Разработка и оценка эффективности вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 Дуплева, Лилия Шамилевна

Краткое описание

Дуплева Лилия Шамилевна. Разработка и оценка эффективности вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 : диссертация ... кандидата биологических наук : 16.00.03 / Дуплева Лилия Шамилевна; [Место защиты: Федер. центр токсик. и радиац. безопасности животных].- Казань, 2009.- 160 с.: ил. РГБ ОД, 61 09-3/1142
ОГЛАВЛЕНИЕ ДИССЕРТАЦИИкандидат биологических наук Дуплева, Лилия Шамилевна
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Эпизоотология и этиология инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота.
1.2. Характеристика и биологические свойства бактерий Moraxella bovis.
1.3. Патогенез и клинические признаки инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота.
1.4. Методы диагностики инфекционного кератоконъюнктивита 31 крупного рогатого скота.
1.5. Лечение и специфическая профилактика инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота.
1.6. Принципы технологии изготовления инактивированных бактериальных вакцин.
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы исследований.
2.2. Методы исследований.
3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Клинико-эпизоотологическая характеристика и этиопатогенез инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота в хозяйствах Среднего Поволжья.
3.2. Разработка регламента изготовления ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1.
3.2.1. Биологическая характеристика производственных штаммов бактерий Moraxella bovis.
3.2.2. Получение матровой расплодки каждого штамма бактерий Moraxella bovis.
3.2.3. Выращивание бактериальной массы каждого штамма бактерий Moraxella bovis в отдельности и ее инактивация.
3.2.4. Получение нативной суспензии герпесвируса типа 1 крупного рогатого скота и ее инактивация.
3.2.5. Определение иммунизирующей дозы бактериальных компонентов ассоциированной вакцины.
3.2.6. Изготовление ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа1.
3.3. Изучение антигенной активности ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 на кроликах.
3.4. Показатели клеточного и гуморального иммунитета кроликов, иммунизированных ассоциированной вакциной.
3.5. Изучение иммуногенной активности ассоциированной вакцины на лабораторных животных.
3.6. Определение прививной дозы "Ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1" на естественно восприимчивых животных.
3.7. Изучение антигенной активности ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 на телятах.
3.8. Показатели клеточного и гуморального иммунитета телят, иммунизированных ассоциированной вакциной.
3.9. Изучение эффективности ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и герпесвируса типа 1 в производственных условиях.
3.10. Экономическая эффективность профилактического действия ассоциированной вакцины.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Список литературы

Введение к работе
1.1 Актуальность-темы.Инфекционный кератоконъюнктивит (ИКК) крупного рогатого скота (КРС), вызываемый бактериямиMoraxella bovis,наносит значительный экономический ущерб скотоводческим хозяйствам за счет выбраковки животных из-за потери племенной ценности, снижения удоев и прироста массы тела вследствие частичной или полной потери зрения, затрат на проведение лечебных и оздоровительных мероприятий (Какоулин Т.Е., 1982; Русинов А.Ф., 1995; Гаффаров Х.З. с соавт., 1998; Henson J.B. et al., 1960; Statter D.H.etai.,1982).
Частота проявления этой острой высококонтагиозной болезни в Российской Федерации (РФ) резко увеличивается в летние месяцы, когда крупный рогатый скот находится на пастбище или открытых выгулах. Наиболее высока заболеваемость среди молодняка в группах доращивания и откормочных площадках с большой плотностью поголовья на фоне интенсивного облучения их солнечными ультрафиолетовыми лучами (Андриасян В.Б., 1988; Черванев В.А. с соавт., 1995; Валебная Л.В., 2007; Barth Т. et al., 1986; Kehnscherper G., 1987).
Современный уровень интенсификации животноводства в РФ, завоз импортного племенного поголовья КРС - скрытых носителей возбудителя, перемещение инфицированного скота из одного региона в другой и из одних хозяйств в другие привели к значительному распространению и появлению стационарно неблагополучных очагов ИКК КРС.
Приступая к разработке ассоциированной вакцины против ИКК КРС, исходили из единого современного представления о ведущей роли бактерийMoraxella bovisв возникновении этой формы патологии. Как известно, жизнеспособные бактерииMoraxella bovisсохраняются в глазных и носовых выделениях животных в течение многих месяцев после клинического выздоровления, являясь постоянным источником инфекции. В этой связи, становится очевидной актуальность проблемы организации контроля и борьбы с данной патологией крупного рогатого скота.
Вместе с тем, отводится важное значение герпесвирусу в инфекционной патологии крупного рогатого скота, вызывающего различные клинически выраженные заболевания (Сюрин В.Н. с соавт., 1991, 1998; Dahme Е., 1984). Кроме того, высказывалось мнение, что герпесвирус типа 1 создает наиболее благоприятную среду для патогенного действия основного возбудителя ИКК -бактерийMoraxella bovis(Rebnun W. et al., 1978).
В мировой практике для специфической профилактики ИКК крупного рогатого скота используют ряд вакцин, отличающихся по принципам получения и по способу проведения вакцинации (Rebnun W. et al., 1978; Brinton C.C.etal., 1983;GwinR, 1985; Lepper A.W.D. etal., 1988, 1995).
В РФ вакцины против ИКК КРС на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвйруса типа 1 не создано.
В связи с вышеизложенным, разработка вакцины против ИКК КРС на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1 является весьма актуальной проблемой.
1.2 Цель и задачи исследований. Целью данной работы явиласьразработка технологии изготовления ассоциированной вакцины противинфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основеантигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1 и оценкаэффективности применения.
В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:
1. Провести мониторинг инфекционного кератоконъюнктивита крупногорогатого скота и изучить этиопатогенез его проявления в неблагополучныххозяйствах Среднего Поволжья.

Изготовить опытные серии биопрепарата, используя наиболее перспективные штаммы бактерийMoraxella bovis,отличающиеся высокой иммуногенной активностью, признанные пригодными для изготовления ассоциированной вакцины.

Изучить антигенные и иммуногенные свойства ассоциированной вакцины на лабораторных животных и естественно восприимчивом поголовье скота.

Испытать в производственных условиях профилактическую эффективность опытно-производственных серий ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1.

Разработать нормативную документацию на ассоциированную вакцину против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1.

1.3 Научная новизна работы. На основе результатов клинико-эпизоотологического мониторинга ИКК установлено значительноераспространение этой болезни среди поголовья крупного рогатого скота в рядехозяйств Среднего Поволжья.
Впервые разработана технология изготовления и способы контроля ассоциированной вакцины против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1 (Патент РФ на изобретение № 2264227от 24.02.2004).
Установлены оптимальные концентрации и соотношения инактивированных антигенов бактериальных клеток каждого штамма в вакцинном препарате.
Установлена высокая антигенная и иммуногенная активность ассоциированной вакцины в лабораторно-производственных условиях. Получены данные, свидетельствующие, что иммунизация вызывает иммунологическую перестройку организма у привитых животных и активизирует их специфические защитные механизмы. Показана эффективность разработанной вакцины в широком производственном опыте.
1.4 Практическая значимость работы. Научно обоснованы принципыизготовления и биологического контроля ассоциированной вакцины против
инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1. Определена иммунизирующая доза препарата, показана эффективность и возможность оценки на лабораторных и естественно-восприимчивых животных. Установлено, что в производственных условиях вакцинация обладает выраженным защитным эффектом, значительно снижая заболеваемость крупного рогатого скота различных возрастных групп. На основе проведенных исследований предложена для внедрения в ветеринарную практику "Ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерийMoraxella bovisи : герпесвируса типа 1".
Разработаны нормативные документы, регламентирующие изготовление, контроль и применение данного биопрепарата, утвержденные Россельхознадзором в 2008 году. Разработанная вакцина зарегистрирована в РФ (№ ПВР-1-4.7/ 02047 от 4 мая 2008 г.).

Апробация работы.Основные положения диссертации доложены на: научных сессиях Ученого совета Федерального центра токсикологической и радиационной безопасности животных (ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") по итогам НИР за 2001-2005 гг.; международной научно-производственной конференции, посвященной 130-летию образования Казанской государственной академии ветеринарной медицины (КГАВМ) (Казань, 2003); международной научно-производственной конференции "Актуальные проблемы эпизоотологии на современном этапе" (С.-Петербург, 2004); международной научно-производственной конференции, посвященной 80-летию ФГУП "Щелковский биокомбинат" - "Ветеринарная биотехнология: настоящее и будущее" (Щелково, 2004); научно-практической конференции молодых ученых и специалистов "Достижения молодых ученых - в производство" - ФГУ "ФЦТРБ-ВНИВИ" (Казань, 2008).

Публикации результатов исследований.По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, в т.ч., 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, а также получен патент РФ на изобретение № 2264227 "Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе бактерийMoraxella bovisи герпесвируса типа 1" от 24.02.2004.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Клинико-эпизоотологическая характеристика инфекционногокератоконъюнктивита крупного рогатого скота в хозяйствах СреднегоПоволжья.
2. Технология изготовления ассоциированной вакцины противинфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основеантигеновMoraxella bovisи герпесвируса типа 1.
3. Антигенная и иммуногенная активность ассоциированной вакцины накроликах и телятах.
4. Оценка эффективности ассоциированной вакцины впроизводственных условиях.
1.8 Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 160 страницах компьютерного текста и включает следующие разделы: общая характеристика работы, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, библиографический список использованной литературы, состоящий из 247 источников, в том числе 138 иностранных авторов и приложение. Диссертация содержит 15 таблиц и иллюстрирована 8 рисунками.