодесневых карманов на питательную среду
Приложение Б Результаты микробиологической и биохимической идентификации культур, полученные при первичном посеве биопсийного материала на питательную среду
Приложение В Результат исследования проб добровольцев на наличие H. pylori с использованием бактериологического и молекулярно-генетического методов .. 133 Приложение Г Результат исследования проб добровольцев на наличие белка CagA H. pylori с использованием экспериментального образца
иммунохроматографической тест-системы
Приложение Д Акты о внедрении результатов диссертации